当归超临界提取物对AOM/DSS诱导的小鼠炎症相关性结直肠癌的化学预防作用

采用氧化偶氮甲烷/葡聚糖硫酸钠（AOM/DSS）诱导的雄性小鼠结肠癌模型,研究当归超临界提取物对诱发小鼠结肠癌的化学预防作用,并探讨其可能的作用机制。给予雄性Balb/c小鼠单剂量皮下注射AOM（10 mg·kg^-1）,1周以后,给予2%DSS饮用7 d,诱导结直肠癌。分别按照15,30,60 mg·kg^-1灌胃给予药物组当归超临界提取物至第17周。当归超临界提取物组肿瘤发生率、小鼠的荷瘤数及荷瘤体积均低于AOM/DSS模型对照组。这可能与当归超临界提取物能够显著降低AOM/DSS诱导的小鼠炎症相关结直肠癌模型中PCNA,COX-2,iNOS的表达有关。研究结果表明,当归超临界提取物对AOM/DSS诱导的小鼠炎症相关性结直肠癌的发生、发展有一定的干预作用,可进一步用于人类结直肠癌的化学预防研究。     

射干提取物对AOM/DSS小鼠炎性反应相关性肠癌的干预作用及机制

目的 探讨射干提取物对AOM/DSS小鼠炎性反应相关性肠癌的干预作用和可能机制。方法 以AOM/DSS制备小鼠炎性反应相关性肠癌模型,观察射干提取物对小鼠的一般情况,进行疾病活动指数(DAI)评分;检测小鼠血清中IL6和STAT3含量变化;进行结直肠段病理组织学评分,考察射干提取物对该模型的干预作用。结果 造模后各组小鼠分别出现了腹泻、便血、脱肛、消瘦等表现;各DSS循环后模型组DAI评分均升高(P<0.01),第三循环后高剂量组能明显降低造模后小鼠的DAI评分(P<0.05);高剂量组肿瘤缩小;中、高剂量组小鼠腺体排列较模型组规则,炎性细胞浸润程度减轻;模型组与空白对照组比较,病理组织学评分分值明显增高(P<0.01),可见明显的炎性反应和肉芽组织;高剂量组评分值较模型组降低(P<0.05);低、中、高剂量组均可明显降低小鼠血清中IL6蛋白水平(P<0.05,P<0.01);中、高剂量组均可明显降低小鼠血清中STAT3蛋白水平(P<0.05,P<0.01)。结论 高剂量组可抑制炎性反应相关性肠癌进展,其作用机制可能与抑制IL6/STAT...     

生姜泻心汤治疗伊立替康导致的结直肠癌小鼠迟发性腹泻

目的观察生姜泻心汤(生姜、干姜、黄连等)对伊立替康(CPT-11)导致的迟发性腹泻结直肠癌小鼠的治疗效果,探讨其可能的作用机制。方法采用氧化偶氮甲烷/葡聚糖硫酸钠(AOM/DSS)诱导的雌性结直肠癌小鼠模型,随机分为正常组、模型组、生姜泻心汤组。生姜泻心汤组灌胃生姜泻心汤,正常组和模型组均灌胃生理盐水,检测腹泻指数、直肠病理形态,测定β-葡萄糖醛酸苷酶活性、白介素-15(IL-15)含有量和尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶1A1(UGT1A1)表达。结果生姜泻心汤组腹泻指数显著低于模型组,这可能与显著抑制β-葡萄糖醛酸苷酶的活性,提高血清IL-15的含有量和UGT1A1的表达有关。结论生姜泻心汤对AOM/DSS诱导结直肠癌小鼠由伊立替康导致的迟发性腹泻有一定的治疗作用。     

黑树莓花青素靶向调控miR-338-5p/SIRT1相关信号通路对结直肠癌的化学预防作用

目的研究miR-338-5p/SIRT1相关信号通路在黑树莓花青素化学预防结直肠癌中的作用。方法小鼠分为健康对照组,氧化偶氮甲烷(AOM)/葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的炎症相关性结直肠癌小鼠模型组,AOM/DSS诱导联合黑树莓花青素处理组。利用miRNA基因芯片筛选差异表达miRNAs,选定miR-338-5p,采用RT-q PCR确认miR-338-5p在小鼠结肠组织及在人结直肠癌细胞株Caco-2、Lo Vo、HCT-116、HT29、SW480中的mRNA表达,生物信息学软件预测miR-338-5p和SIRT1靶向调节关系。Western blotting检测小鼠结肠组织中SIRT1蛋白及其下游mTOR等信号通路相关蛋白表达。结果miRNA基因芯片分析发现,与常规饮食的模型小鼠相比,喂食添加黑树莓花青素的模型小鼠结直肠肿瘤组织中miR-338-5p表达量显著减少,进一步研究几种结肠癌细胞系,确认了miR-338-5p表达趋势;黑树莓花青素处理结直肠癌细胞,miR-338-5p的表达能够显著降低。生物信息学预测miR-338-5p和SIRT1存在靶向调节关系。机制研究发现黑树莓花青素可以促进肠上皮细胞SIRT1蛋白的表达,并对其下游m TOR等相关信号通路分子蛋白水平具有调控作用。结论黑树莓花青素可能通过靶向调控miR-338-5p/SIRT1相关信号通路而发挥对结直肠癌的化学预防作用,进而为结直肠癌提供新的化学预防策略。     

苦参碱与氧化苦参碱对炎症相关结直肠癌的化学预防作用研究

目的研究苦参碱与氧化苦参碱对炎症相关结直肠癌的化学预防作用。方法采用氧化偶氮甲烷/葡聚糖硫酸钠(AOM/DSS)模拟炎症相关的结直肠癌的发生发展过程。将小鼠分成对照组、模型组、苦参碱组与氧化苦参碱组,实验结束后处死小鼠,取出结直肠,统计肿瘤发生率;病理切片观察肿瘤的发生程度、免疫组化法检测结肠组织中增殖细胞核抗原(PCNA)的表达情况;Western blotting法检测结直肠组织中环氧合酶-2(COX-2)、诱导型一氧化氮合酶(i NOS)、核转录因子-κB(NF-κB)、P53和γH2AX蛋白表达情况。结果对照组无肿瘤发生,模型组、苦参碱组与氧化苦参碱组均有肿瘤发生,但肿瘤发生程度不同。苦参碱与氧化苦参碱能够降低PCNA的表达而抑制肿瘤细胞的增殖,同时降低COX-2、i NOS、NF-κB、P53与γH2AX蛋白的表达。结论苦参碱与氧化苦参碱均能减缓肿瘤的发展进程,降低肿瘤的严重程度,具有一定的化学预防作用;同时能对溃疡性结直肠炎进行有效干预,减缓肿瘤的发生程度甚至降低肿瘤的发生率。     

基于miR-124-3p/IL-6信号通路的槲皮素和表儿茶素协同调节炎症相关性结直肠癌研究

目的 基于miR-124-3p/白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)信号通路探究槲皮素与表儿茶素协同作用对炎症相关性结肠癌模型小鼠的干预作用及作用机制。方法 采用氧化偶氮甲烷（azoxymethane,AOM）/葡聚糖硫酸钠（dextran sodium sulfate,DSS）诱导小鼠建立炎症相关性结肠癌模型,同时单独或联合给予槲皮素和表儿茶素,待整个造模周期结束,测量各组小鼠结直肠长度,统计结直肠组织肿瘤数量;采用苏木素-伊红（HE）染色观察各组小鼠结肠组织病理变化;采用qRTPCR检测结直肠组织中炎症相关基因[Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)、IL-1β、IL-6、IL-17]及肿瘤相关基因[c-myc、血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）]和miR-124-3p的m RNA表达;采用Western blotting检测结直肠组织中磷酸化信号转导与转录活化因子3(phosphorylated signal transducer and activator of t...     

黑树莓花青素联合奥沙利铂或喜树碱通过Akt信号通路协同增强结直肠癌化疗药物的治疗效果及作用机制研究

目的 探究黑树莓花青素联合奥沙利铂或喜树碱在结直肠癌细胞和氧化偶氮甲烷（azoxymethane,AOM）诱导的结直肠癌模型小鼠中的协同作用。方法 结直肠癌细胞系SW480和Caco-2给予黑树莓花青素、奥沙利铂或喜树碱进行干预,AOM诱导的结直肠癌模型小鼠给予黑树莓花青素或奥沙利铂进行干预。采用MTT法检测黑树莓花青素联合奥沙利铂或喜树碱对结直肠癌细胞增殖的影响;采用Western blotting法检测结直肠癌细胞和小鼠肠上皮细胞中蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)信号通路相关蛋白表达;采用苏木素-伊红（HE）染色检测小鼠结肠组织病理变化。结果 黑树莓花青素与奥沙利铂或喜树碱联合使用可显著抑制SW480和Caco-2细胞的增殖（P<0.05、0.01、0.001）;黑树莓花青素与奥沙利铂联合使用显著改善结直肠癌模型小鼠的状态,增加小鼠体质量,减少肠道肿瘤数量（P<0.01）;黑树莓花青素可能通过下调Akt信号通路相关蛋白的表达进而增强化疗药物的治疗效果（P<0.01、0.001）。结论 黑树莓花青素可以协同增加奥沙利铂或喜树碱的抗肿瘤作用。     

排脓散对结肠癌小鼠的抗肿瘤作用

目的考察排脓散对结肠癌小鼠的保护作用及炎症因子水平的影响。方法采用氧化偶氮甲烷(AOM)/葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导结肠癌小鼠模型,并在诱导过程中给予排脓散(1.6 g生药/kg)干预。苏木精/伊红染色观察结肠组织病理形态,免疫组化染色检测结肠组织炎症因子白介素-4(IL-4)、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、干扰素-γ(IFN-γ)蛋白表达。结果与模型组比较,排脓散提取物可降低结肠癌小鼠肿瘤数目、增加结肠长度(P<0.01)。同时排脓散下调IL-6、TNF-α蛋白表达(P<0.01),上调IL-4、IFN-γ蛋白表达(P<0.01)。结论排脓散对AOM/DSS诱导结肠癌小鼠模型具有显著的抗肿瘤作用,可能与调节结肠部位炎症因子水平相关。     

胀果甘草中查尔酮类物质对结肠癌的作用研究

目的:探讨甘草查尔酮类物质对结肠癌的作用及机理。方法:采用AOM/DSS诱导结肠癌小鼠模型研究甘草查尔酮类物质对结肠癌的作用。结果:甘草查尔酮类物质可以显著缓解小鼠体重下降情况,并可以延长生存时间;实验结果还显示,甘草查尔酮能显著降低结肠湿重系数,呈剂量依赖性;可以显著降低肿瘤个数,高剂量组肿瘤平均抑制率可达到55.5%;结肠病理切片显示,甘草查尔酮高剂量组可以显著恢复DSS诱导的结肠炎坏死黏膜。结论:甘草查尔酮类物质可以通过抑制结肠细胞炎症因子的释放,从多项指标上预防结肠癌的发生或缓解病变;甘草查尔酮类物质有望成为新型预防及治疗结肠癌的候选药物。     

珍珠烫伤膏干预小鼠溃疡性结肠炎的作用研究

目的:探讨珍珠烫伤膏对葡聚糖硫酸钠(Dextran Sulfate Sodium,DSS)诱导小鼠肠道炎性反应的疗效。方法:采用DSS诱导的小鼠溃疡性结肠炎(Ulcerative Colitis,UC)模型,随机分为空白组、模型组、美沙拉嗪(Mesalazine,Mes)组和珍珠烫伤膏(Pearl Scald Ointment,Pso)低(Pso1)、高剂量组(Pso2),每组10只。给药10 d,观察并分析小鼠体质量、结肠长度、病理评分及炎性反应因子等方面的变化。结果:与模型组比较,珍珠烫伤膏各剂量组小鼠的疾病活动指数、结肠病变评分、HE染色病变评分及炎性反应因子水平均显著下降,由UC引起的体质量及结肠长度缩短均有所改善,差异有统计学意义(P0.05)。结论:珍珠烫伤膏对DSS诱导的溃疡性结肠炎有显著地改善作用,提示其对溃疡性结肠炎有一定的治疗作用。     

仙连解毒方对结直肠癌湿热瘀毒证模型小鼠肠道细胞类型的影响

目的 采用单细胞转录组测序技术探讨仙连解毒方治疗结直肠癌湿热瘀毒证的作用机制。方法 30只雄性C57BL/6N小鼠随机分为对照组、模型组、仙连解毒方组,每组10只。模型组和仙连解毒方组小鼠采用高脂饮食与氧化偶氮甲烷（AOM）/葡聚糖硫酸钠（DSS）诱导建立结直肠癌湿热瘀毒证模型,对照组给予正常饮食。3个循环的DSS饮水结束后,仙连解毒方组开始给予仙连解毒方12.9 g/kg灌胃,对照组及模型组给予等体积的生理盐水,每天1次,连续灌胃6天后停1天,连续给药16周。末次给药结束4 h后,取各组小鼠结直肠组织,HE染色观察小鼠结直肠的组织病理形态。取距肛门6 cm的远端结肠段2 cm,解离组织样本,分离单细胞悬液,提取RNA行qPCR扩增,进行单细胞转录组测序。采用CellRanger-v5.0.0进行数据质控,Seurat-v3.1.1软件包进行降维聚类分析、细胞类型鉴定,对差异基因行GO和KEGG富集分析。结果HE染色结果显示,空白组小鼠结肠腺体排列规则,细胞核位于基底部,呈扁平或立方状;模型组上皮细胞极性消失,呈巢状、筛孔状,中央见坏死,细胞核浆比增大,核染色深,核仁明显,核分裂现象显...     

马甲子抗溃疡性结肠炎的实验研究

目的:评估马甲子乙酸乙酯提取物(Ethyl acetate extract of Paliurus ramosissimus,EAEPR)对溃疡性结肠炎(Ulcerative Colitis,UC)的影响以及抗炎作用。方法:灌胃给予马甲子乙酸乙酯提取物0.8、1.6、3.2 g/kg,采用二甲苯致小鼠耳肿胀模型和小鼠棉球肉芽肿模型,评价其抗炎作用。以3%硫酸葡聚糖钠(Dextran sulfate sodium salt,DSS)溶液自由饮用7d复制实验性小鼠UC模型,自饮用DSS溶液当天开始灌胃给予马甲子乙酸乙酯提取物,剂量同上,连续7d,观察小鼠的一般状态,并进行结肠炎疾病指数(DAI)评分;第8d眼眶采血后脱颈椎处死动物,测定结肠长度并进行组织病理学观察,ELISA检测血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平。结果:马甲子乙酸乙酯提取物各剂量均可显著抑制二甲苯所致小鼠耳肿胀和棉球肉芽肿形成;1.6、3.2 g/kg组能改善实验性UC小鼠一般状况,抑制体重降低和DAI评分增高,并能显著改善肠道水肿和肠道组织损伤,减轻炎细胞浸润,显著降低血清TNF-α水平。结论:马甲子乙酸乙酯提取物具有抗炎作用,可减轻DSS所致实验性小鼠UC病变严重程度,其作用可能与下调TNF-α等炎性因子分泌有关,是一种有效的UC治疗药物。     

三七皂苷和丹参酮ⅡA对炎症相关性结直肠癌小鼠的保护作用及对COX-2蛋白表达的抑制作用

目的 探讨三七总皂苷和丹参酮ⅡA对炎症相关性结直肠癌小鼠的预防作用及可能的作用机制.方法 将88只C57BL/6雄性小鼠,按随机数字表法分为11组,每组8只;分别为氧化偶氮甲烷+葡聚糖硫酸钠(AOM+DSS)模型对照组,三七总皂苷低、中、高剂量组,丹参酮ⅡA低、中、高剂量组,三七总皂苷+丹参酮ⅡA低、中、高剂量组,空白...     

白花蛇舌草对葡聚糖硫酸钠诱导的慢性溃疡性结肠炎小鼠的影响

目的探讨白花蛇舌草乙醇提取物(EEHDH)治疗慢性溃疡性结肠炎(UC)及抑制肠炎组织异常增生的作用。方法小鼠随机分为对照组,模型组,EEHDH低、中、高剂量(2.5、10.0、20.0 g/kg)组,葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导UC模型,每天记录小鼠体质量、便血、便形等症状改变,HE染色评估小鼠结肠黏膜组织病理改变,ELISA和实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测血清及肠组织中炎症因子白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达变化,免疫组化分析肠上皮细胞中核抗原Ki67阳性率。结果与模型组比较,EEHDH中、高剂量组小鼠体质量下降相对缓慢,停止DSS刺激后恢复也较快;同时小鼠腹泻、便血症状改善明显,病理损伤和肠组织异常增生显著降低(P0.05、0.01);小鼠血清及肠组织中IL-6、TNF-α的表达及Ki67阳性率显著降低(P0.05、0.01)。结论 EEHDH能够有效改善DSS诱导的UC症状,并通过抑制IL-6等炎症因子表达降低肠组织的病理损伤、炎症浸润及异常增生,EEHDH对UC的治疗及肠炎相关肿瘤的预防具有重要的价值。     

民族药朝天罐提取物抗炎作用及机理研究

目的 研究朝天罐提取物对不同炎症模型的抗炎作用及作用机理.方法 采用醋酸腹腔注射致小鼠腹腔毛细血管通透性升高试验、二甲苯诱导小鼠耳廓肿胀模型、皮下埋植棉球诱导小鼠棉球肉芽肿模型观察朝天罐提取物的抗炎作用;采用角叉菜胶致小鼠背部气囊急性滑膜炎模型,通过紫外分光光度法,测定朝天罐提取物不同剂量组中小鼠背部气囊炎性的 渗出液PGE2的含量.结果 朝天罐高(20g/kg)、低(10g/kg)剂量组对醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性增高、二甲苯诱导的小鼠耳廓肿胀和小鼠棉球肉芽肿有明显的抑制作用;可显著降低小鼠背部气囊炎性渗出液中PGE2的含量(P＜0.05).结论 朝天罐提取物具有抗炎作用;其抑制炎症组织中PGE的产生可能为抗炎作用机理之一.     

消痰通腑方对结直肠癌前病变模型小鼠结直肠黏膜上皮NFκB/IL6/STAT3和AICD蛋白表达水平的影响

目的探讨消痰通腑方对结直肠癌前病变模型小鼠结直肠黏膜上皮核转录因子-κB(NF-κB)/白介素-6(IL-6)/信号传导与转录激活因子3(STAT3)和活化诱导胞嘧啶核苷脱氨酶(AICD)蛋白表达水平的影响。方法 C57BL/6小鼠90只,按随机数字表法分为空白组、模型组、西药组(柳氮磺胺吡啶组)、中药组(消痰通腑方组)和中西医结合组(柳氮磺胺吡啶加消痰通腑方组)。除空白组外,其余四组采用AOM/DSS"四步三循环法"造模。观察各组小鼠一般状况及结直肠黏膜上皮病理情况,计算结直肠癌前病变成瘤率,Western blotting法检测造模过程中(6周、14周、18周)小鼠结直肠黏膜上皮中NF-κB/IL-6/STAT3及AICD的蛋白表达水平。结果运用消痰通腑方后,小鼠一般状况较模型组好。中西医结合组的成瘤率(33.33%)低于模型组成瘤率(50.00%)。在14周和18周,与西药组比较,中药组和中西医结合组的NF-κB表达水平变化不显著,而IL-6、STAT3和AICD表达水平均下调;与中药组比较,中西医结合组在IL-6和STAT3表达上差异不明显,但AICD表达显著低于中药组。结论消痰通腑方能够改善小鼠一般状况,降低结直肠癌前病变的发生率,下调结直肠癌前病变小鼠直肠黏膜上皮中IL-6/STAT3蛋白的表达水平,下调AICD蛋白表达水平,此作用途径可能是其降低结直肠癌前病变发生率、预防结直肠癌发生的机制之一。     

基于三维响应曲面模型分析当归-红花补血功效的配伍规律

目的:应用多指标综合指数法与三维响应曲面分析法研究当归-红花(GH)补血效应的配伍规律。方法:采用注射乙酰苯肼+环磷酰胺诱导的小鼠血虚模型,将实验动物分为正常组、模型组、当归-红花不同配比(1∶0,4∶1,2∶1,3∶2,1∶1,2∶3,1∶2,1∶4,0∶1)组,按剂量0.01 m L·g~(-1)灌胃给药,连续7 d,观察小鼠血常规和脏器指数(胸腺、脾脏)的变化,建立当归和红花配伍后的三维响应曲面模型。结果:单用当归剂量为7.8 g·kg~(-1)·d~(-1)时,补血效果最好,总效应值5.50;单用红花剂量为0.52 g·kg~(-1)·d~(-1)时,补血效果最好,总效应值4.57。当归和红花配伍后,当归剂量在0.5~1.2 g·kg~(-1)·d~(-1)和红花剂量在0~0.5 g·kg~(-1)·d~(-1)时,表现为协同作用,在大部分剂量配比范围内(约50%)表现为相加作用,其次为拮抗作用。结论:当归和红花配伍后补血效应的协同作用范围较窄,强度也不是很明显,并在一定量比时还有拮抗作用。     

东当归乙醇提取物对小鼠学习记忆的影响

目的 观察东当归乙醇提取物对记忆障碍模型小鼠的作用效果.方法 应用氢溴酸东莨菪碱注射液(SCOP)制备小鼠记忆障碍模型,采用避暗实验、跳台实验、水迷宫实验和Y型电迷宫穿梭实验等方法观察不同剂量东当归乙醇提取物对记忆障碍模型小鼠的作用效果.结果 与模型组比较,东当归乙醇提取物中、高浓度组均能改善记忆障碍,作用强度类似于石杉碱甲.结论 东当归乙醇提取物对SCOP诱导的小鼠记忆障碍具有良好的改善作用.     

蛋白质组学在结直肠癌患者中医辨证分型中的应用进展

<正>根据世界卫生组织公布的2020年全球肿瘤流行病统计数据,全球结直肠死亡人数居癌症死亡原因的第二位,发病率居所有恶性肿瘤第三位,而我国结直肠的发病率仍处于明显上升态势,已跃我国癌症发病率排行的第二位^[1]。中医药治疗结直肠癌疗效确切,在抑制癌症患者术后肿瘤复发转移、减轻化疗毒副作用、提高生活质量及延长生存时间等方面具有一定作用^[2-5]。中药治疗结直肠癌的基础首先是辨证分型,     

小檗碱对DSS结肠炎小鼠发挥保护作用的实验观察

目的探索小檗碱在葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的实验性结肠炎中发挥的作用,为小檗碱更好的应用于临床提供理论依据。方法建立DSS诱导小鼠结肠炎的模型,观察给药小檗碱的实验组、未给药小檗碱的对照组以及不做任何处理的正常饲喂饮用水的阴性对照组在个体、组织、细胞和分子水平的差异。结果给药小檗碱的实验组小鼠肠炎表型得到恢复、组织损伤程度减轻、炎性细胞比例降低、促炎因子表达降低、促修复因子表达增多。结论小檗碱可以减缓DSS诱导结肠炎的发生,其机制可能是小檗碱通过抑制肠道外来细菌感染、抑制中性粒细胞的迁移和聚集、促进修复因子的表达,从而使结肠炎得到恢复。