熟地黄对ADHD模型大鼠前额叶皮质线粒体的保护作用

目的探讨熟地黄对ADHD模型大鼠前额叶皮质线粒体保护作用。方法将30只SHR大鼠随机分为模型组、MPH组(2 mg/kg)、熟地黄组(2.4 g/kg),另设WKY大鼠为正常组,每组10只,灌胃给药4周。采用透射电镜观察大鼠前额叶皮质线粒体超微结构;JC-1染色法和DCFH-DA荧光探针分别检测线粒体膜电位(MMP)和细胞内活性氧簇(ROS)水平;比色法检测超SOD、CAT水平;TUNEL染色检测神经元凋亡。结果与正常组比较,模型组线粒体呈现出肿胀、嵴减少等异常,MPH组上述异常加重,熟地黄组则有所缓解。与模型组比较,MPH组前额叶皮质MMP、SOD水平降低(P0.05,P0.01),ROS水平及神经元凋亡升高(P0.05,P0.01);而熟地黄组前额叶皮质MMP及SOD、CAT水平升高(P0.05,P0.01),ROS水平及神经元凋亡降低(P0.01)。结论熟地黄对ADHD模型SHR前额叶皮质线粒体结构和功能损伤有保护作用,并可减少神经元凋亡,其机制可能与抗氧化应激损伤有关。     

龙牡桂枝汤对ADHD模型大鼠左右额叶-纹状体去甲肾上腺素转运体蛋白表达的影响

目的观察龙牡桂枝汤对注意缺陷多动障碍(ADHD)模型动物—幼年自发性高血压大鼠(SHR)左右额叶-纹状体去甲肾上腺素转运体(NET)蛋白表达的影响,探讨该药治疗ADHD的作用机制。方法采用幼年雄性SHR大鼠48只,随机分为龙牡桂枝汤高、中剂量组、盐酸哌甲酯对照组和生理盐水对照组,连续灌胃给药14天,采用Western-blot法检测各组大鼠左右脑前额叶皮质、纹状体NET蛋白表达水平。结果用药后,盐酸哌甲酯对照组、龙牡桂枝汤中、高剂量组大鼠右脑前额叶皮质和纹状体的NET蛋白表达增加,而各实验组大鼠左脑前额叶皮质和纹状体NET蛋白表达无明显变化。结论龙牡桂枝汤治疗ADHD的作用机制之一与其能上调右脑前额叶皮质、纹状体的NET蛋白表达有关。     

龙牡桂枝汤对ADHD模型大鼠左右额叶-纹状体NET mRNA表达的影响

目的:观察龙牡桂枝汤对注意缺陷多动障碍(ADHD)模型动物-幼年自发性高血压大鼠(SHR)左右额叶-纹状体去甲肾上腺素转运体(NET)mRNA表达的影响,探讨该药治疗ADHD的作用机制。方法:幼年雄性SHR大鼠随机分为龙牡桂枝汤高、中剂量组、盐酸哌甲酯对照组和生理盐水对照组,连续灌胃给药14天,采用Real-time PCR法检测各组大鼠左右脑前额叶皮质、纹状体NET mRNA表达水平。结果:在右前额叶皮质,龙牡桂枝汤高剂量组NET mRNA表达较其他实验组明显增加,而在左前额叶皮质各组差异不明显。在双侧纹状体,与生理盐水组相比,各用药组NET mRNA的表达显著增加,且龙牡桂枝汤高剂量组中剂量组盐酸哌甲酯组,差异具有统计学意义。结论:龙牡桂枝汤治疗ADHD的可能机制之一与其上调右脑前额叶皮质及双侧纹状体NET mRNA表达有关。     

龙牡桂枝汤对ADHD模型大鼠左右额叶-纹状体α2A-AR mRNA表达的影响

目的:观察龙牡桂枝汤对注意缺陷多动障碍(ADHD)模型动物—幼年自发性高血压大鼠(SHR)左右额叶-纹状体α2A肾上腺素受体(α2A-AR)mRNA表达的影响,探讨该药治疗ADHD的作用机制。方法:采用幼年雄性SHR大鼠,随机分为龙牡桂枝汤高、低剂量(18,9 g·kg-1)组,盐酸哌甲酯组(3.75 mg·kg-1)和模型组(生理盐水,10 m L·kg-1),连续ig给药14d,采用Real-time PCR法检测各组大鼠左右脑前额叶皮质、纹状体α2A-AR mRNA表达水平。结果:在右前额叶皮质,盐酸哌甲酯组及龙牡桂枝汤组大鼠的α2A-AR mRNA表达较模型组显著减少(P0.05),而在左前额叶皮质各组差异不明显。在右纹状体,与模型组相比,盐酸哌甲酯组α2A-AR mRNA的表达显著减少,而龙牡桂枝汤低、高剂量组α2A-AR mRNA的表达显著增加(P0.05);在左纹状体,盐酸哌甲酯组α2A-AR mRNA的表达显著高于模型组和龙牡桂枝汤低、高剂量组(P0.05),而龙牡桂枝汤低、高剂量组与模型组比较无显著性差异。结论:α2A-AR与ADHD的发生存在一定关联,龙牡桂枝汤治疗ADHD的作用机制可能与其下调右脑前额叶皮质α2A-AR mRNA表达,上调右脑纹状体α2A-ARmRNA表达有关。     

龙牡桂枝汤对ADHD模型大鼠左右额叶-纹状体α_(2A)-AR mRNA表达的影响

目的:观察龙牡桂枝汤对注意缺陷多动障碍(ADHD)模型动物—幼年自发性高血压大鼠(SHR)左右额叶-纹状体α2A肾上腺素受体(α2A-AR)mRNA表达的影响,探讨该药治疗ADHD的作用机制。方法:幼年雄性SHR大鼠随机分为龙牡桂枝汤高、中剂量组、盐酸哌甲酯对照组和生理盐水对照组,连续灌胃给药14天,采用Real-time PCR法检测各组大鼠左右脑前额叶皮质、纹状体α2A-AR mRNA表达水平。结果:在右前额叶皮质、西药组及中药组大鼠的α2A-AR mRNA表达较生理盐水组显著减少,而在左前额叶皮质各组差异不明显。在右纹状体,与生理盐水组相比,盐酸哌甲酯组α2A-AR mRNA表达显著减少,而龙牡桂枝汤中剂量组和高剂量组α2A-AR mRNA表达显著增加;在左纹状体,盐酸哌甲酯组α2A-AR mRNA表达显著高于生理盐水组和龙牡桂枝汤中、高剂量组,而龙牡桂枝汤中、高剂量组与生理盐水组比较无显著性差异。结论:龙牡桂枝汤治疗ADHD的可能机制之一与其下调右脑前额叶皮质α2A-AR表达,上调右脑纹状体α2A-AR表达有关。     

人参皂苷Rg1对SHR大鼠前额叶、纹状体多巴胺和去甲肾上腺素含量的影响

目的:探讨人参皂苷Rg1治疗注意缺陷多动障碍(ADHD)的神经生化机制.方法:将SHR大鼠随机分为模型对照组、盐酸呱甲酯控释片组和人参皂苷Rg1组,取WKY大鼠为正常对照组.各组大鼠给药14天后,分别取前额叶、纹状体组织,采用高效液相法检测多巴胺(DA)、去甲肾上腺素(NE)的含量.结果:与正常对照组比较,模型对照组前额叶、纹状体多巴胺和去甲肾上腺素的含量显著降低;与模型对照组比较,盐酸呱甲酯控释片组前额叶、纹状体多巴胺和去甲肾上腺素的含量明显升高;与模型对照组比较,人参皂苷Rg1组前额叶、纹状体内多巴胺的含量显著升高,而去甲肾上腺素的含量无明显改变.结论:人参皂苷Rg1可能通过提高前额叶、纹状体多巴胺的含量而起到治疗ADHD的作用.     

安神定志灵对ADHD模型鼠前额叶皮质和纹状体多巴胺D1,D2受体表达的影响

目的:研究安神定志灵对注意缺陷多动障碍(attention deficit hyperactivity disorder,ADHD)动物模型-自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rat,SHR)前额叶皮质、纹状体多巴胺受体D1,D2(DRD1,DRD2)表达的影响,探讨该药治疗ADHD的作用机制。方法:30只SHR鼠随机分为5组(模型组、利他林组、安神定志灵高、中、低剂量组),每组6只,Wistar大鼠6只作为正常对照组。安神定志灵高、中、低剂量组分别按生药剂量34.1,17.1,8.5 g.kg-1 ig;利他林组以2.1 mg.kg-1利他林ig;模型组和正常对照组以10 mL.g-1生理盐水ig。实验2周后处死大鼠,取脑分别用RT-PCR和Western blot检测各组大鼠前额叶皮质、纹状体内DRD1,DRD2 mRNA和蛋白表达水平。结果:模型组与正常对照组比较,DRD1,DRD2 mRNA和蛋白表达水平显著降低(P<0.01);利他林组与模型组比较,DRD1,DRD2 mRNA和蛋白表达水平显著升高(P<0.01);安神定志灵中剂量组与模型组比较,DRD1,DRD2 mRNA和蛋白表达水平显著升高(P<0.01);安神定志灵低剂量组和高剂量组RD1,DRD2mRNA和蛋白表达水平高于空白模型组,但没有统计学差异。结论:安神定志灵可以上调SHR大鼠额叶皮质和纹状体中DRD1,DRD2 mRNA及蛋白的表达水平,说明安神定志灵在调控前额叶-纹状体通路的功能中发挥着重要的作用,而DRD1,DRD2参与了这一调节的过程,最终起到对ADHD的治疗作用。     

孔圣枕中丹对SHR大鼠前额叶皮质及纹状体TH、DAT蛋白和基因表达的影响

目的 探讨孔圣枕中丹对注意缺陷多动障碍(ADHD)动物模型SHR大鼠前额叶皮质、纹状体TH、DAT蛋白和基因表达的影响.方法 90只SHR雄性大鼠分为3批,每批大鼠随机分为3组,分别用孔圣枕中丹、盐酸哌甲酯和生理盐水灌胃28 d,采用免疫组化法、WESTERN BLOT、原位杂交法和荧光定量PCR检测其前额叶皮质、纹状体TH、DAT蛋白和基因的表达.结果 SHR大鼠前额叶皮质及纹状体TH蛋白和基因的表达,孔圣枕中丹组高于盐酸哌甲酯组,盐酸哌甲酯组又高于生理盐水对照组;DAT蛋白和基因的表达孔圣枕中丹组低于盐酸哌甲酯组,盐酸哌甲酯组又低于生理盐水对照组,与对照组比较,P＜0.05,有统计学意义.结论 孔圣枕中丹可能通过影响调控中枢前额叶皮质-基底神经节环路的DA神经信号传导而治疗ADHD.     

逍遥散对LPS所致大鼠神经损伤的保护作用机制

目的:探讨逍遥散对脂多糖(LPS)所致大鼠神经损伤的保护作用,探讨其机制。方法:56只SD大鼠随机分为空白组,假手术组,模型组,阿米替林组(10 mg·kg-1),氟西汀组(10 mg·kg-1),逍遥散高、低剂量组(30,15 g·kg-1),采用侧脑室注射LPS诱导建立神经损伤大鼠模型,连续预防灌胃给药14 d,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测大鼠血清脑源性神经营养因子(BDNF)和β-神经生长因子(β-NGF)水平,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)与蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠海马和皮层部位BDNF,神经生长因子(NGF),原肌球蛋白受体激酶B(Trk B),原肌球蛋白受体激酶A(Trk A),c AMP反应元件结合蛋白(CREB),突触后密度蛋白95(PSD95),突触小泡蛋白(SYP) mRNA或蛋白表达水平。结果:与空白组比较,模型组大鼠血清BDNF,β-NGF含量显著下降(P 0. 01),皮层、海马BDNF,NGF,Trk B,Trk A,CREB mRNA明显下调(P 0. 05,P 0. 01),BDNF,Trk B,CREB,磷酸化c AMP反应元件结合蛋白(p-CREB),PSD95,SYP蛋白表达水平明显下调(P0. 05,P 0. 01);与模型组比较,逍遥散高、低剂量组大鼠血清BDNF,β-NGF含量明显升高(P 0. 05,P 0. 01),皮层、海马BDNF,NGF,Trk B,Trk A,CREB mRNA表达水平明显上调(P 0. 05,P 0. 01),BDNF,Trk B,CREB,p-CREB,PSD95,SYP蛋白表达水平明显上调(P 0. 05,P 0. 01)。结论:逍遥散对侧脑室注射LPS诱导的大鼠神经损伤有一定保护作用,作用发挥与活化BDNF/NGF-TrkB/Trk A-CREB通路及上调突触蛋白表达有关。     

基于“阴静阳躁”理论探讨熟地黄对注意缺陷多动障碍大鼠前额叶皮质能量代谢的影响北大核心CSCD

基于“阴静阳躁”理论观察熟地黄对注意缺陷多动障碍(attentional deficit hyperactivity disorder,ADHD)模型幼龄自发性高血压病大鼠(spontaneously hypertensive rats,SHR)前额叶皮质(prefrontal cortex,PFC)能量代谢及其调控机制的影响。将30只3周龄雄性SHR随机分为模型组、哌醋甲酯(methylphenidate,MPH)组、熟地黄组,同周龄京都(Wistar-Kyoto,WKY)雄性大鼠为正常组,每组10只;正常组、模型组予同体积0.9%羧甲基纤维素钠(sodium carboxymethyl cellulose,CMC-Na)溶液灌胃,MPH组、熟地黄组分别予MPH(2 mg·kg^(-1))、熟地黄(2.4 g·kg^(-1))灌胃,每日2次。给药前、给药第4周时分别采用开场实验评估大鼠自发性行为。给药4周后,分离PFC制备线粒体,采用高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)测定PFC中三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)、二磷酸腺苷(adenosine diphosphate,ADP)、一磷酸腺苷(adenosine monophosphate,AMP)水平,计算能荷(energy charge,EC)值;Clark氧电极法测定线粒体呼吸功能相关参数:Ⅲ态呼吸(state 3 respiration,ST3)、Ⅳ态呼吸(state 4 respiration,ST4)与呼吸控制指数(respiratory control rate,RCR);化学比色法测定线粒体琥珀酸脱氢酶(succinate dehydrogenase,SDH)、细胞色素C氧化酶(cytochrome C oxidase,COX)、Na^(+)-K^(+)-ATP酶、Ca^(2+)-Mg^(2+)-ATP酶活性;采用分光光度法测定线粒体膜通透性转换孔(mitochondrial permeability transition pore,mPTP)开放程度;蛋白免疫印迹(Western blot)法检测PFC中葡萄糖转运蛋白(glucose transporter,GLUT)1和GLUT3的表达水平。结果显示,与模型组相比,熟地黄可以显著降低SHR大鼠在开场实验中的总运动距离、直立次数及中心区域运动距离(P<0.05或P<0.01),升高大鼠脑组织ATP及EC水平、降低AMP水平(P<0.05),升高ST3耗氧率、RCR(P<0.05),明显升高SDH、COX、Na^(+)-K^(+)-ATP酶和Ca^(2+)-Mg^(2+)-ATP酶活性(P<0.05或P<0.01),抑制mPTP开放,提高GLUT1及GLUT3蛋白表达水平(P<0.05)。推测熟地黄可能通过改善ADHD模型大鼠PFC存在的能量代谢障碍而抑制其多动、冲动,其机制可能与改善线粒体呼吸功能,提高Na^(+)-K^(+)-ATP酶、Ca^(2+)-Mg^(2+)-ATP酶及线粒体呼吸酶活性,抑制mPTP开放,提高葡萄糖转运蛋白表达有关,初步揭示了ADHD“阴静阳躁”理论的现代生物学内涵。     

安神定志灵对ADHD模型大鼠纹状体多巴胺转运体表达的影响

目的:研究安神定志灵对注意缺陷多动障碍(attention deficit hyperactivity disorder,ADHD)动物模型-自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rat,SHR)纹状体多巴胺转运体(DAT)表达的影响,探讨该药治疗ADHD的作用机制。方法:30只SHR鼠随机分为5组(模型组、利他林组、安神定志灵高、中、低剂量组),每组6只,Wistar-Kyoto(WKY)大鼠6只作为正常对照组。安神定志灵高、中、低剂量组分别按生药剂量34.1,17.1,8.5 g.kg-1 ig;利他林组以2.1 mg.kg-1利他林ig;模型组和正常对照组以10 mL.kg-1生理盐水ig。连续给药2周后处死大鼠,取脑分别用RT-PCR和激光共聚焦显微镜检测各组大鼠纹状体多巴胺转运体(DAT)mRNA和蛋白表达水平。结果:大鼠纹状体中DAT的蛋白表达水平,组间存在差异(P<0.05),SHR模型组大鼠纹状体中DAT的蛋白表达与正常对照组比较显著增高(P<0.01);安神定志灵中、高剂量组DAT的蛋白表达显著低于模型组(P<0.01),利他林组DAT的蛋白表达显著低于模型组(P<0.05),安神定志灵低剂量组和模型组DAT蛋白表达相比无统计学意义。蛋白表达量从高到低依次为安神定志灵低剂量组、利他林组、安神定志灵中、高剂量组。结论:安神定志灵可以降低SHR大鼠纹状体中DAT mRNA及蛋白的表达水平,减少突触前神经元对DA的重摄取,增加突触间隙的DA浓度,改善了中枢DA的神经信号传导功能,起到对ADHD的治疗作用。     

柴胡皂苷a对ADHD模型大鼠前额叶中多巴胺含量及其合成、释放、清除信号通路的影响

目的:探讨柴胡皂苷a对注意缺陷多动障碍模型——自发性高血压大鼠(SHR)前额叶多巴胺(DA)含量及其合成、释放及清除信号通路的影响。方法:按照随机区组法将50只SHR随机分为模型组、利他林组(2 mg/kg)阳性对照组及柴胡皂苷a低、中、高剂量(12.5、25、50 mg/kg)组,各10只,另将10只WKY大鼠作为正常对照组。各组大鼠灌胃给予相应药物, 2次/d,于给药4 w后摘取大鼠脑组织。同时分别采用实时定量荧光PCR、蛋白质印迹法及免疫组织化学法检测各组大鼠前额叶及纹状体中TH、VMAT2、SNAP-25、Syntaxin-1a、DAT mRNA及蛋白表达,高效液相色谱荧光法检测各组大鼠前额叶中DA含量。结果:与正常对照组比较,模型组大鼠前额叶中TH、SNAP-25、Syntaxin-1a、VMAT2 mRNA和(或)蛋白表达显著降低,DAT蛋白表达及DA含量显著升高(P0.05或P0.01)。与模型组比较,柴胡皂苷a能使模型大鼠前额叶中TH、SNAP-25、Syntaxin-1a、VMAT2 mRNA和(或)蛋白表达及DA含量显著升高, DAT蛋白表达显著降低(P0.05或P0.01)。结论:柴胡皂苷a有增加ADHD模型大鼠前额叶多巴胺含量的作用,其作用机制可能与增加前额叶多巴胺的合成及释放,并减少多巴胺的重吸收有关。     

益智宁对注意缺陷多动障碍大鼠前额叶皮质及纹状体TH、DAT、DRD_1、DRD_2蛋白和基因表达的影响

目的:探讨益智宁对注意缺陷多动障碍(ADHD)动物模型-自发性高血压大鼠(SHR)前额叶皮质及纹状体中酪氨酸羟化酶(TH)、多巴胺转运体(DAT)、多巴胺D1受体(DRD1)、多巴胺D2受体(DRD2)蛋白和基因表达的影响。方法:36只SHR雄性大鼠随机分为3组,分别用益智宁煎剂、盐酸哌甲酯和生理盐水灌胃28d,采用免疫组化法和原位杂交法检测其前额叶皮质、纹状体中TH、DAT、DAR1、DRD2蛋白和基因的表达。结果:在SHR大鼠的前额叶皮质及纹状体,TH蛋白和基因的表达,益智宁组高于盐酸哌甲酯组,盐酸哌甲酯组又高于生理盐水对照组;DAT蛋白和基因表达,益智宁组低于盐酸哌甲酯组,盐酸哌甲酯组又低于生理盐水对照组;DRD1和DRD2的蛋白和基因表达,益智宁组和盐酸哌甲酯组均低于生理盐水对照组;差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:益智宁可能通过影响调控中枢前额叶皮质-基底神经节环路的DA神经信号传导而治疗ADHD。     

人参皂苷Rg1对SHR大鼠纹状体GDNFmRNA基因表达和多巴胺含量的影响

目的:探讨人参皂苷Rg1对SHR大鼠纹状体GDNFmRNA基因表达和多巴胺含量的影响。方法:将SHR大鼠随机分为模型对照组(MC组)、盐酸哌甲酯控释片组(MPH组)和人参皂苷Rg1组(Rg1组)。各组按设计剂量给药14天后,取纹状体组织,采用高效液相法检测多巴胺(DA)的含量、原位杂交法检测GDNFmRNA的基因表达。结果:盐酸哌甲酯控释片组和人参皂苷Rg1组的纹状体神经元的细胞膜及细胞浆GDNFmRNA基因表达明显增强,模型对照组未见明显表达;盐酸哌甲酯控释片组和人参皂苷Rg1组与模型对照组比较,纹状体多巴胺的含量显著升高。结论:人参皂苷Rg1可能通过促进纹状体GDNFmRNA的基因表达和增加多巴胺的含量而起到治疗ADHD的作用。     

安神定志灵对自发性高血压大鼠前额叶、纹状体多巴胺和去甲肾上腺素含量的影响

目的:研究安神定志灵对注意缺陷多动障碍(ADHD)动物模型-自发性高血压大鼠(SHR)前额叶皮质、纹状体脑组织中多巴胺(dopamine,DA)和去甲肾上腺素(norepinephrine,NE)递质含量的影响,探讨该药治疗ADHD的作用机制。方法:40只SHR随机分为5组(模型组、托莫西汀组、安神定志灵低、中、高剂量组),每组8只,Wistar-Kyoto(WKY)大鼠8只作为正常对照组。安神定志灵低、中、高剂量组分别按生药剂量11.85 g/(kg·d),23.7 g/(kg·d),47.4 g/(kg·d)灌胃,每日1次;托莫西汀组按5 mg/(kg·d)给予托莫西汀灌胃,每日1次;模型组和正常对照组每日按体重给予等量生理盐水。实验4周后处死大鼠,采用高效液相色谱-荧光法检测各组大鼠前额叶皮质、纹状体脑组织多巴胺和去甲肾上腺素含量水平。结果:(1)DA递质含量:模型组SHR大鼠前额叶皮质DA含量明显低于正常WKY大鼠(P=0.006),托莫西汀和安神定志灵高剂量均可显著增加DA含量(P0.05),且两者之间无明显差异(P0.05);模型组SHR大鼠纹状体部位DA含量明显高于正常WKY大鼠(P=0.000),托莫西汀和安神定志灵各剂量均能显著降低DA含量(P=0.000),且两者之间无明显统计学差异(P0.05)。(2)NE递质含量:模型组SHR大鼠前额叶皮质NE含量明显低于正常组WKY大鼠(P=0.006),托莫西汀组、安神定志灵中剂量、高剂量组均能显著增加NE含量(P0.05),且两两比较无统计学差异(P0.05);模型组SHR大鼠纹状体NE的含量与正常组WKY大鼠无统计学差异(P0.05)。结论:SHR大鼠前额叶皮质和纹状体存在NE/DA递质失调,前额叶皮质主要表现为NE/DA递质含量的降低,纹状体主要表现为DA含量的增高,与ADHD发病有关;托莫西汀及安神定志灵均能调节NE/DA含量的失衡,且两者之间无明显差异。     

"安神定志灵"对自发性高血压大鼠行为学及前额叶去甲肾上腺素α2A受体的影响研究

目的:研究安神定志灵对自发性高血压大鼠(SHR)多动冲动行为及前额叶去甲肾上腺素α2A受体(ADRα2A)的影响。方法:选择SPF级雄性SHR作为注意缺陷多动障碍(ADHD)模型动物,随机分为模型组、择思达组(0.045mg/kg)和安神定志灵低、中、高剂量组(6.7、13.4、26.7g/kg),每组8只,另设WKY大鼠8只为正常对照1组,SD大鼠8只为正常对照2组。各组分别灌胃药物或生理盐水4周。于灌胃给药第0、7、14、21天进行旷场试验,观察并比较各组大鼠中央区域活动时间、活动距离及穿格数。末次给药24h后取各组大鼠前额叶,运用Western blot法检测ADRα2A蛋白表达,运用PCR技术检测ADRα2A mRNA表达,运用免疫荧光技术检测ADRα2A阳性细胞表达量。结果:给药前,模型组、择思达组及安神定志灵各剂量组大鼠中央区域活动时间、活动距离及穿格数均较正常对照1、2组显著升高(P0.05)。给药第14、21日,各给药组大鼠上述指标均较模型组有不同程度的降低,以择思达组和安神定志灵中剂量组最为明显(P0.05);给药第28天,各给药组大鼠上述指标均较模型组明显降低(P0.05)。模型组大鼠前额叶ADRα2A蛋白表达、m RNA表达及阳性细胞表达量均显著低于正常对照1、2组(P0.05);与模型组比较,择思达组及安神定志灵低剂量组ADRα2A蛋白表达、m RNA表达及阳性细胞表达量显著升高(P0.05),此2组间比较差异无统计学意义(P0.05)。结论:安神定志灵能调控SHR自发活动性及多动、冲动行为,其中中剂量可较早发挥作用,低剂量可显著改善SHR前额叶ADRα2A的表达,达到控制ADHD临床症状的目的。     

电针对急性束缚性应激大鼠海马组织BDNF/ TrkB表达的影响

目的观察电针对急性束缚性应激大鼠海马组织脑源性神经营养因子(BDNF)及其受体酪氨酸B(Trk B)表达的影响,并探讨电针对急性应激的调节作用。方法将24只SD大鼠随机分成正常组、模型组、假电针组、电针组,每组6只。模型组:采用急性束缚2 h制备急性束缚性应激模型;假电针组:造模后给予针刺大鼠双侧足三里和三阴交30 min,但不予电流刺激,其余同模型组;电针组:造模后给予电针刺激大鼠双侧足三里和三阴交(2/15 Hz,2 m A,30 min),其余同模型组;正常组不作任何处理。采用实时荧光定量PCR检测大鼠海马组织中BDNF/Trk B mRNA表达水平,采用Western bolt技术检测大鼠海马组织中BDNF/Trk B蛋白表达水平,采用ELISA法检测大鼠血浆中皮质酮(CORT)和促肾上腺皮质激素(ACTH)的含量。结果造模前后各组血浆中CORT和ACTH的含量比较,差异有统计学意义(P0.05);与正常组比较,模型组血浆中ACTH和CORT含量明显上升(P0.05);与模型组和假电针组比较,电针组造模后30 min血浆中ACTH和CORT含量明显下降(P0.05);与正常组比较,模型组海马组织BDNF和Trk B mRNA表达水平明显下降(P0.05);与模型组和假电针组比较,针刺组海马组织BDNF和Trk B mRNA表达水平明显上升(P0.05);与正常组比较,模型组海马组织BDNF和Trk B蛋白表达水平明显下降(P0.05);与模型组和假电针组比较,电针组海马组织Trk B蛋白表达水平明显上升(P0.05)。结论电针足三里可以缓解急性应激所导致的损害,其可能的机制是电针可以维持海马组织BDNF和Trk B的表达水平。     

安神定志灵对ADHD模型鼠前额叶、纹状体各G蛋白亚基表达的影响

目的:探讨中药复方安神定志灵对注意缺陷多动障碍动物模型SHR大鼠前额叶、纹状体中Gαs、Gαi及Golf mRNA和蛋白表达的影响。方法:将SHR大鼠运用随机区组分为模型组、利他林组、安神定志灵低剂量、中剂量、高剂量组,每组10只,另将10只WKY大鼠设为正常组。安神定志灵低、中、高剂量组分别按生药量6.7、13.4、26.7 g·kg~(-1)灌胃,每日2次;利他林组以2 mg·kg~(-1)给予利他林灌胃,每日2次;模型组和正常对照组每日按体质量给予等量双蒸水灌胃,灌胃4周后处死。分别用RT-PCR和Western Blot检测各组大鼠前额叶、纹状体中Gαs、Golf及Gαi mRNA和蛋白的表达水平。结果:模型组大鼠除前额叶皮质Gαi蛋白外,余G蛋白亚基mRNA和蛋白表达水平均明显低于正常组(P<0.05或P<0.01)。经治疗后,利他林组和安神定志灵各剂量组有提高前额叶皮质、纹状体中三种G蛋白亚基Gαi mRNA和蛋白的表达水平趋势或能显著提高其表达水平(P<0.05或P<0.01)。结论:安神定志灵可以升高SHR大鼠前额叶皮质、纹状体Gαs、Golf及Gαi三者mRNA和蛋白的表达水平,提示安神定志灵可以激活突触后膜多巴胺受体下游不同的G蛋白亚基,进而影响下游的信号通路从而发挥治疗作用。     

补肾活血方对血管性痴呆大鼠海马BDNF mRNA及受体TrkB mRNA表达的影响

目的探讨补肾活血方对血管性痴呆(VD)大鼠脑海马神经元保护机制。方法 70只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、补肾活血高剂量组、补肾活血低剂量组、尼莫地平对照组,每组14只,采用两血管阻断法制备大鼠VD模型,补肾活血高剂量组、低剂量组分别以10.14、5.07 g生药/kg灌服补肾活血方,尼莫地平对照组以11.06 mg/kg灌服尼莫地平,给药30天后,检测各组大鼠水迷宫法行为学、脑海马神经元超微结构及海马组织BDNF mRNA和Trk B mRNA蛋白表达。结果与假手术组比较,模型组大鼠空间学习记忆能力与探索能力下降,表现为逃避潜伏期明显延长,穿越原平台次数及在原平台停留时间均明显减少(P0.01),海马神经元BDNF mRNA和Tr KB mRNA及蛋白表达下降(P0.05,P0.01),脑海马神经元超微结构明显受损;与模型组比较,补肾活血高、低剂量组大鼠空间学习记忆能力与探索能力明显改善,表现为逃避潜伏期明显缩短,穿越原平台次数及在原平台停留时间均明显增加(P0.05,P0.01),海马神经元BDNF mRNA及受体Trk B mRNA及蛋白表达升高(P0.05,P0.01),改善脑海马神经元超微结构。结论补肾活血方可提高脑海马神经元BDNF及受体Trk B表达,保护脑海马神经元,改善VD大鼠学习与记忆能力。     

益智宁对ADHD大鼠前额叶皮质、纹状体多巴胺的影响

目的:观察中药复方益智宁对ADHD模型动物——自发性高血压大鼠(SHR)额-纹状体环路多巴胺(DA)的影响。方法:将11周龄的雄性SHR分为中药高剂量组、低剂量组和生理盐水对照组,分别予益智宁和生理盐水灌胃,用高效液相色谱-电化学法检测前额叶皮质、纹状体多巴胺的含量。结果:益智宁可明显升高SHR纹状体多巴胺含量,高剂量组、低剂量组与生理盐水对照组比较有显著性差异(P<0.05),而高低剂量组间无明显差异,但三组间前额叶皮质多巴胺含量比较无明显差异(P>0.05)。结论:益智宁治疗ADHD肾虚肝亢型的作用机制之一可能与调节单胺类神经递质有关,其对额-纹状体环路DA的调控主要在于提高纹状体DA含量,纹状体为作用靶点之一。