精子DNA完整性检测的临床应用

男性生育力受到许多因素的影响,其中精子DNA损伤一直是生殖医学领域研究的热点之一.精子线粒体、核DNA损伤会导致受精失败或影响受精后原核的形成、胚胎着床及子代的健康.目前,定量检测精子中异常DNA数量的方法有多种,虽然尚不理想,但各有其临床应用价值.精子DNA损伤分析比传统精液常规分析参数更稳定、更敏感.胞浆内单精子注...     

精子DNA完整性检测的临床应用

男性生育力受到许多因素的影响,其中精子DNA损伤一直是生殖医学领域研究的热点之一。精子线粒体、核DNA损伤会导致受精失败或影响受精后原核的形成、胚胎着床及子代的健康。目前,定量检测精子中异常DNA数量的方法有多种,虽然尚不理想,但各有其临床应用价值。精子DNA损伤分析比传统精液常规分析参数更稳定、更敏感。胞浆内单精子注射(ICSI)前先对精子DNA进行评估十分必要。精子DNA损伤程度是新的评价精液质量和预测生育能力的指标。     

DNA甲基化与男性不育关系的研究进展

在严重的精子缺乏患者中普遍存在异常的表观遗传变化,已经发现亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)、PAX8、NTF3、SFN、HRAS、JHM2DA等基因DNA甲基化改变与不育患者中异常的精液参数有关,这些基因通常是高甲基化的.甲基化和去甲基化的正确调控对个体正常发育至关重要,微小的DNA甲基化异常与许多疾病有关,包括男性不育.阐述男性生殖细胞中正常的DNA甲基化,并对已经发现的异常DNA甲基化和男性不育的关系进行综述,从中探究男性不育的某些遗传学病因.     

精子染色质完整性检测与辅助生殖技术

随着男科学研究的深入,精子评估已由传统的精液常规分析向细胞、分子水平深入发展.精子染色质完整性是反映男性生育力的新指标,其影响到辅助生殖技术(ART)中的受精率、胚胎质量和妊娠率等,与ART结局密切相关.检测精子染色质完整性,采取适当措施获得染色质无损伤或损伤较小的精子,对改善ART结局十分必要.精子染色质结构分析是目...     

精子染色质完整性检测与辅助生殖技术

随着男科学研究的深入,精子评估已由传统的精液常规分析向细胞、分子水平深入发展。精子染色质完整性是反映男性生育力的新指标,其影响到辅助生殖技术(ART)中的受精率、胚胎质量和妊娠率等,与ART结局密切相关。检测精子染色质完整性,采取适当措施获得染色质无损伤或损伤较小的精子,对改善ART结局十分必要。精子染色质结构分析是目前检测精子染色质完整性最常用的方法之一。现就精子染色质损伤的机制与检测方法、其与ART结局的关系以及ART中染色质损伤的防治做文献综述。     

精子凋亡检测技术的研究进展

人类睾丸是一种具有高度增殖能力的组织，但成人睾丸中产生的成熟精子的数量要比预计生成的精子数少20％～75％。大量研究表明睾丸中生精细胞这种自发性变化是通过凋亡而发生的，凋亡在精子发生的生理病理过程中扮演一个重要的角色。细胞凋亡，又称程序性细胞死亡（PCD），是指在体内外因素的诱导下，由基因调控而发生的自主性细胞有序死亡。过去对精子凋亡检测技术研究并不多，主要是方法学的不足，随着技术的发展和研究的深入，精子凋亡检测方法逐渐增多。现就目前精子凋亡检测原理、方法及其临床应用作一综述。     

精子顶体发育相关蛋白的研究进展

受精是新生命诞生的第一步,在此过程中,精子将所携带的单倍体遗传物质与卵子的单倍体遗传物质融合成双倍体合子。哺乳动物的受精过程涉及到一系列复杂而精细的活动,如精子的超活化与获能、顶体反应以及精卵结合等。精子顶体是一种特殊的膜细胞器,具有帽状结构并覆盖在精子的细胞核前部,在受精过程中发挥着关键作用。顶体的形成主要包括囊泡形成、囊泡运输、囊泡融合和顶体与细胞核结合等过程,其独特的蛋白运输机制需要内质网、高尔基体等细胞器以及某些特殊结构之间的相互配合。顶体形成是精子细胞分化为精子的关键步骤之一,受多基因精细调控,其发育缺陷与包括圆头精子症在内的多种男性不育症有关。综述近年精子顶体发育过程中主要生物学事件的发生顺序中相关蛋白的研究,并介绍了自噬相关蛋白对顶体发育过程作用的新近研究,以期为男性不育症的诊疗提供新思路。     

精子DNA损伤与辅助生殖技术结局

精子DNA损伤发生的机制包括染色质包装异常、氧化应激和细胞凋亡等。此外,冷冻保存和体外制备技术均能影响精子DNA的完整性。精子DNA损伤与精液参数、精子的受精能力和受精后的胚胎发育潜能、辅助生殖技术（ART）结局及后代遗传风险密切相关。对近年有关精子DNA损伤的机制、冷冻保存和精子制备、精子DNA损伤与精液参数及其与ART结局关系的相关文献进行综述。     

精子纤维鞘发育不良行胞浆内单精子注射成功妊娠一例

精子纤维鞘发育不良(DFS)是一类罕见病,表现为严重的精子运动障碍和精子鞭毛形态异常,超微结构显示精子纤维鞘及轴丝组装异常。最近,本中心通过低渗肿胀试验(HOST)选择精子进行胞浆内单精子注射(ICSI)治疗患者1例,获得成功妊娠。     

新型冠状病毒感染对男性精液检测指标的影响

目前新型冠状病毒感染的机制已经明确,男性生殖系统也可能是新型冠状病毒感染的目标。男性感染新型冠状病毒后,可能会出现暂时性的精液量减少、精子浓度降低、精子数量减少、精子活力降低、正常形态精子百分率降低及精子DNA碎片率增加等精液检测指标的变化,影响男性的精液质量、降低男性的生育能力,引发这一系列变化的机制可能包括了睾丸炎症、过度免疫、细胞因子风暴、内分泌功能受损和发热等,男性精液中是否存在新型冠状病毒还需要进一步的研究检测确定。综述新型冠状病毒感染对男性精液检测指标的具体影响和作用机制,为备孕期夫妇在感染新型冠状病毒后的相关治疗和辅助生殖治疗的受精时机选择提供参考。     

A model for the importance of zinc in the dynamics of human sperm chromatin stabilization after ejaculation in relation to sperm DNA vulnerability

The focus of this review is the dual functions of the sperm chromatin stabilization and how external factors can interfere with these functions. Zinc depletion after ejaculation allows for rapid and total sperm chromatin decondensation without addition of exogenous disulfide cleaving agents. Zinc depletion without concomitant repulsion of chromatin fibers induces another type of stability that requires exogenous disulfide cleaving agents to allow decondensation. It is essential to extend the present concept, that the sperm chromatin stability is based on disulfide bridges only, to include also the functions of Zn²⁺. It is suggested that the chromatin stability of the ejaculated human spermatozoon is rapidly reversible due to the dual function of Zn²⁺ that stabilizes the structure and prevents the formation of excess disulfide bridges by a single mechanism: the formation of zinc bridges involving protamine thiols of cysteine and potentially also imidazole groups of histidine. Extraction of zinc from the freshly ejaculated spermatozoon allows two totally different biological results: (1) immediate decondensation if chromatin fibers concomitantly are induced to repel (e.g., through phosphorylation in the ooplasm) and (2) thiols freed from Zn²⁺ are available to form disulfide bridges creating a superstabilized chromatin. Spermatozoa in the zinc rich prostatic fluid (in first ejaculated fraction) represent physiology. Extraction of chromatin zinc can be caused by unphysiological exposure of spermatozoa to the zinc chelating and oxidative seminal vesicular fluid, a situation common to most assisted reproductive techniques (ART) laboratories where the entire ejaculate is collected into a single container in which spermatozoa and secretions are mixed during at least 30?min. Some men in infertile couples have low content of sperm chromatin zinc due to loss of zinc during ejaculation and liquefaction. Tests for sperm DNA integrity may give false negative results due to decreased access for the assay to the DNA in superstabilized chromatin.     

辅助生殖技术与胚胎DNA甲基化

表观遗传修饰,尤其DNA甲基化在控制细胞表达中发挥重要作用。高甲基化的DNA与基因沉默有关,低甲基化的DNA可以激活基因的转录,哺乳动物中70%~80%的Cp G位点被甲基化。DNA的甲基化状态并不像基因组那样稳定,在原始生殖细胞(primordial germ cells,PGCs)和早期胚胎阶段发生了一系列重组,即甲基化模式擦除、甲基化模式重新建立和甲基化模式维持。发达国家通过辅助生殖技术(assisted reproductive technology,ART)出生的婴儿已占1%~3%,并不断增长。ART方案的多样性和基因组印迹疾病的罕见性导致ART过程与印迹障碍发病率间的因果关系复杂化。除早产的发生率增加外,ART过程可导致配子及胚胎发生异常的表观遗传修饰和重组。脐疝-巨舌-巨体综合征(Beckwith-Wiedemann syndrome,BWS)、普达-威利综合征(Prader-Willi syndrome,PWS)等均为最具有代表性的基因组印迹疾病。     

线粒体DNA与早期胚胎发育的研究进展

线粒体是胞质中独特的细胞器,为细胞各种代谢提供能量。线粒体具有自己独立的遗传物质——线粒体DNA（mtDNA）,是细胞核基因组外的遗传物质。在早期胚胎发育过程中,线粒体会呈现不同的形态及分布,mtDNA的突变及拷贝数变化会对胚胎发育结局产生重要影响。最新研究表明,线粒体DNA突变增多则mtDNA拷贝数增加;囊胚期mtDNA拷贝数多,则胚胎移植成功率高;反之亦然。尽管进行了染色体形态学和遗传学检查,仍有卵母细胞不能成功受精并发育成完好的胚胎;即使胚胎完好,仍有部分胚胎移植失败。因此,从mtDNA角度探讨提高卵母细胞质量的方法对改善辅助生殖技术中移植成功率具有重要意义。     

不同职业男性不育患者精液分析

目的 探讨不同职业及环境因素对生育的影响。 方法 将862例男性不育患者按照职业不同分为农民、工人、干部及其他人员4组,又将工人分为司机、石油工人及其他3组,进行精液常规分析。 结果 4组人员的精子密度比较,差异有显著性(P<0.01);司机、石油工人及其他工人的精子密度、活动度比较,差异有显著性(P<0.01),司机、石油工人分别与其他工人精子的穿透力比较,差异有显著性(P<0.05)。 结论 长期工作在有毒有害环境中是引起男性不育的因素之一。     

卵巢储备功能评估的研究进展

卵巢储备功能是指女性卵巢内可募集的卵泡数量和质量,反映了女性的生育潜能。卵巢功能早衰(POF)是指妇女在40岁前发生卵巢功能衰退,伴有围绝经期症候群、不孕、低雌激素、高促性腺激素等,发病率较高,已成为不孕症的最主要病因之一。若能在POF早期即卵巢储备功能下降时正确评估卵巢储备功能并及时治疗,可在一定程度上减轻围绝经期症状并增加妊娠概率。另外,随着辅助生殖技术的发展,若能早期正确评估卵巢储备功能,对于临床预测生育力、指导用药方案也非常重要。近来对于卵巢储备功能的评估指标仍有争议,但多数研究者均认为单一指标预测准确率较低,多指标联合应用常为首选。本文就卵巢储备功能评估指标的研究进展进行综述,以期能够指导医护人员在工作中选择更加合适的评估卵巢储备功能的手段,为开展相关治疗和研究提供依据,并促进卵巢功能衰退患者及时就医,从而减轻临床症状,改善生活质量。     

胚胎培养液中游离DNA应用于植入前遗传学筛查中的研究进展

植入前遗传学筛查(preimplantation genetic screening,PGS)是指在体外受精-胚胎移植过程中,对具有高遗传风险患者的胚胎进行种植前活检和遗传学分析,选择遗传物质正常的胚胎植入母体宫腔,从而获得健康子代的诊断方法。目前,PGS仍主要通过胚胎活检获取细胞进行遗传学检测,而该有创过程可能会对胚胎发育及产科结局产生不良影响。近年研究发现胚胎培养液中含有胚胎来源的游离DNA片段,其含量与胚胎的碎片率呈正相关,并已在胚胎染色体及单基因疾病的检测和诊断方面得到了初步应用,开创了胚胎无创性PGS的先河。对胚胎培养液中游离DNA进行植入前遗传学筛查具有无创、取材简便、在分子水平检测胚胎的遗传物质等优点,有巨大的应用前景。但目前该技术尚处于研究阶段,存在易污染和特异性较差等问题,有待进一步完善。