HPLC同时测定柴胡中黄酮和皂苷成分含量方法的改进

目的：改进HPLC同时测定柴胡中黄酮和皂苷含量的方法。方法：采用MERCK PUROSPHERSTAR C18色谱柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）;流动相为甲醇-0.05%磷酸（梯度洗脱）;流速为1.0 mL·min-1;柱温为35 ℃;检测波长为210 nm。结果：2个黄酮成分（芦丁、槲皮素）和2个皂苷成分（柴胡皂苷a、柴胡皂苷d）分别在0.36～9.09 μg（r=0.999 7）、0.47～11.70 μg（r=0.999 5）、1.15～28.66 μg（r=0.999 8）和0.66～16.46 μg（r=0.999 8）线性关系良好;平均回收率为96.39%,97.44%,100.04%,97.89%,RSD均小于1.0%。结论：本方法简便准确、稳定可靠,可以用于同时测定柴胡中黄酮和皂苷成分的含量。     

RP-HPLC法测定保康北柴胡中柴胡皂苷a、d的含量

目的采用RP-HPLC法测定保康北柴胡中柴胡皂苷a、d的含量。方法色谱柱:BonChrom C18柱(4.6 mm×200 mm,5μm),流动相:乙腈-水(40∶60),流速:1.0 mL.min-1,检测波长:204 nm。结果柴胡皂苷a:Y=7.131 4X+2.011 8,r=0.999 7,线性范围:2.136~21.360μg;柴胡皂苷d:Y=9.032 3X+3.739 2,r=0.999 0,线性范围:2.656~26.560μg。平均回收率:柴胡皂苷a 99.3%(RSD=0.73%),柴胡皂苷d99.4%(RSD=0.82%)。结论本法简便快捷,结果准确,重复性好,GAP基地的柴胡皂苷含量较高。     

藏柴胡中三萜皂苷类成分的研究

该研究主要探究藏柴胡中的三萜皂苷类成分。采用大孔吸附树脂,MCI,硅胶,ODS,MDS柱色谱以及半制备高效液相色谱等分离纯化方法,从藏柴胡70%乙醇(含0.5%氨水)提取物中得到12个化合物。利用高分辨质谱、核磁共振等波谱手段鉴定其结构分别为柴胡皂苷b2(1),柴胡皂苷a(2),柴胡皂苷b1(3),柴胡皂苷d(4),hydroxysaikosaponin a(5),柴胡皂苷b3(6),柴胡皂苷c(7),柴胡皂苷i(8),柴胡皂苷f(9),chikusaikosidesⅡ(10),柴胡皂苷s(11),柴胡皂苷I(12)。12个化合物均属齐墩果烷型三萜皂苷类化合物,其中化合物1,3,5,8~9,11~12均为首次从该植物中分离得到。体外抗流感病毒实验表明在20μmol·L-1下,化合物2,4,6,8,11~12对流感病毒WSN33具有较明显抑制作用,其抑制率分别为91.3%,88.6%,53.4%,61.3%,77.3%,57.4%。     

HPLC-CAD法测定不同产地柴胡药材中柴胡皂苷

目的建立HPLC-CAD法测定不同产地柴胡中柴胡皂苷a、柴胡皂苷b2、柴胡皂苷d的含有量。方法柴胡甲醇提取液的分析采用Waters C18柱(4.6 mm×15 0 mm,5μm);流动相乙腈-水,梯度洗脱;体积流量1.0 m L/min;柱温20℃;CAD检测器。结果 3种柴胡皂苷分别在0.088~8.8μg(r=0.999 1)、0.044~4.4μg(r=0.999 0)、0.088~8.8μg(r=0.998 5)范围内线性关系良好,平均加样回收率99.04%~100.42%。结论该方法操作简便,结果准确,重复性好,可用于柴胡药材的质量评价。     

大孔吸附树脂-比色法测定柴胡口服液中总皂苷的含量

目的进一步完善柴胡口服液的质量标准,建立该制剂中总皂苷的含量测定方法。方法样品中的柴胡皂苷经大孔吸附树脂富集后,以柴胡皂苷a为对照品,采用对二甲氨基苯甲醛-磷酸法显色,于545 nm波长处测定总皂苷的含量。结果柴胡皂苷a在18.7～66.4μg.ml-1范围内与吸光度有良好线性关系,r=0.999 6,平均加样回收率为98.06%,RSD=1.1%。结论该方法稳定、准确、可靠,可作为柴胡口服液中皂苷类成分的质量控制方法。     

柴胡及其制剂中皂苷类成分的研究

目的利用TLC和HPLC指纹图谱技术,揭示柴胡及其制剂前后皂苷类成分的变化。方法 TLC采用高效硅胶G板,展开剂为三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水(2∶4∶2∶1),显色剂为1%对二甲氨基苯甲醛乙醇溶液-磷酸(3∶1),检视条件为365 nm;HPLC采用Waters XBridge RP18色谱柱(4.6 mm×100 mm,3.5μm),流动相为乙腈-水梯度洗脱,体积流量1.0 mL/min,检测波长208、252 nm。结果经TLC法对比柴胡经煎煮制成制剂前后,发现柴胡皂苷d可转化成柴胡皂苷b2,柴胡皂苷a与柴胡皂苷c基本没有变化;经HPLC指纹图谱对比研究,进一步证明了柴胡皂苷d向柴胡皂苷b2转化,且煎煮制成制剂后,指纹图谱中出现6个原药材中不存在的新色谱峰,大多数新色谱峰的最大吸收波长基本集中在250nm左右。结论对柴胡在煎煮制剂过程中新出现的皂苷类成分需进行深入系统的研究,将有助于揭示中药柴胡发挥功效的物质基础。     

柴胡水煎过程中皂苷成分的变化规律

目的 研究柴胡煎煮前后及其水煎液在酸碱环境中皂苷成分的变化。方法 以柴胡皂苷a、d、b2为指标,采用高效液相色谱法。色谱柱为LUBEX Ecosil C18(4.6 mm × 250 mm,5 μm),流动相为乙腈-水,梯度洗脱,流速为1.0 mL·min-1;柱温30 ℃;检测波长为204 nm(检测柴胡皂苷a、d)和254 nm(检测柴胡皂苷b2)。结果 水煎后,柴胡皂苷b2大幅增加,柴胡皂苷a、d逐渐减少;水煎过程中3种柴胡皂苷含量随煎煮时间、温度、pH值有不同程度的变化,柴胡水煎液经人工肠液、人工胃液不同时间孵育后,3种皂苷的含量呈动态变化。结论 柴胡中的皂苷类成分在柴胡煎煮前后会发生变化,并且其水煎液中的皂苷类成份在不同酸碱环境中亦呈动态变化。     

竹叶柴胡根中皂苷类成分的薄层鉴别及含量测定

目的：研究竹叶柴胡根中的皂苷类成分,为其入药提供科学依据。方法：采用薄层色谱法对皂苷类成分进行定性鉴别,并采用高效液相色谱法首次对竹叶柴胡根中皂苷类成分进行含量测定,用C₁₈（4.60 mm×150 mm,5 μm）柱,以乙腈-水为流动相梯度洗脱,检测波长210 nm,流速0.8 mL·min^-1,柱温35 ℃,进样量10 μL。结果：竹叶柴胡根中含有皂苷类成分。柴胡皂苷a和柴胡皂苷d的线性范围分别为440~8 800 ng（r=0.999 7）,488~9 760 ng（r=0.999 2）线性关系良好,平均加样回收率（n=6）分别为99.88%（RSD 0.41%）,100.23%（RSD 0.46%）。样品中柴胡皂苷a和柴胡皂苷d的总量在0.48%~1.08%。结论：竹叶柴胡全草入药具有其科学性。     

柴胡口服液工艺药渣中5种柴胡皂苷的含量测定

 目的 建立HPLC测定柴胡口服液工艺药渣中5种柴胡皂苷含量的方法。方法 Hypersil C₁₈ 色谱柱（4.6 mm×250 mm,5 μm）;以乙腈和水为流动相,梯度洗脱;流速：1.0 mL·min^-1;柱温：30 ℃;检测波长：210,254 nm。结果 柴胡皂苷a、c、h、b₁、b₂的线性范围分别为：0.23~4.6 μg（r=0.999 8）、0.11~2.2 μg（r=0.995 6）、0.15~3.0 μg（r=0.999 6）、0.35~3.5 μg（r=0.999 3）、0.71~7.1 μg（r=0.999 7）,平均回收率分别为98.10%（RSD=1.73%）、100.60%（RSD=2.25%）、98.60%（RSD=2.08%）、97.27%（RSD=0.83%）、99.70%（RSD=2.26%）。结论 该方法简便可靠,可用于柴胡口服液工艺药渣中柴胡皂苷的含量测定。     

HPLC法测定柴胡疏肝胶囊中柴胡皂苷a、d的含量

目的建立同时测定柴胡疏肝胶囊中柴胡皂苷a、d含量的方法。方法采用高效液相色谱法,色谱柱为Agilent C18柱(250 mm x 4.6mm,5μm),流动相为乙腈-水(梯度洗脱),流速为1.0mL/mi n,柱温为30℃,检测波长为210nm,进样量为10μL。结果柴胡皂苷a、d检测浓度分别在2.958~19.72μg/μL(r=0.999 8),3.09~20.6μg/μL(r=0.999 7)范围内与各自峰面积积分值呈良好的线性关系;平均加样回收率分别为99.33%、99.53%,RSD分别为0.84%、0.64%(n=6)。结论本方法简便、准确、重复性好,可用于柴胡疏肝胶囊的质量控制。     

高效液相色谱-紫外检测法同时测定北柴胡中柴胡皂苷a、b_2、c、d、f含量

目的建立高效液相色谱-紫外检测法(HPLC-UV)同时测定北柴胡中柴胡皂苷a、b2、c、d、f含量的方法。方法采用Hypersil ODS2 C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈(A)-水(B)为流动相梯度洗脱(0 min,33%A;20 min,40%A;40 min,53%A;45 min,33%A),流速1 mL/min,柱温为室温,紫外检测器检测波长210 nm。结果柴胡皂苷a、b2、c、d、f分别在0.020~10.1、0.013~6.56、0.016~8.08、0.020~10.24、0.017~8.28μg范围内线性关系良好(r分别为0.997 0、0.999 0、0.999 1、0.997 8、0.999 8),平均回收率分别为99.8%、98.9%、100.2%、98.6%、99.3%。结论该方法简便、快捷、重复性好,可用于柴胡药材的质量检测。     

HPLC法测定仙灵骨葆胶囊中川续断皂苷Ⅵ、补骨脂素及异补骨脂素

目的采用多波长HPLC法建立仙灵骨葆胶囊中川续断皂苷VI、补骨脂素及异补骨脂素的定量测定方法。方法采用月旭Ultimate?XB-C18柱,流动相采用乙腈-水系统,梯度洗脱;柱温30℃;检测波长:川续断皂苷Ⅵ为212 nm,补骨脂素、异补骨脂素为246 nm。结果 3种成分均能达到基线分离,川续断皂苷VI的进样量在144.1~5 764.0 ng(r=0.999 6)、补骨脂素在5.4~215.2 ng(r=0.998 0)、异补骨脂素在6.6~265.6 ng(r=0.998 5)与峰面积线性关系良好,平均回收率分别为98.11%、97.86%、98.22%,RSD均小于2.0%。结论建立的方法操作简便、分离良好、数据准确、灵敏度高、工作效率好,可用于仙灵骨葆胶囊的多指标成分定量测定。     

HPLC测定三峡库区紫花大叶柴胡中柴胡皂苷a含量

目的:建立紫花大叶柴胡柴胡皂苷a的含量测定方法。方法:色谱条件Phenomenex luna C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以甲醇-水(74∶26)为流动相,流速0.9 mL.min-1,柱温35℃,检测波长200 nm。结果:柴胡皂苷a进样量在0.11～4.4μg与峰面积线性关系良好(r=0.999 9)。柴胡皂苷a平均回收率为97.42%,RSD 1.42%。结论:紫花大叶柴胡中柴胡皂苷a的HPLC梯度洗脱法灵敏、准确,专属性强,重复性好。     

野生北柴胡根与根茎中化学成分比较研究

目的对比野生北柴胡根与根茎中各化学成分含量差异,为进一步明确柴胡药用部位提供科学依据。方法实地考察北京百花山与灵山的北柴胡野生资源,采挖地下部分,区分根与根茎;采用紫外-可见分光光度法测定总黄酮及总皂苷含量,高效液相色谱法测定柴胡皂苷a、c、d的含量,利用SAS 8.2软件对根与根茎中各化学成分进行配对t检验与主成分分析,并以主成分得分进行综合性评价。结果野生北柴胡根与根茎中总黄酮含量无显著性差异;根中总皂苷与柴胡皂苷a、c、d含量显著高于根茎含量,其中根茎中柴胡皂苷a+d含量未达到药典规定标准;主成分分析提取三个特征值:综合型(Z_1)、黄酮型(Z_2)、皂苷型(Z_3),累计方差贡献率达到97.90%,特征向量构建主成分线性关系为:Y=0.6638Z_1+0.1851Z_2+0.1301Z_3,根与根茎主成分得分之间存在显著性差异(P=0.0022),且根中平均值高于根茎。结论野生北柴胡根茎中皂苷类成分远低于根,根茎不能药用,只有根才可药用。     

HPLC-QqQ-MS测定珠子参中5种皂苷类成分的含量

该文采用HPLC-Qq Q-MS技术对不同产地珠子参中的5种成分建立含量测定方法。色谱条件为Zorbax XDB-C18(4.6mm×100 mm,1.8μm),流动相乙腈(含0.1%甲酸)-0.1%甲酸水梯度洗脱,流速0.5 m L·min-1,柱温30℃。质谱条件为正离子检测模式,采用电喷雾电离源(ESI),扫描方式为多反应离子监测模式(MRM),定量分析离子分别为人参皂苷Re m/z 203.2,人参皂苷Rg1m/z 202.9,人参皂苷Rf m/z 365.0,人参皂苷Rd m/z 789.1,人参皂苷Ro m/z 360.9,干燥气流速10L·min-1,干燥气温度300℃,雾化气压力45 psi(1 psi=6.895 k Pa),毛细管电压4 000 V。结果显示5种人参皂苷的含量在一定范围内线性关系良好(r0.9991)。人参皂苷Re、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rf、人参皂苷Rd、人参皂苷Ro线性范围分别在3.33~66.60μg(r=0.999 1),2.83~56.54μg(r=0.999 2),0.32~6.51μg(r=0.999 2),12.55~251.00μg(r=0.999 3),0.85~16.90μg(r=0.999 5),范围与色谱峰面积呈良好的线性关系,加样回收率(n=6)均在100.8%~104.6%,RSD均3.0%。该方法简单、准确,重复性好,可用于人参皂苷类成分的含量测定。     

高效液相色谱-蒸发光散射法测定柴胡中柴胡皂苷a及柴胡皂苷d的含量

目的采用高效液相色谱-蒸发光散射(HPLC-ELSD)法建立柴胡中柴胡皂苷a及柴胡皂苷d的含量测定方法,并测定不同产地柴胡中柴胡皂苷a,d的含量。方法采用Phnom enex C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),乙腈-水(43∶57)为流动相,流速0.8 m l/m in,A lltech ELSD2000ES蒸发光散射检测器,漂移管温度99℃,气速3.0 L/m in,外标法定量。结果柴胡皂苷a在0.296~2.96μg范围内呈良好线性关系,回归方程为Ya=1.387 6X-2.920 2(r=0.999 8),平均回收率为97.4%,RSD为2.39%(n=6);柴胡皂苷d在0.299~2.99μg范围内呈良好线性关系,回归方程Yd=1.259 5X-1.290 6(r=0.999 6),平均回收率为98.1%,RSD为2.47%(n=6)。结论该方法简便易行,结果准确,重现性好,可作为柴胡药材质量控制的方法。     

UPLC法测定冠脉康片中3种成分含量

目的:建立UPLC法同时测定冠脉康片中3种成分(三七皂苷R_1、人参皂苷Rg_1及人参皂苷Rb1)的含量。方法:采用Waters ACQUITY UPLCBEH C_(18)柱(5mm×210mm,1.7μm),以乙腈-水溶液为流动相,梯度洗脱,流速为0.6mL·min-1,检测波长为203nm,柱温为25℃。结果:人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb_1及三七皂苷R_1的线性范围分别为0.003 8~0.041 8μg(r=0.999 7)、0.062 4~0.686 4μg(r=0.999 7)、0.005 8~0.063 8μg(r=0.999 9);平均加样回收率分别为101.24%、98.12%、100.33%;RSD(n=6)分别为1.34%、1.82%、1.55%。结论:该方法稳定、快速、专属性强,可用于冠脉康片中人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1及三七皂苷R_1的含量测定及其质量控制。     

高效液相色谱-蒸发光散射检测法测定柴胡药材中柴胡皂苷a及柴胡皂苷d的含量

目的制定柴胡药材中柴胡皂苷a、d的含量测定方法。方法用高效液相色谱-蒸发光散射检测法(HPLC-ELSD),A lltim a C18色谱柱,流动相甲醇-水(80∶20),速度0.8 m l.m in-1;蒸发光散射检测器参数:漂移管温度40℃,气压3.5bar。结果柴胡皂苷a和柴胡皂苷d分别在1.908~19.08μg(r=0.999 6)和1.804~18.04μg(r=0.999 2)范围内线性关系良好,平均回收率分别为98.35%(RSD=1.26%)和97.64%(RSD=1.58%)。结论该方法简便、灵敏、可靠、准确、重现性好,可作为柴胡药材的质量控制方法。     

HPLC法测定不同产地北柴胡中柴胡皂苷a、c、d的含量

目的:不同产地北柴胡中柴胡皂苷a、c、d的含量测定方法。方法:采用HPLC法,LUNA C1(82)(250 mm×4.6 mm,5μm)为色谱柱,乙腈-水为流动相;检测波长为210 nm,流速为1.0 mL/min。结果:柴胡皂苷a线性回归方程Y=2.0266×105+1.1444×106X,r=0.9997,柴胡皂苷a含量在1.01-21.5μg之间为良好线性关系。柴胡皂苷c线性回归方程Y=2.0266×105+1.1444×106X,r=0.9994,柴胡皂苷c含量在1.04-21.7μg之间为良好线性关系。柴胡皂苷d线性回归方程Y=3.2025×105+1.2414×106X,r=0.9994,柴胡皂苷d含量在1.03-21.3μg之间为良好线性关系。结论:该法可以用于柴胡中柴胡皂苷a、c、d含量测定,可以为柴胡的质量控制提供参考。     

HPLC法同时测定妇康消肿丸中4种成分

目的建立HPLC法同时测定妇康消肿丸中4种成分的含有量。方法该药物甲醇提取液的分析采用Alltimate C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相乙腈-0.02%磷酸,梯度洗脱;体积流量1.0 m L/min;柱温35℃;检测波长283 nm和204 nm。结果橙皮苷、柚皮苷、柴胡皂苷a、柴胡皂苷d分别在1.327~13.27 mg(r=0.999 2)、0.864~8.64 mg(r=0.999 4)、0.221~2.21 mg(r=0.999 9)、0.193~1.93 mg(r=0.999 6)范围内线性关系良好,平均加样回收率分别为99.4%(RSD=1.42%)、99.6%(RSD=1.13%)、98.5%(RSD=1.24%)、99.6%(RSD1.62%)。结论该方法简单准确,重复性良好,可用于妇康消肿丸的质量控制。