睡眠剥夺诱导的大鼠血瘀证对血小板活化影响的研究

运用睡眠剥夺法诱导大鼠血瘀证模型,检测中医证候宏观指标体质量、舌象及血液流变学确定中医血瘀证候,运用酶联免疫法检测血小板α颗粒、致密颗粒释放及活化相关指标,为证候研究的血小板功能评价及相关药物影响提供实验基础。结果显示,模型组大鼠体质量较正常组明显降低(P0.01);舌象呈现紫暗的血瘀证特点,色彩分析舌面R,G,B较正常组明显降低(P0.01);血液流变学高切、中切、低切全血黏度均高于正常组(P0.01),血浆黏度未有明显变化;血小板α颗粒(GMP-140,β-TG,PF4)及致密颗粒(ADP,5-HT)释放明显(P0.01)。血浆TXB_2和6-keto-PGF1α都较正常组明显升高(P0.01),且两者比值也显著高于正常组(P0.01)。PAF模型组较正常组明显上升(P0.01)。结果表明睡眠剥夺诱导的大鼠血瘀证血小板功能存在明显改变,血小板活化增强,颗粒释放增多,并可能存在炎症及内皮细胞功能异常。     

睡眠剥夺复合冠状动脉左前降支结扎建立心力衰竭气虚血瘀证大鼠模型的评价

目的对采用睡眠剥夺复合冠状动脉左前降支结扎的方法建立心力衰竭大鼠气虚血瘀证模型进行评价。方法 70只SD大鼠随机分为空白对照组、模型组、睡眠剥夺组、心肌梗死组以及益气活血颗粒高、中、低剂量组,每组10只。睡眠剥夺组给予无规律性睡眠剥夺8周,模型组以及益气活血颗粒高、中、低剂量组大鼠给予睡眠剥夺3周后进行冠状动脉左前降支结扎,手术后第2天继续睡眠剥夺5周建立心力衰竭气虚血瘀证模型,心肌梗死组仅给予冠状动脉左前降支结扎,空白对照组正常饲养。手术后第2天益气活血颗粒高、中、低剂量组分别给予益气活血颗粒4.0、2.0、1.0g/(kg·d)灌胃,其余各组给予生理盐水1ml/100g灌胃,持续5周。比较各组大鼠体重、抓力、脉搏幅度、自主活动、舌象、心功能、心室重构指标、血液流变学指标以及腹主动脉血流速度。结果与空白对照组比较,模型组大鼠体重、抓力、脉搏幅度及自主活动总路程和平均速度明显下降,心室重构指标升高,心功能、室壁厚度指标和腹主动脉血流速度则明显下降,不同切变率下的血液黏度和血浆黏度明显升高,舌面R(红)、G(绿)、B(蓝)相对值均有明显降低(P0.05或P0.01)。与模型组比较,益气活血颗粒高剂量组可以增加大鼠体重、抓力、脉搏幅度、室壁厚度,降低心室重构、血液流变学指标,改善大鼠心功能和自主行为活动,提高腹主动脉血流速度,大鼠舌面R、G相对值明显升高(P0.05或P0.01)。结论采用睡眠剥夺复合冠状动脉左前降支结扎的方法可以促使心力衰竭大鼠表现出明显的气虚血瘀证外在客观表现,高剂量的益气活血颗粒的有效干预反证此模型的科学性和可靠性。     

气虚血瘀证模型大鼠血清蛋白质组学初步研究

目的:进行正常大鼠与气虚血瘀证大鼠血清的蛋白质组学初步研究,寻找气虚血瘀证的差异表达蛋白。方法:复合因素制作大鼠气虚血瘀证动物模型,利用二维凝胶电泳,软件分析及质谱鉴定等技术观察气虚血瘀证大鼠血清的蛋白质表达谱改变情况。结果:初步鉴定出气虚血瘀证大鼠血清与正常组相比升高的蛋白质是结合珠蛋白(haptoglobin)、补体C3(complement component C3)、ZN--α2-糖蛋白(ZN-alpha-2-glycoprotein)、免疫球蛋白λ轻链(immunoglobulin lambda light chain),降低的蛋白质是CD5抗原样蛋白(CD5 antigen-like)。结论:初步发现的差异蛋白可能与气虚血瘀证的形成、发生、发展有关。     

睡眠剥夺对大鼠大脑功能的影响

目的探讨睡眠剥夺(SD)对大鼠大脑功能的影响。方法采用小平台水环境法建立SD模型,以正常对照组和大平台对照组为对照,以学习记忆能力和脑电活动为指标,观察SD对大鼠脑功能的影响。结果①大平台对照组学习记忆能力提高(P<0.05);SD组学习记忆能力降低(P<0.05和0.01),且随SD时间的延长,学习记忆能力下降越明显。②大平台对照组与正常对照组的脑电活动无差别(P>0.05);SD组与大平台组有差异(P<0.05和0.01)。结论SD的确对大脑功能有明显的抑制作用,而且SD时间越长抑制越明显。     

气虚血瘀证大鼠模型的建立与评价

目的评价睡眠剥夺方法建立气虚血瘀证大鼠模型的可行性并构建系统性评价体系。方法 24只SD大鼠随机分为正常对照组与模型组,每组12只。模型组采用每天随机14～16 h睡眠剥夺方法进行干预,连续6周;正常对照组大鼠不进行干预。比较两组大鼠的力竭游泳时间及体重系数,采用超声仪检测左心室射血分数(LVEF)、有效心输出量(CO)、心脏指数(CI)与每搏输出量(SV),采用旷场实验观察大鼠运动总路程、平均速度以及进入中央区域次数,并检测凝血功能、舌象的色彩分析及脉搏幅度,检测血浆/血清中促肾上腺皮质激素(ACTH)、烟碱型胆碱受体α1 (chrnα1)、三磷酸腺苷(ATP)与二磷酸腺苷(ADP)含量以及心脏、血管病理结果。结果与正常对照组比较,模型组大鼠运动总路程、平均速度下降,进入中央区域次数增加,力竭游泳时间缩短,体重明显下降,血浆ACTH水平降低,血清chrnα1水平升高,心功能LVEF、CO、SV、CI均下降,血浆活化部分凝血酶时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)降低,纤维蛋白原(FIB)增加,血清ATP含量降低,而ADP含量增加(P 0. 05或P 0. 01)。模型组大鼠舌象表现为红、红/绿、红/蓝、洋红色至绿色范围与黄色至蓝色范围值显著降低,脉搏幅度降低(P 0. 05或P 0. 01)。两组大鼠的心脏与血管组织病理未发生改变。结论睡眠剥夺方法可以成功建立气虚血瘀证大鼠模型,以主症、兼症、舌象、脉象为系统的评价体系对证候模型建立具有指导意义。     

心肌缺血模型大鼠血瘀证相关信息的评价

目的探究心肌缺血模型大鼠的证候属性,对模型大鼠血瘀证相关信息进行客观评价。方法采用左冠状动脉结扎法复制大鼠心肌缺血模型,术后多个时间点,动态观察大鼠宏观体征,采集大鼠耳廓、足底及舌面图像,进行色度分析,同时在各时间点检测大鼠血液流变学指标;采用LARS法分析局部图像色度与血液流变学指标之间的相关性。结果模型组大鼠术后7～28天,局部图像色度和血液流变学指标与假手术组相比存在显著差异,术后7天时模型组大鼠足底R值(176.29±4.96)比假手术组(182.04±6.35)显著降低(P0.05);术后14天时,模型组大鼠舌R值和G值显著降低(P0.05);术后21天模型组大鼠耳廓G值(130.38±7.52)比假手术组(138.02±9.32)显著降低(P0.05);术后28天,模型组大鼠舌B值(93.70±4.79)较假手术组(85.80±6.60)显著升高(P0.01);模型组大鼠足底R、G、B值于术后14、21、28天均显著降低(P0.05,P0.01)。血液流变学指标中,模型组大鼠红细胞压积于术后14天和术后28天时与假手术组同时间点检测结果相比显著升高(均P0.05),术后21天时模型组(45.38±1.96)比假手术组(41.50±2.12)显著升高(P0.01);血小板聚集率,术后7天时模型组(49.35±6.74)比假手术组(37.83±9.94)显著升高(P0.01),术后14天时模型组(58.19±7.57)比假手术组(48.00±10.44)亦显著升高(P0.05);不同切变率下全血表观黏度和全血还原黏度也在模型组术后7～28天范围内存在不同程度改变。LARS回归显示局部图像色度与红细胞压积和血小板聚集率存在相关性。结论左冠状动脉结扎法造成的心肌缺血大鼠在术后7～28天内同时具备血瘀证和气虚证相关指征,诊断为气虚血瘀证。模型组大鼠局部图像色度的改变可能与其血中红细胞压积和血小板聚集率有关。     

护肝片对睡眠剥夺大鼠肝损伤的保护作用

目的:探讨护肝片对睡眠剥夺大鼠肝损伤的保护作用。方法:取SD大鼠72只,随机分成6组,每组12只,分别为:正常对照组、模型组、一贯煎阳性对照组及护肝片低、中、高剂量组。灌胃给药,1次/d,连续16 d,于给药第17天采用改良多平台睡眠剥夺法造模,连续造模9 d,每日剥夺20 h。于造模第9天给药30 min后,采血分离血清检测IL-6、IL-12、AST、ALT水平,称量肝脏湿质量,计算肝脏系数,取肝组织匀浆检测MDA、SOD、GSH水平,取肝切片,HE染色,光镜观察。结果:与模型组比较,护肝片可显著降低睡眠剥夺模型大鼠血清IL-6、IL-12、ALT及肝组织MDA水平,提高肝组织GSH、SOD水平(P0.05);肝组织病理学检查结果显示护肝片对睡眠剥夺大鼠的肝损伤有一定程度的保护作用。结论:护肝片具有显著降低肝损伤的作用,其作用机理可能与提高机体免疫功能和抗氧化能力有关。     

建立一种脑梗死血瘀证大鼠模型的实验研究

目的 :建立一种因血管内皮细胞损伤而诱导的大鼠局灶性脑梗死血瘀证模型。方法 :取SD大鼠 ,分离左侧颈总动脉、颈外动脉和颈内动脉 ,结扎左颈外动脉远心端 ,夹闭左翼腭动脉和颈总动脉 ,经颈外动脉逆行插管并缓慢注入月桂酸钠至颈内动脉系统 ,造成大脑中动脉血管内皮细胞受损。结果 :从模型动物的行为表现、梗死灶形态学和病理学及血液流变学等方面考察 ,大鼠可产生一定程度的脑梗死和血瘀证表现 ,造模成功率为 90 .9%。结论 :该模型的稳定性和重复性较好 ,能在大脑中动脉的供血区产生恒定的梗死灶 ,适合进行中医药防治脑梗死血瘀证研究。     

睡眠剥夺诱导小鼠气虚证模型的方法研究

目的：通过比较睡眠剥夺、力竭游泳、睡眠剥夺结合力竭游泳3种造模方法,研究小鼠气虚模型的建立与评价方法。方法：将小鼠分为正常对照组、睡眠剥夺组、力竭游泳组、睡眠剥夺+力竭游泳（简称“复合组”）,每组12只,睡眠剥夺组采用多平台水环境法进行睡眠剥夺,每天10h;力竭游泳组采用负重10%进行力竭游泳,每天一次;复合组两种方法联合使用,连续28天。试验结束后,观察小鼠行为与体重,抓力仪测量小鼠抓力,利用小动物无创监护仪检测脉搏信号（心率、呼吸频率、呼吸幅度、脉搏幅度）,采用数码照相机采集舌面图像,利用细胞流式仪检测脾脏T细胞亚群（CD3⁺、CD4⁺、CD8⁺）与B细胞（CD19⁺）。结果：与正常对照组比较,3组模型小鼠活动能力均降低,呈现疲劳特性,体重、抓力显著降低（P<0.05-0.01）;小鼠舌面均见不同程度的变白,仅复合组具有显著性差异（P<0.05）;睡眠剥夺组与复合组小鼠心率、呼吸频率、脉搏幅度与呼吸幅度均显著降低（P<0.05-0.01）;3组的CD3⁺、CD4⁺、CD8⁺T细胞亚群显著增加（P<0.01）,睡眠剥夺组的CD19⁺B细胞显著减少（P<0.01）。结论：三种方法均可以成功制备气虚小鼠模型,以睡眠剥夺造模最优。     

建立一种脑梗死血瘀证大鼠模型的实验研究

目的：建立一种因血管内皮细胞损伤而诱导的大鼠局灶性脑梗死血瘀证模型。方法：取SD大鼠，分离左侧颈总动脉、颈外动脉和颈内动脉，结扎左颈外动脉远心端，夹闭左翼腭动脉和颈总动脉，经颈外动脉逆行插管并缓慢注入月桂酸钠至颈内动脉系统，造成大脑中动脉血管内皮细胞受损。结果：从模型动物的行为表现、梗死灶形态学和病理学及血液流变学等方面考察，大鼠可产生一定程度的脑梗死和血瘀证表现，造模成功率为90．9％。结论：该模型的稳定性和重复性较好，能在大脑中动脉的供血区产生恒定的梗死灶，适合进行中医药防治脑梗死血瘀证研究。     

3种活血化瘀药对实验性血瘀证模型大鼠作用的比较研究

目的：通过对活血化瘀药活血化瘀作用的分类对比研究,探讨活血化瘀药功效级差的现代科学本质。方法：冰水浸泡加药物法建立大鼠血瘀证模型,以肠系膜微循环、体外血栓形成及血小板聚集为指标,研究3种不同功效的活血化瘀药———川芎、丹参、三棱活血化瘀作用的差异。结果：川芎、丹参、三棱均可以增加血瘀证大鼠肠系膜微循环的毛细血管数、毛细血管交叉点的个数、微静脉的血管直径、血流速度（P〈0.05）;减少血栓湿重、干重、血栓长度、血栓指数及聚集的血小板数（P〈0.05）。其中三棱在改善血流速度,血栓干重方面作用最强（P〈0.05）,三棱与丹参在改善血小板聚集性方面作用优于川芎（P〈0.05）。结论：活血化瘀药的功效级差在大鼠血瘀证模型的改善方面得以印证,在改善微循环、抑制血栓形成及血小板聚集方面,破血逐瘀药作用最强;活血散瘀药作用次之,在抑制血栓形成,改善血小板聚集性方面,作用优于和血行血药。     

丹红注射液对睡眠剥夺大鼠学习记忆的影响

目的 探讨丹红注射液(Danhong injection)对睡眠剥夺(sleep deprivation,SD)大鼠学习记忆及海马胶质纤维酸性蛋白(Glial Fibriliary Acidic Protein,GFAP)表达的影响.方法 用小平台水环境法建立SD模型.选用Wistar大鼠,根据SD时间的不同(0～5 d),随机分为6组,每组又分为实验组和对照组,实验组给予丹红注射液,相应时间点对各组大鼠行Morris水迷宫测试,免疫组化法检测海马组织中GFAP的含量.结果 ①Morris水迷宫实验: 2,3,5 d组潜伏期,实验组低于对照组(P<0.05),4 d组潜伏期,实验组低于对照组(P<0.01);2,5 d组游泳路程,实验组低于对照组(P<0.05),3,4 d组游泳路程,实验组低于对照组(P<0.01);SD各时间点组穿越平台次数,实验组和对照组无统计学差异(P>0.05).②海马GFAP含量:2,3 d组海马GFAP含量,实验组高于对照组(P<0.05),4,5 d组海马GFAP含量,实验组高于对照组(P<0.01).结论 丹红注射液对SD后大鼠学习记忆的损害有保护作用,这种作用可能与海马中星形胶质细胞(astrocyte,AS)功能活化有关.     

三种血瘀证动物模型的比较及评价

1材料与方法1·1动物SD大鼠,由维通利华实验动物研究所提供;动物于实验前1周运到实验室,在安静环境下分笼饲养,温度控制在23℃±1℃的范围内,相对湿度60%,光线自动控制,明(07:00~19:00)暗(19:00~07:00)交替,给予充足清洁饮水、摄食。1·2实验药物与仪器血小板聚集指数检测仪,血液黏度测定仪LG-R-80,红细胞变形聚集仪LG-B-190,富士数码相机(Fine Pix S7000,600万像素),高速低温离心机(Sigma公司产品)等。1·3动物分组SD大鼠随机分为4组:正常组、冰水游泳组、肾上腺素组和右旋糖苷组。1·4模型制备1·4·1冰水游泳组冰水游泳组大鼠每天…     

血瘀证动物模型的研究——外伤致血瘀的大鼠模型

古代医家认为"大凡打扑损坠堕, 或刀斧所伤,皮未破而内损者,必有瘀血停积"(《古今医鉴》)。本实验采用重物打击肢体的方式,研制了定量化的天鼠外伤性血瘀模型。采用特制的"击伤器",调节重物的高度,即可在0～0.55kgm(公斤米)范围内选择打击的势能。以红细胞比积、血液粘度、血浆粘度、复钙凝血时间(tr)、凝血粘度上升率(dη/dt)、血小板聚集性及血浆热沉蛋白含量等指标评价外伤的程度。结果表明,外伤后首先出现短时相的高凝倾向     

试用睡眠剥夺方法建立心虚证的动物模型

本文报道了用睡眠剥夺的小站台法,模拟中医理论的"惊"和"劳"等病因,在20只大鼠身上建立心虚证模型的实验。结果表明,它能够使实验动物产生某些心虚证的体征。并可通过控制睡眠剥夺的时间,选择性的造成类似心阴虚、心气虚或气阴两虚偏气虚证的动物模型。     

艾灸对寒凝血瘀证大鼠活血化瘀作用的实验研究

目的研究艾灸疗法活血化瘀作用及其相关机理。方法将大鼠置于实验室风寒环境中,造成“寒凝血瘀”大鼠模型。观察艾灸“肾俞”穴对其血瘀症状、血液流变、氧自由基代谢和中枢神经递质的影响。结果艾灸治疗能改善造模大鼠的一般血瘀症状,降低血浆和全血粘度、RE、Ht,提高血清和脑组织中SOD,降低MDA,减少NE、DA、No的含量。上述指标与模型组比较差异显著(P＜0．05～0．01)。表明艾灸能纠正血瘀大鼠血液流变的异常和紊乱,增强对氧自由基的清除,调整中枢神经递质水平。结论灸疗有显著的活血化瘀作用,其机理与艾灸改善机体循环状态及自由基代谢,调整神经内分泌,稳定内环境等多种因素有关。     

蜜蜂蜂毒对大鼠急性血瘀证的影响

目的:观察蜜蜂蜂毒(Bee venom,BV)对大鼠急性血瘀证的影响。方法:以皮下大剂量注射盐酸肾上腺素(Adrenalin hydrochloride,A)后再施以冰水游泳复制急性血瘀模型。通过测定血液流变学、凝血四项、纤溶活性等各项指标评价BV对大鼠急性血瘀证的影响。结果:与NS模型组比较,BV中剂量组不同切变率的全血粘度均显著降低(P0.05或P0.01);BV高、中、低剂量组血浆粘度、红细胞聚集指数、卡松粘度均有降低趋势;BV高、低剂量组PT、APTT有延长趋势,中、低剂量组TT有延长趋势;BV中剂量组可显著降低FIB含量(P0.01)。结论:BV具有改善大鼠急性血瘀证的作用,其机制与降低血液粘度、FIB含量有关。     

温病气分证血瘀病理变化的初步研究

为探讨温病气分证是否存在血瘀病变,选用大肠杆菌内毒素制作家兔气分证动物模型并与正常组相比较,实验组家兔出现高热、渴饮、舌质红、眼结膜充血,BPC明显减少(P<0.01),血小板聚集率明显升高(P<0.01),PT及KPTT显著缩短(P<0.01),TXB_2明显升高(P相似文献   

冠心病血瘀证患者免疫功能的初步研究

冠心病血瘀证患者免疫功能的初步研究廖奕华导师艾陵张道亮湖北中医学院九五级研究生（武汉４３００６１）胡萍香湖北中医学院附属医院（武汉４３００６１）血瘀是冠心病的基本病机之一，为探讨冠心病血瘀证本质，本文观察了３１例冠心病血瘀证患者红细胞免疫、Ｔ淋巴细胞...