京大戟毒性部位及其醋制前后成分变化研究

为比较京大戟不同极性部位的肠道毒性作用,分析毒性部位醋制前后成分变化规律,该实验以95%乙醇提取京大戟,石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯依次萃取得不同极性部位。不同极性部位小鼠灌胃3 h后,测定粪便含水量及十二指肠、空肠、回肠、结肠含水量,考察不同极性部位对小鼠腹泻及肠道水肿的影响;采用MTT法比较不同极性部位对大鼠小肠隐窝上皮细胞IEC-6细胞的增殖抑制作用,并采用RT-PCR法测定结肠中水通道蛋白AQP1,AQP3的mRNA表达水平,考察不同极性部位的毒性。研究结果显示,与空白组相比,京大戟醇部位、石油醚部位、乙酸乙酯部位均可导致小鼠粪便含水量及十二指肠及结肠的含水量增高,石油醚部位作用最强。京大戟95%醇提物、石油醚部位对IEC-6细胞具有显著的增殖抑制作用,IC₅₀分别为95.03,33.75 mg·L^-1;京大戟95%醇提物、石油醚部位、乙酸乙酯部位均能导致结肠中AQP1的mRNA表达降低、AQP3的mRNA表达增高。表明京大戟可导致小鼠腹泻及肠道水肿,其作用与导致水通道蛋白AQP1,AQP3的mRNA表达水平变化相关;并可抑制IEC-6细胞增殖;京大戟的主要毒性部位为石油醚部位,通过成分分离及炮制前后成分变化比较,发现毒性的降低可能与石油醚部位的二萜类成分含量下降相关。     

商陆正丁醇部位醋制前后肠道毒性变化研究

为探索商陆毒性部位炮制前后对肠道毒性变化的影响,提取分离获得了商陆正丁醇毒性部位,在整体动物模型水平,灌胃给药后观察小鼠肠道肿胀程度,测定小鼠肠道不同部位的含水量及粪便的含水量,考察商陆正丁醇部位炮制前后对腹泻及肠道肿胀的影响;在细胞水平,采用MTT法,测定肠细胞HT-29,IEC-6的IC50,比较醋制前后商陆正丁醇部位的毒性变化。结果显示商陆正丁醇部位能够导致肠道肿胀,表现为引起十二指肠、空肠的水肿,且可导致粪便含水量增加引起腹泻,可抑制肠细胞HT-29,IEC-6增殖,表明其具有肠细胞毒性,对HT-29细胞的IC5014.59 mg·L-1,IEC-6 IC5043.77 mg·L-1;经醋制,小鼠肠道肿胀程度显著减弱,肠道和粪便的含水量明显降低,对HT-29和IEC-6的抑制作用减轻,对HT-29细胞的IC5058.51 mg·L-1,IEC-6 IC5084.37 mg·L-1。由此可知,醋制法具有降低商陆正丁醇部位的毒性作用。     

千金子制霜前后提取物对正常及癌性腹水模型小鼠泻下逐水效应与毒性研究

目的：筛选千金子泻下逐水药效部位,探究其制霜前后泻下逐水效应及结肠、肾脏毒性的变化。方法：采用H22癌性腹水模型小鼠,以腹水量、粪便含水量、尿量等生物效应指标筛选千金子药效部位;采用H22癌性腹水模型小鼠,灌胃千金子生品、霜品石油醚部位,结合生物效应指标、脏器指数、肾脏功能指标、氧化应激指标、炎症因子含量及水通道蛋白表达考察千金子的泻下逐水效应;采用正常小鼠,以脏器指数、肾脏功能指标、氧化应激指标、炎症因子含量考察千金子制霜前后的毒性差异。结果：千金子制霜前后石油醚部位能够提高癌性腹水模型小鼠粪便含水量、尿量,降低小鼠腹水量（P<0.05,P<0.01）,非石油醚部位无显著作用。药效实验结果显示,与模型组比较,各给药组小鼠组织损伤显著减轻,在灌胃石油醚部位后小鼠血清尿素氮（BUN）、肌酐（Cr）含量降低,总超氧化物歧化酶（SOD）含量升高,丙二醛（MDA）含量下降,结肠、肾脏组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β (IL-1β)的含量显著降低,且能抑制结肠、肾脏组织中水通道蛋白1 (AQP1)和水通道蛋白3 (AQP3)蛋白表达水平。毒性结果显示,与对照组比...     

大戟属根类有毒中药醋制前后的毒性比较研究

目的:研究京大戟、甘遂、狼毒炮制前后的毒性变化并比较三者的毒性强弱。方法:采用肠推进运动模型及巨噬细胞炎症模型,评价3种大戟属根类有毒中药炮制前后的毒性。结果:京大戟、甘遂、狼毒生品及醋品均可明显促进小鼠小肠推进运动及巨噬细胞释放NO的能力,强弱顺序为甘遂>京大戟>狼毒,醋制后三者均可明显缓和这一作用。结论:京大戟、甘遂、狼毒可诱导炎症反应的发生并促进肠推进运动,产生强烈的泻下作用,醋制后致炎及肠推进作用显著减弱,表明醋制可缓和京大戟、甘遂、狼毒的泻下作用。     

醋制法对瑞香狼毒毒效影响的研究

目的:为探讨有毒中药瑞香狼毒炮制解(减)毒理论的科学性,并了解瑞香狼毒醋制前后对药效的影响。方法:PHLC-MS技术比较瑞香狼毒醋制前后成分差异;建立H22皮下移植瘤模型,比较醋制前后对荷瘤小鼠与正常小鼠的致死作用及体重变化;荷瘤小鼠连续灌胃给药后比较醋制前后对肿瘤及免疫器官的影响;荧光报告基因法研究瑞香狼毒提取物对肿瘤细胞作用的靶标基因TGF-β,AP1,NF-κB的影响。结果:瑞香狼毒提取物Zp1102与醋制后的提取物Zp1103的LD50分别为9.89,16.85 g·kg-1,Zp1103半数致死剂量高于Zp1102。药效试验表明,药物为2 g·kg-1时,Zp1102对小鼠皮下移植瘤H22有显著抑制作用,抑瘤率为36.24%(P<0.01),Zp1103的抑瘤率略低,为34.40%(P<0.05);药物为1 g·kg-1时,Zp1102抑瘤率为34.52%(P<0.05),而Zp1103抑瘤率明显降低,为21.55%。Zp1102,Zp1103对报告基因AP1基本无影响;Zp1102对HepG2细胞经刺激内源性NF-κB浓度升高后的报告基因有上调作用,且能下调TGF-β的表达,但Zp1103仅能上调NF-κB的表达,对TGF-β无影响。结论:瑞香狼毒醋制后的提取物较未经炮制而提取工艺相同的提取物毒性降低,同时体内药效学实验结果表明其抗肿瘤活性也略有降低,其机制可能与药物对转化生长因子TGF-β的调节有一定关联。     

巴豆不同炮制品肠道毒性差异及炮制对巴豆脂肪油、总蛋白的影响

为考察不同巴豆制霜过程对巴豆脂肪油、总蛋白及致肠道毒性的影响,将巴豆生品进行热压去油,冷压去油和淀粉稀释法炮制,得3种巴豆制霜品。小鼠灌胃给药,采用ELISA法测定小鼠血清中二胺氧化酶(DAO)和D-乳酸含量,考察肠道通透性的变化;采用Western blot法测定不同肠段中紧密连接蛋白(occludin,claudin-1)表达变化,考察巴豆生品及其制霜品对肠道损伤的毒性差异。分别采用GC-MS和SDS-PAGE分析巴豆制霜前后脂肪油和总蛋白的变化。结果显示,巴豆生品能够显著增加小鼠肠道通透性和降低十二指肠、空肠紧密连接蛋白表达。制霜后小鼠肠道通透性和紧密连接蛋白表达均趋向正常,毒性降低。不同巴豆霜肠道毒性大小为:冷压巴豆霜稀释巴豆霜≈热压巴豆霜。3种巴豆霜脂肪油成分组成一致,但总蛋白含量和组成具有明显差异。含量高低:冷压巴豆霜热压巴豆霜稀释巴豆霜,其中冷压和稀释巴豆霜总蛋白条带相对分子质量分布一致,热压巴豆霜总蛋白组成发生显著变化,条带减少,变淡。表明在巴豆制霜中,稀释和加热过程均能够降低蛋白含量,且加热导致部分蛋白变性失活。稀释和加热均能降低巴豆霜毒性,但加热过程减毒作用更显著,表明加热是巴豆制霜过程中的关键步骤。     

醋制南五味子抗α-淀粉酶活性部位筛选

目的:醋制南五味子抗α-淀粉酶活性部位筛选。方法:以α-淀粉酶抑制率为指标,考察醋制前后氯仿、乙酸乙酯、正丁醇、水提部位α-淀粉酶抑制率的差异,筛选抗α-淀粉酶活性部位。结果:五味子炮制前和炮制后的乙酸乙酯提取部位对α-淀粉酶抑制作用最好,抑制率分别是30.02%±0.104,43.13%±0.103;五味子炮制后各化学部位对α-淀粉酶抑制率大于炮制前。结论:醋制南五味子抑制α-淀粉酶的活性强于其原药材,其活性部位主要为氯仿、乙酸乙酯、正丁醇化学部位。     

炮制对附子减毒变化及氯仿致颤作用的比较研究

目的：探讨附子炮制前后生物碱变化情况与毒性变化及对小鼠氯仿致颤作用的抑制作用。方法：通过对附子生、炮品及提取生物碱急性毒性实验及相应氯仿致颤实验探讨炮制过程中附子化学成分变化的同时对其毒性和相关药效的影响作用。结果：炮制在导致化学变化的同时引起毒性下降,同时对氯仿致颤的抑制作用也相应减低。结论：附子在炮制过程中发生了化学成分的变化导致毒性下降,并且对氯仿致颤的抑制作用也相应下降。     

狼毒醋炙前后毒性比较研究

目的:比较狼毒醋炙前后对动物胃黏膜的刺激性变化情况。方法:比较狼毒醋炙前后单次大剂量给药后小鼠脏器病理切片,观察其对小鼠消化系统脏器的重量与PGE2含量的影响。结果:病理切片显示狼毒对小鼠胃黏膜有明显刺激性。狼毒经炮制后对小鼠胃体重量、PGE2含量的影响较生狼毒明显减轻。结论:经过醋炙后狼毒对动物胃黏膜的刺激性比生品时显著减弱。     

松果菊苷对便秘小鼠的通便作用及其机制

目的 探讨松果菊苷对便秘小鼠的通便作用及其机制。方法 KM小鼠分为对照组、模型组和松果菊苷低、高剂量组(30、70 mg/kg),每组8只,除对照组外,其余各组小鼠用洛哌丁胺灌胃法构建便秘模型。记录小鼠排便次数、粪便粒数和粪便含水量,钡餐推进法评估小肠转运率,HE染色观察结肠组织形态,试剂盒检测结肠组织SOD、GSH-Px活性及IL-1β、TNF-α水平,免疫荧光法检测结肠组织AQP3蛋白表达,Western blot法检测结肠组织SR4、SP、VIP、AQP3、CFTR、PKA蛋白表达。结果 与模型组比较,松果菊苷各剂量组小鼠排便频率、粪便颗粒数、粪便含水量、肠道转运率,以及结肠组织SOD、GSH-Px活性和SR4、SP、AQP3、CFTR、PKA蛋白表达升高(P<0.05,P<0.01),结肠组织病理损伤得到改善,IL-1β、TNF-α水平和VIP蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01)。结论 松果菊苷对便秘小鼠具有通便作用,可能与减轻肠道氧化应激及炎症反应、改善肠神经递质异常和增加结肠组织AQP3表达有关。     

狼毒(月腺大戟)醋制前后化学成分变化规律的研究

目的:研究狼毒(月腺大戟)醋制前后化学成分的变化规律。方法:采用比色法,Kedde显色剂显色,测定醋制前后狼毒饮片中毒性成分总内酯含量的变化;采用高效液相色谱法,Kromasil-ODS柱(4.6 mm×250 mm,5μm),检测波长290nm,柱温25℃,乙腈-水梯度洗脱,流速1 mL.min-1,同时测定醋制前后狼毒饮片中有效成分狼毒乙素、狼毒丙素的含量变化。结果:狼毒饮片醋制后其毒性成分总内酯含量降低,由0.60降至0.45 mg.g-1。有效成分狼毒乙素、狼毒丙素含量均有不同程度提高;建立的特征图谱信息丰富,可以反映醋制前后化学成分的整体变化规律。结论:狼毒饮片醋制后化学成分发生明显变化,其醋制后降低毒性,增强疗效可能与这些成分变化有关。     

附子-肉桂调控结肠VIP/cAMP/PKA/AQP通路改善大鼠阳虚型慢传输型便秘

目的：通过血管活性肠肽（VIP）/环状磷酸腺苷（cAMP）/蛋白激酶A(PKA)/水通道蛋白（AQP）通路探究附子-肉桂对阳虚型慢传输便秘（STC）大鼠肠道功能的影响及作用机制。方法：将SD大鼠随机分为6组（n=6）,包括正常组、模型组、附子-肉桂高剂量组、附子-肉桂中剂量组、附子-肉桂低剂量组及普芦卡必利组。除正常组以外,其余组均采用盐酸洛哌丁胺联合冰水灌胃造模法,建立阳虚型STC大鼠模型。记录各组大鼠首次黑便排出时间,粪便数量,粪便含水量,肠道推进率及粪便性状评分。通过苏木素-伊红（HE）染色观察结肠组织病理形态,阿利新蓝-过碘酸-雪夫（AB-PAS）染色观察结肠黏液分泌情况。酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清中VIP的水平。实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测结肠组织中AQPs mRNA表达水平,免疫组化检测结肠和肾组织中AQPs表达,蛋白免疫印迹法（Western blot）检测结肠组织中cAMP、PKA及VIP的蛋白表达水平。结果：与空白组大鼠相比,模型组大鼠首粒黑便排出时间显著加长,粪便粒数及含水量显著减少,粪便性状评分及肠道推进率显著降低（P...     

益肠通秘汤对慢传输型便秘大鼠肠道传导功能的影响

目的：探究益肠通秘汤对慢传输型便秘大鼠肠道传导功能的影响。方法：采用盐酸洛哌丁胺建立慢传输型便秘大鼠模型，将30只成功建模的大鼠随机分成模型组、莫沙必利组、益肠通秘汤组，并另设10只正常大鼠为空白对照组，给予相应干预。记录大鼠粪便含水量及首粒黑便排出时间，运用碳墨推进法检测肠道传输功能，使用RT-PCR法检测结肠壁水通道蛋白3(AQP3)、水通道蛋白4(AQP4)基因相对表达量，并检测ENaC-β/-γ的相对表达量。结果：与模型组相比，莫沙必利组及益肠通秘汤组粪便含水量、肠道推进率显著增加，首粒黑便排出时间显著减少(P<0.05),AQP3、AQP4、ENaC-β及ENaC-γ mRNA均显著减少(P<0.05);与莫沙必利组相比，益肠通秘汤组粪便含水量、肠道推进率显著上升，首粒黑便排出时间显著下降(P<0.05),AQP3、AQP4、ENaC-β及ENaC-γ mRNA水平均显著下降(P<0.05)。结论：益肠通秘汤能够改善慢传输型便秘大鼠排便情况，可能是通过下调AQP3、AQP4以及ENaC-β/-γ水平，调节水盐代谢，从而达到增加粪便含水量、肠道推进率的目...     

商陆提取物醋制前后毒性作用的比较研究

目的:提取分离获得商陆的毒性成分,并比较其醋制前后毒性的变化.方法:采用黏膜刺激性反应、小鼠腹腔炎症模型及离体巨噬细胞释放NO模型,比较商陆毒性成分醋制前后的致炎毒性变化.结果:商陆毒性成分具有显著的致炎毒性,可导致家兔眼结膜水肿、小鼠腹腔渗出液中PGE2含量升高以及巨噬细胞释放NO含量升高;经醋制后,对家兔眼结膜刺激性减弱,使小鼠腹腔渗出液中PGE2含量降低、巨噬细胞释放NO含量降低.结论:醋制法能够降低商陆毒性成分的毒性作用.     

醋制商陆正丁醇部位降低肝肾毒性作用机制研究

目的 采用代谢组学的方法探究商陆Phytolacca acinosa醋制前后正丁醇部位肝肾毒性的差异及减毒作用机制。方法 采用UPLC-Q-TOF/MS的方法对商陆醋制前后正丁醇部位的成分变化进行研究。小鼠ig商陆生醋品正丁醇部位低、高剂量（27、54 mg/kg）28 d后,通过血清生化指标和病理切片评价商陆醋制前后的肝肾毒性差异;采用UPLC-Q-TOF/MS对血清进行数据采集;通过QI、HMDB及MetaboAnalyst 5.0寻找与商陆炮制减毒相关的差异代谢物及代谢通路。结果 商陆醋制后部分皂苷类成分含量下降显著,并能够明显降低生品导致的肝肾功能指标的异常升高。病理切片结果显示,与对照组比较,生品组的肝、肾组织病变明显;醋制后病变程度显著减轻。通路富集分析发现胆汁酸代谢可能与商陆醋制减毒密切相关;进一步对胆汁酸进行半定量分析发现,商陆醋制后能够改善生品导致的结合型胆汁酸含量的下降及次级胆汁酸含量的升高,从而改善胆汁酸代谢紊乱。结论 商陆生品具有肝肾毒性,醋制后皂苷类成分含量下降,毒性显著降低,其作用机制可能与改善胆汁酸代谢紊乱密切相关。     

甘遂炮制前后不同提取部位急性毒理实验

目的考察生甘遂和醋甘遂乙醇提取物不同提取部位的毒性。方法采用急性毒性实验法,测定LD50,并用BLISS法计算。结果与生甘遂醇提物相比,醋甘遂醇提物石油醚部位和氯仿部位毒性均有下降,乙酸乙酯部位下降3倍多。结论甘遂经醋制后毒性显著降低。     

中药干预慢传输型便秘肠道水通道蛋白表达及其作用机制的研究进展

便秘是临床常见的高复发性疾病,其发病率存在明显地域差异,与性别、年龄、饮食习惯、文化程度等多种因素相关,发病机制尚不明确,主要表现为因肠道动力不足引起粪质干硬、排便困难,口服西药有诸多不良反应。分布在结肠内的水通道蛋白与肠道内水液的转输密切相关,药物作用于体内某些细胞因子或信号通路可影响肠道内其表达,进而影响肠道粪便含水量。在研究中药干预便秘时发现,肠道内水通道蛋白表达发生变化,表明它可能是中药治疗便秘的重要靶点。本文对水通道蛋白功能、便秘肠道内其变化、中药干预对便秘肠道内其表达的影响进行概述,可为研究中药干预便秘机制及开发相关新靶点药物提供参考。     

龙血竭不同提取部位对高血糖模型小鼠血糖水平的影响

目的研究龙血竭不同提取部位对链脲佐菌素性高血糖模型小鼠血糖水平的影响。方法分别制备龙血竭石油醚、氯仿、乙酸乙酯提取部位,研究不同提取部位对链脲佐菌素性高血糖模型小鼠血糖、血脂水平及骨骼肌葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)mRNA表达的影响。结果龙血竭氯仿部位和乙酸乙酯部位能降低链脲佐菌素性高血糖小鼠空腹血糖水平,乙酸乙酯部位可上调模型小鼠GLUT4mRNA表达。结论龙血竭氯仿部位和乙酸乙酯部位具有降血糖功效。     

醋制对商陆及商陆正丁醇部位中皂苷类成分含量的影响

为研究醋制对商陆及商陆正丁醇部位皂苷类成分的影响,比较商陆中主要毒性成分商陆皂苷B(EsB)和商陆皂苷C(EsC)醋制前后含量的变化,依据商陆《中国药典》醋炙工艺,将商陆正丁醇部位进行模拟醋制;采用液质联用法对商陆正丁醇部位醋制前后皂苷类成分进行研究;采用HPLC-ELSD方法检测毒性成分EsC和EsB在商陆生品、醋制品中的含量,考察商陆醋制前后的含量变化。结果显示,商陆正丁醇部位中除商陆皂苷甲(EsA)以外,各商陆皂苷类成分含量均不同程度下降,皂苷类化合物组成显著变化,但醋制后未见新化合物生成;含量测定发现生商陆中EsC和EsB的质量分数分别为0.12%,0.20%,醋制后下降为0.48%,0.094%。表明醋制能够显著改变商陆及商陆正丁醇部位中皂苷类成分的组成,显著降低毒性皂苷EsC和EsB的含量,表明商陆采用醋制法炮制的科学性。     

益肠通秘汤对便秘小鼠菌群多样性及肠道Occludin表达的影响

目的 探讨益肠通秘汤对便秘小鼠菌群多样性及肠道紧密连接蛋白(Occludin)表达的影响。方法 将40只Balb/C小鼠随机分为正常组、便秘组、益肠通秘汤组和莫沙必利组,每组10只。除正常组外,其余组小鼠使用洛哌丁胺(10 mg/kg)灌胃2周建立便秘模型。第3周开始,益肠通秘汤组给予益肠通秘汤14 g/(kg·d)灌胃,莫沙必利组给予枸橼酸莫沙必利5 g/(kg·d)灌胃,正常组及便秘组给予等量生理盐水灌胃,均持续2周。灌胃结束后,观察各组小鼠粪便数量、粪便含水量及小肠活性炭推进长度、肠道推进率,使用16S rDNA测序方法分析各组小鼠粪便肠道菌群,使用免疫荧光染色方法检测小鼠结肠组织中Occludin表达情况。结果 便秘组小鼠粪便数量、粪便含水量及小肠活性炭推进长度、肠道推进率均明显低于正常组(P均<0.05);益肠通秘汤组和莫沙必利组小鼠粪便数量、粪便含水量、肠道推进率及益肠通秘汤组小肠活性炭推进长度均明显高于便秘组(P均<0.05)。便秘组小鼠菌群多样性中Chao1、shannon水平和粪便中Lactobacillus、Bifidobacterium、Prevote...