黄蒲通窍胶囊对阿尔茨海默病大鼠海马氧化应激和线粒体凋亡途径的影响

目的探讨黄蒲通窍胶囊对阿尔茨海默病(AD)大鼠学习记忆的影响及其可能作用机制。方法SD大鼠予以腹腔注射D-半乳糖联合双侧海马注射Aβ25-35建立AD动物模型,期间给予不同剂量黄蒲通窍胶囊干预28天,同时设立假手术组和多奈哌齐阳性对照组。Morris水迷宫实验测试各组大鼠逃避潜伏期变化,HE染色观察各组大鼠海马神经元损伤情况,免疫组化法检测大鼠海马Bax表达,ELISA法检测大鼠血清中谷胱甘肽(GSH)含量,比色法检测大鼠血清中超氧化物歧化酶(SOD)活性以及丙二醛(MDA)含量,Western blot法检测大鼠海马组织细胞色素C(Cyt C)、Bcl-2、Caspase-3含量。结果与假手术组比较,模型组逃避潜伏期明显延长,海马神经元损伤严重,GSH、Bcl-2含量和SOD活性明显降低,MDA含量和Cyt C、Bax、Caspase-3表达明显升高(P0.01);与模型组比较,黄蒲通窍胶囊组逃避潜伏期明显缩短,海马神经元损伤较轻,GSH、Bcl-2含量和SOD活性明显升高,MDA含量和Cyt C、Bax、Caspase-3表达明显降低(P0.01,P0.05)。结论黄蒲通窍胶囊对AD大鼠的学习记忆能力有明显改善作用,可减少AD大鼠海马神经元的损伤,其机制可能与减少氧化应激和抑制线粒体凋亡途径有关。     

黄蒲通窍胶囊对阿尔茨海默病大鼠海马EGFR-PLCγ信号通路的影响

黄蒲通窍胶囊(Huangpu Tongqiao Capsules,HPTQC)功能益气补肾,豁痰化瘀,具有治疗阿尔茨海默病(AD)的作用,但其作用机制需进一步探讨。为了探讨黄蒲通窍胶囊对阿尔茨海默病的治疗作用机制与EGFR-PLCγ信号通路的关系,该实验选择健康雄性SD大鼠40只,随机分为4组:假手术组(sham)、模型组(model)、黄蒲通窍胶囊组(HPTQC)、尼莫地平组(NMP),运用腹腔注射D-半乳糖联合双侧海马注射Aβ_(25-35)的方法进行造模,给药28 d后,Morris水迷宫实验和HE染色结果显示:AD大鼠学习记忆能力明显下降(P0.01),海马神经元出现明显损伤,而黄蒲通窍胶囊可显著提高AD大鼠学习记忆能力(P0.05),减轻海马神经元损伤。免疫荧光实验结果显示:AD大鼠海马CA1区EGFR和p-Tau表达明显增加(P0.01),而黄蒲通窍胶囊可显著减少AD大鼠海马EGFR和p-Tau表达(P0.01)。Western blot实验结果显示:AD大鼠海马EGFR,PLCγ,IP3R,p-Tau蛋白表达明显增加(P0.01),而黄蒲通窍胶囊可显著减少AD大鼠EGFR,PLCγ,IP3R,p-Tau蛋白表达(P0.05);RT-PCR实验结果显示:AD大鼠海马EGFR,PLCγ,IP3R,Tau的mRNA水平明显升高(P0.01),而黄蒲通窍胶囊可显著降低AD大鼠EGFR,PLCγ,IP3R,Tau的mRNA水平(P0.05)。结果表明,黄蒲通窍胶囊可改善AD大鼠学习记忆能力,其作用机制可能与调节EGFR-PLCγ信号通路有关。     

黄蒲通窍胶囊治疗血管性痴呆的临床观察

目的观察黄蒲通窍胶囊治疗血管性痴呆（VaD）患者的临床疗效及安全性。方法将符合纳入病别标准的90例VaD患者随机分成3组,即西药多奈哌齐治疗组（A组）,中医辨证后运用黄蒲通窍胶囊组（B组）和中医辨证后使用黄蒲通窍胶囊合用多奈哌齐组（C组）。疗程为60d。观察3组治疗后中医证候积分;神经心理学量表检查包括：简明精神状态检查量表（MMSE）、日常生活能力量表（ADL）、阿尔茨海默病评定量表-认知分量表（ADAS—Cog）。测定血液流变学及血清同型半胱氨激（Hcy）。结果黄蒲通窍胶囊可以显著改善中医证候积分、ADL、MMSE、ADAS—cog积分,降低血Hcy且无明显不良反应。结论黄蒲通窍胶囊可以改善VaD患者的临床症状,是治疗血管性痴呆的安全有效药物。     

黄蒲通窍胶囊对血管性痴呆大鼠 SOD、MDA、AchE的影响

目的:探讨黄蒲通窍胶囊对血管性痴呆大鼠的保护作用及其机制.方法:采用线栓法局灶脑缺血动物模型,观察VD大鼠脑组织MDA含量、SOD和AchE活性的变化..结果:黄蒲通窍胶囊显著降低VD大鼠脑组织MDA含量和AchE活性,显著增加SOD活性(P＜0.01).结论:黄蒲通窍胶囊对VD大鼠学习记忆减退有明显保护作用,其机制与降低MDA含量、增加SOD活性及防治中枢胆碱能神经元损伤有关.     

黄蒲通窍胶囊对血管性痴呆大鼠保护作用的实验研究

目的：通过对VD大鼠行为学、脑组织生化指标及细胞因子改变的观察，探讨黄蒲通窍胶囊对血管性痴呆大鼠的保护作用及其机制。方法：采用栓线法制作局灶脑缺血动物模型，比色法测定各组大鼠脑组织NO含量和NOS活性，放免法测定血清IL－6和TNF—α含量。结果：黄蒲通窍胶囊可明显缩短大鼠跳台实验的逃避潜伏期，降低错误次数，可显著降低VD大鼠脑组织NO含量和NOS活性及血清IL－6和TNF—α含量（P〈0．01）。结论：黄蒲通窍胶囊对VD大鼠学习记忆减退有明显保护作用，其机制与降低脑组织NO含量和NOS活性及血清IL－6和1NF—α含量有关。     

黄蒲通窍胶囊对血管性痴呆大鼠学习记忆能力及NOS的影响

全楷体目的:通过对VD大鼠脑组织NO含量和NOS活性的测定,探讨黄蒲通窍胶囊对血管性痴呆大鼠的保护作用及其机制.方法:采用栓线法局灶脑缺血动物模型,观察VD大鼠脑组织NO含量和NOS活性的变化.结果:黄蒲通窍胶囊显著降低VD大鼠脑组织NO含量和NOS活性(P<0.01).结论:黄蒲通窍胶囊对VD大鼠学习记忆减退有明显保护作用,其机制与降低NO含量和NOS活性有关.     

UPLC测定黄蒲通窍胶囊中β-细辛醚含量

目的建立快速测定黄蒲通窍胶囊中β-细辛醚含量的方法。方法采用超高效液相色谱法。色谱柱为Waters Acquity BEH C18（2.1 mm×50 mm,1.7μm）,流动相为水-乙腈（63∶37）,流速0.35 mL/min,检测波长257 nm,柱温30℃。结果β-细辛醚在0.0343～0.1715μg范围内与峰面积线性关系良好,r=0.9999,平均加样回收率为98.53%,RSD=2.10%（n=6）。结论所建立的方法快速、简便、易行,结果准确可靠,可作为黄蒲通窍胶囊的质量控制方法。     

黄蒲通窍胶囊对拟血管性痴呆大鼠神经细胞c-fos、c-jun蛋白表达的影响

目的探讨黄蒲通窍胶囊对血管性痴呆（VD）大鼠脑组织c-fos和c-jun影响的机制。方法制作线栓法大脑中动脉栓塞所致血管性痴呆大鼠模型,观察各组大鼠脑组织c-fos和c-jun的变化。结果模型组大鼠脑组织中c-fos和c-jun有一定的表达,中药组、都可喜组血浆和脑组织中c-fos和c-jun表达明显增强,并有统计学意义（P〈0.01）。结论黄蒲通窍胶囊一方面可能通过上调脑缺血后c-fos的表达,而起到脑保护的作用;另一方面可能通过增强c-fos的表达起到改善VD大鼠学习记忆障碍的作用。推测这可能是该方治疗血管性痴呆的机制。     

牛黄醒脑丸对阿尔茨海默病模型小鼠海马区细胞凋亡的影响

目的 探讨牛黄醒脑丸对阿尔茨海默病模型小鼠Bcl-2、caspase-3及C型-半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶-3(type C cysteine aspartate specific protease-3,C-caspase-3)表达的影响.方法 将50只APP/V717小鼠按随机区组分组法分为牛黄醒脑丸高、中、低剂量组,模型组,阳性对照组;另选取10只C57BL/6小鼠为空白对照组.牛黄醒脑丸高、中、低剂量组小鼠分别灌胃牛黄醒脑丸水溶液142、71、35.5 mg/kg;阳性对照组灌胃多奈哌齐溶液10 mg/kg;空白对照组及模型组灌胃等体积生理盐水.1次/d,连续给药60 d.采用Morris水迷宫实验检测各组小鼠的学习记忆能力.采用ELISA法检测小鼠海马组织SOD、GSH-Px及CAT含量;采用免疫印迹法检测小鼠海马组织Bcl-2、caspase-3、C-caspase-3表达.利用TUNEL染色法检测各组小鼠海马区细胞凋亡情况.结果 与模型组比较,牛黄醒脑丸高、中、低剂量组小鼠第Ⅲ象限停留时间[(36.58±4.57)s、(32.46±4.25)s、(29.71±4.26)s比(25.48±3.91)s]延长,穿越平台次数[(5.82±0.87)次、(4.59±0.76)次、(3.96±0.75)次比(3.27±0.53)次]增加(P<0.05);牛黄醒脑丸高、中、低剂量组小鼠海马GSH-Px[(161.14±14.01)U/mg、(150.76±13.16)U/mg、(143.17±12.54)U/mg比(120.78±10.92)U/mg]、SOD[(14.25±1.82)U/mg、(11.17±1.65)U/mg、(7.24±1.02)U/mg比(3.12±0.31)U/mg]、CAT[(17.95±2.16)U/mg、(16.72±1.83)U/mg、(15.54±1.47)U/mg比(13.25±2.60)U/mg]水平升高(P<0.05);caspase-3[(1.13±0.13)、(1.25±0.15)、(1.41±0.17)比(1.49±0.20)]、C-caspase-3[(1.17±0.14)、(1.27±0.16)、(1.42±0.18)比(1.52±0.23)]表达降低,Bcl-2[(0.88±0.08)、(0.79±0.06)、(0.67±0.04)比(0.59±0.04)]表达升高(P<0.05).TUNEL染色结果表明,牛黄醒脑丸高、中、低剂量组仅观察到少量凋亡神经元.结论 牛黄醒脑丸可调节阿尔茨海默病模型小鼠海马组织Bcl-2、caspase-3及C-caspase-3表达,抑制海马区神经细胞凋亡.     

针刺对阿尔茨海默病模型大鼠神经细胞凋亡的影响

目的观察阿尔茨海默病(AD)模型大鼠大脑皮质和海马神经细胞凋亡情况及针刺对细胞凋亡的影响。方法SD大鼠被随机分为空白组、模型组与针刺组;AD模型采用腹腔注射0.96%D半-乳糖与双侧M eynert基底核注射鹅膏蕈氨酸(IBO)损毁复合造模;在造模的同时,针刺组选用百会、大椎、风府针刺治疗;行为学检测采用Y型电迷宫法;细胞凋亡检测采用TUNEL法。结果(1)与空白组比较,模型组大鼠学习与记忆能力均明显降低(均P<0.01),针刺组大鼠学习与记忆能力均较模型组大鼠明显提高(均P<0.01)。(2)模型组大鼠脑组织皮质及海马中可见分布有大量的凋亡细胞,而针刺组皮质和海马中仅见少量凋亡细胞,模型组皮质中凋亡细胞数目(45.34±6.28)明显多于针刺组(20.39±5.48)与空白组(9.46±1.86)(均P<0.01);模型组海马中凋亡细胞数目(53.64±8.20)也明显多于针刺组(11.38±6.36)与空白组(3.62±0.89)(均P<0.01);针刺组皮质与海马凋亡细胞数明显高于空白组(均P<0.01)。结论针刺能一定程度减少复合型AD模型大鼠皮质和海马神经细胞凋亡,从而防止AD模型大鼠学习记忆能力下降。     

振肌胶囊对大鼠疲劳模型骨骼肌细胞凋亡的影响

用游泳方法建立大鼠疲劳模型,观察爱维治与不同剂量振肌胶囊对大鼠疲劳模型血清乳酸含量及骨骼肌细胞调亡的影响.结果显示:模型组与正常对照组相比大鼠血清乳酸含量明显增高(P＜0.05).中药常规剂量组、中药大剂量组与模型组相比,血清乳酸含量明显降低(P＜0.05).与模型组相比,各组骨骼肌细胞凋亡数目明显减少(P＜0.05),中药大剂量组与中药常规剂量组相比骨骼肌细胞凋亡数目亦明显减少(P＜0.05).爱维治(Actovegin)组与中药大剂量组相比肌细胞凋亡数目统计学上无差异(P＞0.01),推测中药振肌胶囊抗疲劳的机理可能与降低血清乳酸及防止骨骼肌细胞的凋亡有关,其机理有待进一步研究.     

正交设计优选黄蒲通窍胶囊中挥发油的提取及包合工艺

目的优选黄蒲通窍胶囊中石菖蒲、益智仁、川芎混合挥发油的最佳提取和包合工艺。方法采用水蒸气蒸馏法,运用正交试验,以挥发油提取量为指标,从加水量、浸泡时间、提取时间3个方面优选挥发油的最佳提取工艺;采用饱和水溶液法,运用正交试验,以包合物收率和挥发油包合率为指标,从挥发油与β-环糊精(β-CD)的比例、包合时间、包合温度3个方面优选最佳包合工艺。结果最佳提取工艺为：加入8倍量水,浸泡2 h,提取7 h;最佳包合工艺为：挥发油与β-CD的比例为1∶10,包合3 h,包合温度为40℃。结论优选的提取工艺收油率较高,包合工艺的挥发油包合率也较高,工艺稳定可行。     

加味不忘散对阿尔茨海默病模型大鼠海马神经元细胞凋亡及炎症反应的影响

目的:研究中药免煎剂加味不忘散对阿尔茨海默病(AD)模型大鼠海马神经元细胞凋亡及炎症反应的影响,初步探讨其发挥作用可能的机制。方法:SD大鼠按随机数字表法分为假手术组、模型组、低剂量组及高剂量组,分别采用HE染色、TUNEL染色观察海马神经元细胞形态学改变及海马神经元细胞凋亡情况,使用ELISA法测定IL-1β、IL-6、TNF-α含量。结果:HE染色观察结果示,模型组海马神经元细胞形态异常,低、高剂量组海马神经元细胞较模型组均有不同程度的改善; TUNEL染色结果示,模型组较假手术组凋亡细胞数明显增加,低剂量组未见凋亡细胞数减少,而高剂量组凋亡细胞数减少; ELISA结果示,低剂量组海马组织中TNF-α水平较模型组降低,而IL-1β及IL-6水平并未降低,高剂量组海马组织中的IL-1β、IL-6、TNF-α水平降低。结论:加味不忘散可抑制Aβ1-42所致的海马炎症因子释放以及神经元细胞凋亡,提示加味不忘散可能通过抑制炎症反应发挥其神经元保护作用。     

电针对阿尔茨海默病模型大鼠额叶胶质细胞的影响

目的观察额叶胶质细胞在阿尔茨海默病(AD)发病中的作用及电针对其的影响,探讨电针防治AD的可能机制。方法将Wistar大鼠随机分成正常组、假手术组、模型组和电针组,海马区注射微量Aβ1-40制备动物模型,取"百会"、"太溪"、"足三里"进行电针治疗,采用免疫组化法检测造模后3d、7d、14d额叶小胶质细胞和星型胶质细胞的阳性表达。结果模型组与正常组及假手术组比较,胶质细胞表达数量呈显著性增加,差异具有统计学意义(P<0.01),且造模后7d表达最强,经电针治疗后,阳性细胞表达减少。结论电针治疗可减少AD模型大鼠额叶胶质细胞的活化,从而阻断其介导的免疫炎性反应。     

HPLC法同时测定黄蒲通窍胶囊中3种蒽醌类成分的总含量

目的:建立高效液相色谱法测定黄蒲通窍胶囊中大黄素、大黄酚和大黄素甲醚3种蒽醌类成分总含量的方法.方法:采用高效液相色谱法,以Agilent TC-C18(Φ250×4.6 mm,5 μm)为固定相;以甲醇:0.1%磷酸(83∶17,V∶V)为流动相;流速为1.0 mL.min-1;柱温为25 ℃;检测波长为254 nm.结果:大黄素在0.0410～0.205 μg(R2=0.999 49),大黄酚在0.040 6～0.020 3 μg(R2=0.999 33),大黄素甲醚在0.040 2～0.201 μg(R2=0.999 21)范围内线性关系良好;平均加样回收率分别为97.06%、98.19%、99.68%;RSD分别为1.61%、2.44%、1.68%.结论:所建立的方法简便、准确、快速,可作为黄蒲通窍胶囊的质量控制方法.     

寿尔智胶囊对老年性痴呆模型小鼠海马神元细胞凋亡及超微结构的影响

目的：观察寿尔智胶囊对老年性痴呆模型小鼠海马神经元细胞凋亡及超微结构的影响。方法：采用流式细胞仪以及光镜、电镜对老年性痴呆模型小鼠海马神经元凋亡细胞及超微结构进行观察。结果：寿尔智胶囊可以保护海马神经元，具有抗凋亡作用。结论：寿尔智胶囊有助于老年痴呆的防治，可发挥延缓衰老作用。     

通窍鼻炎胶囊对小鼠免疫功能的影响

目的：了解和评价通窍鼻炎胶囊的免疫作用。方法：测定该药对小鼠网状内皮系统吞噬功能及绵羊红细胞免疫小鼠ＬＴ转化、ＰＦＣ,ＮＫ,ＩＬ-２的活性,并以左旋咪唑作阳性对照。结果：该药和左旋咪唑均使小鼠网状内皮系统功能增强,２ｇ／ｋｇ作用最为显著,与左旋咪唑２．５ｍｇ／ｋｇ作用相当;该药１ｇ／ｋｇ时显著提高ＮＫ活性（Ｐ＜０．０１）,２ｇ／ｋｇ和左旋咪唑２．５ｍｇ／ｋｇ均对ＰＦＣ,ＣＴ转化、ＮＫ活性、ＩＬ-２有非常显著提高作用（Ｐ＜０．００１）,４ｇ／ｋｇ对上述４项指标仍有明显作用（Ｐ＜０．０５～０．０１）,但较２ｇ／ｋｇ作用减弱。结论：通窍鼻炎胶囊具有显著的免疫提高作用。     

琐琐葡萄多糖对阿尔茨海默病细胞模型APP表达的影响

目的:观察琐琐葡萄多糖(polysaccharide from Vitis viniferal,VTP)对β-淀粉样蛋白25-35(Aβ25-35)诱导PC12细胞β-淀粉样前体蛋白(beta-amyloid precursor protein,APP)基因表达的影响,探讨VTP在阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)发病机制中的作用。方法:体外培养PC12细胞,分为对照组,AD模型组(20μmol·L-1Aβ25-35作用24 h),VTP低、中、高剂量组质量浓度分别为20,40,80 mg·L-1。VTP作用24 h后,检测细胞活性、超氧化物歧化酶(SOD)活力、丙二醛(MDA)含量和细胞超微结构,采用实时荧光定量PCR(real-time PCR)检测APP mRNA表达。结果:与正常组比较,模型组细胞活性及SOD活力降低(P0.01),MDA含量及APP mRNA表达增高(P0.01),细胞超微结构明显异常;与模型组比较,给药组细胞活性及SOD活力增强(P0.05),MDA含量及APP mRNA表达下降(P0.01),减轻神经细胞损伤。结论:VTP对Aβ25-35诱导的氧化损伤有保护作用,通过抗氧化和调节APP mRNA表达,抑制Aβ形成,保护神经细胞,起到防治AD的作用。     

芪红胶囊对柯萨奇病毒引起细胞凋亡的影响

目的 探讨柯萨奇病毒是否能够引起心肌细胞凋亡,以及芪红胶囊对凋亡发生是否有抑制作用。方法 将培养细胞分为4组：病毒感染对照组、芪红胶囊加病毒组、芪红胶囊对照组和正常细胞对照组。应用原位末端标记法(TUNEL)、Hoechst33258染色和Annexin-V／PI染色观察各组细胞凋亡发生情况;并通过流式细胞仪分析各组细胞的凋亡发生率;应用RT-PCR方法观察与凋亡相关细胞因子的表达改变。结果 病毒感染对照组细胞经Hoechst33258染色发现病毒感染后的细胞核出现强亮度的蓝色荧光,可观察到凋亡细胞的典型变化;Annexin-V／PI染色可见HeLa细胞膜呈强绿色荧光,细胞核显强红色荧光;通过流式细胞仪检测PI染色的细胞DNA,发现病毒感染组出现明显凋亡峰;芪红胶囊加病毒组凋亡发生率明显下降,正常对照组细胞未发生凋亡;同时芪红胶囊能够调节与凋亡相关细胞因子的表达。结论 芪红胶囊能够抑制柯萨奇病毒引起的细胞凋亡。