西黄丸含药血清对人乳腺癌细胞生长的影响

目的研究西黄丸含药血清对人乳腺癌细胞系(MCF-7)生长及其细胞周期分布的影响。方法应用MTT比色法检测肿瘤细胞活性,流式细胞仪分析细胞周期相对分布。结果西黄丸含药血清对人乳腺癌细胞系(MCF-7)有较强的抑制作用,其抑制率与含药血清浓度呈直线相关。流式细胞仪周期分析结果显示含药血清处理24 h,S期细胞比例增加,G2/M期细胞减少;处理48 h后,G0/1期细胞增多,S期细胞减少。结论西黄丸含药血清可抑制人乳癌细胞系(MCF-7)细胞生长,并可干扰其细胞周期。     

西黄丸含药血清对三阴性乳腺癌细胞株MDA-MB-231细胞增殖、凋亡、迁移的影响

目的:研究西黄丸含药血清对三阴性乳腺癌细胞株MDA-MB-231细胞增殖、凋亡、迁移以及对环氧化酶2(COX-2)转录的影响,以期探讨西黄丸对三阴性乳腺癌细胞的作用.方法:大鼠灌胃给药制备西黄丸含药血清,实验设置大鼠空白血清组和西黄丸含药血清组,以含药血清干预三阴性乳腺癌细胞株MDA-MB-231,MTT法检测细胞增殖...     

鳖甲-莪术药对含药血清对MCF-7人乳腺癌细胞的影响

目的基于Wnt/β-catenin信号通路探讨鳖甲-莪术药对含药血清对乳腺癌细胞增殖的抑制作用。方法细胞悬液加入不同剂量的鳖甲含药血清、莪术含药血清、鳖甲-莪术药对含药血清孵育48、72 h后,用MTT法检测细胞增殖抑制率,流式细胞术检测细胞周期,Western blot法检测β-Catenin、c-Myc、cyclin D1蛋白表达。结果与空白血清组比较,各含药血清组处理48、72 h均可抑制细胞增殖(P0.05,P0.01);处理48 h后,其G0/G1期细胞比例增加(P0.05,P0.01)、S期细胞比例降低(P0.05,P0.01),β-Catenin、c-Myc、cyclin D1蛋白表达均降低(P0.05,P0.01)。结论各组含药血清对MCF-7细胞的增殖均有抑制作用。此外,鳖甲-莪术药对抑制作用高于单独用药,其抗乳腺癌的机制可能与抑制Wnt/β-catenin信号通路中β-catenin的表达,下调β-catenin以及β-catenin下游靶基因cyclin D1,c-Myc蛋白表达有关。     

黄芪含药血清对人乳腺癌MCF-7细胞的实验研究

目的:研究不同浓度黄芪含药血清对雌激素受体阳性的人乳腺癌MCF-7细胞增殖和细胞周期的作用以及Bcl-2蛋白表达的影响,初步探讨黄芪的植物雌激素效应情况.方法:采取MTT法观察不同含药血清组对人乳腺癌MCF-7细胞在不同时间段(24h,48h,72h)的增殖活性,检测细胞周期及细胞凋亡率,检测细胞凋亡相关基因Bcl-2蛋白的表达.结果:黄芪含药血清可以抑制乳腺癌MCF-7细胞的增殖,并且呈现不同剂量的梯度性;不同浓度黄芪含药血清均不能诱导细胞的凋亡;但黄芪高剂量组可以明显的增加G0/G1期比例;黄芪含药血清可以上调Bcl-2蛋白的表达.结论:黄芪含药血清可以抑制MCF-7细胞的增殖;高剂量组可以使MCF-7固定在G0/G1期;可部分上调Bcl-2蛋白的表达,抑制细胞凋亡.     

仙茅、淫羊藿含药血清对乳腺癌MCF-7细胞增殖及凋亡的影响

目的 探讨仙茅、淫羊藿含药血清单用或与三苯氧胺(TAM)合用是否有促人乳腺癌MCF-7细胞增殖/凋亡的作用.方法 设立空白、E<,2>及TAM对照组,观察仙茅、淫羊藿含药血清单用及联合TAM在不同剂量和作用时间下时MCF-7细胞生长的影响.应用MTT法观察细胞增殖情况,应用Annex-V+PI双染法及流式细胞仪观察细胞凋亡情况.结果 仙茅、淫羊藿对乳腺癌MCF-7细胞生长的影响因浓度的不同而不同:不同浓度的仙茅含药血清对乳腺癌细胞MCF-7的促增殖作用均不明显(P>0.05).仙茅、淫羊藿与TAM联合作用于MCF-7细胞,无明显促细胞增殖的作用(P>0.05),高剂量的淫羊藿甚至有诱导细胞凋亡的可能(P<0.05).结论 仙茅、淫羊藿临床上使用基本是安全的,尤其对ER(+)乳腺癌患者合并TAM治疗的情况下.研究结果为临床应用补肾中药治疗乳腺癌提供了实验依据.     

乳宁Ⅱ号对人乳腺癌MDA-MB-435细胞株生长转移的影响

材料与方法1　乳宁Ⅱ号对裸鼠ＭＤＡ ＭＢ 4 35人乳腺癌抑瘤抗转移作用的动物体内观察1 1　模型制备采用ＢＡＬＢ Ｃ雌性裸小鼠 ,ＳＰＦ级 ,体重 2 0ｇ±2ｇ ,35～ 4 0日龄 ,购自中国科学院上海药物研究所。人乳腺癌ＭＤＡ ＭＢ 4 35细胞株 (由上海市肿瘤医院分子生物学实验室邵志敏教授惠赠 )。参照文献方法[1] ,无菌条件下 ,将ＭＤＡ ＭＢ 4 35人乳腺癌细胞接种于裸小鼠左侧第二乳头下的脂肪垫 (细胞数为 1× 10 6/只 )。 2周后皮下明显触及肿块生长时随机分组。给药时间为 10周 ,停药后 3ｄ将动物脱颈处死。1 2　药物乳宁Ⅱ号 :由生黄芪…     

康莱特注射液对人乳腺癌MCF-7细胞增殖和凋亡的影响

目的观察康莱特注射液对人乳腺癌MCF-7细胞增殖、细胞周期和凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法取对数生长期人乳腺癌MCF-7细胞,分为对照组和康莱特不同浓度组(10、20、40μL/mL)。RPMI-1640培养基培养24 h后药物处理,采用MTT法检测康莱特注射液对MCF-7细胞增殖抑制率,流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡,Hochest荧光染色法检测细胞核变化,ELISA及Western blot检测Bcl-2、Bax蛋白表达。结果康莱特注射液作用12、24、48 h对MCF-7细胞增殖均有显著的抑制作用(P0.05,P0.01);与对照组比较,康莱特注射液作用48 h后G1/G0、G2/M期细胞比例增加(P0.001,P0.01),S期细胞比例下降(P0.01),细胞凋亡率升高(P0.05,P0.001),Bcl-2蛋白表达明显降低、Bax蛋白表达明显升高(P0.01,P0.001)。结论康莱特注射液能抑制人乳腺癌MCF-7细胞增殖,阻滞细胞周期,诱导细胞凋亡,其机制与降低Bcl-2蛋白表达和增加Bax蛋白活性有关。     

乳病消片含药血清对MCF-7细胞增殖的抑制作用

目的探讨乳病消片含药血清对人乳腺癌MCF-7细胞增殖的抑制作用。方法细胞悬液加入低剂量(25%)、中剂量(50%)或高剂量(100%)含药血清后分别孵育24、48、72 h,MTT法测定细胞增殖抑制率,流式细胞术检测细胞周期和凋亡,Hoechst 33258染色法观察细胞核形态变化,Western blot法检测胞浆细胞色素C (Cyt-C)、半胱氨酸蛋白酶-3 (Caspase-3)、半胱氨酸蛋白酶-9 (Caspase-9)表达。结果与对照组(空白血清)比较,含药血清组在不同孵育时间均可显著抑制细胞增殖(P 0. 05,P 0. 01);孵育48 h后,G0/G1期细胞比例显著增加(P 0. 05),S期细胞比例显著降低(P 0. 05),凋亡率显著升高(P 0. 01);细胞核碎裂、浓缩程度和蓝色荧光强度呈剂量依赖性增加,中、高剂量组出现凋亡小体,Cyt-C、Caspase-3、Caspase-9表达均显著增加(P 0. 05)。结论乳病消片含药血清对MCF-7细胞增殖具有显著抑制作用,其机制可能与启动线粒体凋亡途径有关。     

ADAM17-siRNA对MCF-7人乳腺癌细胞增殖的影响

目的利用RNAi使解聚素-金属蛋白酶17(ADAM17)基因沉默,观察AD-AM17 mRNA在人MCF-7乳腺癌细胞中的表达及其对细胞增殖的影响。方法利用脂质体介导ADAM17-siRNA转染MCF-7细胞,采用实时荧光聚合酶链反应(Real-time PCR)检测ADAM17 mRNA表达的水平;MTT法检测细胞增殖的活性;流式细胞仪检测细胞周期。结果 ADAM17 mRNA在MCF-7细胞中高表达,转染特异性ADAM17-siRNA后,其表达显著被抑制,同时MCF-7细胞增殖能力也明显下降,细胞进入S和G2/M期的比例降低,绝大多数细胞停留在G0/G1期。结论 ADAM17-siRNA可通过脂质体有效转染MCF-7人乳腺癌细胞,转染后的MCF-7细胞增殖能力明显下降,这种作用与阻止癌细胞进入增殖周期有关。     

苦瓜皂苷对人乳腺癌MCF-7细胞增殖作用的影响

目的 研究苦瓜皂苷抑制乳腺癌MCF-7细胞的作用及其诱导凋亡的机制.方法 采用MTT法观察苦瓜皂苷对MCF-7细胞的生长抑制作用;HE染色观察皂苷作用后癌细胞的形态学变化;免疫荧光染色检测Bcl-2的阳性表达率变化;流式细胞术分析细胞周期及细胞凋亡率.结果 MTT法得到苦瓜皂苷与MCF-7细胞生长抑制率之间存在浓度依赖关系,半数致死量IC50为159.02 mg/L;HE染色观察到经苦瓜皂苷作用24h后的MCF-7细胞出现典型的凋亡形态学特征;免疫荧光检测到苦瓜皂苷作用细胞24h后,Bcl-2的阳性表达率为22.35％,远小于对照组75.61％;流式细胞术表明苦瓜皂苷处理细胞后,S期细胞数明显增加,细胞周期被阻滞在S期,随着皂苷作用时间的延长细胞凋亡率增加.结论 苦瓜皂苷可抑制体外培养MCF-7细胞乳腺癌细胞的增殖,其抑制作用与细胞凋亡机制有关.     

红三叶总异黄酮对人乳腺癌MCF-7细胞增殖和凋亡的影响

目的研究红三叶总异黄酮对人乳腺癌MCF-7细胞的生长抑制和凋亡的诱导作用。方法在体外细胞培养下,采用不同质量浓度红三叶异黄酮和5-Fu处理MCF-7细胞,MTT法测定红三叶总异黄酮抑制MCF-7细胞增殖的量-效关系;TUNEL法、流式细胞术分析其细胞凋亡率和周期分布。结果红三叶总异黄酮对MCF-7细胞增殖的抑制作用随药物质量浓度提高和作用时间延长而更加明显,而在低质量浓度时却出现轻微促细胞增殖现象。TUNEL法、流式细胞术分析结果表明,红三叶总异黄酮能诱导MCF-7细胞凋亡,阻滞细胞于G2/M期,降低细胞增殖指数,且这种作用也存在剂量-效应关系。结论红三叶总异黄酮可抑制MCF-7细胞增殖并诱导其凋亡,具有抗肿瘤作用。     

丹栀逍遥散含药血清对乳腺癌MCF-7细胞自噬的影响

目的:观察丹栀逍遥散含药血清通过诱导自噬对乳腺癌细胞MCF-7的影响。方法:大鼠ig 8.99 g·kg^-1丹栀逍遥散,制备含药血清,取对数生长期MCF-7细胞,以1×10⁵个/mL密度接种于96孔板,每孔100μL,分为空白血清组和含药血清组,每组设3个复孔,分别作用12,24,48,72 h,噻唑蓝(MTT)法测定其对MCF-7细胞生长的抑制作用,单丹磺酰戊二胺(MDC)荧光染色观察细胞自噬泡的形成情况,免疫印迹法(Western blotting)检测自噬蛋白(Beclin1)的表达。结果:与空白血清组比较,15%丹栀逍遥散含药血清具有显著抑制MCF-7细胞生长的作用,确定其最佳作用时间为48 h。丹栀逍遥散含药血清作用细胞48 h后能够增强MDC染色荧光强度,增加自噬泡的形成并显著上调Beclin1的表达。结论:丹栀逍遥散含药血清能够显著抑制MCF-7的细胞生长,诱导细胞自噬性死亡可能是其抗乳腺癌的机制之一。     

补骨脂素逆转人乳腺癌耐药细胞株MCF-7多药耐药性研究

人乳腺癌细胞产生多药耐药性(multidrugresistance,MDR)是肿瘤化疗失败的主要原因之一。已知某些中药具有钙拮抗作用,且药物作用较温和,能逆转MDR从而提高化疗效果,具有很好的应用和开发前景。补骨脂是补益药中少有的钙离子通道拮抗剂,本实验选用其主要成分之一的补骨脂素为研究对象,进行逆转人乳腺癌细胞株耐药性的研究,为今后进一步开发有效耐药逆转剂打下基础。材料和方法1·材料实验用细胞株MCF-7(人乳腺癌细胞株)及MCF-7/ADR(用长春新碱诱导的MCF-7多药耐药细胞株)由北京大学提供。RPMI-1640由GIBCO公司出品,P-170单抗购于…     

西黄丸含药血清干预人乳腺癌细胞增殖的药效强度及其与采血时间的关系

目的探讨西黄丸大鼠含药血清对人乳腺癌细胞增殖的作用特点。方法 SD大鼠48只随机分为空白对照组12只及西黄丸0. 5 h组、西黄丸1 h组、西黄丸2 h组、西黄丸3 h组各9只。西黄丸各时间组给予2. 4 g/(kg·d)西黄丸混悬液灌胃,每日2次,空白对照组大鼠给予等体积蒸馏水,连续给药7次。于末次给药0. 5、1、2、3 h后对相应组采血,制备含药血清。MDA-MB-435和MCF-7细胞分别设10%空白血清组、20%空白血清组、30%空白血清组、10%西黄丸血清组、20%西黄丸血清组和30%西黄丸血清组,每组6个复孔。加入相应含药血清培养后,采用MTT方法检测不同采血时间点、不同浓度的西黄丸大鼠含药血清对乳腺癌细胞株增殖的抑制作用。结果与其他时间点相比,西黄丸大鼠各浓度含药血清作用24、48 h均为采血时间2 h含药血清对MDA-MB-435细胞的抑制增殖作用最强;西黄丸大鼠各浓度含药血清作用24、48、72 h均为采血时间3 h含药血清对MCF-7细胞的抑制增殖作用最强(P 0. 05);且均为30%西黄丸含药血清对MDA-MB-435、MCF-7两种细胞株增殖的抑制作用最强(P 0. 05)。结论西黄丸采血时间2 h含药血清对MDA-MB-435细胞的抑制增殖作用最强,采血时间3 h含药血清对MCF-7细胞的抑增殖作用最强,且以30%含药血清抑制作用最强。     

莪术油对人乳腺癌细胞株MCF-7增殖以及细胞周期阻滞的影响

目的:探讨莪术油对体外培养的人乳腺癌细胞株MCF-7的抑制作用以及对其细胞周期的影响。方法:采用cck-8检测不同浓度莪术油对体外培养的人乳腺癌细胞株MCF-7增殖的影响,并采用流式细胞仪检测其对MCF-7细胞周期的影响。结果:莪术油对MCF-7细胞的增殖存在抑制作用,抑制率与药物浓度呈正相关(P0.05),且抑制率随着药物作用时间的延长而升高,加药后24 h、28 h、72h对MCF-7细胞的半数抑制浓度分别为335.42μg/mL、242.71μg/mL和155.93μg/mL。采用流式细胞仪观察分析,莪术油作用于MCF-7细胞可使G1期细胞比率增高,S期和G2期细胞数降低。结论:莪术油可对MCF-7细胞增殖产生抑制作用,并使细胞阻滞于G1期。     

佛手挥发油对MDA-MB-435人乳腺癌细胞体外增殖的影响

 目的 探讨佛手挥发油对MDA-MB-435人乳腺癌细胞增殖的影响。方法 采用MTT法测定细胞活力;倒置显微镜、荧光显微镜和扫描电镜观察细胞的凋亡与坏死的形态学变化;彗星电泳检测细胞DNA的损伤程度;流式细胞术分析细胞周期的变化。结果 佛手挥发油对MDA-MB-435癌细胞的增殖有明显的抑制作用,且呈剂量依赖性。不同浓度的佛手挥发油处理MDA-MB-435细胞6 h后,低、中浓度实验组(31.25,62.5和125 μg·mL-1)细胞体积缩小、核固缩,染色质凝集或片段化,呈现典型的凋亡特征;而高浓度实验组(250 μg·mL-1)细胞膜裂解,但核形态完整, 呈明显的坏死特征。此外,彗星电泳结果显示,低、中浓度实验组彗星头小而彗尾窄长,表明细胞发生了凋亡;高浓度实验组彗星头大而彗尾长且宽,表明细胞已坏死。进一步的流式细胞结果显示,佛手挥发油能将MDA-MB-435癌细胞周期阻滞在S期和G2/M期。结论 佛手挥发油具有抑制MDA-MB-435癌细胞增殖的作用,低、中浓度的佛手挥发油诱导细胞凋亡且将细胞周期阻滞在S期和G2/M期,而高浓度的佛手挥发油引起细胞坏死。     

炻乳汤含药血清对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖及迁移的影响

目的探讨炻乳汤合药血清对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖及迁移的影响。方法以高、中、低剂量炻乳汤含药血清加入体外培养的三阴性乳腺癌细胞系MDA-MB-231细胞。MTT法检测其对MDA-MB-231细胞增殖的影响,Transwell细胞迁移实验观察其对MDA-MB-231细胞迁移的影响。结幂低剂量组、中剂量组与空白对照组对比,增值率下降;高剂量组72h有使肿瘤细胞凋亡的作用（P〈0.01）;三组均明显抑制细胞迁移（P〈0．01）。结论炻乳汤有抑制MDA-MB-231细胞增殖及迁移作用。     

丹栀逍遥散对人乳腺癌MCF-7细胞株裸鼠移植瘤的影响

目的:研究丹栀逍遥散对MCF-7乳腺癌细胞株裸鼠移植瘤的抑制作用及其机制。方法:体外培养MCF-7人乳腺癌细胞,将MCF-7细胞悬液接种于裸鼠腋下,建立裸鼠皮下移植瘤模型。雌性裸鼠分为4组,即模型组,丹栀逍遥散高、中、低剂量(17.98,8.99,4.50 g·kg~(-1))组,每组8只,每日ig给予丹栀逍遥散连续15 d,模型组ig等容积的生理盐水。比较给药各组肿瘤质量抑制率,采用苏木素和伊红(HE)染色法观察给药各组对肿瘤组织形态学影响,采用Tunel染色法观察给药各组对肿瘤细胞凋亡的影响。结果:与模型组比较,丹栀逍遥散高、中剂量组对肿瘤组织质量有显著抑制作用(P0.05,P0.01),可改善肿瘤组织形态学,增加肿瘤组织被Tunel染色的细胞数目,增加肿瘤细胞凋亡率(P0.01)。结论:丹栀逍遥散能够抑制MCF-7荷瘤裸鼠肿瘤组织生长,其作用机制可能与其促进肿瘤细胞凋亡有关。