地塞米松对哮喘模型豚鼠肺泡灌洗液IL-4、IFN-γ水平及肺组织NF-κB的影响

目的：探讨地塞米松对支气管哮喘豚鼠模型肺泡灌洗液（BALF）中IL-4、IFN-γ水平及肺组织中NF-κB的影响。方法：实验分为正常对照组、哮喘模型组、地塞米松治疗组。用卵白蛋白（OVA）致敏、激发建立哮喘豚鼠模型。ELISA法检测豚鼠BALF中IL-4，IFN-γ含量。免疫组化法观察NF-κB在豚鼠支气管上皮的表达。结果：哮喘组BALF中的IL-4、IFN-γ含量及PC20水平都与正常对照组有显著差别（P〈0．05），而地塞米松治疗组豚鼠BALF中IL-4含量明显低于哮喘模型组（P〈0．05），其IFN-γ含量和PC20水平较后者显著升高（P〈0．05）。哮喘模型组和地塞米松治疗组豚鼠气道中NF-κB阳性细胞百分比有显著差异（P〈0．05）。结论：地塞米松能有效降低豚鼠BALF中IL-4水平，升高IFN-γ含量，同时降低气道高反应性和NF-κB在哮喘豚鼠支气管上皮中的表达。     

n-3多不饱和脂肪酸对运动性哮喘豚鼠气道炎症和气道高反应性的影响

目的:探讨n-3多不饱和脂肪酸(n-3PuFA)对运动性哮喘(EIA)豚鼠支气管肺灌洗液(BALF)、肺组织病理学、气道阻力和动态肺顺应性的影响及其可能机制。方法:20只豚鼠随机分为正常对照组(n=6)、EIA模型组(n=7)和EIA+n-3PuFA干预组(n=7)。实验第1、14天对照组腹腔注射生理盐水,其它两组腹腔注射脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)+甲双吡丙酮(Metyrapon1,MET)。n-3PuFA干预组每天给予n-3PuFA液灌胃(0.04g/kg),对照组和EIA模型组补充同剂量的蒸馏水。各组豚鼠在第21天测试气道阻力(RL)和动态肺顺应性(Cydn),建立运动性哮喘模型后麻醉处死,取豚鼠肺组织观察BALF细胞总数及分类、豚鼠气道反应性及肺组织形态学的变化。结果:EIA模型组豚鼠BALF中细胞总数、嗜酸性粒细胞(EOS)显著高于对照组(P<0.01);RL显著性增高,Cydn明显下降(P<0.05);肺组织可见嗜酸性粒细胞、中性粒细胞和淋巴细胞等炎性细胞浸润。EIA+n-3PuFA干预组豚鼠BALF中细胞总数、EOS显著低于EIA模型组(P<0.05),气道阻力RL呈下降趋势,Cydn表现出升高趋势;支气管粘膜上皮伴少许炎性细胞浸润。结论:运动性哮喘存在气道粘膜的炎症改变和气道高反应性,n-3PuFA可以通过减少气管粘膜炎性介质的产生改善EIA的通气情况。     

特异性p38丝裂原活化蛋白激酶抑制剂对哮喘气道黏液高分泌的抑制作用

目的观察p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)特异性抑制剂SB203580对哮喘模型小鼠气道黏液高分泌的抑制作用。方法取BABL/C小鼠40只,按随机数字表法分为哮喘组、SB203580治疗组、地塞米松治疗组和正常对照组,每组10只。高碘酸希夫(AB-PAS)特染法检测各组小鼠小支气管杯状细胞的数量,ELISA法检测支气管肺泡灌洗液中黏蛋白MUC5AC含量,RT-PCR法检测小鼠肺组织MUC5AC mRNA表达水平,并采用图像分析法进行灰度分析。结果与正常对照组相比,哮喘组的上皮杯状细胞数量、支气管肺泡灌洗液中MUC5AC含量、肺组织MUC5AC mRNA表达水平均显著增加(P<0.01)。经过SB203580和地塞米松分别干预后,上述指标均明显低于哮喘组(P<0.01),而且SB203580对杯状细胞、肺组织MUC5AC mRNA的抑制能力比地塞米松更强(P<0.01)。结论p38 MAPK特异性抑制剂SB203580在一定程度上能够抑制杯状细胞增生与MUC5AC合成,在哮喘气道黏液高分泌的防治中具有潜在的临床应用前景。     

右美托咪啶对失血性休克兔丙二醛及胱抑素C水平影响

目的通过观察右美托咪定(DEX)干预对失血性休克兔肾组织及血清中丙二醛(MDA)、血清胱抑素C(Cys-c)含量的变化,探讨DEX对失血性休克肾功能的保护作用及可能机制。方法建立失血性休克动物模型。选取健康新西兰大耳兔32只,雌雄不限,随机分为4组,对照组(n=8):即假手术组,仅麻醉与手术,但不放血;休克组(n=8):维持休克状态2 h;灌注组(n=8):休克+回输自体肝素化血+等量生理盐水;DEX干预组(n=8):休克+回输自体肝素化血+含DEX等量生理盐水。各组均维持2 h后取全血离心分离血清测Cys-c、MDA水平,取肾组织制成4%组织匀浆测MDA水平。结果休克组与灌注组血清和肾组织中MDA含量高于对照组及DEX干预组,组间比较,差异有统计学意义(P<0.05);DEX干预组与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。休克组与灌注组血清中Cys-c含量高于对照组及DEX干预组,组间比较,差异有统计学意义(P<0.05);DEX干预组与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 DEX可降低失血性休克兔的MDA、Cys-c水平,减轻失血性休克肾组织的氧化应激反应,增加肾小球滤过率,对失血性休克肾具有一定的保护作用。     

地塞米松对哮喘小鼠中性粒细胞性气道炎症和HMGB1表达的影响

目的探讨地塞米松对哮喘小鼠中性粒细胞性气道炎症和高迁移率族蛋白B1(HMGB1)表达的影响。方法 40只SPF级雌性Balb/c小鼠随机分为对照组、哮喘组、1 mg/kg地塞米松干预组、5 mg/kg地塞米松干预组,每组10只,采用无鸡蛋卵清蛋白诱导建立哮喘模型。采用小鼠有创肺功能仪测定小鼠气道高反应性;检测小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中炎性细胞的数量及分类;HE染色观察肺组织病理学变化;免疫组化和Western blotting检测小鼠气道上皮及肺组织HMGB1的表达。结果与对照组比较,哮喘组小鼠气道反应性明显增强(P<0.01),BALF中炎性细胞总数明显增加,且以中性粒细胞为主(P<0.001),气道周围大量炎性细胞浸润,上皮细胞不同程度坏死脱落,气道上皮及肺组织HMGB1表达明显增加(P<0.05)。与哮喘组比较,地塞米松干预组小鼠气道反应性降低(P<0.05),BALF中炎性细胞总数和中性粒细胞计数均减少(P<0.01),气道周围炎性细胞浸润明显减少,气道炎症明显减轻,气道上皮及肺组织HMGB1表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论...     

哮喘模型小鼠脾脏和肺脏CD8~+T细胞的作用机制研究

目的建立哮喘小鼠模型,探讨CD8+T细胞在哮喘中的作用。方法将32只BALB/c小鼠随机均分为对照组和哮喘组,哮喘组小鼠建立哮喘模型。测定两组小鼠的气道反应性,对肺泡灌洗液(BALF)行细胞学分类和计数,观察肺组织的病理变化。用免疫磁珠纯化柱纯化两组小鼠脾、肺组织的CD8+T细胞,加入卵蛋白(OVA)刺激,用ELISA法检测培养96h后CD8+T细胞上清中IL-4、IL-10及IFN-γ的水平。结果哮喘组小鼠存在气道高反应性,证明模型构建成功。哮喘组BALF中的细胞总数和中性粒细胞、嗜酸性粒细胞的比例均较对照组明显增加(P<0.05),巨噬细胞比例明显降低(P<0.05)。哮喘组肺间质中有大量炎性细胞浸润,气道上皮损伤,杯状细胞肥大增生,有大量黏液分泌,黏膜下胶原纤维沉积。对照组无明显的炎症改变。哮喘组肺CD8+T细胞分泌的IL-4(203.20±16.59pg/ml)较对照组(3.29±1.61pg/ml)明显增加(P<0.05),IL-4在两组脾CD8+T细胞培养上清中均未检出。哮喘组脾CD8+T细胞分泌IFN-γ水平(4997.05±189.07pg/ml)较对照组(4509.73±378.10pg/m...     

芍药提取物对哮喘模型大鼠IL-22和IL-13水平的影响

目的探讨芍药提取物对哮喘模型大鼠血清、肺泡灌洗液、肺组织匀浆IL-22和IL-13水平的影响。方法 SD大鼠36只随机分成生理盐水对照组（A组）、哮喘发作组（B组）和治疗组（C组）。治疗组给予芍药提取物灌胃治疗10天,观察三组大鼠的外观表现、肺组织病理变化,并测定血清、肺泡灌洗液、肺组织匀浆IL-22和IL-13水平。结果 B组和C组经激发后出现典型的哮喘表现,C组经中药治疗后外观表现、肺组织病理改变较B组有明显好转,血清、肺泡灌洗液、肺组织匀浆中的IL-22和IL-13水平明显低于B组,P＜0.05。结论芍药提取物可通过调节IL-22和IL-13的水平治疗哮喘。     

地塞米松对嗜酸性粒细胞凋亡及Fas mRNA表达的影响

目的:观察地塞米松对哮喘豚鼠体外不同密度嗜酸性粒细胞(Eos)凋亡及Fas mRNA表达的影响,探讨其促进哮喘Eos凋亡的机制。方法:卵蛋白激发哮喘豚鼠动物模型48 h后行支气管肺泡灌洗,分离不同密度Eos。地塞米松(DM)(10-10~10-5mol/L)干预24 h,原位杂交检测Eos的Fas mRNA表达,3'末端脱氧核苷转移酶介导的脱氧三磷酸尿苷(d-UTP)缺口末端标记(TUNEL)法检测细胞凋亡。结果:DM干预24 h,可见Eos凋亡增加,以低密度Eos(HEos)为明显,与对照组相比,在10-9mol/L时出现显著差别(P<0.05);DM可使Eos表达Fas mRNA增加,并具有剂量依赖性;HEos与NEos相比,其Fas mR-NA表达无明显差别;Eos Fas mRNA表达与其细胞凋亡呈正相关。结论:DM可提高Fas mRNA表达,促进Eos凋亡。Fas可能是DM调节Eos凋亡的通路之一。     

阿奇霉素对哮喘大鼠气道重塑及HIF-1 a、TGF-β1表达的影响

目的 探讨阿奇霉素对哮喘大鼠气道重塑及缺氧诱导因子-1a(HIF-1a)、转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的影响.方法 将32只雄性Sprauge-Dawley大鼠随机分为正常对照组(A组)、哮喘组(B组)、阿奇霉素哮喘组(C组)、地塞米松哮喘组(D组),每组8只,采用卵清蛋白和氢氧化铝混合液腹腔致敏大鼠,2mg·ml-1卵清蛋白滴鼻激发大鼠,各组于末次激发后24小时内麻醉,留取右肺组织行苏木素-伊红染色观察大鼠肺组织病理变化;医学图像分析系统测量气道重塑参数;免疫组织化学检测肺组织HIF-1 a及TGF-β1的表达情况,ELISA检测血清HIF-1a及TGF-β1的表达.结果 与A组相比,B组可见黏膜上皮局部脱落,黏液栓形成,气道壁及肺组织内可见大量炎性细胞浸润,C、D组上述改变明显减轻;B组支气管壁厚度、平滑肌厚度较A组升高(P<0.05),C、D组支气管壁厚度低于B组(P<0.05);C、D组肺组织及血清HIF-1a的表达较A组升高(P<0.05),TGF-β1的表达较B组降低(P<0.05).结论 HIF-1a及TGF-β1可能参与了哮喘气道重塑,阿奇霉素不能有效抑制HIF-1 a的表达来改善哮喘大鼠气道重塑,但它可能通过抑制TGF-β1的表达来改善哮喘大鼠气道重塑.     

胸部开放伤海水浸泡致ALI犬体内SP-A、B的变化

目的探讨胸部开放伤后海水浸泡致急性肺损伤(ALI)肺表面活性蛋白A和B(SP-A、SP-B)的表达变化及机制。方法16只健康犬锐器致开放性气胸后随机均分为实验组(S组)和对照组(C组),每组8只。S组胸腔内灌注海水(35mg/kg)制备ALI动物模型,C组不注入海水。所有犬持续观察6h。采用ELISA法检测灌注前(0h)及灌注后2、4、6h的TNF-α、IL-8,肺组织及血清中SP-A、SP-B含量的变化。于灌注后6h测定支气管肺泡灌洗液(BALF)中SP-A、SP-B的含量。实验结束后处死动物,留取肺组织块匀浆测定SP-A、SP-B含量,并行肺病理组织学检查,采用免疫组化染色观察SP-B在肺内的表达情况。结果S组海水灌注后4、6h时BALF及血清中IL-8、TNF-α均显著高于C组(P<0.05)。S组BALF及肺组织匀浆中SP-A、SP-B含量明显减低,血清中SP-A(灌注后4、6h)、SP-B(灌注后6h)含量增加(P<0.05),但C组SP-A、SP-B的改变不明显。S组肺内SP-B阳性的Ⅱ型肺泡上皮细胞数量较C组明显减少,SP-B蛋白表达明显减弱(P<0.05)。结论胸部开放伤后海水浸泡致ALI时肺...     

哮喘豚鼠肺内不同密度嗜酸细胞凋亡及活性变化

目的：研究哮喘时肺内不同密度嗜酸细胞（Eos）凋亡与活性的关系,探讨其在哮喘发病中的作用。方法：健康豚鼠随机分为正常组、哮喘组,卵蛋白致敏激发制作哮喘模型,密度梯度分离法分离支气管肺泡灌洗液（BALF）中低密度Eos(HEos）及正常密度Eos(NEos),TNEL法检测细胞凋亡,免疫细胞化学方法检测Eos EG2^ 。结果：哮喘组不同密度Eos均显著高于正常组,以HEos为著(P＜0.01);Eos凋亡率明显低于正常组（P＜0.01）。HEos、NEos细胞数与细胞凋亡率明显负相关,EG2^2检测显示,嗜喘组明显高于正常组,哮喘组HEos明显高于NEos。HEos、NEos凋亡与Eos EG2^ 明显负相关。结论：哮喘时Eos存在凋亡抑制,细胞活性增加,细胞凋亡受阻是哮喘Eos增多、活性增加的原因之一。     

雷公藤甲素对哮喘豚鼠嗜酸细胞凋亡与活性的影响

目的：观察雷公藤甲素（ＴＰ）对哮喘豚鼠支气管肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ０中嗜酸细胞（Ｅｏｓ）调亡及活性的影响,探讨ＴＰ治疗哮喘的机制。方法：以卵蛋白致敏激发制作豚姒哮喘模型,随机分为哮喘组、ＴＰ组,密度梯度分离法分离ＥＡＬＦ中的低密度Ｅｏｓ（ＨＥｏｓ）及正常密度Ｅｏｓ数量均明显低于哮喘组（Ｐ〈０．０１）,以ＨＥｏｓ下降为明显（Ｐ〈０．０５）,ＢＡＬＦ中Ｅｏｓ以ＮＥｏｓ ＥＧ２＾＋。结果：用ＴＰ ２４ｈ后     

基质金属蛋白酶-9在哮喘豚鼠气道重构中的作用及抗神经生长因子抗体干预的影响

目的 探讨哮喘豚鼠模型中基质金属蛋白酶-9（MMP-9）与气道重构的关系及抗神经生长因子抗体干预对气道重构的影响。方法 重复雾化吸入卵蛋白4周建立豚鼠哮喘气道重构模型。实验分为对照组、哮喘组、抗神经生长因子（NGF）抗体干预组（每组8只豚鼠）。免疫组化方法结合显微图像分析检测MMP-9表达。半定量PCR检测MMP-9mRNA水平。结果 哮喘组动物出现管壁增厚、平滑肌增生、黏液分泌增加等气道重构的特征性改变，MMP-9mRNA水平和蛋白表达均明显增高。NGF抗体组与哮喘组比较，炎症反应轻微，平滑肌增生、黏液分泌不明显。MMP-9mRNA水平和蛋白表达均降低。与对照组差异无显著性。结论 少量、多次变应原吸入可导致气道重构，MMP-9在气道重构中发挥作用，NGF抗体干预可延缓气道重构的发生。     

哮喘豚鼠血浆及肺匀浆一氧化氮含量与气道吹气压相关性研究

内源性一氧化氮在哮喘发病中具有复杂而广泛的病理生理作用,本研究通过检测哮喘豚鼠血浆和肺组织中一氧化氮含量以及气道吹气压变化,观察其相互关系。结果表明,哮喘急性发作时血浆及肺组织中一氧化氮含量均显著增高,并与其气道吹气压增高呈正相关性,说明哮喘发作时气道阻力增高与一氧化氮含量增高关系密切。     

脂多糖致大鼠急性肺损伤肺组织中糖皮质激素受体的表达及活性变化

目的探讨脂多糖致大鼠急性肺损伤24h内肺组织糖皮质激素受体(GR)表达及活性变化的特点。方法将70只Wistar大鼠随机分为脂多糖致伤组和地塞米松治疗组,采用RT-PCR和Western blot在mRNA水平和蛋白质水平测定致伤组肺组织GR,EMSA法测定肺组织GR活性。结果大鼠肺组织GR mRNA在致伤后表达下调,24h恢复至正常水平;肺组织GR蛋白质表达降低,伤后8h降至最低;肺组织GR活性在伤后1h降到最低,24h仍未恢复至正常水平。地塞米松治疗组在治疗后期不能有效维持GR活性。结论大鼠急性肺损伤肺组织GR蛋白表达降低,可能与mRNA表达降低及蛋白降解加速有关;GR活性被显著抑制,出现糖皮质激素抵抗。     

山莨菪碱对脑外伤后急性肺损害大鼠神经降压素含量的影响

目的 探讨山莨菪碱对重型颅脑损伤后发生急性肺损害时大鼠血浆、肺组织匀浆中神经降压素（neurotensin，NT）含量变化的影响。方法 通过放射免疫分析（RIA）方法测定大鼠脑外伤血浆及肺组织匀浆NT含量以及应用山莨菪碱后血浆、肺组织匀浆NT含量。结果 大鼠脑外伤组血浆及肺组织匀浆中NT含量明显高于正常对照组，山莨菪碱治疗组血浆及肺组织匀浆中NT含量明显降低。结论 血浆及肺组织匀浆中NT含量增高可能是参与脑外伤后急性肺损伤过程的一个重要因素，山莨菪碱通过降低血浆及肺组织中NT含量而发挥对颅脑损伤后急性肺损伤的保护作用。     

核因子-κB在大鼠肺型氧中毒发病中的作用

目的 探讨核因子(NF)-κB在大鼠肺型氧中毒发病中的作用.方法 32只SD大鼠随机分为正常对照组及230 kPa高压氧暴露2、6、10 h组.观察肺组织病理变化以及NF-κB和肿瘤坏死因子a(TNF-α)在肺组织中含量的变化.结果 (1)病理检查发现肺组织在高压氧暴露6 h组出现炎症改变,10 h组肺损伤加重.(2)肺组织细胞核中NF-κB P65含量在高压氧暴露2 h组中明显增高,6 h组中达高峰,10 h组中下降但仍高于正常对照组.(3)肺组织TNF-α mRNA表达及肺匀浆中TNF-α浓度在高压氧暴露6 h组中明显增高,10 h组中继续增高.结论 高压氧可以通过活化NF-κB诱导TNF-α高表达从而介导氧中毒的肺损伤.     

芥菜籽对BALB/c小鼠变应性接触性皮炎的作用研究

目的探讨食用5%芥菜籽饲料对小鼠变应性接触性皮炎模型的作用及机制。方法将30只SPF级雌性BALB/c小鼠随机分为芥菜籽组、模型对照组、正常对照组。模型对照组和正常对照组给予普通饲料,芥菜籽组给予含5%芥菜籽饲料。喂养3周后,用2,4-二硝基氟苯诱导小鼠ACD模型:实验第1、2天用0.5%2,4-二硝基氟苯溶液外涂于背部剃毛处,第6天用0.25%2,4-二硝基氟苯溶液外涂左耳背腹面进行激发。耳部激发24 h后,取小鼠耳片测量质量差,行HE染色观察局部炎症细胞浸润情况,采用ELISA方法检测血清TNF-α的变化。结果芥菜籽组小鼠耳片质量的改变明显小于模型对照组,局部炎症细胞计数明显减少,血清TNF-α值亦低于模型对照组(P<0.05)。结论喂饲5%芥菜籽饲料可有效抑制2,4-二硝基氟苯所诱导的小鼠ACD,显著减轻水肿和炎症细胞浸润,下调血清TNF-α。