供多年使用、多厂家试剂共用的HIV抗体干血棉球质控品应用研究

[目的]研究设计一种供多年使用,多厂家ELISA检测HIV抗体试剂盒共用的干血棉球质控品。[方法]用HIV抗体阴性血清稀释HIV抗体强阳性血清,制备成较高S/CO值的干血棉球质控品。根据不同厂家ELISA检测HIV抗体试剂盒敏感性的差异,标定出不同试剂盒检测干血棉球质控品S/CO值2～3时溶解液的各自用量。实验时,不同厂家试剂盒用不同用量的溶解液溶解干血棉球质控品,使之成为该厂家试剂盒S/CO值2～3的弱阳性质控血清,用于室内质量控制。[结果]干血棉球质控品置-20℃历时3年,经多个厂家的ELISA检测HIV抗体试剂盒对干血棉球质控品20次检测结果,其S/CO值的变异系数(cv)均﹤20%。[结论]使用干血棉球质控品大大减少了制备频次,简化了操作程序,为各级艾滋病检测实验室ELISA检测HIV抗体的室内质量控制提供了极大的方便。     

乙型肝炎病毒表面抗原室内质控血清制备及评价

目的制备HBs Ag检测的室内质控血清及对其应用进行评价。方法将若干HBs Ag阳性血清混匀,以及若干健康体检者血清混匀,经3 000 r/分离心15 min去除蛋白质沉淀,56℃加热30 min灭活处理备用。用处理后的正常血清对上述阳性标本做系列稀释至S/CO值2~3,用0.2μm滤膜过滤稀释好的质控血清除菌,按0.01%加入硫柳汞充分混匀,以每支0.5 m L分装、标记,-70℃保存备用。结果 HBs Ag自制质控血清质控图均值(x)、标准差(s)、变异系数(CV)分别为:2.60、0.08、3.07。自制HBs Ag质控血清在室温2℃~8℃、-20℃、-70℃不同温度储存连续检测至S/C0值失控,结果室温下6 d在控;2℃~8℃两周内在控;-20℃、-70℃储存条件下12月内稳定、在控,且-20℃、-70℃储存条件下12月内差异无统计学意义(P>0.05)。两个厂家不同试剂批号检测结果分析,每月检测20次,持续检测12个月,统计每月S/CO的、s、CV%,检测结果比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论自制弱阳性质控血清可用于HBs Ag室内质控血清制备与评价,质控效果和稳定性均符合国家质控物要求。     

CLIA与ELISA法在乙肝病毒感染性标志物检测中的应用价值分析

目的探讨化学发光免疫分析法(Chemi luminescence Immunoassay,CLIA)与酶联免疫吸附试验法(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)在乙肝病毒感染性标志物检测中的应用价值。方法选取2015年7月—2016年9月疑似乙型肝炎患者268例作为研究对象。分别使用CLIA与ELISA法检测HBs Ab、HBs Ag、HBe Ag、HBe Ab、HBc Ab五项指标,对比两种方法的检测率。结果 CLIA法对HBe Ag、HBs Ag、HBe Ab标志物检出率比ELISA法高,差异有统计学意义(均P<0.05);当低水平HBs Ag检测值>1.0 IU/ml时,ELISA法与CLIA法检测结果相同;而当低水平HBs Ag检测值<0.01时,CLIA法检测HBs Ag低水平结果高于ELISA法检测HBs Ag低水平结果,差异有统计学意义(P<0.05);CLIA法最低检出浓度为0.03 IU/ml,ELISA法最低检出浓度为0.13 IU/ml。结论 CLIA能定量检测乙肝病毒感染标志物HBs Ab、HBs Ag指标,比ELISA法检测具有更高的准确性,更有利于临床乙肝病毒的早期诊断及病情监测。     

抗-HBe抗体室内质量控制探讨

目的探讨使用低值质控品在乙肝抗-HBe抗体室内质控的意义,并通过使用日期-吸光度描点的质控图指导对抗-HBe抗体进行室内质控。方法对2006年3月抗-HBe抗体检测结果进行统计分析,绘制质控图,并对质控图进行分析。结果抗-HBe抗体的临界值与质控品的吸光度值统计有统计学差异,通过绘制质控图可以对质控品和操作过程进行质量控制。结论采用临界值-质控品吸光度值质控图更能直观的反应整个检测过程和检测结果的可靠性,且节省计算量。     

应用回归方程延续HBsAg酶免实验质控图

目的研究应用回归方程解决不同批号酶免试剂间室内质量控制延续性问题。方法以HBsAg酶免测定室内质量控制为对象,每工作日用两个批号试剂盒（其中一个为对照）同时测定日常质控品,常规进行室内质控并绘图;换用新试剂盒时以新旧试剂测定HBsAg系列浓度质控品,计算它们的S/CO值,求得其回归方程间系数,新试剂盒OD值乘上该系数后点在原质控图上。观察、分析各点在质控图上的位置、走势等情况。评价它们的符合性、效果。结果有三个批号酶免试剂测定同一质控物,其经过回归方程处理前后绘制的质控图,其走势、位置等基本一致,无明显改变。结论本方法可以解决不同批号酶免试剂室内质量控制做图连续性问题,并减少重复劳动,节约成本和时间。     

乙肝病毒血清标志物ECLIA法和ELISA法的比较分析

目的比较ELISA法和ECLIA法检测乙肝血清标志物的检测性能。方法用ELISA法(酶联免疫吸附法)和ECLIA(电化学发光法)对HBV血清标志物进行检测,并对强阳性标本进行稀释。结果对120例患者的血清进行HBV五项的检测,ELISA法和ECLIA法对HBs Ag、HBs Ab、HBe Ag三项标志物的检出率无显著性差异(P0.05),但对HBe Ab和HBc Ab的检测,电化学发光法检出率明显高于ELISA法(P0.05)。结论乙肝病毒血清标志物的检测,ECLIA法检测血清乙肝标志物的灵敏度和自动化程度均高于ELISA法,并可动态观察疗效和监测病情。     

酶联免疫吸附试验中HIV抗体室内质控品的制备及应用

目的制备酶联免疫吸附试验(ELISA)检测中HIV抗体室内质控品。方法用HIV抗体阴性血清,按1∶1、1∶2、1∶4、1∶8稀释ELISA试剂盒中HIV阳性对照品,检测不同稀释度的HIV抗体,选择S/CO=2～4倍临界值作为弱阳性质控品的稀释倍数,大批量配制,分装,-20℃储存。将自制质控品与日常血清样品同时检测HIV抗体,每月统计检测S/CO均值、标准差和变异系数,监测其均一性和稳定性。结果经单因子方差分析自制的弱阳性质控品均一性无显著性差异,12个月中HIV抗体S/CO均值在2～3之间,变异系数20%,稳定性良好。结论自制的HIV抗体质控品均一性、稳定性良好,保存期达12个月,可作为ELISA检测中弱阳性质控品使用。     

质控品在血液检测试剂质量抽检中注意的问题

为保证血液检测质量,几年来我们一直坚持对每批进货的血液检测试剂盒(ELISA法)进行质量抽检,对照样本主要为血清盘或质控血清,评价方法只要检测结果符合血清盘/质控血清说明书规定要求即视为该批试剂合格,相对很少关注试剂批间变异系数(CV值)的差异.因此对检验科实验室质控图的建立、试验的重复性、试验的敏感性都产生不同程度的影响.新颁布的《中国输血技术操作规程(2012版)》4.2.5.4对血液检测试剂质量抽检的样本进行了明确规定[1,2],即"试剂盒对照、室内质控品、实验室自制或商品化的血清盘.     

以质控品浓度为指标的ELISA室内质控方法研究

目的探寻更好的ELISA室内质控方法。方法在每次ELISA试验时,同时检测临界标准品和质控品,依据所测得的临界标准品和质控品的吸光度以及临界标准品的浓度计算出质控品的浓度。根据所得的质控品的浓度计算出其均值作为靶值,以普遍可以接受的CVl5％设定控制线,建立Levey—Jennings质控图。结果使用该质控方法不但质控结果变异小,更换试剂批号时无需更换质控图,而且可以直接反映出检测的灵敏度。结论以质控品浓度为指标的ELISA室内质控方法明显优于以OD／CO为指标的ELISA室内质控方法。     

血站用部分ELISA试剂的稳定性分析与评价

目的探讨本站使用的乙型肝炎病毒表面抗原、丙型肝炎病毒抗体ELISA试剂的批内和批间变异,以评价ELISA试剂在本站使用过程中的稳定性。方法室内质控品与血液检测标本在相同的检测条件下进行检测,按相同批次的试剂盒计算其批内CV;按相同批次的室内质控品不同批次的试剂盒计算其批间CV。结果乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)酶联免疫诊断试剂盒和丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV)酶联免疫诊断试剂盒,每种试剂均采用进口试剂与国产试剂同时进行检测。国产试剂的批内变异为:8.1%~17%,批间变异为:6.6%~19%;进口试剂的批内变异为:5.7%~12.2%,批间变异为:6.5%~8.3%。结论所使用的国产与进口试剂的批内和批间差异均控制在20%以内,能满足《血站技术操作规程》的要求。