咬合重建大鼠三叉神经节CGRPmRNA及其相应蛋白的表达研究

目的：研究咬合重建对大鼠三叉神经节降钙素基因相关肽（calcitonin gene-related peptide,CGRP）及CGRPmRNA表达的影响。方法：Wistar雄性大鼠48只,随机均分为3个实验组及正常对照组。实验组动物间断磨除右上、下颌磨牙牙冠至龈下,有2组分别第3周、第9周停止磨牙,任其自行萌出,恢复咬合关系。双侧三叉神经节（trigeminal ganglia,TG）切片行CGRP免疫组织化学反应（SABC法）和原位杂交反应。光镜观察拍片,并用I mage Pro Plus5.1图像分析软件进行测定。SPSS10.0软件行统计分析。结果：单侧咀嚼实验组咀嚼侧和非咀嚼侧TG内CGRP免疫阳性神经元百分比与对照组比较显著降低（P〈0.01）,其非咀嚼侧明显低于咀嚼侧（P〈0.01）,而CGRPmRNA阳性神经元百分比显著增高（P〈0.01）,非咀嚼侧明显高于咀嚼侧（P〈0.01）。晚期恢复咬合实验组TG内CGRP和CGRPmRNA表达情况与单侧咀嚼实验组一致。结论：早期恢复咬合关系TG内CGRP和CGRPmRNA表达可恢复正常,晚期恢复咬合关系其表达不能恢复正常,CGRP和CGRPmRNA参与了单侧咀嚼引起的颞颌关节病的病理变化过程。     

牙齿损伤后降钙素基因相关肽和胶质源性神经生长因子在三叉神经节中的表达变化

目的:探讨降钙素基因相关肽(CGRP)和胶质源性神经生长因子(GDNF)在大鼠磨牙损伤后不同时段三叉神经节中表达变化。方法:制备大鼠磨牙机械损伤的模型,对其三叉神经节中CGRP和GDNF进行免疫组化染色。结果:在正常三叉神经节中CGRP呈阳性反应,GDNF染色呈阴性;损伤后即刻组CGRP染色阳性,GDNF少许表达;3天组GDNF染色强阳性;损伤5天后CGRP染色强阳性,GDNF表达开始减弱;损伤9天后两者表达恢复到正常水平。结论:CGRP和GDNF参与并促进牙齿损伤后的痛过敏及神经再生修复。     

重度磨耗对大鼠三叉神经节中CGRP表达的影响

目的：探讨重度磨耗对大鼠三又神经节中降钙素基因相关肽（calcitonin gene—related petide,CGRP）表达的影响。方法：8周龄雄性SD大鼠75只,随机平均分为操作对照组、空白对照组和实验组,每组各25只,实验组用人工逐次磨低大鼠牙冠高度的方法建立重度磨耗动物模型。各组分别于干预后3、7、14、21、28天处死5只动物,取出双侧三叉神经节,通过免疫荧光染色的方法观察三叉神经节中CGRP的表达变化。结果：与空白对照组和操作对照组相比,实验组3天组和7天组的CGRP阳性神经元数量明显增加（P〈0．05）,14天组和21天组CGRP阳性神经元数量有所减少,但仍明显多于对照组（P〈0．05）,28天组基本恢复正常（P〉0．05）。结论：重度磨耗可导致大鼠三叉神经节内CGRP表达的可逆性变化。     

正畸牙齿移动过程中大鼠三叉神经节CGRP mRNA表达变化

目的：观察正畸牙齿移动不同时期大鼠三叉神经节CGRP mRNA表达变化。方法：采用反转录。聚合酶链反应（RT-PCR）技术检测正畸加力和撤力后不同时期大鼠三叉神经节CGRP mRNA水平的变化。结果：加力后2h CGRP mRNA的表达量没有明显增加,至加力后8h开始增加,加力1d-1W达到最高峰,至撤力后2～4WCGRP mRNA的表达量开始下降,但CGRP mRNA水平仍然明显高于对照组（P〈0．05）。结论：CGRP可能不仅参与早期正畸牙周组织的炎症损伤过程,而且可能参与了后期的组织修复重建过程。     

咬合重建对大鼠三叉神经节降钙素基因相关肽表达影响的研究

目的：研究咬合重建对大鼠三叉神经节降钙素基因相关肽（calcitonin gene—related peptide,CGRP）表达的影响。方法：Wistar雄性大鼠30只,随机分为3个实验组及相应的正常对照组,每组5只。实验组动物间断磨除右侧上、下颌磨牙牙冠至龈下,有二组分别于第3周、第9周停止磨牙,任其自行萌出,恢复咬合关系。双侧三叉神经节（trigeminal ganglia,TG）切片行CGRP免疫组化染色（SABC法）。光镜观察,并用Image Pro Plus 5．1图像分析软件进行测定。结果与对照组比较。进行统计学分析。结果：单侧咀嚼实验组咀嚼侧和非咀嚼侧TG内CGRP免疫阳性神经元百分比与对照组比较显著降低（p〈0．01,p〈0．05）,非咀嚼侧明显低于咀嚼侧（p〈0．01）。早期恢复咬合实验组TG内免疫阳性神经元百分比与对照组比较无差异（p〉0．05）,咀嚼侧与非咀嚼侧比较无差异（P〉0．05）。晚期恢复咬合实验组TG内免疫阳性神经元百分比与对照组比较显著降低（p〈0．01,p〈0．05）,非咀嚼侧明显低于咀嚼侧（p〈0．05）。结论：早期恢复咬合关系,TG内CGRP表达可恢复正常,晚期恢复咬合关系,CGRP表达不能恢复正常,CGRP参与了单侧咀嚼引起的颞颌关节病的病理变化过程。     

卫星胶质细胞活化在束缚应激致大鼠咬肌痛觉敏感中的作用

目的:观察慢性心理应激致咬肌痛觉敏感中三叉神经节卫星胶质细胞活化和P物质释放的关系。方法:40只健康雄性SD大鼠随机分为空白对照组、束缚应激3 d组、束缚应激7 d组、束缚应激14 d组。用体质量检测、旷场实验观察束缚应激后大鼠是否产生焦虑、抑郁样情绪;用Von Frey电子测痛仪检测大鼠咬肌痛阈。用免疫组织荧光染色法检测三叉神经节卫星胶质细胞活化的标志物神经胶质酸性蛋白(Glial fibrillary acidic protein, GFAP)及神经肽P物质(Substance P, SP)免疫阳性产物的变化。结果:受束缚应激后,大鼠体质量增长明显低于对照组,在旷场中总移动距离和总移动速度均明显降低,提示大鼠处于焦虑、抑郁样情绪状态。束缚应激后大鼠咬肌机械性痛阈明显降低;提示大鼠咬肌痛敏增强。束缚应激7 d、14 d组大鼠三叉神经节内GFAP及SP的表达明显高于空白对照组。结论:慢性心理应激可导致三叉神经节中的卫星胶质细胞活化,神经元SP表达升高。因此,三叉神经节中卫星胶质细胞和神经元的活化可能参与了慢性心理应激引起咬肌痛觉敏感升高过程。     

大鼠正畸牙移动过程中TRPV1和CGRP在三叉神经节中的表达变化

目的建立SD大鼠正畸牙移动模型,研究牙移动过程中,三叉神经节(trigeminal ganglion,TG)中瞬时受体电位香草酸亚型1（transient receptor potential vanilloid 1,TRPV1）及降钙素基因相关肽(calcitonin gene related peptide,CGRP)的表达位置及表达量的变化规律,进而探讨其在正畸疼痛中的作用机制。方法将66只SD大鼠随机分为空白对照组（6只）、假手术组（6只）和实验组（54只）。建立正畸牙移动模型,实验组大鼠施加50 g力后,分别于4、8 h、1 d（1 d组按力值大小分为1 d-30 g、1 d-50 g、1 d-80 g 3个亚组）、3、5、7、14 d,随机处死6只,切取三叉神经节,采用免疫荧光技术分别检测大鼠三叉神经节中TRPV1及CGRP的表达位置及表达量变化。采用SPSS16.0软件包对数据进行统计学分析。结果免疫荧光染色显示,TRPV1及CGRP主要表达于小型及中型神经元。随着加力时间的延长,三叉神经节中TRPV1免疫反应阳性（TRPV1-IR）神经元百分比及CGRP免疫反应阳性（CGRP-IR）神经元百分比增加,1~3 d相继达到高峰,之后逐渐降低,回落至初始水平,且两者随加力力值增大而呈现增高趋势。结论大鼠正畸牙移动过程中,三叉神经节内TRPV1及CGRP的表达随加力时间及加力力值改变呈现规律性变化,提示TRPV1及CGRP可能在正畸疼痛的发生机制中具有重要作用。     

降钙素基因相关肽和神经生长因子在损伤牙齿中的表达变化

目的：探讨降钙素基因相关肽（CGRP）和神经生长因子（NGF）在损伤牙齿中的表达变化及作用。方法：应用免疫组织化学方法，比较正常和机械损伤状态下CGRP和NGF在牙髓组织中的变化。结果：在正常牙髓组织中CGRP呈阳性反应，NGF染色呈阴性；损伤后即刻组CGRP染色弱阳性，NGF开始表达,3d组NGF牙髓染色强阳性；损伤5d后CGRP染色强阳性，NGF表达开始减弱；损伤9d后两者表达恢复到正常水平。结论：CGRP和NGF可能参与并促进牙齿损伤后的痛过敏和神经再生修复。     

神经生长因子在牙齿损伤后三叉神经节中的表达变化

目的：探讨神经生长因子（NGF）在牙齿损伤过程中的变化。方法：制备大鼠磨牙机械损伤的模型，对其三叉神经节中NGF进行免疫组化染色。结果：正常对照组NGF在三叉神经节中低水平表达；损伤1－3d时表达明显增强；损伤5d后表达开始减弱；损伤9d后表达恢复至正常水平。结论：NGF可能参与牙齿损伤后的反应并促进其修复。     

实验性牙移动三叉神经节内降钙素基因相关肽改变

目的：观察实验性牙移动后,初级感觉神经元兴奋性递质降钙素基因相关肽（CGRP）的改变。分析正畸疼痛时,初级感觉神经元痛信号发生、传导及敏感化机制。方法：制备大鼠实验性牙移动动物模型,采用免疫荧光染色法和RT-PCR法分别观察不同时间点三叉神经节内CGRP免疫阳性结构的改变及CGRP mRNA表达的变化。结果：实验性牙移动后,实验侧三叉神经节（TG）内CGRP-ir节细胞以及CGRP mRNA的表达强于对侧。结论：实验性牙移动后,初级感觉神经元中痛感受兴奋性神经递质CGRP的合成、表达增加。表明实验性牙移动影响了初级感觉神经元痛信号的发生、传导,使之致敏。     

实验性牙髓炎大鼠三叉神经系统CGRP的动态表达

目的:观察牙髓炎大鼠三叉神经节及牙髓中CGRP的分布,探讨神经系统参与牙髓病理改变的信号调节作用。方法:建立完全弗氏佐剂诱发的大鼠牙髓炎及痛敏模型,应用免疫组化法标记CGRP的表达变化。结果:炎症刺激后,初级感觉神经元及其轴突的CGRP表达明显增强,1周后显著性减少。而牙髓CGRP阳性传出神经纤维在牙髓炎症刺激后显著减少,1周后呈回升趋势。结论:三叉神经系统通过调节CGRP的表达参与牙髓的炎症及痛觉过敏过程。     

CD16参与大鼠外周神经损伤及痛觉过敏的研究

目的:观察实验性大鼠神经损伤过程中CD16在三叉神经节的动态表达和分布,探讨三叉神经系统通过神经免疫反应参与外周神经损伤及痛觉过敏的潜在机制。方法:建立大鼠眶下神经慢性压榨损伤动物模型,应用免疫荧光标记观察CD16在三叉神经节的表达和分布,通过与CGRP的相关性分析,检测痛觉过敏过程中CD16的参与作用。结果:大鼠眶下神经压榨性损伤72 h后,三叉神经节初级感觉神经元CD16的表达显著性增强,5 d后达峰值,且神经元内CD16的表达与CGRP的表达具有显著相关性。结论:三叉神经系统初级感觉神经元细胞表达CD16,并参与外周神经损伤和痛觉过敏过程。     

实验性牙移动三叉神经节内神经生长因子受体mRNA的改变

目的:观察实验性牙移动时,NGF受体-TrkA mRNA在三叉神经节内的改变,方法:采用RT-PCR方法研究实验性牙移动后,三叉神经节内TrkA mRNA表达的改变。结果:实验性牙移动后6 h,实验侧TrkA mRNA的表达开始增加;24 h、3 d,1周实验组三叉神经节内TrkA mRNA的表达强于对照组;2周组,实验侧TrkA mRNA的表达恢复至正常水平。结论:实验性牙移动时,三叉神经节内TrkA的表达升高。     

牙髓损伤性刺激对三叉神经节中前速激肽原等mRNA的影响

目的：比较和分析急性牙髓炎和牙齿开髓刺激对三叉神经节中ＰＰＴＡｍＲＮＡ、β－ＣＧＲＰｍＲＮＡ的影响。方法：利用斑点杂交分析方法。结果：开髓１ｈ后两种ｍＲＮＡ表达增高，２ｈ持续增高，４ｈ仍维持较高水平。炎症２ｈ组两种ｍＲＮＡ均有高表达，４ｈ组ｍＲＮＡ含量高于２ｈ组。任何一组的ＣＧＲＰｍＲＮＡ杂交信号强于ＰＰＴＡｍＲＮＡ杂交信号。结论：两种刺激均增加三叉神经节中Ｐ物质（ＳＰ）、降钙素基因相关肽（ＣＧＲＰ）的合成     

正畸牙齿移动过程中大鼠三叉神经节PPTA mRNA表达变化

目的：观察正畸牙齿移动不同时期大鼠三叉神经节PPTA mRNA表达变化。方法：采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测正畸加力和撤力后不同时期大鼠三叉神经节PPTA mRNA水平的变化情况。结果：加力后2h大鼠三叉神经节PPTA mRNA的表达量开始增加，加力8h至加力3d达到最高，至撤力后2～4周PPTA mRNA的表达量开始下降，但PPTA mRNA水平仍然明显高于对照组。结论：正畸牙齿移动过程中大鼠三叉神经节PPTA mRNA表达发生了明显的变化。提示P物质可能不仅参与早期正畸牙周组织的炎症损伤过程，而且可能参与了后期的组织修复重建过程。     

Temporal changes in inflammatory mediator concentrations in an adjuvant model of temporomandibular joint inflammation

AIMS: To determine temporal changes in the concentrations found in the temporomandibular joint (TMJ) and trigeminal ganglion of 3 specific classes of inflammatory mediators commonly linked with conditions of joint inflammation. The intent was to determine whether concentrations of the neuropeptide calcitonin gene-related peptide (CGRP), the neurotrophin nerve growth factor (NGF), and the proinflammatory cytokines interleukin-1beta (IL1beta) and tumor necrosis factor-alpha (TNF-alpha) are altered in the trigeminal ganglion and TMJ tissues during various stages of adjuvant-induced inflammation of the rat TMJ. METHODS: Adult male rats received bilateral TMJ injection of complete Freund's adjuvant (CFA), while control rats did not receive CFA treatment. The trigeminal ganglion and TMJ tissues were collected at 2 days, and 2, 4, and 6 weeks postinjection and analyzed using either radioimmunoassay or enzyme-linked immunosorbent assay. RESULTS: In the trigeminal ganglion, both CGRP and NGF concentrations were significantly elevated in comparison to controls from 2 days to 4 weeks; however, the patterns of increase differed. Concentrations of each inflammatory mediator were significantly elevated in the TMJ tissues of CFA-injected animals at 2 days and continued to be significantly elevated throughout the 6-week period. CGRP content remained at peak levels from 2 days through 6 weeks, while peak content for NGF, IL-1beta, and TNF-alpha was found at 2 days through 2 weeks. CONCLUSION: The results suggest that the development of CFA-induced inflammation of the TMJ was accompanied by a variable increase in the concentration of different classes of inflammatory mediators in both the trigeminal ganglion and TMJ tissues, which implies that each class of inflammatory mediator may play a significant role during different stages in the onset and exacerbation of the inflammatory process.