单侧迷路破坏术后GABAA受体β2亚型在前庭内侧核中的变化

目的:观察单侧迷路破坏术后前庭内侧核(MVN)内γ-氨基丁酸A受体(GABAA receptor)2β亚型的表达变化。方法:利用免疫组织化学、蛋白免疫印记法(Western blot),切除大鼠一侧迷路,观察前庭内侧核区GABAA受体β2亚型表达的变化,及其在前庭代偿中可能的作用。结果:手术两侧比较及术后1 d3、d、7 d组与假手术组比较差异均无显著性意义(P>0.05)。结论:在前庭代偿的早期,GABAA受体β2亚型表达的变化极可能没有涉及前庭代偿。     

银杏叶制剂对一侧迷路切除后前庭内侧核区突触素表达的影响

目的　观察银杏叶制剂对左侧迷路切除后前庭内侧核 (medial vestibular nucleus,MVN )区突触素(synaptophysin)表达的影响 .方法　健康成年豚鼠 15只 ,随机分 3组 :正常对照组、迷路切除 (U L)组和 UL+金纳多(EGb)组 ,ip EGb,5 0 mg· kg- 1 · d- 1 ,共 30 d.左侧迷路切除后 ,不同存活时间行前庭内侧核突触素二步法免疫组化染色 .结果　一侧迷路切除 (unilateral labyrinthectomy,UL )后 10h,受损侧 MVN突触素免疫反应强度降低 ,2 0 d有所增加 (P<0 .0 5 ) ,90 d明显恢复至正常 (P>0 .0 5 ) .未损侧突触素免疫反应强度在不同时间段与正常对照无显著差别 .U L+金纳多 (EGb)组受损侧 ,术后 10 h及 2 0 d较同期 UL组 MVN突触素免疫反应强度高 (16 7.0± 2 .7,172 .5± 2 .0 vs 15 9.9±1.9,16 9.2± 3.1,P<0 .0 5 ) ,但术后 90 d与正常对照无显著差别 (P>0 .0 5 ) .结论　U L+EGb组突触密度恢复较 UL 组快 .前庭代偿及银杏叶制剂促进前庭代偿与前庭核区结构的调整有关 .银杏叶提取物对失支配侧前庭核的结构重塑具有易化作用     

组胺受体H1和H4在过敏性炎症中的作用:新型抗组胺药的研究

组胺在过敏性炎症中起关键性作用,长期以来人们认为组胺释放引起的炎性反应是由H1受体介导的.H1受体拮抗剂也称为抗组胺药,用于治疗过敏性反应已很多年.但是在哮喘和慢性瘙痒症的病理状态下组胺的重要性可能被低估.已证明组胺的确在炎症和免疫调节疾病中起作用,特别是H4受体的发现及其在多种免疫和炎性细胞中的表达,提示应重新评价组胺的作用,预示新型H4受体拮抗剂将被发现,且H1,H4受体拮抗剂在许多炎性反应靶标上可能有协同作用.     

大鼠前庭内侧核γ-氨基丁酸受体mRNA的表达

γ-氨基丁酸(gamma-aminobutyric acid, GABA)是前庭传入神经系统的抑制性神经递质,GABA的A受体或B受体的拮抗剂都能改变前庭神经元的放电[1],提示前庭神经核内存在着GABA的两种受体.然而,前庭中枢究竟存在着哪些GABA受体的亚基/亚型,目前少见报道.本研究旨在探明前庭核内GABA的受体亚基/亚型,以进一步明确其神经化学基础.     

哮喘豚鼠脑内组胺含量的变化及中枢组胺H3受体的调节作用

目的　检测豚鼠哮喘急性发作时脑内组胺含量的变化 ,观察中枢组胺H3受体在哮喘未发作时对脑内组胺含量的影响。方法　哮喘急性发作组豚鼠给予腹腔注射卵蛋白致敏 ;阴性对照组豚鼠给予腹腔注射等量生理盐水 ;THIO组豚鼠在哮喘未发作期侧脑室内注射H3受体拮抗剂thioperamide (2 0 μg) ;生理盐水组豚鼠在哮喘未发作期侧脑室内注射等量生理盐水。断头处死动物后 ,在冰台上迅速分离出下丘脑、大脑皮质和海马 ,称重 ,匀浆 ,荧光法测定组胺含量。结果　哮喘急性发作组 ,下丘脑和大脑皮质中的组胺含量高于阴性对照组 ,差异有显著意义 (P <0 0 1) ;海马内组胺含量差异无显著意义 (P >0 0 5 )。哮喘未发作期侧脑室注射thioperamide后 ,下丘脑和大脑皮质中的组胺含量均升高 ,与生理盐水组比较差异有显著意义 (P <0 0 5 ) ,海马内组胺含量无显著变化 (P >0 .0 5 )。结论　中枢组胺含量与哮喘发作有关 ,脑内组胺H3受体可能通过调节组胺含量参与哮喘发病的病理生理过程     

组胺H1 受体在新生大鼠离体延髓脑片呼吸神经元电活动中的作用

目的探讨组胺H1受体对新生大鼠延髓脑片吸气神经元放电的调制作用。方法制作新生大鼠离体延髓脑片标本,保留舌下神经根,使用改良Kreb's液(MKS)灌流延髓脑片。用吸附电极记录到舌下神经根呼吸相关节律性放电活动(RRDA)后,以细胞外记录方式在面神经后核内侧区同步记录吸气神经元放电活动。稳定记录吸气神经元放电20min后,用5μmol/L组胺灌流延髓脑片20min;使用空白MKS冲洗至RRDA和吸气神经元放电基本恢复后;再用含组胺H1受体特异拮抗剂10μmol/Lpyrilamine的MKS灌流脑片。观察组胺和pyrilamine对吸气神经元放电的呼吸周期(RC)、吸气时程(TI)、呼气时程(TE)、放电积分幅度(IA)和单位放电的峰频率(PF)等指标的作用。结果给予组胺后,吸气神经元放电的RC缩短25.86%、TE缩短27.03%,TI、IA和PF无变化;使用pyrilamine后RC延长21.46%、TE延长22.15%,TI,IA和PF无变化。结论组胺H1受体参与调节新生大鼠离体延髓脑片吸气神经元放电活动。激活H1受体对吸气神经元放电有兴奋作用。     

大鼠前庭内侧核与前庭传出神经元间的直接投射通路及其电生理特性

目的:证实新生大鼠前庭内侧核（MVN）与前庭传出（VE）神经元之间的直接投射通路并观察该通路的电生理特性。方法:选用新生（9±1）d的Wistar大鼠,雌雄不限。通过全细胞膜片钳记录技术,刺激MVN,记录VE的突触后电流;逆行刺激脑干面神经膝部（g7）内侧VE的分布区,记录MVN区域传入神经元的动作电位,并使用生物胞素...     

组胺受体H1和H4在过敏性炎症中的作用：新型抗组胺药的研究

组胺在过敏性炎症中起关键性作用, 长期以来人们认为组胺释放引起的炎性反应是H₁受体介导的。H₁受体拮抗剂也称为抗组胺药, 用于治疗过敏性反应已很多年。但是在哮喘和慢性瘙痒症的病理状态下组胺的重要性可能被低估。已证明组胺的确在炎症和免疫调节疾病中起作用,特别是H₄受体的发现及其在多种免疫和炎性细胞中的表达,提示应重新评价组胺的作用,预示新型H₄受体拮抗剂将被发现,且H₁,H₄受体拮抗剂在许多炎性反应靶标上可能有协同作用。     

Zmu-1:DHP豚鼠气道对组胺的敏感性与组胺H1受体表达量的相关性研究

目的　研究Zmu-1：DHP豚鼠气道对组胺诱导产生的反应及气道组胺H1受体的表达量,阐明豚鼠气道敏感性与组胺H1受体数量的关系,为哮喘研究提供具有较高敏感性的速发型过敏的动物模型。方法　通过活体气管插管及雾化组胺气体吸入,测定豚鼠气道阻力和肺动态顺应性;采用离体气管片组胺滴定法,通过气管片收缩测定气管平滑肌对组胺的敏感性;采用同位素标记药物配位法,测定豚鼠气道组织组胺H1受体的密度及平衡解离常数。结果　当豚鼠吸入大于0.5mg/ml雾化组胺时,Zmu-1：DHP豚鼠气道阻力上升率和肺动态顺应性下降率与DHP豚鼠相比,其速度有增大趋势,但未达到显著水平 (P >0 0 5 );两个品系豚鼠雄性个体比雌性的敏感性显著增加（P <0.01）。当组胺浓度为10-5M和10-4M时,Zmu-1：DHP豚鼠气管片平滑肌的收缩率显著大于DHP豚鼠 (P <0.01-0.05 )。两个品系豚鼠气道组胺H1受体的密度及其平衡解离常数无显著差异(P >0 0 5 )。 结论　在一定的组胺浓度范围内,Zmu-1：DHP豚鼠气道平滑肌对组胺的敏感性大于DHP豚鼠,雄性豚鼠的敏感性大于雌性豚鼠。豚鼠气道对组胺的敏感性与其组胺H1受体数量未表现出显著的相关性,提示气道反应可能还受到平滑肌膜上其它受体和化学介质的作用。     

下丘脑室旁核组胺H3受体对哮喘大鼠呼吸运动的调节

目的:探讨下丘脑室旁核(PVN)组胺H3 受体对哮喘大鼠呼吸运动的影响及其作用机制。方法:将大鼠随机分为对照组、模型组、假手术组、生理盐水组、PVN内微量注射特异性组胺H3 受体激动剂R- (α) - 甲基组胺[(R -(α) - methylhistamine ,R- (α) -MeHA]的R- (α) - MeHA组以及PVN内微量注射组胺H3 受体拮抗剂thioperamide(Thio)的Thio组,采用中枢立体定位技术,在PVN植入带芯的不锈钢外套管,通过内管恒速注射不同药物。用电生理方法记录膈肌肌电活动;用胸内压法测定气道阻力、肺顺应性。结果:与对照组比较,模型组膈肌放电频率增加,膈肌肌电积分幅值下降,气道阻力增加,肺顺应性降低(均为P <0 .0 1)。与生理盐水组比较,R- (α)- MeHA组膈肌放电频率下降(P <0 .0 1) ,膈肌肌电积分幅值增加(P <0 .0 5 ) ,气道阻力降低(P <0 .0 1) ,肺顺应性改善(P <0 .0 1) ;Thio可阻断上述效应,差异均有统计学意义。结论:PVN内组胺H3 受体参与呼吸运动的调节,特异性激动组胺H3 受体能改善哮喘大鼠的肺功能。     

银杏制剂对一侧迷路切除后前庭内侧核超微结构影响

目的 观察豚鼠一侧迷路切除（unilateral labyrinthectomy,UL）后前庭功能的恢复情况，前庭内侧核超微结构的变化及银杏叶标准提取物(standard extract of Gink-go biloba,EGb）金纳多对其的影响。方法 切除豚鼠左侧迷路，采用自然恢复和EGb给药两种处理，对比旋转后眼震与前庭内侧核超微结构变化的差别。结果 银杏叶标准提取物能明显促进一侧迷路切除后旋转后眼震的恢复，在超微结构方面，术后1wk，迷路切除（UL）组与迷路切除＋金纳多（UL＋EGb）组差别不明显；术后90d，UL组可见末梢突触增多，突触小泡密集，但神经元的突触结构未见增多；UL＋EGb组可见末梢与神经元突触结构均增多，突触小泡也明显增多。结论 银杏叶标准提取物能够促进前庭动态症状的恢复，恢复的发生可参与前庭区突触结构的增多、功能增强有关。     

豚鼠一侧前庭损毁后前庭内侧核GFAP表达

目的 观察左侧迷路切除后前庭内侧核（MVN）胶质纤维酸性蛋白（GFAP）的表达变化。方法 左侧迷路切除后,不同存活时间行前庭内侧核GFAP二步法免疫组化染色。结果 一侧迷路切除（UL）后可诱导双侧MVN区星形胶质细胞GFAP免疫反应增强,且术侧大于未损侧,GFAP反应在术后10h已较正常对照增强,20h强于10h,此后40h至20dGFAP反应处于下降趋势,结论 UL后可诱导MVN区胶质细胞GFAP免疫反应增强,初级前庭传入或中枢前庭神经元的静息放电降低可能与胶质细胞反应有关,但其在前庭代偿中的作用尚有待研究。     

Muscarinic acetylcholine receptor subtype expression in type vestibular hair cells of guinea pigs

Recent studies have demonstrated that five subtypes (M1-M5) of muscarinic acetylcholine receptor (mAChR) are expressed in the vestibular periphery.However,the exact cellular location of the mAChRs is n...     

Zmu-1:DHP和DHP两个品系豚鼠组胺激发试验气道反应性的比较

目的 研究Zmu-1:DHP和DHP豚鼠组胺激发试验气道反应性的差异,为哮喘研究提供具有较好反应性的动物模型.方法 通过活体气管插管及雾化组胺气体吸人,测定豚鼠气道阻力和肺动态顺应性;采用离体气管片组胺滴定法,通过气管片收缩测定气管平滑肌对组胺的敏感性;采用同位素标记药物配位法,测定豚鼠气道组织组胺H1受体的密度及平衡解离常数.结果 当豚鼠吸人大于0.5 mg/mL雾化组胺时,Zmu-1:DHP豚鼠气道阻力上升率和肺动态顺应性下降率与DHP豚鼠相比,其速度有增大趋势,但未达到显著水平(P＞0.05);两个品系豚鼠雄性个体比雌性的敏感性显著增加(P＜0.01).当组胺浓度为10-5 mol/L和10-4 mol/L时,Zmu-1:DHP豚鼠气管片平滑肌的收缩率显著大于DHP豚鼠(P＜0.01 ～0.05).两个品系豚鼠气道组胺H1受体的密度及其平衡解离常数无显著差异(P＞0.05).结论 在一定的组胺浓度范围内,Zmu-1:DHP豚鼠气道平滑肌对组胺的敏感性大于DHP豚鼠,雄性豚鼠的敏感性大于雌性豚鼠.两个品系豚鼠气道组胺H1受体数量无差异,提示气道反应可能还受到平滑肌膜上其它受体和化学介质的作用.     

碱性成纤维细胞生长因子及成纤维细胞生长因子受体在豚鼠前庭中的定位和表达

目的 :观察碱性成纤维细胞生长因子 ( b FGF)及成纤维细胞生长因子受体 ( FGFR)在豚鼠前庭终器的定位和表达。方法 :免疫组织化学。结果 :b FGF位于支持细胞和毛细胞的胞浆及胞核 ,FGFR位于支持细胞表面。b FGF及 FGFR在成年豚鼠表达较弱 ,新生豚鼠及庆大霉素内耳损伤豚鼠表达较强。结论 :提示 b FGF在豚鼠前庭终器发育、结构功能维持及损害后修复中起重要作用     

豚鼠发育过程前庭上皮ERK 1/2的表达

目的：检测胞外信号调控蛋白激酶1/2（extracellu-lar signal regulated kinase，ERK1/2）在豚鼠发育过程前庭上皮的表达和分布特点，并探讨其生物学特征及意义。方法：利用免疫组织化学的方法，以ERK1，ERK2抗体为标记物，检测发育期豚鼠前庭器中的表达情况及分布特点；利用West-ern bolt方法检测ERK1/2的活性变化。结果：ERK1/2可在豚鼠前庭上皮细胞中表达，随年龄增加而逐渐减少。ERK1/2的活性随年龄的增长而逐渐降低，且ERK2的活性高于ERK1。结论：正常豚鼠前庭上皮中有ERK1/2表达，其表达量及活性与细胞增殖、分化相一致，随发育过程而减少。     

胆碱能受体激动剂对豚鼠离体前庭毛细胞内钙离子浓度的影响

目的：通过观察胆碱能受体激动剂对离体前庭毛细胞内钙离子浓度的影响,探讨前庭毛细胞膜所存在的胆碱能受体及其分型、受体的脱敏现象。方法：用胶原酶消化后机械分离法,分离豚鼠壶腹嵴前庭毛细胞（VHC), 钙敏荧光探针 Fluo-3 荧光染色,用激光扫描共聚焦显微镜记录VHC细胞内游离钙离子浓度（[Ca2+]i）的动态变化。结果：①胆碱能M和N型受体激动剂乙酰胆碱(ACh)、氨甲酰胆碱(CCh)均可引起离体VHC内[Ca2+]i的升高;N型受体激动剂溴化乙酰胆碱(Ach-Br)仅在高浓度（10 mmol/L）时引起部分（4/5）离体VHC内[Ca2+]i升高,在低浓度(1mmol/L)时影响不明显;②ACh、CCh 引起 VHC内[Ca2+]i升高在同一细胞不能重复出现,存在脱敏现象;而不同类型的受体激动剂先后作用时无脱敏现象;③阿托品对ACh、CCh引起的VHC内[Ca2+]i的升高有抑制作用;加入 0.1 mmol/L 阿托品可使 1 mmol/L ACh 或 CCh 引起的 VHC 内[Ca2+]i升高的峰值明显减小(t检验均有极显著差异,P<0.01)。结论：豚鼠前庭毛细胞膜上存在 M 型和 N 型两种受体,M 型受体激动剂引起 VHC 内[Ca2+]i的升高较 N 型明显。阿托品对 M 型受体激动剂引起的[Ca2+]i 升高有抑制作用;前庭毛细胞膜上的胆碱能受体对同一类型的激动剂有脱敏现象,而不同类型的激动剂