石榴叶多糖亚临界水提取工艺的优化及其体外抗氧化活性

目的优化石榴Punica granatum L.叶多糖亚临界水提取工艺,并评价其体外抗氧化活性。方法在单因素试验基础上,以反应压力、料液比、提取时间、提取温度为影响因素,多糖得率为评价指标,Box-Behnken法优化提取工艺。再检测多糖对羟自由基、超氧阴离子、DPPH自由基的清除作用。结果最佳提取条件为反应压力5 MPa,料液比1∶27,提取时间11 min,提取温度155℃,多糖得率1.809%。清除率与多糖质量浓度呈量效关系,0.1 mg/m L多糖对羟自由基、超氧阴离子、DPPH自由基的清除作用最强,清除率分别为57.36%、70.51%、58.02%。结论该方法稳定可靠,可用于亚临界水提取有明显体外抗氧化活性的石榴叶多糖。     

黄连多糖提取工艺的优化及其体外抗氧化作用

目的探讨黄连多糖的最佳提取工艺及其体外抗氧化作用。方法单因素试验考察不同提取及样品处理方法对黄连多糖得率的影响,正交试验确定最佳提取条件,测定其对超氧阴离子自由基、羟自由基和DPPH自由基的清除作用。结果最佳提取工艺为粉碎过40目筛,回流提取,料液比、提取温度、时间及次数分别为1∶10、100℃、45 min和3次,平均得率为1.52%。同时,黄连多糖对超氧阴离子自由基、羟自由基和DPPH自由基均有一定的清除作用。结论该方法操作简便,条件温和,适合推广。     

响应面法优化金果榄多糖提取工艺及抗氧化活性研究

目的研究复合酶提取金果榄多糖的最佳条件,并探讨其体外抗氧化活性。方法复合酶种类及配比为纤维素酶∶果胶酶∶木瓜蛋白酶=1∶1∶1,液料比固定为20 mL/g,以金果榄多糖得率为响应值,在单因素试验基础上,以酶解pH值、酶解时间、复合酶添加量、酶解温度为自变量,采用响应面法建立数学模型,筛选最佳提取工艺;采用DPPH自由基、羟自由基(·OH)、超氧阴离子自由基(O_2~-·)清除能力体系评价金果榄多糖体外抗氧化活性。结果金果榄多糖最佳提取条件为:酶解pH值5.1,酶解时间56 min,复合酶添加量2.0%,酶解温度52℃。在此条件下多糖得率为14.03%,与理论值14.12%的相对误差5%。酶解温度对多糖得率影响最显著,酶解时间、酶解pH值次之,酶添加量影响最小。金果榄多糖对DPPH、·OH、O2_~-·清除的半数抑制浓度分别为1.358、0.927、1.096 mg/mL,与维生素C比较,抗氧化活性较弱。结论本研究优选的金果榄多糖复合酶法提取工艺方便可行,酶解得到的多糖具有较强的体外抗氧化活性。     

败酱多糖提取工艺优化及其抗氧化活性研究

目的:优化败酱多糖提取工艺,并评价其体外抗氧化活性。方法:在单因素考察的基础上设计正交试验,以提取时间、提取温度、料液比为考察因素,以多糖提取率为考察指标,优化败酱多糖的提取工艺;采用比色法考察其抗氧化活性。结果:最佳条件为提取时间3 h,提取温度100 ℃,提取次数3次,料液比1:25,多糖提取率为(3.42±0.27)%。多糖对1,1-二苯基-2-吡啶酰肼(DPPH)自由基具有较高的清除活性,对超氧阴离子和羟基的自由基清除作用相对不明显。结论:该方法稳定可靠,可用于提取具有较强抗DPPH活性的败酱多糖。     

石榴皮多糖的不同制备工艺及其生物活性比较

目的通过正交试验优化不同方法制备石榴皮多糖的工艺,并研究石榴皮多糖的体外生物活性,为石榴皮药材资源开发提供依据。方法分别以热水浸提法、超声波辅助水浸法和复合酶法提取石榴皮多糖,利用正交试验法优化石榴皮多糖提取工艺,采用不同的体外抗氧化和抑菌实验探索石榴皮多糖的生物活性。结果石榴皮多糖的最适提取条件分别为:料液比1∶35,提取温度为95℃,时间为1h,超声时间60min,超声温度55℃,料液比为1∶25,超声波功率140W;料液比1∶55、酶解温度60℃、酶解时间2h,复合酶浓度为1%,在此最佳条件下石榴皮多糖得率分别8.6%、8.2%和11.9%。其中热水浸提和超声波辅助提取的多糖都具有抑菌性,而且对大肠杆菌和谷草芽孢杆菌的抑菌性强于酵母菌。结论优化的石榴皮多糖提取工艺中,复合酶法制备的石榴皮多糖得率最高,三种不同方法制备的石榴皮多糖具有很强的超氧阴离子自由基和羟基自由基清除活性,适度的抗菌活性。     

不同提取方法对玄参多糖单糖组分和抗氧化活性的影响

目的研究不同提取方法对玄参多糖的提取率、纯度、单糖组分和体外抗氧化活性的影响,为玄参多糖的提取方法及多糖活性差异提供必要的参考。方法传统水提法、稀碱浸渍法、微波辅助法、酶辅助提取法、超声辅助法被用来提取玄参多糖;采用苯酚硫酸法测定多糖的提取率和纯度;采用高效液相色谱法检测多糖完全水解后单糖的组成;DPPH自由基、羟基自由基、超氧阴离子自由基和总还原力为指标评价玄参多糖的体外抗氧化能力。结果酶辅助提取法获得多糖提取率为7.35±0.43,多糖纯度为54.43%±3.43%,其单糖质量摩尔比例中葡萄糖醛酸和半乳糖酸含量最高,分别为12.1%和8.8%;多糖体外抗氧化活性研究发现,酶辅助法获得多糖清除DPPH自由基能力和超氧阴离子自由基清除能力最高,玄参多糖对羟基自由基的清除不太稳定,其与多糖浓度并不成正相关,还原能力比较发现酶辅助法多糖还原能力最强。结论不同方法提取中酶辅助提取法获得多糖的纯度最高,体外抗氧化活性最强,推测其抗氧化活性和单糖组分比例有关。     

巴戟天醇提物的提取优化及其抗氧化活性研究

目的:优化巴戟天醇提物的提取工艺,并评价其体外抗氧化活性。方法:对巴戟天醇提物的提取进行单因素实验分析,然后通过清除ABTS、清除DPPH、清除超氧阴离子、还原力和总抗氧化五种方法评价巴戟天体外抗氧化活性。结果:最佳提取条件为乙醇提取浓度75%,提取温度100℃,提取时间2 h;巴戟天75%醇提物对ABTS自由基、DPPH自由基、超氧阴离子自由基均有一定的清除能力,对DPPH自由基和超氧阴离子自由基的最大清除率分别为48.016%和28.782%,还原力测试与总抗氧化能力实验数值均与浓度呈现量效关系。结论:巴戟天具有一定的体外抗氧化活性。     

川牛膝多糖抗氧化活性测定和微波提取工艺优化

目的测定川牛膝Cyathulae Radix多糖抗氧化活性,并优化其微波提取工艺。方法微波提取多糖后进行微波干燥,硫酸-苯酚法测定其含有量,评价该成分清除DPPH、ABTS、OH·、·O~2-自由基作用以及总还原能力。在单因素试验基础上,以提取时间、提取温度、料液比为影响因素,多糖提取率为评价指标,Box-Behnken响应面法优化提取工艺。结果多糖对DPPH、ABTS、OH·自由基的清除能力以及总还原能力均较强,但对·O2自由基无清除能力。微波提取最佳条件为提取功率640 W,料液比1∶16,提取温度60℃,提取时间4 min,多糖提取率60.67%。结论微波提取川牛膝多糖时,可在提高其提取率的同时缩短提取时间,节约能源,并增强该成分抗氧化活性。     

海蜇酶解多肽分离纯化及其抗氧化活性研究

目的 研究海蜇酶解多肽的抗氧化活性.方法 采用碱性蛋白酶酶解提取海蜇多肽,用超滤方法获得不同分子量的酶解液,从还原体系、羟自由基清除体系和DPPH自由基清除体系3方面,研究海蜇酶解液抗氧化肽的活性.结果 不同分子量的海蜇酶解物具有较强还原性,对羟自由基、DPPH自由基清除作用均较强,且抗氧化活性随着浓度的增加而明显增加.从分子量来看,小于3KDa组分抗氧化活性最强,当浓度为15 mg/ml时,其对羟自由基和DPPH自由基的清除率分别为62.27％和78.25％.结论 海蜇酶解物具有抗氧化活性,且小分子肽的抗氧化活性最强.     

新疆石榴皮多酚和多糖的提取及抗氧化活性研究

目的:提取及测定新疆石榴皮中的总多酚和总多糖含量,并测定其抗氧化活性。方法:采用超声提取法提取石榴皮中的总多酚,采用水提醇沉法提取石榴皮中的总多糖;通过测定其还原能力和对DPPH自由基的清除能力,对石榴皮多酚和多糖的抗氧化活性进行研究。结果:石榴皮总多酚含量为1.05%,总多糖含量为50.40%;石榴皮多酚和多糖具有较强的还原能力和清除DPPH自由基能力。结论:新疆石榴皮多酚和多糖提取工艺稳定、可靠,且体外有明显抗氧化活性。     

桑白皮中α-葡萄糖苷酶抑制和抗氧化活性成分研究

目的：研究桑白皮（Morus alba）的化学成分及其α-葡萄糖苷酶抑制和DPPH自由基清除活性方法：采用硅胶、凝胶柱色谱和制备HPLC等方法进行分离纯化,通过高分辨质谱和核磁鉴定化合物结构结果：从桑白皮提取物中分离得到了13个化合物,其中化合物1,3和8表现出显著的α-葡萄糖苷酶抑制活性,IC50值分别为147.1 ± 1.1,314.1 ± 0.8和207.6 ± 0.1 µM,均低于阳性对照阿卡波糖（418.6 ± 0.1 µM）。化合物10和11均表现出良好的DPPH自由基清除活性,EC50值分别为2.9 ± 0.1和5.0 ± 0.1 µM,均低于阳性对照维生素C的EC50值（54.8 ± 0.1 µM)结论：化合物1、3和8的α-葡萄糖苷酶抑制活性为首次测定。     

羊胎盘多肽抗疲劳机制的研究

目的:疲劳已成为21世纪人类健康的主要威胁之一。传统中药被认为是更加安全有效的抗疲劳方法,并已成为抗疲劳研究的热点。人胎盘,又称“紫河车”,自唐代以来,其在抗疲劳中的作用引起了极大的关注。然而,人类胎盘的缺乏限制了紫河车的广泛使用。根据传统中医理论认为,羊胎盘也有养血、镇静、养肤、延长生命的功效。本研究的目的是研究羊胎盘多肽的抗疲劳作用,并明确其抗疲劳的作用机制。 方法:采用酶解法从新鲜羊胎盘中提取多肽。每天灌胃给予小鼠羊胎盘多肽 (0.13 g/kg)和大豆肽(0.65g/kg),共进行4周。首先应用负重游泳试验考察羊胎盘多肽的抗疲劳作用,进一步应用非负重游泳试验阐明羊胎盘多肽抗疲劳作用的机制。 结果:羊胎盘多肽可以提高小鼠负重游泳的时间。在非负重游泳模型中,羊胎盘多肽可以显著降低模型小鼠非负重游泳试验后骨骼肌丙二醛(MDA)和血清乳酸(LD)水平,增加骨骼肌谷胱甘肽过氧化物酶(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)和肝糖原的活性。电镜观察,在非负重游泳试验后,羊胎盘组小鼠肌纤束排列整齐,H带、I带、Z线、M线清晰,线粒体数目正常,但仍有部分线粒体肿胀的现象。 结论:羊胎盘多肽具有较强的抗疲劳能力;并可能是通过增加骨骼肌细胞的抗氧化活性和能量储备,改善运动所导致的骨骼肌线粒体超微结构的损伤来发挥其抗疲劳作用的机制。     

人参水煎液miRNA的提取及验证

目的：证明新鲜人参汤存在微小RNA（miRNA）。方法：按照传统方法将新鲜人参煎煮成汤剂,浓缩,用植物microRNA提取试剂盒提取miRNA。然后用DNase I处理miRNA,进行琼脂糖凝胶电泳和Agilent 2100生物分析。选取在人参中高表达的MiR-159和miR-6135进行实时定量PCR验证。结果： MiR-159和miR-6135在新鲜水煎液中表达,水平低于鲜人参。结论：MiRNA在加工后稳定存在,高温处理后保持稳定。这些发现为进一步研究人参miRNAs奠定了基础。     

Effect of 43 cases of temporomandibular joint dysfunction treated with thumb-tack needle based on the meridian cutaneous region theory

Objective

To observe the clinical efficacy of thumb-tack needle on temporomandibular joint dysfunction (TMD).

Acupuncture at Kŏngzuì (孔最LU 6) for 76 cases of hemorrhoids

Objective

To observe the effect of acupuncture at K?ngzuì (孔最LU 6) for hemorrhoids.

Metabolite Characterization of Penta-O-galloyl-??￠-D-glucose in Rat Biofluids by HPLC/QT of MS

Objective: To understand the in vivo metabolic fate of 1,2,3,4,6-Penta-O-galloyl-β-d-glucose(PGG)naturally existed in many medicinal herbs and food plants such as Rhus chinensis,Paeonia suffruticosa,Paeonia lactiflora and Mango.Methods: The metabolites of PGG in rat biofluids were characterized using high performance liquid chromatography combined with quadrupole time-of-flight tandem mass spectrometry(HPLC-QTOF-MS).Results: Ten metabolites in urine,five metabolites in feces and two metabolites in plasma,were observed when the rats were administrated with a single intravenous injection of PGG(20 mg/kg).Conclusion: PGG is firstly metabolized to gallic acid,then gallic acid undergoes sulfation,glucuronidation and methylation by rat liver.The determination of metabolites and the proposed metabolic pathway of PGG in vivo will be benefit to gain deeper insights into its pharmacological activities.     

Synthesis and Biological Evaluation of New Peroxo-bridged Diosgenin Derivatives

Objective: In order to find lead compound with anti-HBV activity from peroxo-bridged diosgenin derivatives obtained with Eosin Y as the photosensitizer.Method: Eosin Y was used as the photosensitizer to activate the oxygen in the air to synthesize novel diosgenin derivatives with peroxo-bridge.The structures of synthesized compounds were identified by NMR and HR-MS.Their cytotoxicity and antihepatitis B activity were evaluated via MTS assay and ELISA method,respectively.Results: Six diosgenin derivatives were synthesized,three of which contained peroxo-bridge,and their structures were confirmed by spectroscopy.It showed that 5 α,8 α-peroxo-6-alkenyl-diosgenin(7)could suppress the production of HBs Ag on transfected HepG2.2.15 cells at low-toxic concentration and the inhibition rate on HepG2.2.15 cells was 18.28% at 12.50 μg/mL,better than that of 3 TC(7.30% at 12.50 μg/mL)and others.Conclusion: Due to its lower cytotoxicity and potential anti-hepatitis B activity,compound 7 could be developed as the promising candidate of anti-hepatitis B drug.It also indicated that the peroxo-bridged derivatives had potential biological values for developing clinical agents.     

Study on timing and dosage of acupuncture in stroke treatment

Objective

To summarize the timing-efficacy relationship and the dosage–efficacy relationship of acupuncture in stroke treatment.

中药颗粒剂的水分吸附和扩散测定：糊精为辅料进行流化床制粒的防潮效果

目的：采用流化床制粒法以糊精为辅料制备了泽泻汤颗粒,研究其水分吸附和扩散特征。方法：采用粒径、扫描电镜法（SEM）、差示扫描量热法（DSC）和傅里叶变换红外光谱法（FTIR）对泽泻汤颗粒进行表征,采用饱和盐溶液法测定泽泻汤颗粒的吸湿等温线、平衡吸湿量、水分扩散系数和扩散能量。 结果：粒径大小从6.04 μm（泽泻汤浸膏粉）增加到 1201.47 μm（泽泻汤颗粒）;糊精、泽泻汤浸膏粉和泽泻汤颗粒的玻璃态转变温度（Tg）分别为107.13 ℃, 94.82 ℃和126.25 ℃。制粒后,泽泻汤颗粒的平衡吸湿量和水分扩散系数均显著降低（p<0.01）,临界相对湿度和水分扩散能量均高于泽泻汤浸膏粉,能量壁垒的提高阻碍水分在颗粒中的扩散。结论：以糊精为辅料进行流化床制粒能够降低泽泻汤浸膏粉的吸湿性,抑制水分扩散,这可能与流化床制粒改变颗粒的微观组织结构和糊精的抗塑化作用有关。     

Acupuncture combined with cupping therapy for 30 cases of intractable hiccup

Objective

To observe the clinical efficacy of acupuncture combined with cupping therapy for intractable hiccup.