姜黄素诱导的平滑肌细胞凋亡在球囊损伤后内膜增生中的作用

目的:观察姜黄素对家兔髂动脉球囊损伤后血管内膜增生的影响。方法:新西兰大白兔30只,随机分为3组:对照(C1)组、阿托伐他汀(G2)组、姜黄素(G3)组,每组各10只。所有实验组在高脂饮食基础上均予灌胃给药,其中G3组予姜黄素100mg/(kg·d),G2组予阿托伐他汀2.5mg/(kg·d),G1组予生理盐水5ml/d。1周后制作髂动脉球囊损伤模型,5周后取目的血管,经苏木精-伊红、弹力纤维染色观察内膜增生情况,同时电镜观察细胞凋亡,并检测凋亡基因p53、Caspase3。结果:病理切片图像分析显示内膜增生程度由强到弱为:G1组>G2组>G3组。在G3组p53表达明显增高,其他两组无差异(P>0.05)。Caspase3表达以G3组最高。电镜观察G3组平滑肌细胞可呈早中期凋亡现象。结论:姜黄素具有诱导血管平滑肌细胞凋亡作用,在一定程度上抑制血管内膜增生。     

牙龈卟啉单胞菌对兔血管平滑肌细胞增殖和迁移的影响

目的研究牙龈卟啉单胞菌(P.gingivalis)上清液对兔血管平滑肌细胞增殖和迁移的影响.方法组织块法进行兔腹主动脉VSMCs的原代培养,复苏培养P.gingivalis标准菌株,不同浓度细菌上清液刺激细胞48h,MTT法检测细菌上清液对细胞增殖的影响;爬片法检测7 d内4.3×106CFU/mL的P.gingivalis上清对细胞迁移的影响.结果浓度高于4.3×106CFU/mL的P.gingivalis上清液能抑制VSMCs的增殖;4.3×106CFU/mLP.gingi-valis上清作用于VSMCs前4 d能促进VSMCs的迁移,明显高于对照组(P<0.05).结论高于4.3×106CFU/mL的P.gingivalis上清液能抑制VSMCs的增殖,4.3×106CFU/mL P.gingivalis上清液可促进血管平滑肌早期的迁移,从而在动脉粥样硬化的发生发展过程中可能发挥一定的作用.     

阿魏酸钠对球囊损伤大鼠颈总动脉血管内膜增生的影响

目的：研究阿魏酸钠对球囊损伤大鼠颈总动脉内膜增生的影响。方法：制作球囊损伤的大鼠颈总动脉内膜增生模型，Wistar雄性大鼠15只随机分为①对照组(n=7)腹腔内注射生理盐水(4ml／d)。②阿魏酸钠治疗组(n=8)腹腔内注射融于生理盐水的阿魏酸钠(200mg/d)，球囊损伤14d后，损伤区域的血管段取材固定后，分析血管断面组织形态学的变化；免疫组化方法观察增殖细胞核抗原(PCNA)阳性细胞以了解血管壁细胞的增殖情况。结果：阿魏酸钠可明显减少新生内膜面积，增加管腔面积，抑制平滑肌细胞的增殖。结论：阿魏酸钠具有抑制血管内膜增生的作用。     

泛素-蛋白酶体抑制剂对血管平滑肌细胞增殖和迁移的影响

血管平滑肌细胞(VSMC)的增殖、迁移是动脉粥样硬化(As)、高血压和冠状动脉成形术后再狭窄的主要病理表现。而As也是导致心脑血管疾病的重要原因。泛素-蛋白酶体系统是真核细胞内主要的细胞降解系统,而泛素-蛋白酶体抑制剂可以抑制VSMC的增殖及迁移。     

家兔血管成形术前后血小板对培养血管平滑肌细胞增殖的影响

探讨腔内血管成形术后再狭窄形成的部分机制。方法 对家兔腹主动脉粥样硬化狭窄估行ＴＡ，观察培养的ＴＡ前后及正常血管平滑肌细胞的细胞计数和＾１２５碘－尿嘧啶脱氧核苷参入变化。结果 ＴＡ后４０ｈ的ＶＳＭＣ数值较ＡＳ－ＶＳＭＣ增加不明显，但二者较正常ＶＳＭＣ明显增加。     

敲低Tudor-SN对血管平滑肌细胞增殖迁移和凋亡的影响

目的 经皮冠状动脉介入治疗冠心病有较好的近期疗效,但患者长期预后却受血管再狭窄的制约,血管平滑肌细胞(VSMC)的表型转化是导致血管狭窄的主要原因。文章通过构建敲低Tudor-SN稳定株,检测Tudor-SN基因对大鼠血管平滑肌细胞A7R5增殖、迁移、凋亡的影响,为研究血管平滑肌细胞表型转化和血管再狭窄发病机制提供细胞模型。方法 通过制备敲低Tudor-SN基因的重组慢病毒,感染A7R5细胞,加入嘌呤霉素药物筛选出低表达Tudor-SN基因的稳定株;使用Western blot检测Tudor-SN敲低效果;在表型实验中,将A7R5细胞分为pLKO-Vector对照组和sh-Tudor-SN实验组,利用CCK-8实验、免疫荧光实验、细胞划痕实验和流式细胞术分别检测对照组和实验组A7R5细胞的增殖、迁移和凋亡的变化;使用PDGF诱导pLKO-Vector对照组和sh-Tudor-SN实验组细胞表型转化,检测Tudor-SN蛋白表达。结果 成功构建了敲低Tudor-SN的shRNAs的重组慢病毒稳定株;表型实验结果显示,敲低Tudor-SN后,实验组从第3天起细胞增殖能力明显低于对照组,实验...     

纤维粘连蛋白和骨桥蛋白对血管平滑肌细胞增殖、迁移的影响及分子机制

血管平滑肌细胞 (ｖａｓｃｕｌａｒｓｍｏｏｔｈｍｕｓｃｌｅｃｅｌｌ,ＶＳＭＣ)增殖、向内膜下迁移是动脉粥样硬化、血管再狭窄等病理过程的关键环节。有报道ＶＳＭＣ的增殖和迁移与病变局部细胞外基质 (ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒｍａｔｒｉｘ)的合成降解的再平衡即细胞外基质的重构有关。纤维粘连蛋白 (ｆｉｂｒｏｎｅｃｔｉｎ)和骨桥蛋白(ｏｓｔｅｏｐｏｎｉｔｉｎ)是细胞外基质中的重要功能蛋白 ,在血管受损伤时表达量均明显增加 ,但是纤维粘连蛋白和骨桥蛋白对ＶＳＭＣ增殖和迁移的影响及其分子机制尚不清楚。本研究探讨了纤维粘连蛋…     

球囊血管成形术对兔血管平滑肌细胞增殖周期的影响

本实验对２６只髂动脉粥样硬化模型兔进行球囊血管成形术，应用流式细胞仪检测血管成形术后不同时期成形段血管平滑肌细胞增殖周期动力学改变。结果表明，血管成形术后４８～７２ｈ血管平滑肌细胞Ｓ期、Ｇ２期和Ｍ期细胞数即增加；术后２～４周达高峰；６周后不再增加，但部分血管增殖期细胞仍维持在高水平，提示平滑肌细胞增生是血管成形术后再狭窄的重要原因之一。     

青藤碱对家兔血管平滑肌细胞增殖的影响

研究青藏对血管平滑肌细胞增殖作用及ＤＮ合成的影响。方法采用内皮素刺激的离子体家兔血管平滑肌细胞增殖模型，细胞计数，氚－胸腺嘧啶核苷掺入方法。结果青藤碱明显抑制血管平滑肌细胞增殖反应及ＤＮＡ合成，呈剂量依赖关系。     

血管内放射对猪受损髂动脉平滑肌细胞增殖与凋亡的影响

目的 :观察血管内放射照射对猪髂动脉球囊损伤后血管新生内膜平滑肌细胞(SMC)增殖与凋亡的影响。方法 :2 7头小型猪分为 3组 ,所有猪行髂动脉球囊过大扩张 ,通过后装装置将 1 0Gy和 2 0Gy的192 Ir放射源分别置于 9只猪受损髂动脉部位 ,其他 9只猪的受损髂动脉作为对照。每组的 9头猪分别术后 3天、1 0天和 2 8天分 3次处死。用增殖细胞核抗原(PCNA)和三磷酸脱氧尿嘧啶缺口末端标记法 (TUNEL)法检测内膜SMC增殖和凋亡情况。结果 :代表血管内膜增殖的PCNA指数在 1 0天和 2 8天宰杀的猪中 ,放射治疗组明显低于对照组。术后 1 0天内膜SMC凋亡在对照组和 1 0Gy、2 0Gy组的值分别为 :(1 85± 0 49) %比 (2 2 7± 0 49) %(P >0 0 5)和 (1 85± 0 49) %比 (2 53± 0 45) %(P <0 0 5) ;术后 2 8天上述值分别为(1 61± 0 3 5) %比 (3 1 1± 0 51 ) %(P <0 0 5)和 (1 61± 0 3 5) %比 (7 0 5± 1 82 ) %(P <0 0 5) ;2 8天时 2 0Gy组的内膜SMC凋亡明显高于 1 0Gy组 (7 0 5± 1 82 ) %比 (3 1 1± 0 51 ) %(P <0 0 5)。相同的放射剂量时 ,2 8天宰杀猪的髂动脉SMC凋亡高于 1 0天宰杀猪的量。结论 :血管内γ射线照射能抑制小型猪球囊损伤髂动脉内膜SMC增殖和刺激SMC凋     

睾酮对损伤后血管内膜增生的抑制作用及对血脂的影响

目的：观察不同浓度睾酮对损伤后血管内膜增生的抑制作用及对血脂的影响。方法：25只雄性白兔随机分为5组，第1组为对照组行假去势术，第2～5组为去势组。去势术后1周开始给第3～5组分别按3mg／kg、6mg／kg、12mg／kg肌注睾酮。第2组未肌注睾酮。去势术后2周各组行右髂动脉内膜剥脱术。内膜剥脱术后2周采血测睾酮及血脂水平，并截取右髂动脉进行图像分析。结果：5组间同时间点（脱内皮术前及脱内皮术后2周）相比均为：在去势组（除第2组，即3～5组）中随外源性睾酮的补充，血浆总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白（LDL-C）逐渐降低，血浆高密度脂蛋白（HDL-C）逐渐升高，第5组变化最明显，血脂水平已接近第1组，第2组和第1组比较差异最显著（P〈0．05），各组脱内皮术后2周和脱内皮术前比较，TC、TG、LDL-C、HDL-C差异无显著性（P〉0．05）。在去势组（除第2组，即3～5组）中随外源性睾酮的补充，新生内膜面积及内膜和中膜面积比值逐渐降低，第5组变化最明显，第5组已接近第1组，第2～4组和第1组比较差异显著（P〈0．01），其中第2组差异最显著。电镜下第2组内皮细胞修复最差，从第3～5组中可见内皮细胞逐渐光滑、平整，第5组新生内皮细胞修复与第1组接近。结论：在生理浓度范围内，睾酮有抑制损伤动脉内膜增生的作用，其作用随浓度增加而增强；同时对血脂代谢存在有益作用，其作用也随浓度增加而增强。     

普伐他汀对激活的VSMC增殖和细胞因子合成的干预作用

目的研究不同浓度普伐他汀对体外培养的经脂多糖 (LPS)激活的狗血管平滑肌细胞 (VSMC)增殖和细胞因子合成的影响。方法 10、10 0、5 0 0 μmol/L普伐他汀 ,于作用后 2 4h和 4 8h采用MTT比色法观察VSMC增殖情况 ,ELISA法观察细胞因子IL 6和TNF α的表达。结果作用 2 4h后 ,10 0、5 0 0 μmol/L的普伐他汀可抑制VSMC的增殖 ,而各浓度均可抑制IL 6的合成 (P <0 .0 5 ) ;作用 4 8h后 ,各浓度普伐他汀均可抑制VSMC增殖和IL 6合成 ,10 0、5 0 0 μmol/L组作用大于 10 μmol/L组 (P<0 .0 5 ) ;普伐他汀对TNF α合成无显著影响 (P >0 .0 5 )。结论一定浓度的普伐他汀可抑制VSMC增殖和细胞因子IL 6的合成 ,该作用可能与时间和剂量有关。     

亮氨酸脑啡肽对脂多糖促血管平滑肌细胞增殖效应的抑制作用

观察亮氨酸脑啡肽和脂多糖对血平滑肌细胞增殖的影响，并观察两者之间的相互作用及阿片受体阻滞剂纳洛酮的影响，方法：实验以离体培养的ＳＤ大鼠胸主动脉ＶＳＭＣ为模型。     

肝细胞生长因子对冠状动脉平滑肌细胞增殖迁移的影响

为观察肝细胞生长因子(HGF)对牛冠状动脉平滑肌细胞(BCASMC)增殖、迁移的影响,分离和培养BCASMC,采用四甲基偶氮唑蓝法观察HGF对BCASMC增殖的作用,倒置显微镜观察BCASMC的迁移。结果显示,对照组、HGF组BCASMC的D值相差显著(P<0.05),HGF组的BCASMC增殖率为45.2％,且迁移明显。提示HGF能促进BCASMC的增殖和迁移。     

阿奇沙坦酯对大鼠颈总动脉球囊损伤后内膜增生的抑制作用及机制探讨

目的 探讨新型降压药阿奇沙坦酯（azilsartan medoxomil,TAK-491）能否抑制球囊损伤后血管内膜增生及其可能机制。方法 选取清洁级雄性200~250g SD大鼠48只,随机分为4组,即假手术组、模型组、阿奇沙坦酯低剂量组、阿奇沙坦酯高剂量组,每组12只。建立模型后,阿奇沙坦酯低剂量组与高剂量组SD大鼠分别按2mg/kg和4mg/kg每天给予3ml药物灌胃,模型组和假手术组大鼠每天用3ml生理盐水灌胃。于术后14、28天取大鼠颈总动脉行HE染色,观察血管形态学变化,同时计算内膜面积（IA）、中膜面积（MA）及内膜/中膜面积比（IA/MA）。免疫组化技术测量增殖细胞核抗原（PCNA）、Toll样受体4（TLR4）、核因子-κB （NF-κB） p65表达变化结果,酶联免疫吸附测定（ELISA）血清中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）及白细胞介素-6（IL-6）水平。结果 与模型组对比发现,药物低、高剂量组术后14、28天IA、IA/MA明显减少（P<0.05）,颈总动脉的PCNA、TLR4、NF-κB p65蛋白的表达明显降低（P<0.05）,血清中TNF-α、IL-6表达明显降低（P<0.05）。与假手术组进行对比发现,手术组术后14、28天IA、IA/MA明显增加（P<0.05）,颈总动脉的PCNA、TLR4、NF-κB p65的表达明显增加（P<0.05）,血浆中TNF-α、IL-6表达明显增加（P<0.05）。结论 阿奇沙坦酯可以减轻损伤后血管再狭窄发生率,其作用机制可能是通过抑制TLR4介导的NF-κB通路,减少了下游炎性相关因子TNF-α、IL-6等的表达,继而减少内膜增生而实现的。     

他汀类药物对血管平滑肌细胞的影响及机制

心血管疾病尤其是冠状动脉硬化性心脏病具有很高的死亡率和发病率,对这些冠脉疾病的病因分析,认为动脉粥样硬化是主要原因。动脉壁脂质沉积和血管平滑肌细胞的异常迁移与增殖是动脉粥样硬化形成的两个关键步骤。目前抗动脉粥样硬化以调脂药物如三羟基三甲基戊二酰辅酶A（HMG-COA）还原酶抑制剂（即他汀类药物）为主,临床实验和基础研究表明：他汀类药物不仅具有调控血浆胆固醇的主要作用,而且还涉及其非调脂的抗动脉粥样硬化作用,如抗炎症反应、抑制血小板聚集、抑制血管平滑肌细胞增殖与迁移、促进血管平滑肌细胞凋亡和改善内皮功能等。本文主要就他汀类药物对血管平滑肌细胞增殖、迁移、凋亡的影响及其机制做如下综述。     

过表达趋化因子受体4的内皮祖细胞影响血管平滑肌细胞迁移、增殖

目的 研究过表达趋化因子受体4(chemokine receptor 4,CXCR4)的内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)对血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)迁移、增殖的影响.方法 分离培养并鉴定大鼠骨髓来源EPCs.CXCR4的重组腺病毒感染EPCs后,流式细胞术、实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分别检测细胞膜CXCR4受体及mRNA表达,CCK-8法、Transwell法分别检测EPCs增殖活性、迁移能力.建立过表达CXCR4的EPCs与VSMCs非接触共培养模型,Transwell法、CCK-8法检测EPCs对VSMCs的迁移、细胞存活的影响.结果 CXCR4重组腺病毒感染EPCs 48 h后,EPCs细胞膜CXCR4受体和mRNA表达明显增高(P＜0.01),过表达CXCR4对EPCs增殖活性无明显影响,但可增强EPCs定向迁移能力(P＜0.01).共培养模型中,SDF-1α诱导下,CXCR4组VSMCs迁移、细胞存活率明显降低(P＜0.05),无SDF-1α诱导下空白对照组、GFP组及CXCR4组VSMCs的迁移、细胞存活率整体高于SDF-1α诱导下各组(P＜0.05).结论 过表达CXCR4可增强EPCs的迁移能力,在SDF-1/CXCR4调控轴中加强EPCs对VSMCs迁移和增殖的抑制作用,可用于防治血管再狭窄的细胞治疗.     

KCa3.1通道对增殖表型大鼠血管平滑肌细胞增殖和迁移的影响

目的探讨KCa3.1通道对增殖表型大鼠血管平滑肌细胞增殖和迁移的影响。方法组织贴壁法培养大鼠血管平滑肌细胞,采用光学显微镜、电镜和免疫细胞化学染色法观察初代和9代平滑肌细胞形态学特征。RT-PCR和免疫细胞化学染色法检测初代和9代平滑肌细胞KCa3.1通道mRNA和蛋白表达。MTT和Transwell法观察KCa3.1通道对平滑肌细胞增殖和迁移的影响。结果初代和9代平滑肌细胞分别表现出收缩表型和增殖表型特征,9代平滑肌细胞KCa3.1通道mRNA、蛋白表达水平、增殖和迁移能力显著高于初代细胞(P<0.01),KCa3.1通道阻断剂TRAM-34可显著抑制9代细胞的增殖和迁移(P<0.01),对初代细胞无明显影响。结论增殖表型血管平滑肌细胞KCa3.1通道表达增加可能促进了细胞的增殖和迁移。     

Kawasaki Disease on PDGF Expression and VSMC Proliferation

The effect of serum of patients with Kawasaki disease (KD) on expression of platelet-derived growth factor (PDGF) B chain protein in vascular endothelial cells (VEC) was studied by immunocytochemical method. Meanwhile,the effects of the endothelial cell conditioned media (ECM) on expression of PDGF receptor mRNA in vascular smooth muscle cells (VSMC) and on cell cycle of VSMC were investigated by the methods of nucleic acid hybridization and flow cytometry (FCM). The results showed that the serum of patients with KD induced the expression of PDGF-B chain protein significantly. ECM significantly promoted the expression of PDGF receptor mRNA and induced the proliferation of VSMC. These data suggest that the activation of PDGF-PDGF receptor may play a role in the pathogenesis of coronary complication of KD.     

温脉通对VSMC增殖和迁移相关因子MMP-2、TIMP-1表达的影响

目的 观察温脉通对血管平滑肌细胞(VSMC)增殖、迁移及其相关因子基质金属蛋白酶_2(MMP-2)和其抑制因子(TIMP-1)的影响.方法 体外培养兔胸主动脉VSMC,以血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)作为诱导因素,复制VSMC增殖、迁移模型,用温脉通药物血清进行干预.应用四唑盐(MTT)比色法测定VSMC增殖活性,用免疫细胞化学检测方法 观察MMP-2、TIMP-1的表达.结果 细胞经AngⅡ作用后其增殖活性和迁移距离明显增加,与正常对照组比较有显著性差异(P<0.01);而加入药物血清后,细胞增殖活性降低、迁移距离变短,与AngⅡ组比较有显著性差异(P<0.01),其中以高剂量组最为明显.正常对照组MMP-2呈弱表达、TIMP-1呈中度表达;AngⅡ组MMP-2表达明显增强、TIMP-1表达减弱;温脉通组MMP-2表达明显受到抑制而TIMP-1表达增强.结论 温脉通可抑制AngⅡ诱导的VSMC增殖和迁移,抑制MMP-2蛋白表达、诱导TIMP-1蛋白表达,提示该方抑制VSMC迁移可能与影响细胞因子表达从而调节细胞外基质(ECM)代谢有关.