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1.
目的:研究EBV-LMP及二甲基亚砜(DMSO)对人鼻咽癌(NPC)细胞体外生长的影响,方法:以人高分化鼻咽癌细胞体(CNE1)为对象,采和电穿孔基因转染技术,将重组EBV-LMP表达质粒转染CNE1细胞,以载体质粒转染及CNE1细胞为对照。用细胞体外增殖实验,流式细胞仪和免疫组化方法,细胞生长分化的变化情况,结果:EBV-LMP在体外可明显促进CNE1细胞的增殖,实验组与空白组及阴性对照组比较( 相似文献
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目的:研究EBV-LMP及二甲基亚砜(DMSO)对人鼻咽癌(NPC)细胞体外生长分化的影响。方法:以人高分化鼻咽癌细胞株(CNE1)为对象,采用电穿孔基因转染技术,将重组EBV-LMP表达质粒转染CNE1细胞,以载体质粒转染及CNE1细胞为对照,用细胞体外增殖实验、流式细胞仪和免疫组化等方法,观察细胞生长分化的变化情况。结果:EBV-LMP在体外可明显促进CNE1细胞的增殖,实验组与空白组及阴性对照组比较P<0.01,实验组S期细胞明显增多,细胞角蛋白表达显著下降(P<0.05),有向低分化鳞癌发展倾向;DMSO诱导后CNE1细胞增殖力明显下降(P<0.01),细胞角蛋白表达显著增高(P<0.01);LMP可明显抑制DMSO对CNE1细胞的诱导分化作用,转染细胞诱导后增殖力和角蛋白表达无显著改变(P>0.05)。结论:DMSO可在一定程度上诱导CNE1细胞分化;EBV-LMP对CNE1细胞生长有明显的促进作用,可抑制细胞分化及降低细胞对终末分化信号的反应,有助于深入研究NPC的发生机理及防治 相似文献
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EB病毒潜在膜蛋白对鼻咽癌细胞系CNE1生长及HLA表?… 总被引:1,自引:0,他引:1
研究EBV-LMP对高分化鼻咽癌细胞株CNE1生长及HLA表达的影响。方法 以人高分化鼻咽癌细胞株为对象,采用电穿孔基因转染技术,将重组EBV-LMP表达质粒pCMVa-LMP转染CNE1细胞。用细胞体外增殖试验,免疫组化和流式细胞术等方法,观察细胞生长及HLA表达的变化。结果 EBV-LMP在体外可明显促进CNE1细胞的增殖,增殖吸光度比值试验组与空白组及阴性对照组比较有显著性差异;实验组细胞软 相似文献
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EB病毒潜在膜蛋白对鼻咽癌细胞系CNE1生长及HLA表达的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
目的研究EBV-LMP对高分化鼻咽癌细胞株CNE1生长及HLA表达的影响。方法以人高分化鼻咽癌细胞株(CNE1)为对象,采用电穿孔基因转染技术,将重组EBV-LMP表达质粒pCMVa-LMP转染CNE1细胞。用细胞体外增殖试验、免疫组化和流式细胞术等方法,观察细胞生长及HLA表达的变化。结果EBV-LMP在体外可明显促进CNE1细胞的增殖,增殖吸光度(A)比值试验组与空白组及阴性对照组比较有显著性差异(P<0.01);实验组细胞软琼脂克隆形成率显著高于空白及阴性对照组(P<0.01);细胞DNA含量明显增高(P<0.01/0.05);FCM法测定细胞角蛋白表达,实验组比空白及阴性对照组阳性率显著降低(P<0.05);HLA免疫组化检测结果表明,LMP表达细胞系HLAⅠ类及Ⅱ类抗原的表达都明显下降(P<0.01)。结论EBV-LMP对CNE1细胞生长有明显的促进作用且可明显抑制细胞分化,LMP可致鼻咽癌细胞HLA抗原的表达改变。 相似文献
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目的:探讨MBP对外周血单个核细胞(PBMNC)与人脐静脉内皮细胞(HUVEC)粘附性的影响,以揭示中枢神经系统(CNS)炎症时PBMNC进入CNS的可能原因。方法:用细胞粘附试验,研究PBMNC与HUVEC的粘附性,用细胞免疫化学法、FACS分别观察VCAM-1和ICAM-1的表达。结果:MBP活化的PBMNC与MBP刺激的PBMNC培养上清作用的HUVEC的粘附性较对照有显著提高。ICAM_1 相似文献
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转染B7—1基因至鼻咽癌细胞株及其诱导的细胞免疫应答 总被引:1,自引:1,他引:1
通过包装细胞把逆转录病毒载体pLXSN/B7-1导入鼻咽癌细胞株CNE1,利用RT-PCR及FACs等技术证实B7-1的表达情况,同时检测了CNE1细胞表面MHCI抗原。在此基础之上,观察了表达B7-1的CNE1细胞(CNE1/B7-1)对健康个体PBL(外周血淋巴细胞)的增殖及细胞因子分泌的影响,结果表明:CNE1/B7-1可以促进PBL的增殖及细胞因子的分泌,且增高水平的细胞因子主要是IL-2和IFN-γ。提示:CNE1/Β7-1诱导的免疫应答以细胞免疫为主。 相似文献
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系统性红斑狼疮患者B淋巴细胞EBV-LMP1和ZEBRA的表达研究 总被引:1,自引:1,他引:1
目的:探讨EBV-LMP1和ZEBRA在系统性红斑狼疮患者(SLE)的表达情况。方法:间接荧光免疫标记,流式细胞仪检测。结果:SLE患者B淋巴细胞中EBV-LMP1和ZEBRA的表达显著高于正常对照组(P<0.01)。活动期患者CD23+细胞EBV-LMP1和ZEBRA的表达率均高于CD19+细胞(P<0.01)。非活动期患者CD23+细胞EBV-LMP1表达也高于CD19+细胞(P<0.01)。但EBV-ZEBRA表达在两亚群间差异没有统计学意义(P>0.05)。结论:朋病毒参与了SLE的发病机制,病毒主要以潜伏期状态存在于患者中,病毒复制促进病情发展,检测B淋巴细胞EBV-LMP1和ZEBRA的表达率,有助于病情活动指标的判断。 相似文献
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东亚钳蝎毒抗癌多肽对Eca 109细胞和HeLa细胞的毒性作用 总被引:9,自引:0,他引:9
目的和方法:采用MTT比色法、生长抑制实验、集落形成抑制实验,探讨东亚钳蝎毒抗癌多肽(anticancer polypeqtide from Buthrs Martensii Venom,APBMV)对Eca109细胞和HeLa细胞的细胞毒作用。结果:APBMV对Eca109细胞有明显的毒性作用,且呈显著量在系,处理细胞24h和72h的IC50分别为0.027rg.mL^-1 和0.024ug.mL^-1。APBMV对Eca109细胞的生长抑制作用呈明显的时效 相似文献
9.
高,低分化的鼻咽癌细胞膜电位比较 总被引:2,自引:2,他引:2
用玻璃微电极细胞内记录法,对体外培养的人胚鼻咽上皮细胞、人低分化鼻咽癌(CNE-2Z)和高分化鼻咽癌(CNE-1)细膜膜电位(MP)进行研究,结果表明:(1)与人胚细胞相比,癌细胞MP负值增大,各细胞MP差异大,分布弥散,尤以CNE-2Z细胞为甚;(2)这3种细胞,细胞外K^+对数浓度与MP值均呈高度负相关;(3)比较3种细胞MP值与细胞外液K^+对数浓度的回归系数,CNE-2Z的最大,人胚的最小 相似文献
10.
为了探讨Epstein-Bar病毒在喉鳞癌细胞中的表达情况,对90例喉鳞癌组织进行了Ep-stein-Barr病毒潜伏膜蛋白(EBV-LMP-1)的检测,结果显示,LMP-1主要定位于细胞膜和细胞浆内,90例喉鳞癌中LMP-1阳性者41例,阳性检出率为45.5%,其中低分化鳞癌阳性率为44%(12/27),中分化鳞癌为52%(25/48),高分化鳞癌为26.6%(4/15)。提示,EB病毒不仅存在于低分化喉鳞癌中,也存在于高分化鳞癌中,喉癌的发生可能与EB病毒感染有关。 相似文献
11.
目的:观察EB病毒潜伏膜蛋白1(LMP1)表达对鼻咽癌细胞系增殖和细胞周期分布的作用。方法:用免疫组化(LSAB)法检测LMP1蛋白的表达;用MTT法测定鼻咽癌细胞系的增殖能力;用流式细胞术检测细胞周期的分布。结果:表达LMP1的鼻咽癌细胞系L-CNE1的OD值明显高于LMP1阴性的鼻咽癌细胞系V-CNE1和CNE1(P<0.001)。L-CNE1细胞系的G1期细胞百分率明显减少和S期细胞百分率明显增加,与V-CNE1和CNE1细胞系比较均有非常显著性差异(P<0.001)。而V-CNE1与CNE1细胞系之间各期细胞百分率则无明显差异(P>0.05)。结论:EBV-LMP1表达可使鼻咽癌细胞系细胞周期分布改变和增殖能力增强。 相似文献
12.
目的:探讨EB病毒(EBV)感染对鼻咽癌细胞系生长和细胞凋亡的影响。方法:用EBV直接感染人鼻咽癌细胞系CNE1;用免疫组化(LSAB)法检测EBV-LMP1和bcl-2蛋白的表达;用MTT法测定鼻咽癌细胞系的生长能力;用流式细胞术和TUNEL法检测癌细胞凋亡。结果:感染EBV的鼻咽癌细胞系(E-CNE1)的EBV-LMP1表达阳性,生长能力较未感染EBV的CNE1明显增强(P<0.01),2种鼻咽癌细胞系均无凋亡发生,而均仅有2%~3%的细胞表达bcl-2蛋白。结论:EBV感染和LMP1表达可促进鼻咽癌细胞生长,但对鼻咽癌细胞的bcl-2表达和细胞凋亡无影响。 相似文献
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目的:探讨EB病毒(EBV)感染对鼻咽癌细胞系生长和细胞凋亡的影响。方法:用EBV直接感染人鼻咽癌细胞系CNE1;用免疫组化(LSAB)法检测EBV-LMP1和bcl-2蛋白的表达;用MTT法测定鼻咽癌细胞系的生长能力;用流式细胞术和TUNEL法检测癌细胞凋亡。结果:感染EBV的鼻咽癌细胞系(E-CNE1)的EBV-LMP1表达阳性,生长能力较未感染EBV的CNE1明显增强(P<0.01),2种鼻咽癌细胞系均无凋亡发生,而均仅有2%~3%的细胞表达bcl-2蛋白。结论:EBV感染和LMP1表达可促进鼻咽癌细胞生长,但对鼻咽癌细胞的bcl-2表达和细胞凋亡无影响。 相似文献
14.
目的 :研究端粒酶反义寡核苷酸对鼻咽癌细胞生长分化的影响。方法 :脂质体介导反义寡核苷酸转染鼻咽癌CNE1和CNE2Z细胞株 ,用细胞体外增殖实验、免疫组织化学S P法 ,观察细胞生长分化的变化情况。结果 :针对端粒酶RNA模板区的反义寡核苷酸可抑制CNE1和CNE2Z细胞的增殖并呈剂量和时间依赖性 ,反义寡核苷酸组细胞角蛋白表达高于其它处理组及空白对照组 (P <0 0 1) ,细胞形态趋向分化成熟。结论 :端粒酶反义寡核苷酸可抑制鼻咽癌CNE1和CNE2Z细胞的生长 ,并促进细胞分化。 相似文献
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目的:探讨不同来源的EB病毒潜伏膜蛋白1(LMP1)基因转染对人高分化鼻咽癌(NPC)细胞系CNE1生长的影响。方法:采用脂质体介导法分别将含有来源于B95-8淋巴细胞标准株的LMP1基因(B95-8-LMP1)和来源于NPC组织的LMP1基因(CAO-LMP1)的质粒转染CNE1;RT-PCR和蛋白印迹法分别鉴定LMP1mRNA和蛋白表达;结晶紫法、流式细胞术和平板克隆形成法测定不同来源的LMP1对CNE1生长特性的影响。结果:成功建立稳定表达不同来源LMP1的CNE1细胞系。两种不同来源的LMP1均可促进CNE1细胞的生长(P<0.01);CAO-LMP1比B95-8-LMP1具有更强促进CNE1生长的作用(P<0.01)。结论:不同来源LMP1对CNE1的体外生长均有促进作用,CAO-LMP1比B95-8-LMP1具有更强的促增殖能力。 相似文献
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目的:探讨鼻咽癌(NPC)中特殊富含AT序列结合蛋白1(SATB1)的表达及其与肿瘤侵袭和转移的关系。方法:免疫组化检测76例临床NPC及61例对照鼻咽黏膜慢性炎症(NPI)组织样本中SATB1、上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)和波形蛋白(vimentin)的表达,并分析NPC中SATB1与患者临床参数、E-cadherin和vimentin表达的相关性。体外培养不同分化状态的NPC细胞系CNE1、CNE2Z及C666-1,筛选出SATB1高表达细胞系,采用小干扰RNA(siRNA)沉默SATB1表达后,分析上皮-间充质转化(EMT)相关分子的表达及细胞侵袭能力的改变。结果:临床鼻咽组织中SATB1表达定位于胞质和胞核,NPC组中SATB1阳性表达率显著高于对照NPI组(P0.01);E-cadherin在NPI黏膜上皮中呈膜阳性表达,NPC中膜表达水平下降,但出现胞质阳性。NPI中E-cadherin膜阳性率为100%,显著高于NPC的32.89%(P0.01)。Vimentin呈胞质阳性,NPI上皮细胞中均阴性,但NPC中阳性率为51.32%(P0.01)。NPC中SATB1高表达与患者性别、年龄及N分期无关,但与T分期和M分期均呈正相关(P0.05);SATB1高表达与vimentin呈正相关(r=0.358,P=0.009)。NPC细胞系中SATB1表达与细胞分化水平呈负相关。采用siRNA敲减C666-1细胞中SATB1表达后,E-cadherin表达上升,vimentin表达下降,且细胞侵袭能力下降。结论:SATB1高表达通过促进EMT而介导NPC临床进展。 相似文献
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目的: 探讨负向调控miR-9对人鼻咽癌细胞增殖、迁移和侵袭作用。方法: 用脂质体LipofectamineTM 2000转染合成抑制剂的方法抑制鼻咽癌细胞miR-9表达,转染抑制对照剂作为对照组。CCK-8法和流式细胞术检测细胞增殖和细胞周期变化;Transwell侵袭实验和划痕实验检测细胞侵袭和迁移能力;免疫印迹实验检测蛋白变化。结果: 抑制鼻咽癌细胞miR-9表达后,肿瘤增殖能力降低(P<0.05),G0/G1期细胞增多[CNE2:(57.96±1.39)% vs(47.93±1.76)%,P<0.05;CNE1:(51.24±0.88)% vs(48.29±0.39)%,P<0.05],迁移距离明显缩短[CNE2:(186.50±7.94)μm vs (247.56±15.56)μm,P<0.05;CNE1:(139.06±16.73 )μm vs(230.66±14.27 )μm,P<0.01],CNE2细胞中侵袭细胞数明显减少(43.00±3.17 vs 65.80±5.20,P<0.01),β-连环蛋白(β-catenin)表达被抑制。结论: 在鼻咽癌细胞中,负向调控miR-9可抑制鼻咽癌细胞的增殖、侵袭和迁移。 相似文献
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目的:研究端粒酶活性抑制后鼻咽癌细胞p53蛋白表达水平的变化。方法:脂质体介导端粒酶反义寡核苷酸转染鼻咽癌CNE1和CNE2Z细胞株,MTT法检测细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞凋亡,免疫组化法检测端粒酶逆转录酶(hTRT)和p53蛋白表达水平。结果:端粒酶RNA反义寡核苷酸可抑制CNE1和CNE2Z细胞的增殖并呈剂量依赖性,流式细胞仪检测出现凋亡峰,反义寡核苷酸组hTRT和p53蛋白表达水平显著低于其它处理组及空白对照组(P<0.01)。结论:端粒酶RNA反义寡核苷酸抑制鼻咽癌细胞端粒酶活性后可降低p53蛋白表达水平。 相似文献
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为探讨EB病毒潜伏膜蛋白 1(LMP1)促鼻咽癌细胞生长作用与端粒酶活性的关系 ,用LMP1基因真核表达质粒转染鼻咽癌CNE1细胞 ;脂质体介导端粒酶反义核酸处理转染细胞 ;MTT法检测细胞增殖能力 ;原位杂交法检测端粒酶逆转录酶 (hTERT)mRNA表达 ;免疫组化法检测LMP1蛋白表达。结果显示 :转染LMP1基因的细胞增殖能力和hTERTmRNA表达水平均显著高于未转染和转染空载质粒的细胞 (均P <0 0 1)。经端粒酶反义核酸作用 4 8h ,LMP1基因转染细胞的细胞增殖能力、hTERTmRNA和LMP1蛋白表达水平均显著低于空白对照组 (均P <0 0 1) ,反义核酸和脂质体处理组上述各指标无显著变化 ;反义核酸组LMP1基因转染细胞的增殖能力和hTERTmRNA表达水平仍均显著高于未转染细胞和转染空载质粒的细胞 (均P <0 0 1)。以上结果提示 :EB病毒LMP1的促鼻咽癌细胞生长作用与端粒酶活性密切相关。 相似文献