葡萄籽提取物原花青素对大鼠实验性隐睾生精细胞凋亡的影响

目的:探讨葡萄籽提取物原花青素对隐睾生精细胞凋亡的影响,为临床治疗某些特发性男性不育症药物的开发研究提供实验依据.方法:将雄性健康SD大鼠40只随机分为隐睾+原花青素(高、中、低剂量)组、隐睾+生理盐水组、假手术组5组,每组8只大鼠,每天定时定量灌胃3次,7天后断颈处死大鼠,双侧睾丸称湿重并取手术侧睾丸HE染色观察组织...     

实验性大鼠隐睾中eNOS的表达与生精细胞凋亡

①目的 研究内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase, eNOS)的表达与实验性大鼠隐睾生精细胞凋亡的关系.②方法 通过手术建立单侧大鼠隐睾模型,术后第7天采用TUNEL法检测生精细胞凋亡,免疫组化SABC法及RT-PCR检测隐睾及对侧睾丸eNOS基因表达的变化.③结果 术后第7天隐睾侧重量明显减轻,生精细胞凋亡指数较对侧睾丸明显增加;RT-PCR显示隐睾中eNOS mRNA的表达较对侧睾丸增强;免疫组化显示对侧睾丸生精上皮内未见eNOS表达,隐睾侧睾丸生精上皮中有eNOS表达.④结论 隐睾生精细胞凋亡明显增加,eNOS参与介导生精细胞凋亡.     

隐睾睾丸生精功能的损害

目的 研究大鼠隐睾睾丸组织生精功能,了解睾丸生殖细胞凋亡.方法 建立隐睾大鼠动物模型,获得单侧隐睾大鼠(A组)12只,双侧隐睾大鼠(B组)10只,空白对照正常大鼠(C组)10只.当日龄为60 d时,切取大鼠双侧睾丸组织,行HE染色、Johnsen评分;采用原位缺口末端标记法检测生殖细胞凋亡.结果 A、B组隐睾睾丸组织Johnsen评分较对照组显著降低(P<0.05),生精功能明显破坏,生殖细胞凋亡指数显著增加(P<0.05).结论大鼠隐睾睾丸组织生精功能受到损害,生殖细胞凋亡增加.     

p53、p63在SD大鼠隐睾中的表达

目的 探讨p53、p63在SD大鼠隐睾中的表达及其在隐睾所致生精障碍过程中的可能作用.方法 本实验将30只健康雄性SD大鼠随机分为隐睾组和假手术组,建立单侧隐睾模型.术后7天脱颈椎处死大鼠,留取各组大鼠双侧睾丸称湿重,常规组织学切片观察各组睾丸生精上皮形态,免疫组化分别检测p53、p63蛋白表达的变化.结果 术后第7天,与正常侧睾丸相比,隐睾侧睾丸重量明显减轻,生精小管内生精细胞排列紊乱,生精细胞与精子的数量减少,可见较多多核巨细胞;免疫组化显示p53在各组睾丸的生精小管的各级生精细胞的胞质中均有表达,尤其是在精母细胞胞质中,但在隐睾中表达最强;p63在假手术组表达较少且较弱,而在隐睾组中表达较多且较强.结论 隐睾能导致睾丸内p53、p63表达增高,从而促进生精细胞凋亡增加.     

细胞因子TNF-α在大鼠先天性隐睾组织中的表达及意义

目的：探讨大鼠隐睾生精细胞细胞因子TNF-α表达的变化对隐睾生精障碍的影响.方法：应用免疫组化及图像分析技术,观察18例二级雄性Wistar大鼠隐睾和15例正常睾丸及附睾的细胞因子肿瘤坏死因子-α（TNF-α）表达的变化.结果：隐睾生精小管腔内的大多数细胞TNF-α染色呈阴性,间质呈阳性的细胞较对照组增多,阳性染色增强.结论：生精细胞TNF-α表达减少,在隐睾所致生精细胞损伤中发挥重要作用.     

输精管结扎对大鼠睾丸生精细胞凋亡的影响

为探讨输精管结扎对睾丸曲精管生精细胞凋亡程度的影响，应用流式细胞仪和脱氧核糖核酸末端转移酶介导的ｄＵＴＰ缺口末端标记技术，检测大鼠输精管结扎和假手术后２－１２周睾丸生精细胞的凋亡情况。     

L-NAME对大鼠生精细胞p53表达的影响

目的 探讨NOS抑制剂N-硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAME)对隐睾下降固定术后生精细胞p53表达的影响.方法 将75只雄性SD大鼠建立单侧隐睾模型.术后12d将隐睾组大鼠随机分为假手术组,隐睾固定组、隐睾固定+生理盐水组、隐睾固定+L-NAME组,建立隐睾下降固定模型.术后分别于腹腔内注射生理盐水或L-NAME.术后第12d于腹腔内给药后2h大鼠尾部采血,取血清测定NO含量及NOS活性.术后第24d脱颈椎处死大鼠,TUNEI原位末端标记法检测各组右侧睾丸生精细胞凋亡;免疫组化检测p53的表达.结果 隐睾固定+L-NAME组血清中NO浓度、NOS活性以及生精细胞凋亡率及p53的表达低于隐睾固定组和隐睾固定+生理盐水组P＜0.05,差异有统计学意义假手术组最低,低于其它各组(P＜0.05),差异有统计学意义.结论 L-NAME降低隐睾下降固定后NO的产生,降低p53的表达,减少生精细胞凋亡,提示NOS抑制剂能促进隐睾下降固定术后的睾丸提高生精能力.     

L-NAME对大鼠生精细胞p53表达的影响

目的探讨NOS抑制剂N-硝基-L-精氨酸甲酯（L-NAME）对隐睾下降固定术后生精细胞p53表达的影响。方法将75只雄性SD大鼠建立单侧隐睾模型。术后12d将隐睾组大鼠随机分为假手术组,隐睾固定组、隐睾固定＋生理盐水组、隐睾固定＋L-NAME组,建立隐睾下降固定模型。术后分别于腹腔内注射生理盐水或L-NAME。术后第12d于腹腔内给药后2h大鼠尾部采血,取血清测定NO含量及NOS活性。术后第24d脱颈椎处死大鼠,TUNEL原位末端标记法检测各组右侧睾丸生精细胞凋亡;免疫组化检测p53的表达。结果隐睾固定＋L-NAME组血清中NO浓度、NOS活性以及生精细胞凋亡率及p53的表达低于隐睾固定组和隐睾固定＋生理盐水组P〈0.05,差异有统计学意义假手术组最低,低于其它各组（P〈0.05）,差异有统计学意义。结论 L-NAME降低隐睾下降固定后NO的产生,降低p53的表达,减少生精细胞凋亡,提示NOS抑制剂能促进隐睾下降固定术后的睾丸提高生精能力。     

氨基胍对隐睾所致生精细胞凋亡中p53表达的影响

目的:通过研究氨基胍对隐睾生精细胞中p53表达的影响,探讨生精细胞凋亡的分子机制。方法:雄性SD大鼠随机分为假手术组、隐睾组、隐睾+氨基胍(Aminoguanidine,AG,iNOS抑制剂)组、隐睾+生理盐水组。后三组建立单侧隐睾模型,后两组术后分别于腹腔内注射AG和生理盐水,每天一次,定时定量。7天后处死所有大鼠,取双侧睾丸称湿重。手术侧睾丸H.E染色观察常规组织学及免疫组化检测p53的表达。结果:隐睾+AG组睾丸生精上皮较隐睾组及隐睾+生理盐水组排列有序,细胞层数厚,该组中p53表达弱于隐睾组。结论:AG可降低隐睾中p53的表达,抑制隐睾生精细胞的凋亡,提示NO可能通过增强隐睾生精细胞中p53的表达而促进生精细胞凋亡。     

输精管结扎对大鼠睾丸生精细胞凋亡的影响

为探讨输精管结扎对睾丸曲细精管生精细胞凋亡程度的影响，应用流式细胞仪和脱氧核糖核酸末端转移酶介导的ｄＵＴＰ缺口末端标记（ＴＵＮＥＬ）技术，检测大鼠输精管结扎和假手术后２～１２周睾丸生精细胞的凋亡情况。结果：流式细胞仪检测发现结扎组的亚单倍体峰增高，亚单倍体细胞百分率升高；ＴＵＮＥＬ法则显示结扎后总的生精细胞凋亡数较假手术后明显增加（Ｐ＜０．００１）。结扎后不同时间组与同期假手术组比较，２周、６周、１０周组精原细胞和初级精母细胞凋亡数前者均高于后者（Ｐ均＜０．０５），１２周组精原细胞凋亡数前者高于后者（Ｐ＜０．０５）。结果表明输精管结扎会导致生精细胞凋亡增加。     

突变型瓜氨酸波形蛋白抗体在类风湿性关节炎诊断中的意义

目的 研究突变型瓜氨酸波形蛋白抗体(MCV抗体)在类风湿性关节炎(RA)诊断中的意义以及与疾病活动度积分(DAS28积分)的相关性.方法 采用酶联免疫吸附试验(ELISA)定量检测68例类风湿性关节炎患者、64例其它结缔组织病患者MCV抗体水平,同时检测CCP抗体,计算RA组患者疾病活动度积分(DAS28).评价MCV抗体、CCP抗体两者诊断RA的价值,并分析两者与RA疾病活动度的关系.结果 两组抗体诊断RA的敏感性和特异性分别为MCV抗体(70.6%,96.9%)、CCP抗体(54.4%,95.3%);MCV抗体对RA诊断的敏感性和特异性均高于CCP抗体,患者MCV抗体水平与DAS28积分呈正相关.结论 MCV抗体是RA患者良好的诊断指标,并且与疾病活动关系密切,高滴度提示病情活动.     

波形蛋白在大鼠肾间质纤维化中的表达及意义

目的：探讨波形蛋白（VIM）在肾间质纤维化（RIF）大鼠模型中的表达及意义。方法：将27只SD大鼠随机分为假手术组（S组）、模型组（U组）及丹参酮IIA磺酸钠治疗组（T组）,U组和T组采用单侧输尿管结扎术制作肾小管间质纤维化的动物模型,术后第11天处死大鼠,肾组织HE染色及Masson染色后进行图像分析,评定各组肾小管间质损害、肾间质炎性细胞浸润及肾间质纤维化状况;用免疫组织化学方法检测各组大鼠肾间质的VIM的表达。结果：U组肾小管间质损伤指数（TDI）、肾间质炎性细胞浸润指数（TICI）及肾间质纤维化指数（TFI）均明显高于S组（P〈0.01）,U组VIM的表达明显高于S组（P〈0.01）,T组的上述各指标分别较U组降低（P〈0.05）;TDI、TICI、TFI分别与VIM的表达均呈正相关。结论：VIM可能在促炎症反应和促RIF过程中具有一定作用,丹参酮IIA磺酸钠可通过降低VIM在肾小管间质的表达减轻了RIF。     

人参皂苷Rg3对大鼠脑胶质瘤GFAP,Vimentin表达的影响

目的：观察人参皂苷Rg3对大鼠C6胶质瘤胶质纤维酸性蛋白（GFAP）、波形蛋白（Vimentin）表达的影响,探讨人参皂苷Rg3抗胶质瘤作用机制.方法：制备大鼠脑C6胶质瘤模型,实验分为人参皂苷Rg3溶媒混合物治疗组,溶媒组,生理盐水组,在接种细胞模型建立2wk后,人参皂苷Rg3溶媒混合物治疗组给予人参皂苷Rg3,4wk后处死大鼠并观察肿瘤形成情况,进行GFAP,Vimentin免疫组织化学检测并分析组间差异.结果：免疫组织化学染色显示GFAP,Vimentin在各组均表达.溶媒组和生理盐水组GFAP表达面密度值分别为（0.12±0.01）,（0.11±0.01）;光密度值分别为（692.80±146.38）,（647.54±127.62）.应用人参皂苷Rg3后,GFAP面密度值和光密度值表达明显增强,分别为（0.24±0.02）,（882.80±150.67）,差异具有统计学意义（P〈0.01）;溶媒组和生理盐水组Vimentin表达面密度值分别为（0.19±0.02）,（0.20±0.01）,光密度值分别为（792.80±131.28）,（817.54±137.62）.应用人参皂苷Rg3后,Vimentin面密度值和光密度值表达明显减弱,分别为（0.10±0.01）,（682.31±126.38）,差异具有统计学意义（P〈0.01）.而溶媒组与生理盐水组之间GFAP,Vimentin面密度值与光密度值表达差异无统计学意义.结论：人参皂苷Rg3可能是通过抑制脑胶质瘤Vimentin的表达,同时增强GFAP的表达以起到抗肿瘤的作用.     

实验性隐睾大鼠生殖细胞凋亡及Bcl-xl、Bad蛋白表达检测

目的:检测实验性隐睾大鼠生殖细胞凋亡及Bcl-xl、Bad蛋白表达的变化.方法:50只成年健康SD雄性大鼠随机分成隐睾组(n=23)和对照组(n=27).建立单侧隐睾动物模型,术后3 d,7 d,10 d取材隐睾侧睾丸,对照组同侧取材.采用原位缺口末端标记法(TUNEL)检测生殖细胞凋亡,免疫组化法检测Bcl-xl,Bad蛋白表达.结果:凋亡细胞主要是初级精母细胞和圆形精子细胞.隐睾组生殖细胞凋亡指数术后3 d组((5.54±1.93)%)、7 d组((7.33±1.61)%)、10 d组((9.48±2.96)%)均明显高于对照组((2.26±0.92)%,P＜0.01);隐睾组Bcl-xl蛋白表达术后3 d组((67.30±6.11)%)、7 d组((54.00±8.75)%)、10 d组((35.85±6.55)%)均低于对照组((76.00±6.83)%,P＜0.01);Bad蛋白表达术后7 d组((46.22±9.30)%)、10 d组((41.30±5.81)%)均高于对照组((13.88±3.58)%,P＜0.01).结论:实验性隐睾大鼠生殖细胞凋亡增多,可能与Bcl-xl蛋白表达降低、Bad蛋白表达升高相关.     

海带多糖对实验性大鼠动脉粥样硬化的预防作用

目的:探讨海带多糖(laminaria japonica polysaccharides,LJP)对大鼠动脉粥样硬化的预防作用。方法:SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、阳性药对照组、LJP低剂量、中剂量和高剂量组。12周后,颈动脉取血,检测血清TG、TC、LDL-C、HDL-C及血清超氧化物歧化酶(SOD)活力和丙二醛(MDA)水平。取血后分离主动脉,作病理形态学观察。结果:LJP能显著降低血清TG、TC、LDL-C及MDA水平,增高HDL-C水平和SOD活力,并呈剂量依赖性。主动脉HE染色病理观察显示,LJP给药组主动脉内皮脂质沉积较模型组少见。结论:LJP对高脂饲料诱导的大鼠动脉粥样硬化具有保护作用,其机制可能与其调节血脂,抗氧化作用有关。     

曲美他嗪对实验性心肌缺血的保护作用

目的 :探讨曲美他嗪 (trimetazidine,TMZ)对心肌缺血缺氧的保护作用及其机制。 方法 :5 0只昆明种雄性小白鼠 ,随机分为三组 ,分别给予腹腔注射生理盐水稀释的 TMZ 5 mg/ kg、10 m g/ kg及等量生理盐水 ,连续 7d,第 6天起 ,按 2 0mg/ (kg· d)腹腔内注射异丙肾上腺素 ,连续 2 d,造成小鼠心肌坏死模型 ,制作光镜及电镜标本 ,观察心肌超微结构、血清心肌酶谱及心肌组织丙二醛 (MDA)、超氧化物歧化酶 (SOD)等的改变。 结果 :与对照组相比 ,两个治疗组心肌超微结构损害明显减轻 ,血清 CK及 L DH显著减低 (P<0 .0 5 ) ,心肌 MDA显著降低 (P<0 .0 1) ,SOD显著增高 (P<0 .0 1)。 结论 :TMZ能显著减轻异丙肾上腺素所致的心肌损害 ,对心肌缺血缺氧具有一定的保护作用 ,其机制可能与 TMZ能减少氧自由基产生等作用有关。     

N-硝基-L-精氨酸甲酯对实验性大鼠隐睾Bcl-2表达的影响

①目的研究一氧化氮合酶抑制剂N-硝基-L-精氨酸甲酯对实验性大鼠隐睾生精细胞凋亡过程中B细胞淋巴瘤/白血病-2（Bcl-2）表达的影响。②方法 42天龄雄性SD大鼠建立单侧隐睾模型,随机分为隐睾组、隐睾＋L-NAME组、隐睾＋生理盐水（溶媒）组、假手术组,每组12只大鼠,隐睾＋L-NAME组和隐睾＋生理盐水组大鼠术后分别腹腔内注射L-NAME或生理盐水,每天1次,定时定量（50mg/Kg）,术后第7天分别采用RT-PCR和免疫组织化学方法检测各组隐睾Bcl-2mRNA和蛋白表达的变化。③结果与假手术组睾丸相比,隐睾组、隐睾＋生理盐水组睾丸生精上皮和睾丸间质细胞内Bcl-2mRNA和蛋白表达降低,差异有显著性（P〈0.05）;而隐睾＋L-NAME组Bcl-2 mRNA和蛋白与假手术组睾丸无明显差别。④结论 L-NAME可通过调节Bcl-2的表达抑制热应激导致的生精细胞凋亡。