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1.
目的了解宁波地区ESBLs志贺菌的耐药性,为疾病防控提供依据。方法从监测点和医院分离、收集志贺菌;药敏试验采用K-B法;ESBLs表型确证采用纸片法;CTX-M耐药基因采用PCR法;耐药基因分型采用核苷酸序列法。结果药敏试验筛检出93株ESBLs志贺菌,有78株携带CTX-M耐药基因,检出率为83.87%,其中CTX-M-1群36株,占38.71%,CTX-M-9群42株,占45.16%,携带2种耐药基因的志贺菌21株。未检出CTX-M-2群耐药基因。CTX-M-1群测序分型以CTX-M-15型为主;CTX-M-9群则多为CTX-M-14型。结论本地区志贺菌ESBLs株较多,携带CTX-M较高,甚至可同时携带CTX-M的两群耐药基因,显示志贺菌对抗菌药物耐药率较强,CTX-M-15型和CTX-M-14型是主要的流行酶型。B群志贺菌无论是表型的耐药性,还是耐药基因携带情况均高于D群志贺菌,该发现有助于志贺菌耐药规律的研究。  相似文献   

2.
目的运用变性高效液相色谱(DHPLC)技术,检测超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)基因型,了解浙江沿海地区ESBLs基因型分布情况。方法对171株多药耐药肠杆菌科细菌进行表型确证试验,采用多重PCR对标准菌株和ESBLs表型阳性的临床菌株进行CTX-M扩增,扩增产物经DHPLC分析,通过与标准菌株色谱峰比对进行临床菌株基因分型。结果 171株多药耐药肠杆菌科细菌,有142株临床菌株ESBLs表型阳性,经多重PCR扩增142株肠杆菌科109株携带CTX-M基因,52株为CTX-M-1产物,57株为CTX-M-9产物,检出率达79.80%,其中大肠埃希菌携带CTX-M基因比例最高,其次是肺炎克雷伯菌和阴沟肠杆菌;109株临床菌株PCR产物经DHPLC分析检测出4种CTX-M基因型,33株携带CTX-M-3、19株携带CTX-M-15、5株携带CTX-M-9、52株携带CTX-M-14。结论运用DHPLC技术检测出CTX-M型ESBLs菌株有4种基因型,其中CTX-M-14型是CTX-M型ESBLs主要型别;该地区细菌携带CTX-M型ESBLs以大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、阴沟肠杆菌最多见。  相似文献   

3.
目的 探究肺癌患者术后感染超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌分离株基因分型和耐药性,为临床治疗ESBLs肺炎克雷伯菌用药提供指导。方法 收集2019年1月-2021年7月于武汉市肺科医院行胸腔镜肺段切除术后感染患者肺炎克雷伯菌分离株100株,分析菌株对常用抗菌药物的耐药率,双纸片扩散法进行ESBLs表型筛选及确证,聚合酶链式反应(PCR)检测产ESBLs菌株的耐药基因,将PCR阳性产物进行测序并确定基因型别。结果 100株肺炎克雷伯菌中检出35株产ESBLs菌株,占35.00%,主要来源于痰液;产ESBLs肺炎克雷伯菌对氨苄青霉素、头孢菌素的耐药率高于90%; 35株产ESBLs肺炎克雷伯菌主要耐药基因型为TEM、CTX-M和SHV,其中CTX-M型中,CTX-M-1有10株,CTX-M-9有12株,未检测出CTX-M-2、CTX-M-8及CTX-M-25型,所有TEM型均为TEM-1,SHV型均为SHV-12。结论 胸腔镜肺段切除术后感染肺炎克雷伯菌菌株产ESBLs检出率较高,产ESBLs肺炎克雷伯菌对替加环素、美罗培南及亚胺培南较敏感,且携带的基因型以CTX-M型、TEM...  相似文献   

4.
目的了解乌鲁木齐地区临床分离肠道致病菌中志贺氏茵的流行趋势及耐药情况,分析产生超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)菌株的流行特征及耐药表型和基因型别,为临床合理使用抗生素提供依据。方法志贺氏菌选择培养基采用四区划线法分离培养出135株志贺氏茵,参照Kirby—Bauer纸片扩散法检测其对23种抗生素的耐药性:采用纸片确认试验对多重耐药菌株进行ESBLs表型确证检测;采用聚合酶链式反应(PCR)检测CTX—M、SHV、TEM等耐药基因,对PCR产物测序,通过与美国GenBank核酸库已登录的序列作比对确定基因亚型。结果135株志贺氏菌感染患者中,男性占53.3%(72/135),女性占46.7%(63/135);高发季节为6—8月;25岁以下发病人数占总发病人数的71.9%(97/135);对氨苄西林、氯霉素和复方磺胺甲噫唑的耐药率较高,分别达91.1%、68.1%、70.4%。有43株(31.9%)ESBLs表型检测阳性。PCR扩增结果表明,共有19株携带CTX.M基因,其中CTX.M.1群6株,CTX.M-9群13株;4株携带SHV基因;6株携带TEM基因。基因测序确定各基因型存在多种亚型。结论福氏志贺氏茵为本地区优势志贺氏茵。对某些抗生素存在高度耐药性。应引起临床重视。ESBLs耐药菌株以CTX.M型为主,流行亚型为CTX.M.14、CTX—M.15和TEM-1。产CTX.M-24志贺茵在乌鲁木齐属首次报告检出。  相似文献   

5.
目的 对肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌(ECO)CTX-M型产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)菌株进行耐药基因分型,从而调查广州地区目前临床分离菌对抗菌药物的耐药性.方法 收集广州地区9所医院临床分离所获产ESBLs肺炎克雷伯菌(KPN)和ECO CTX-M型菌株,应用纸片扩散筛选法和纸片扩散确证法对菌株进行确认,然后用PCR方法对ESBLs进行基因分型.结果 92株产ESBLs ECO,对氨苄西林、哌拉西林和头孢呋辛均高度耐药,耐药率分别为97.5%、89.5%和89.5%;42株产ESBLs KPN对氨苄西林(100.0%)和哌拉西林(100.0%)也呈高度耐药;PCR及测序结果显示,CTX-M-1群阳性株包括ECO 7株、KPN 9株,阳性率分别为7.6%和21.4%,基因型分布在ECO为CTX-M-3、CTX-M-15和CTX-M-55型,而在KPN为CTX-M-3和CTX-M-15型.结论 广州地区9所医院临床分离的134株产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌,对青霉素类和头孢菌素类抗菌药物的耐药率均达到很高水平,并且在广州地区首次分离获得CTX-M-55型耐药菌株.  相似文献   

6.
产超广谱β-内酰胺酶宋内志贺菌的检测   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的 了解宋内志贺菌中超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的基因型别.方法 K-B法测定5株宋内志贺菌对常用抗菌药物的耐药性,CLSI推荐的确证试验进行产ESBLs菌株的表型鉴定,并进行接合试验;采用TEM、SHV、CTX 3种β-内酰胺酶基因通用引物进行PCR扩增和DNA序列分析;同时进行指纹分析脉冲场检测.结果 5株宋内志贺菌对青霉素类、第一、二代头孢菌素、第三代头孢菌素中的头孢噻肟及庆大霉素、磺胺类显著耐药,对喹诺酮类抗菌药物中度敏感,对头孢他啶、四代头孢、阿米卡星、美罗培南敏感;这些菌株的ESBLs基因型均为CTX-M-15,CTX-M-15编码基因型可接合方式发生水平转移;4株菌株的PFGE谱型相同,1株不同.结论 5株宋内志贺菌产生CTX-M-15型ESBLs,引发对多种抗菌药物耐药,并存在克隆传播,需要加强检测.  相似文献   

7.
医院感染肺炎克雷伯菌的表型及基因型研究   总被引:1,自引:2,他引:1  
目的 调查研究天津南开医院医院感染肺炎克雷伯菌中产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)株的比率、耐药表型和ESBLs基因型.方法 纸片法ESBLs初筛及表型确证,K-B法检测耐药谱,聚合酶链反应(PCR)法检测ESBLs SHV、TEM、CTX-M-I、CTX-M-94类基因.结果 表型产ESBLs肺炎克雷伯菌的检出率为54.0%,ESBLs阳性菌对抗菌药物耐药的种类和程度明显高于ESBLs阴性菌,多数临床常用抗菌药物的耐药率达到80.0%~100.0%,仅对第三代头孢菌素与β-内酰胺酶抑制剂合剂和碳青酶烯类保持敏感;56株ESBLs表型阳性的肺炎克雷伯菌中SHV、CTX-M-1、TEM组基因的检出率分别为64.3%、46.4%和32.1%;同时携带2种和3种耐药基因的菌株占35.7%和8.9%.结论 在研究所涉及的肺炎克雷伯菌中·ESBLs表型阳性菌检出率高,耐药范围广,所携带的ESBLs基因以SHV和CTX-M-1组为主.  相似文献   

8.
产CTX-M酶肠杆菌科细菌耐药性及其相关耐药基因研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的了解产CTX-M型超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肠杆菌科细菌的阳性率、耐药性以及基因型分布。方法采用纸片扩散法检测临床分离大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对18种抗菌药物的耐药性,用聚合酶链反应(PCR)技术检测相关耐药基因并用DNA序列分析确认基因亚型。结果检测菌株中ESBLs阳性56株,阳性率为44.4%;检测菌株对亚胺培南全部敏感,质粒接合试验证实,CTX-M型ESBLs介导的耐药可以水平转移;产ESBLs阳性菌株中有48株扩增到CTX-M型耐药基因,其中CTX-M-3型11株,CTX-M-9型7株,CTX-M-14型25株。结论产CTX-M型ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌检出率较高,以CTX-M-14型为多;碳青霉烯类抗菌药物是目前治疗产ESBLs细菌最有效药物。  相似文献   

9.
大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌产ESBLs表型与基因型分析   总被引:3,自引:2,他引:1  
目的 了解医院产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌发生率及主要基因型分布特点.方法 采用美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)推荐的纸片扩散法对临床标本中分离的110株大肠埃希菌和94株肺炎克雷伯菌进行ESBLs的表型确定试验,同时分别用聚合酶链反应(PCR)扩增法检测TEM、SHV、CTX-M-1、CTX-M-2、CTX-M-9耐药基因,并对其产物进行序列分析.结果 产ESBLs阳性菌株的检出率分别为:肺炎克雷伯菌占36.2%,大肠埃希菌占42.7%,总检出率为39.7%;ESBLs检出模式以头孢噻肟、头孢噻肟/克拉维酸单组为底物阳性率最高,占阳性菌株的66.7%;单用头孢他啶,头孢他啶/克拉维酸一组为底物,会造成大肠埃希菌68.1%和肺炎克雷伯菌64.7%的漏检;耐药基因型分析显示,TEM、SHV、CTX-M-I、CTX-M-2、CTX-M-9基因检出率分别为54.3%、38.3%、21.O%、24.7%、70.4%,大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌均以CTX-M型为主要基因型,占91.4%;同时携带>2种耐药基因菌株占71.6%.结论 医院分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产ESBLs菌株携带多种耐药基因严重,需引起临床的高度重视.  相似文献   

10.
目的了解CTX-M-9组超广谱β-内酰胺酶(ESBLs),在温州地区分离的产ESBLs大肠埃希菌中的分布,分析CTX-M-9组基因的种类、数量以及多态性。方法收集2005-2006年临床分离非重复的145株ESBLs大肠埃希菌,纸片扩散法检测ESBLs,聚合酶链反应(PCR)检测CTX-M-9组ESBLs基因,对PCR产物进行测序以确定基因型,核酸序列比对分析SNPs位点。结果 145株ESBLs大肠埃希菌中,114株携带CTX-M-9组基因,阳性率78.6%;其中2005年73株中CTX-M-9组基因阳性60株占82.2%,2006年72株中阳性54株占75.0%,各阳性菌株的ESBLs基因均与CTX-M-9组中的CTX-M-14型相似,25株菌的CTX-M-14基因5个位点发生点突变,造成80、158、242、275位氨基酸改变。结论温州地区大肠埃希菌CTX-M-9组ESBLs耐药基因传播情况严重,检测到的均与CTX-M-14型相似,部分样本有点突变,并引起相应的氨基酸的改变。  相似文献   

11.
目的:分析了解新疆地区新生儿科分离的产超广谱β-内酰胺酶(Extended-Spectrumβ-lactamase,ESBLs)肺炎克雷伯菌的耐药性及耐药基因分布情况。方法:采用K-B法测定病原菌对19种抗菌药物的耐药率,采用聚合酶链反应(PCR)检测TEM、SHV、CTXM-1、CTXM-9等4种β-内酰胺酶基因,并对部分产物进行测序分析。结果:100株产ESBLs菌对亚胺培南全部敏感,对喹诺酮类耐药率在10%以下;但对大多β-内酰胺类抗生素全部耐药。基因型分析显示有72株携带TEM基因,79株携带SHV基因,58株携带CTX-M-1基因,42株携带CTX-M-9基因;91%的菌株同时携带两种及两种以上ESBLs基因型。结论:新生儿产ESBLs的肺炎克雷伯菌耐药严重,新疆地区新生儿以同时携带多种ESBLs基因型为主。  相似文献   

12.
目的了解某院临床分离的产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌的耐药性及基因型。方法收集临床分离的肺炎克雷伯菌,采用美国临床实验室标准化委员会2005年推荐的方法进行ESBLs初筛及表型确证试验;K-B纸片扩散法进行抗菌药物敏感性试验;聚合酶链反应(PCR)法分析产ESBLs菌株的基因类型。结果产ESBLs肺炎克雷伯菌的检出率为62.22%(56/90)。产ESBLs菌仅对第三代头孢菌素与β-内酰胺酶抑制剂合剂、碳青霉烯类抗生素较敏感。基因型分析结果显示,产ESBLs肺炎克雷伯菌中SHV型、CTX-M 1型、TEM型、CTX-M-9型的检出率分别为69.64%、51.79%、37.50%、0.00%,同时携带2种、3种耐药基因的菌株分别占35.71%和14.28%。结论产ESBLs肺炎克雷伯菌耐药严重,基因型以SHV、CTX-M-1为主。  相似文献   

13.
目的:了解临床分离大肠埃希菌的耐药性和超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)和头孢菌素酶(AmpC)基因分布情况。方法:采用VITEK-60全自动细菌分析仪对657株大肠埃希菌临床分离株进行药敏检测,并通过PCR方法检测其中140株试验菌的ESBLs和AmpC酶相关基因,对部分ESBLs基因进行DNA测序。结果:140株大肠埃希菌中ESBLs表型试验阳性的有86株,阳性率为61.4%。86株ESBLs表型阳性菌株中检测到ESBLs基因阳性的有80株,占93.0%。其中有61株携带CTX-M-9型基因,30株携带CTX-M-1型基因,23株携带TEM型基因,1株携带SHV型基因。140株大肠埃希菌中检测到AmpC酶基因阳性的有18株,阳性率为12.9%,其中有10株携带DHA型基因,9株携带CIT型基因,1株携带FOX型基因。结论:临床分离大肠埃希菌耐药情况严重,其携带ESBLs基因以CTX-M-9型为主,AmpC酶基因以DHA和CIT为主。  相似文献   

14.
目的对血流感染中分离的大肠埃希菌进行筛查并检测相关的耐药基因,为合理用药提供实验室依据。方法选取2015年6月至2016年5月温州医科大学附属第一医院门诊及住院患者血液中首次分离的216株大肠埃希菌,采用VITEK-2全自动微生物分析仪进行药敏试验;采用双纸片扩散法进行ESBLs表型检测;采用PCR方法筛选ESBLs基因,并测序确定其基因型。结果 216株大肠埃希菌对氨基糖苷类(除庆大霉素外)、头霉素类、呋喃妥因和碳青霉烯类等药物具有较好的敏感性,但对青霉素类、喹诺酮类和磺胺类药物耐药率较高;检出产ESBLs菌株56.94%(123/216);在130株第三代头孢菌素耐药株中,22株bla_(TEM)基因检测阳性,59株bla_(CTX-M)基因检测阳性,经测序比对显示:29株携带bla_(CTX-M-14)基因,23株携带bla_(CTX-M-15)基因。结论引起血流感染的大肠埃希菌多为对第三代头孢菌素耐药的产ESBLs菌株,携带的耐药基因主要为bla_(CTX-M)和bla_(TEM)。  相似文献   

15.
目的研究一株同时产ESBLs和AmpCβ-内酰胺酶弗氏柠檬酸杆菌(CFR)的耐药机制。方法 2008年1月从临床尿液标本中分离出多药耐药弗氏柠檬酸杆菌1株,采用双纸片扩散法检测产ESBLs,头孢西丁三维试验检测AmpC酶,E-test法测定抗菌药物最低抑菌浓度(MIC),聚合酶链反应(PCR)检测产ESBLs和AmpC酶基因,DNA测序决定基因型;接合试验测定耐药基因的转移性。结果临床分离出一株同时产ESBLs和AmpCβ-内酰胺酶的多药耐药弗氏柠檬酸杆菌,对头孢他啶、头孢噻肟、头孢西丁、氨曲南、氨苄西林、磺胺甲噁唑/甲氧苄啶的MIC分别为96、96、256、192、>256、>32μg/ml,PCR扩增及测序临床分离株携带blaCTX-M-3和blaCMY-2,接合试验显示含blaCTX-M-3和blaCMY-2基因耐药质粒可以通过接合转移至受体菌大肠埃希菌J53。结论 CFR同时携带有ESBLs和AmpCβ-内酰胺酶基因,ESBLs基因和AmpCβ-内酰胺酶基因由质粒介导。  相似文献   

16.
产ESBLs肺炎克雷伯菌β-内酰胺酶基因检测   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的了解产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌临床分离株中β-内酰胺酶(bla)基因流行状况。方法采用美国临床实验室标准化研究所(CLSI)推荐的的表型筛选与确证试验检测ESBLs,应用PCR扩增产ESBLs菌株bla(TEM)、bla(SHV)、bla(CTX-M)基因,并对PCR阳性产物进行克隆后测序确定其基因亚型。结果 46株产ESBLs肺炎克雷伯菌中,基因检出率分别为bla(TEM)11株,占23.9%;bla(SHV)13株,占28.3%;bla(CTX-M)43株,占93.5%;携带1种bla基因菌株21株,占45.7%;携带2种20株,占43.5%;携带3种3株,占6.5%;全部菌株bla(TEM)基因测序结果均为TEM-1亚型,bla(SHV)基因为SHV-11、12、28亚型;部分菌株bla(CTX-M)基因测序结果为CTX-M-15、24、38亚型。结论产ESBLs肺炎克雷伯菌中ESBLs基因型以CTX-M型为主,其次为SHV型,部分菌株同时携带广谱β-内酰胺酶基因TEM-1或SHV-11;监测产ESBLs细菌β-内酰胺酶基因流行状况,有助于指导临床合理应用抗生素。  相似文献   

17.
革兰阴性杆菌超广谱β-内酰胺酶基因型研究   总被引:2,自引:1,他引:2  
目的分析革兰阴性杆菌中超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的基因型.方法采用双纸片协同法筛选ES-BLs菌,用纸片扩散法检测其药敏结果,分别用TEM、SHV和CTX-M通用引物进行PCR扩增并对PCR产物进行序列分析.结果大部分产ESBLs菌对头孢噻肟耐药,而对头孢他啶敏感,少部分对两者都耐药,这些菌株前者以CTX-M引物的PCR扩增结果,主要为CTX-M-3,还检出CTX-M-12、CTX-M-14;后者以SHV引物的PCR扩增结果,主要为SHV-12,还检出SHV-40、SHV-33和SHV-5型.TEM引物扩增结果全部为TEM-1型广谱酶.结论革兰阴性杆菌中ESBLs主要是CTX-M-3型,62.9%的菌同时存在2~3种酶.  相似文献   

18.
目的 了解天津产ESBLs大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌基因型及耐药情况.方法 收集部分医院临床分离218株产ESBLs大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌,利用实时荧光定量PCR方法检测CTX-M-1、CTX-M-2、CTX-M-8、CTX-M-9、TEM、SHV、OXA-1、OXA-2、OXA-10耐药基因,结合Tm值将其分型.结果 109株产ESBLs大肠埃希菌耐药基因CTX-M-1、CTX-M-2、CTX-M-8、CTX-M-9、TEM、SHV、OXA-1分别为32.1%、0.9%、0.9%、33.9%、73.4%、27.5%、15.6%,携带>2种基因菌株达66.1%;109株产ESBLs肺炎克雷伯菌耐药基因CTX-M-1、CTX-M-2、CTX-M-8、CTX-M-9,TEM、SHV、OXA-1、OXA-10分别为49.5%、2.8%,1.8%、22.9%、78.9%、76.1%、33.0%、9.0%,携带>2种基因达82.2%;检测菌株对亚胺培南保持高度敏感.结论 天津市肺炎克雷伯菌及大肠埃希菌ESBLs的基因型以SHV型、TEM型、CTX-M-1型、CTX-M-9型为主,OXA呈上升趋势,各医院肺炎克雷伯菌耐药基因型存在一定差异.  相似文献   

19.
目的研究近3年分离的肺炎克雷伯菌超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的基因分型及耐药性变迁。方法选取用双纸片协同试验确认产ESBLs肺炎克雷伯菌145株,纸片扩散法(K-B)法检测对常用抗菌药物的耐药性,PCR法检测ESBLs基因并对阳性产物进行DNA测序及比对确认具体基因型别。结果 145株产ESBLs肺炎克雷伯菌,对头孢他啶、头孢吡肟、氨曲南耐药率逐年升高;对PCR阳性产物进行DNA测序及比对确定基因型分别为TEM、SHV型酶基因检测变化不大,而CTX-M型由以CTX-M-14型为主变迁为以CTX-M-28型为主,3年均未检测到OXA、LAP、PER、GES、SFO、VEB型ESBLs。结论近3年分离出的产ESBLs肺炎克雷伯菌基因中CTX-M型发生明显变迁,对头孢他啶、头孢吡肟、氨曲南耐药率明显升高,临床应结合耐药菌株的药物敏感试验和地方流行病学特征选择最佳的抗菌药物。  相似文献   

20.
目的探讨胆道感染的病原菌谱及耐药性,并对产ESBLs的大肠埃希菌进行基因分型。方法胆道感染住院手术患者的胆汁行细菌培养和药敏测定,设计特异性引物PCR扩增。结果 240例胆汁标本中分离出细菌200株,真菌25株,培养阳性率达93.75%,其中大肠埃希菌80株,占35.56%;大肠埃希菌部分出现多药耐药,但对亚胺培南、美罗培南及阿米卡星较为敏感,表型确证试验发现20株为ESBLs菌株,PCR检测发现20株均携带有TEM基因,共携带了5个ESBLs基因,其中还有10株CTX-M-9基因型,6株CTX-M-1基因型,有4株OXA-1基因型,5株SHV基因型;部分菌株携带有≥2个β-内酰胺酶基因。结论胆道感染的主要致病菌是大肠埃希菌,医院分离株呈现多药耐药,以产ESBLs株为主,其主要基因型为TEM基因,但也存在CTX-M、OXA、SHV等多种基因型。  相似文献   

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