老年患者医院感染产ESBLs及AmpC酶肺炎克雷伯菌检测及耐药性分析

目的 了解老年住院患者在医院感染肺炎克雷伯菌产ESBLs及AmpC酶的情况,为临床用药提供参考.方法 对2011年高龄住院患者进行病例剖析,整理出各类标本中分离的肺炎克雷伯菌单产ESBLs、AmpC酶和同产ESBLs及AmpC酶菌株的检出率及耐药性.结果 从老年住院患者各类标本中共分离到肺炎克雷伯菌97株,单产ESBLs 29株,占29.9％,单产AmpC酶16株,占16.5％,同产ESBLs及AmpC酶8株,占8.3％;产酶与非产酶菌株除对亚胺培南敏感率100.0％外,对其余(p-)内酰胺类抗菌药物头孢菌素类呈高度耐药,产酶菌株耐药率高于非产酶菌株,同产ESBLs及AmpC酶菌株耐药率要高于单产ESBLs和AmpC酶菌株.结论 老年住院患者感染的肺炎克雷伯菌单产ESBLs、AmpC酶及同产ESBLs及AmpC酶菌株检出率较高,并且产酶菌株对多种抗菌药物呈耐药状态.     

耐头孢西丁肺炎克雷伯菌AmpC酶的检测及耐药性基因分析

目的对耐头孢西丁肺炎克雷伯菌AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)进行检测及其耐药基因进行分析,探讨产AmpC酶基因对其耐药表型的影响。方法采用头孢西丁三维试验检测AmpC酶,采用双纸片确诊试验测定ESBLs,PCR扩增AmpC酶与ESBLs基因及其序列测定确定其基因型。结果 72株耐头孢西丁肺炎克雷伯菌中AmpC酶阳性有45株,阳性率为62.5%(45/72),3株为CMY-2型,43株为DHA-1型,其中在1株菌株中同时存在CMY-2和DHA-1两种基因;45株AmpC酶阳性肺炎克雷伯菌中33株检测出ESBLs,检出率为73.3%(33/45),23株携带CTX-M基因,15株携带SHV基因,19株携带TEM基因。结论 AmpC阳性肺炎克雷伯菌菌株中ESBLs检出率高,加强监测高产AmpC酶耐头孢西丁肺炎克雷伯菌,治疗相关菌感染以亚胺培南和美罗培南为首选,合并产AmpC酶和ESBLs肺炎克雷伯菌比单产AmpC酶菌株对亚胺培南和美罗培南的耐药率低。     

女性盆腔炎病原菌分布与耐药性分析

目的 了解引起女性盆腔炎感染的病原菌分布及耐药情况,为临床正确诊断、合理应用抗菌药物提供科学依据.方法 对分离的348株病原菌用K-B法进行药敏试验,对革兰阴性菌采用ESBLs确认试验检测ESBLs,头孢西丁三维试验检测AmpC酶.结果分离的348株病原菌中,革兰阴性菌215株,占61.78%,主要为大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、褪色沙雷菌;革兰阳性菌127株,占36.49%,以凝固酶阴性葡萄球菌、金黄色葡萄球菌居前2位,革兰阴性杆菌ESBLs、AmpC酶总检出率分别为38.1%、34.9%,单产ESBLs、单产AmpC、同产ESBLs+高产AmpC酶、ESBLs+诱导AmpC酶菌株依次占13.02%、9.77%、13.95%、11.16%,革兰阳性菌除对万古霉素、替考拉宁、喹奴普汀/达福普汀、利福平的耐药率较低外,其余抗菌药物的耐药率均>48.00%,革兰阴性菌对亚胺培南、美罗培南、头孢吡肟的耐药率分别为5.58%、3.72%、26.00%,产酶株较非产酶株具有较高的耐药率(P<0.05).结论 女性盆腔感染以凝固酶阴性葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、褪色沙雷菌为主,万古霉素、替考拉宁对革兰阳性菌,亚胺培南、美罗培南、头孢吡肟对革兰阴性菌具有良好的抗菌活性.     

产ESBLs和AmpC肺炎克雷伯菌的临床分布及耐药性监测

目的对医院临床分离的肺炎克雷伯菌中ESBLs和AmpC的流行情况及其对常见抗生素的耐药谱特征进行分析,指导临床合理选择抗菌药物。方法采用头孢西丁三维试验检测AmpC酶,采用双纸片确诊试验测定ESBLs,采用K-B纸片扩散法检测17种常用抗生素的耐药性。结果临床分离无重复肺炎克雷伯菌129株,标本分布主要为痰标本检出90株(69.7%)、血液23株(17.8%)和尿液7株(5.4%),科室分布主要为ICU28株(21.7%),呼吸内科57株(44.2%),烧伤科17株(13.2%);129株肺炎克雷伯菌中检出产ESBLs酶菌82株(63.56%),产酶菌株的耐药性比非产酶菌株的耐药性明显严重,对哌拉西林、庆大霉素、氨苄西林/舒巴坦、头孢哌酮/舒巴坦、环丙沙星、左氧氟沙星、头孢哌酮、头孢曲松、头孢吡肟、氨曲南、头孢他啶均大于31.7%;82株产ESBLs肺炎克雷伯菌中检出产AmpC菌45株(54.87%),所有菌株均对亚胺培南、美罗培南和阿米卡星敏感,AmpC阳性菌株对亚胺培南、美罗培南和头孢吡肟的耐药率远低于AmpC阴性菌株。结论肺炎克雷伯菌菌株中ESBLs和AmpC检出率高,合并产AmpC酶和ESBLs肺炎克雷伯菌比单产AmpC酶菌株对亚胺培南和美罗培南的耐药率低,应加强监测产ESBLs和AmpC酶肺炎克雷伯菌,治疗相关菌感染以亚胺培南、美罗培南和头孢吡肟为首选。     

肺炎克雷伯菌产ESBLs和AmpC酶的检测及其质粒分析

目的了解武汉地区分离的肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)和AmpC酶的发生率、耐药情况及质粒型耐药基因。方法从该地区3家医院的重症监护病房(ICU)分离获得38株肺炎克雷伯菌,采用E-test法进行最低抑菌浓度(MIC)测定;以美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)推荐的双纸片协同试验和确证试验检测ESBLs;酶提取物三维试验检测AmpC酶;质粒接合和消除试验检测耐药基因。结果产ESBLs的肺炎克雷伯菌检出率为71.05%(27/38);产AmpC酶的肺炎克雷伯菌检出率为13.16%(5/38);其中同时产ESBLs和AmpC酶的肺炎克雷伯菌检出率为5.26%(2/38)。产酶株对第三代头孢菌素、氨基糖苷类、氟喹诺酮类耐药率均较高,对亚胺培南、厄他培南等碳青霉烯类耐药率最低。通过质粒接合和消除试验,40%(4/10)产ESBLs的肺炎克雷伯菌和20%(1/5)产AmpC酶的肺炎克雷伯菌检测到传播耐药的质粒。结论肺炎克雷伯菌产ESBLs和AmpC酶是其对多种抗菌药物耐药的主要原因,其耐药扩散与细菌质粒的水平传播有关,对这些产酶株的监测和阻止其传播是控制肺炎克雷伯菌感染的重要措施。     

ICU感染患者分离肺炎克雷伯菌AmpC酶、 ESBLs基因检测及耐药性

目的 研究重症监护室(ICU)感染患者分离的肺炎克雷伯菌头孢菌素(AmpC)酶、超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)基因检测情况，并分析耐药性。方法 选取2016年4月-2020年4月四川大学华西医院金堂医院ICU医院感染患者临床分离的498株肺炎克雷伯菌株，进行细菌分离与鉴定、AmpC酶耐药表型与基因型分析、接合转移试验，选出AmpC酶菌株并确证，聚合酶链式反应(PCR)、DNA测序分析AmpC酶基因型，同时进行药敏试验。结果 498株肺炎克雷伯菌株主要来自痰液(78.31%),共筛选出疑产AmpC酶阳性菌株102株，初筛阳性率20.48%,经接合试验、AmpC酶三维试验确证获得50株产AmpC接合子，产AmpC酶检出率49.02%(50/102);经基因测序单纯AmpC酶基因阳性菌株32株(64.00%),同时携带AmpC酶及ESBLs基因菌株18株(36.00%),DNA测序证实均为DHA-1型AmpC酶。>60岁人群产AmpC酶肺炎克雷伯菌检出率高于其他年龄段人群(P<0.05);同产ESBLs+AmpC酶的肺炎克雷伯菌耐药率高于单产AmpC酶(除头孢唑林、头孢呋辛、阿...     

产AmpC酶和ESBLs肺炎克雷伯菌的耐药性分析与耐药基因检测

目的 了解浙江省温州、台州地区的肺炎克雷伯菌耐药性及存在状况.方法 采用VITEK 60型和VITEK 32型、肉汤稀释法测定56株产C类头孢菌素酶(AmpC)和超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌的药敏结果;采用聚合酶链反应(PCR)分析ESBLs、质粒介导的AmpC酶和AMEs基因型.结果 产AmpC酶和ESBLs肺炎克雷伯菌首选亚胺培南(100%敏感),对其他抗菌药物均有不同程度的耐药;20株菌株100%检出TEM基因,90%检出CTX-MⅠ基因,100%检出SHV基因,85%检出DHA基因,15%检出MIR基因,90%检出不同的氨基糖苷类修饰酶(AMEs)基因.结论 产AmpC酶和ESBLs肺炎克雷伯菌表现多药耐药,碳青酶烯类药物亚胺培南是治疗效果最好的药物,同时存在2～6种不同类型的耐药基因.     

肺炎克雷伯菌医院感染的临床分布及耐药性分析

目的 了解肺炎克雷伯菌医院感染的临床分布及其耐药现状,为临床合理使用抗菌药物提供依据.方法 对近两年临床分离的470株肺炎克雷伯菌,采用K-B法检测其对15种抗菌药物的耐药性,用三维试验检测AmpC酶和ESBLs.结果 菌株分离最多的临床科室是ICU和烧伤科,检出率最高的标本是痰液和创面;药敏结果表明,肺炎克雷伯菌对青霉素类,一、二代头孢菌素,喹诺酮类和复方新诺明等药物的耐药率51.1%～88.3%,第三、四代头孢菌素的耐药率为32.6%～40.4%,未发现对美罗培南耐药株,但有2株对亚胺培南耐药;共检出产ESBLs菌152株,检出率32.3%,检出产AmpC酶菌29株,检出率6.2%,其中有21株为同时产ESBLs和AmpC酶.结论 下呼吸道感染是肺炎克雷伯菌感染的最常见临床类型,ICU、烧伤科是医院感染的高危病区,肺炎克雷伯菌耐药率日趋严重,应加强实验室检测和信息反馈.     

产AmpC肺炎克雷伯菌质粒介导的多药耐药性与基因型研究

目的探讨产AmpC肺炎克雷伯菌耐药质粒介导的多药耐药性、耐药基因类型及转移方式。方法应用VITEK-2型全自动细菌鉴定仪鉴定细菌,头孢西丁纸片扩散法筛选出疑产AmpC酶阳性菌株,采用接合转移试验了解肺炎克雷伯菌耐药基因转移方式,通过K-B法检测受体菌的多药耐药性,并通过酶粗提物头孢西丁三维试验和PCR测序等试验分析其耐药基因。结果 820株临床分离的肺炎克雷伯菌筛选出疑产AmpC酶阳性菌株108株,阳性率为13.17%;108株疑产AmpC菌经接合试验、AmpC酶表型确认试验获53株产AmpC接合子;经基因测序单纯AmpC酶基因阳性菌株34株,阳性率64.15%;同时携带ESBLs和AmpC基因菌株检出19株,阳性率35.85%;其均能通过接合转移方式将其质粒携带的耐药性传递至受体菌。结论质粒介导AmpC酶是肺炎克雷伯菌产生多药耐药的重要原因,产酶株对多种抗菌药物耐药,耐药基因质粒的转移可导致耐药性的传播扩散。     

肺炎克雷伯菌耐药性分析及质粒介导的 AmpC酶基因型检测

目的了解肺炎克雷伯菌的耐药性和质粒介导的AmpC酶基因型。方法采用K-B法进行抗菌药物敏感试验,用酶提取物三维试验检测AmpC酶,用聚合酶链反应(PCR)产物测序确定AmpC酶基因型。结果产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)阳性率41.90%、AmpC酶阳性率0.95%、ESBLs AmpC酶阳性率2.86%;药敏试验结果显示,对青霉素类、头孢菌素类、酶抑制剂复合剂、氨曲南、氟喹诺酮类均有较高耐药,亚胺培南敏感率100.00%;AmpC酶阳性菌株为质粒介导DHA型AmpC酶。结论可见临床分离的肺炎克雷伯菌中已经出现产质粒介导AmpC酶菌株,其耐药基因可在同种或不同种传播。     

肺炎克雷伯菌和产酸克雷伯菌中ESBLs和AmpC酶基因的研究

目的研究肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌中ESBLs和AmpCβ-内酰胺酶的存在形式及其基因类型和转移方式。方法利用CLSI纸片法确认实验和APB纸片增强试验分别检测ESBLs和AmpC酶,基因芯片技术和序列分析测定两种酶基因的类型,接合转移实验了解肺炎克雷伯菌和产酸克雷伯菌耐药基因转移方式。结果在对头孢西丁不敏感的72株肺炎克雷伯菌和20株产酸克雷伯菌中,以同时产生ESBLs和AmpC酶为主要形式,分别占54.2%和75.0%;单产ESBLs分别为22.2%和25.0%,肺炎克雷伯菌中单产AmpC酶占12.5%;肺炎克雷伯菌和产酸克雷伯菌中的AmpC酶基因绝大多数为DHA型(测得DHA-1型基因),ESBLs则以SHV型为主(测得SHV-12型),它们均能通过接合转移方式将其质粒携带的耐药性传递至受体菌。结论同时存在的ESBLs和AmpC酶是肺炎克雷伯菌和产酸克雷伯菌耐药的主要原因,耐药基因的转移可导致耐药性的传播扩散。     

肺炎克雷伯菌质粒编码的AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶的表型和基因型分析

目的研究肺炎克雷伯菌质粒编码的AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的表型和基因型。方法利用3-氨基苯酚硼酸及ESBLs确认试验检测AmpC酶与ESBLs表型,接合转移试验了解质粒在细菌间的传递;通过质粒的提取、纯化,PCR反应及序列分析,研究肺炎克雷伯菌质粒携带的ampC基因和ESBLs基因类型。结果从肺炎克雷伯菌中获得1条约15 kb大小的质粒,此质粒可通过接合转移方式将耐药性传递至大肠埃希菌,以从肺炎克雷伯菌及接合转移后的接合子细菌中,提取的质粒为模板,均可扩增出DHA型ampC基因及SHV型ESBLs基因,序列分析进一步证实ampC及ESBLs基因型分别为DHA-1型及SHV-12型。结论从肺炎克雷伯菌可转移的质粒中,检测到DHA-1型ampC基因及SHV-12型ESBLs基因。     

碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌多重β-内酰胺酶基因型研究

目的:研究医院感染碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌中碳青霉烯酶、超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)和质粒介导的AmpC酶基因型的分布。方法:筛选出产KPC酶肺炎克雷伯菌,采用改良的Hodge试验、接合试验、聚合酶链反应(PCR)等方法确定多重β-内酰胺酶基因型。结果:收集并证实产KPC-2型碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌26株,其中CTX-M型ESBL检出率最高;3株细菌同时编码ESBL和AmpC基因,其中2株细菌同时携带blaCTX-M-3、blaSHV-12和blaDHA-1三种β-内酰胺酶基因。结论:产KPC酶肺炎克雷伯菌同时携带有其他β-内酰胺酶耐药基因,CTX-M型ESBL最为常见,使细菌耐药性更为严重。     

大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌质粒β-内酰胺酶检测

目的了解大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产质粒β-内酰胺酶的类型、检测方法及耐药性. 方法用NCCLS确证试验检测超广谱β-内酰胺酶,根据表型、纸片协同试验及头孢西丁三相试验检测AmpC酶. 结果 835株大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌,共检测出产超广谱β-内酰胺酶菌株220株,大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌总ESBLs发生率为26%;根据头孢西丁三相试验结果,表现为产AmpC酶的菌株共有36株,检出率为4.31%,表型鉴别高产AmpC酶,表现为产AmpC酶的菌株共有37株,检出率为4.43%,与头孢西丁三相试验符合率为97.3%;纸片协同试验表现为产AmpC酶的为32株,检出率为3.83%,与头孢西丁三相试验符合率为88.9%. 结论大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶为主;表型筛选法检测AmpC酶结果可靠、方法简便,易于在临床实验室中推广应用.     

肝病患者医院感染肺炎克雷伯菌产β-内酰胺酶的分类检测及耐药性分析

目的 研究肝病患者医院感染肺炎克雷伯菌(KPN)所产各种β-内酰胺酶(β-lase)分布情况及其耐药性,为临床合理用药提供依据.方法 采用多底物纸片法(协同法、拮抗法)、超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)确认试验、AmpC酶检测法检测30株肝病患者医院感染KPN所产各种β-lase,采用琼脂扩散法分析其耐药性.结果 30株KPN总β-lase检出率为100.0%,其中产青霉素酶24株(80.0%),产广谱酶3株(10.0%),产ESBLs 3株(10.0%),未检出AmpC酶、复合产酶、碳青酶烯酶;肝病患者医院感染KPN对5大类9种抗菌药物较敏感,对环丙沙星、亚胺培南敏感(100.0%),对阿米卡星、庆大霉素较敏感(均90.0%),对氨苄西林耐药率高(100.0%).结论 β-lase检出率高,以青霉素酶、ESBLs为主,未检出AmpC酶、产复合酶、碳青酶烯酶;肝病患者医院感染KPN耐药率不高.     

产酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检测及耐药性分析

目的研究某医院产超广谱β 内酰胺酶( ESBLs)和质粒AmpC酶的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌耐药情况。方法对2006年11月-2007年7月分离的139株大肠埃希菌和102株肺炎克雷伯菌分别采用标准纸片扩散法检测ESBLs,头孢西丁三维试验检测质粒AmpC酶;并用K B纸片扩散法进行药敏试验,根据美国临床实验室标准化委员会 2002年判断标准分析结果。结果139株大肠埃希菌产ESBLs、AmpC酶及ESBLs+AmpC酶菌株的检出率分别为48.20%、9.35%、2.88%;102株肺炎克雷伯菌产ESBLs、AmpC酶及ESBLs+AmpC酶菌株的检出率分别为55.88%、8.82%、2.94%。产ESBLs菌株对头孢菌素类、氨基糖苷类、单环酰胺类抗菌药物耐药率明显高于非产ESBLs菌株（P＜0.001～0.05 ）。除碳青霉烯类及头孢他啶等抗生素外,产AmpC酶菌株对二、三代头孢菌素及喹诺酮类等药的耐药率均明显增高（P＜0.001～0.05 ）。结论耐药酶的产生是导致细菌耐药的重要原因之一,合理使用抗菌药物对预防耐药菌的产生和控制医院感染非常重要。     

呼吸重症监护室产质粒介导AmpC酶和ESBLs细菌的耐药性及基因型

目的了解深圳地区2所三级综合医院呼吸重症监护室（RICU）分离的革兰阴性（G-）菌产AmpC酶和超广谱β 内酰胺酶（ESBLs）情况及其耐药性与基因型特征。方法选择分离自上述2所医院RICU的对第一、二代及1种以上第三代头孢菌素耐药的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌,采用纸片扩散法及E test进行药敏试验,酶提取物三维试验检测单产AmpC酶,美国临床实验室标准化研究所 (CLSI)推荐的表型筛选和确证试验检测产ESBLs菌株,聚合酶链反应（PCR）通用引物扩增AmpC酶和ESBLs基因及其序列测定以确定基因亚型。结果检出单产AmpC酶、单产ESBLs、合产AmpC酶和ESBLs的菌株分别为9株（9.38%）、52株（54.17%）和10株（10.42%）。单产AmpC酶菌株对头孢吡肟和亚胺培南具有较高的敏感性,耐药率分别为33.33％和0.00%;单产ESBLs菌株对亚胺培南、哌拉西林/他唑巴坦及头孢哌酮/舒巴坦的敏感性较高,耐药率分别为0.00％、34.62％和19.23%;合产AmpC酶和ESBLs的菌株仅对亚胺培南敏感,未发现耐药株。检出AmpC酶基因型为DHA 1和ACT 1,分别占76.92％和26.08%;ESBLs基因型为CTX M系列和SHV 5,分别占96.77％和3.23%。结论该2所综合医院RICU存在产质粒介导DHA 1、ACT 1型AmpC酶和CTX M、SHV型ESBLs的G-菌流行株,其对大多数新型广谱β 内酰胺类抗生素耐药,对亚胺培南敏感,值得临床关注。     

维吾尔族与汉族新生儿感染产超广谱β-内酰胺酶与头孢菌素酶病原菌的耐药性及基因型分析

目的 了解乌鲁木齐地区维吾尔族与汉族新生儿中肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)与头孢菌素酶(AmpC酶)的耐药性及基因型分布.方法 采用纸片扩散(K-B)法测定299株病原菌对22种抗菌药的耐药率;利用多重PCR技术检测产ESBLs或AmpC酶菌株耐药基因,并用DNA序列分析确认基因亚型;采用数字表法随机抽取产ESBLs的TEM、SHV、CTX-M-1、CTX-M-9组阳性菌株及产AmpC酶的DHA、CIT阳性菌株共148株进行测序.耐药率采用世界耐药监测网Whonet 5.4软件进行统计,数据对比应用医学PEMS 3.1统计软件采用卡方检验进行统计学处理,P＜0.05认为差异有统计学意义.结果 在耐药率方面,维吾尔族与汉族新生儿中产ESBLs肺炎克雷伯菌对复方新诺明[80.0%(40/50)和56.0%(28/50),x2=6.6176,P=0.0101]、产ESBLs大肠埃希菌对头孢哌酮+舒巴坦[54.2%(32/59)和94.0%(47/50),x2=21.4512,P=0.0000]、产AmpC酶肺炎克雷伯菌对头孢哌酮+舒巴坦[100.0%(20/20)和72.2%(26/36),x2=6.7633,P=0.0093]和对阿米卡星[65.0%(13/20)和25.0%(9/36),x2=8.6246,P=0.0033]耐药率差异有统计学意义.基因测序结果显示,ESBLs基因型除SHV在大肠埃希菌中维吾尔族新生儿只检出3.4%(2/59)而汉族新生儿未检出外,其他TEM、CTX-M-1、CTX-M-9组基因检出率均在38.0%(19/50)以上;其中TEM、CTX-M-1组基因分别为单一的TEM-1型和CTX-M-15型,SHV、CTX-M-9组阳性基因分别检出SHV-1、2、11、12、27、61、99和CTX-M-9、14、24、27、65等不同型别基因.肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌中检出2种或2种以上ESBLs基因型的菌株占56.7%(42/74)～90.0%(63/70).携带AmpC酶基因的2种菌在2个民族新生儿中基因型都只集中在DHA-1和CMY-44型,其他型未检出.2个民族新生儿间只有产TEM型的ESBLs大肠埃希菌检出率为维吾尔族新生儿高于汉族新生儿[71.2%(42/59)和50.0%(25/50),x2=5.1291,P=0.0235],其余各种耐药基因型检出率差异无统计学意义(x2＜3.7780,P＞0.05).结论 2个民族新生儿间部分菌株耐药率和耐药基因型分布差异有明显统计学意义,而且肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌携带多种耐药基因并对β-内酰胺类抗生素呈高耐药性.

Abstract：

Objective This study aimed to investigate drug resistance and genotypes of the extended spectrum β-lactamase (ESBLs) and AmpC β-lactamase-producing Escherichia coli and Klebsiella pneumoniae isolated from Uygur and Han newborns in Urumqi. Methods Disk diffusion test (Kirby-Bauer) was used for detecting drug resistance of 299 strains to twenty two kinds of antibiotics. Resistance genes of the ESBLs and AmpC β-lactamase-producing strains were amplified by multiplex PCR and subtypes were confirmed by DNA sequence analysis. Total 148 strains were selected with random number table and sequenced,which included TEM-, SHV-, CTX-M-1-, or CTX-M-9- positive ESBLs-producing strains and DHA-,or CIT- positive AmpC β-lactamase-producing strains. Antibiotic resistant rates were analyzed by Whonet 5.4 and statistic analysis was performed by chi-square ( x2 ) test with PEMS 3. 1. Results The antibiotic resistant rates between Uygur and Han newborns significantly differ in ESBLs-producing Klebsiella pneumoniae to Suffamethoxazolum-Trimethoprimum (80. 0% (40/50) and 56. 0% (28/50) ,x2 = 6. 6176,P = 0. 0101 ) ,in ESBLs-producing Escherichia coli to Sulbactam and Cefopcrazone (54. 2% (32/59) and 94. 0% (47/S0), x2 = 21.4512, P = 0. 0000 ), and in AmpC β-lactamase-producing Klebsiella pneumoniae to Sulbactam and Cefopcrazone ( 100. 0% (20/20) and 72. 2% (26/36) ,x2 =6. 7633 ,P =0. 0093) and to Amikacin (65.0% (13/20) and 25.0% (9/36), X2 = 8.6246, P= 0.0033). Although SHV gene of ESBLs-producing Escherichia coli was detected from Uygur newborns at only 3.4% (2/59) and not detectable from Han newborns, TEM, CTX-M-1, and CTX-M-9 group genes were all detected over 38.0%(19/50). Among the detected strains,the subtypes of TEM and CTX-M-1 were mainly TEM-1 and CTX-M-15,respectively; whereas the subtypes of SHV and CTX-M-9 included SHV-1,2,11,12,27 ,61,99 and CTX-M-9,14,24,27,65, respectively. The strains of Escherichia coli and Klebsiella pneumoniae carrying two or more kinds of ESBLs genotypes were 56. 7% (42/74) -90. 0% (63/70). Two species carrying the AmpC gene in two kinds of newborns were only grouped in the subtypes of DHA-1 and CMY-44 ,and other subtypes were not detected at all. Moreover,TEM-positive ESBLs-producing Escherichia coli were detected from Uygur newborns at the higher rate than that from Han newborns (71.2% (42/59) and 50. 0% (25/50), x2 =5. 1291 ,P= 0. 0235 ), while there was no difference in other genotypes detected between two kinds of newborns ( x2 ＜ 3. 7780, P ＞ 0. 05 ). Conclusion There were significant differences in antibiotic resistance and genotype distribution of Klebsiella pneumoniae and Escherichia coli between two nationality newborns, and these two bacteria detected in this study carried multi-resistance genes and showed high resistant to β-lactamase antibiotics.     

质粒介导产AmpC酶大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌AmpC基因型检测与分析

目的了解台州、温州两地临床分离的由质粒介导的产AmpC酶大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌ampC耐药基因型。方法采用酶提取三维试验、头孢西丁三相试验、氯唑西林双纸片协同法等方法测定大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌AmpC酶;采用PCR法测定大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌ampC耐药基因型。结果在20株产AmpC酶的大肠埃希菌中,检测到DHA基因有5株（25%）,检测到MIR基因有2株（10%）,检测到FOX基因有2株（10%）;在20株产AmpC酶的肺炎克雷伯菌中,检测到DHA基因有7株（35%）,检测到MIR基因有1株（5%）;在产AmpC酶的大肠埃希菌中,有1株ESBLs阳性的菌株,AmpC氯唑西林协同试验阳性,但AmpC三维试验与头孢西丁三维试验均阴性,在质粒中同时检测到DHA基因与MIR基因。结论两地临床分离的由质粒介导的大肠埃希菌以DHA基因为主,阳性率25%,MIR、FOX基因为辅,阳性率各10%;由质粒介导的肺炎克雷伯菌ampC耐药基因以DHA基因为主,阳性率35%,MIR基因为辅,阳性率为5%;未检到其他ampC耐药基因。