热休克蛋白70与耐受的机制

热休克蛋的白（HSP）是机体在应激情况下迅速合成的一组蛋白质，热休克蛋白70（HSP70）是最重要的家族，具有普遍性、高度保守性及应激性，并通过分子伴侣作用、抗氧化作用、协同免疫作用和抗细胞凋亡作用对再次出现的应激有保护耐受作用，且具有交叉耐受性。本文在叙述热休克蛋白的概念之后，着重对热休克蛋白增强耐受性的机制及对热休克蛋白诱导现象的研究和应用展望进行了简要综述。     

热应激时热休克蛋白70及其细胞保护作用

热应激时机体组织细胞可合成热休克蛋白以提供细胞保护。本文对热应激状态下热休克蛋白７０（ＨＳＰ７０）的细胞保护作用及其在各器官组织中的表现进行了综述,并探讨了ＨＳＰ７０在热应激时的细胞保护作用机制及其在高温医学中的应用前景。     

热休克蛋白70的特性与热耐受

在突然升温和其他应激的条件下 ,一切生物细胞包括原核细胞及真核细胞都合成了一系列蛋白质 ,这些蛋白质被命为热休克蛋白 (heat shock protein,HSP)。近年来的研究 ,人们发现以热为刺激原诱导细胞产生热休克蛋白 ,并可诱导基因调控水平的变化而形成机体抗热的保护作用。1　热休克蛋白热休克蛋白 (HSP)是一组所有的细胞能在应激情况下由热休克基因所编码合成的序列高度保守的伴随细胞蛋白 ,并能对抗更为严重的应激损伤 ,这种现象称为热休克反应 (heatshock response,HSP)。目前认为热休克反应是细胞对于各种不利于自身的因素刺激所表现…     

高温作用后大鼠视网膜热休克蛋白70的表达

目的观察高温作用后大鼠视网膜热休克蛋白70(HSP 70)的表达和分布.方法SD大鼠在高温环境生存2 h,分别于4、18、24、48 h后摘除眼球,用免疫组织化学方法观察大鼠视网膜中HSP 70的表达和分布.结果高温后及正常对照组视网膜各层的均有HSP 70的表达,各层高温后18 h与对照组比较差异均有非常显著性(P＜0.01),随时间的延长而逐渐降低.结论高温可诱导视网膜各层组织HSP 70的表达增高.     

热休克蛋白70在乳腺癌中的表达

目的 探讨乳腺癌组织中热休克蛋白70(HSP70)表达水平及其临床意义.方法 用免疫印迹法检测47例乳腺癌组织和43例良性乳腺病变组织中HSP70的表达.结果 HSP70在乳腺癌组织中的表达水平(142 582)升高.与良性乳腺病变组织(40 449)相比,差异有统计学意义(P<0.01);乳腺癌HSP70的表达与临床分期、淋巴结是否转移及肿瘤直径有关(P<0.05),而与年龄、月经状况及组织学分型无关(P>0.05).结论 HSP70在乳腺癌组织中存在一定程度的异常表达.提示,在乳腺癌的发病机制中可能发挥一定作用.     

风湿热患儿血液热休克蛋白70的表达

目的　探讨热休克蛋白 70 (HSP70 )在儿童急性风湿热 (ARF)中的作用。　方法　采用Westernblot技术检测ARF活跃期、静止期及健康对照组血液单个核细胞HSP70表达情况 ,并与血沉 (ESR)、C反应蛋白 (CRP)进行相关分析。　结果　活跃期组HSP70呈高表达 ,静止期组表达降低 ,正常对照组呈低表达 ,活跃期组与静止期组及正常对照组比较 ,有显著差异 (P <0 .0 1) ;静止期组与正常对照组 ,差异无显著性 (P >0 .0 5 )。活跃期组血液HSP70表达与ESR、CRP呈正相关。　结论　ARF患儿血液HSP70表达可作为判断风湿活跃的一项实验指标     

锌对热应激大鼠热休克蛋白70mRNA表达的影响

目的：锌对热应激大鼠热休克蛋白７０ ｍ Ｒ Ｎ Ａ 表达的影响。方法：分别以高、中、低锌饲料（锌含量分别为９２２０、４５６１、２１７０ ｍ ｇ／ｋｇ 饲料）喂养３ 组大鼠,热暴露（干球４１５ ° Ｃ、湿球３２ ° Ｃ）３０ ｍ ｉｎ 时断头处死,应用 Ｎｏｒｔｈｅｒｎ 印迹杂交和斑点杂交检测热应激大鼠肝脏热休克蛋白７０ ｍ Ｒ Ｎ Ａ 的表达情况。结果：不经受热暴露的３ 组动物仅高锌组能检测到热休克蛋白７０ ｍ Ｒ Ｎ Ａ,而热暴露３０ ｍ ｉｎ 的３ 组动物均有热休克蛋白７０ ｍ Ｒ Ｎ Ａ 条带,且依锌水平不同,其表达强弱依次为高锌组强于中锌组,中锌组强于低锌组。结论：热应激时热休克蛋白７０ 基因的转录水平提高;锌通过活化热休克蛋白７０ 基因的转录而诱发热应激大鼠热休克蛋白７０ 的合成,从而使机体对热暴露产生更强的耐受力。     

谷氨酰胺对肝癌细胞热休克蛋白70表达的影响

目的研究谷氨酰胺(Gln)对体外培养肝癌细胞株SMMC-7721内热休克蛋白70(HSP70)表达的影响,及其与细胞增殖的关系。方法SMMC-7721细胞株分别与0、0.5、1.0、2.0、4.0、8.0和16.0mmol/L的Gln培养24小时后,采用MTT法检测SMMC-7721细胞的增殖,RT-PCR和Western blot方法检测细胞内HSP70 mRNA和蛋白质的表达。结果Gln能显著促进SMMC-7721细胞增殖,当Gln浓度为2.0mmol/L时,SMMC-7721细胞的增殖达峰值。SMMC-7721细胞内有HSP70表达,Gln显著增加HSP70 mRNA和蛋白质的表达(P<0.05),当Gln浓度为2mmol/L时,HSP70表达量最高。结论诱导SMMC-7721细胞HSP70表达增高可能是Gln促肿瘤生长的作用机制之一。     

噪声预暴露对强声致豚鼠听力损伤及热休克蛋白70表达的影响

目的研究噪声预暴露在强噪声所致豚鼠听力损伤中的保护作用以及内耳毛细胞内热休克蛋白 70 (HSP70 )的表达。方法体重 2 5 0～ 30 0g健康杂色、耳廓反应正常豚鼠 4 0只 ,随机分为正常对照组 ,噪声预暴露组 ,强噪声暴露组 ,噪声预暴露 +强噪声暴露组。所用预暴露噪声为 95dBSPL、6h× 10d ,强噪声暴露为 110dBSPL、2h。应用听性脑干反应 (ABR)测听、基底膜铺片和免疫组化方法分别检测听阈位移、毛细胞缺失率和HSP70在毛细胞的表达。结果与单纯强噪声暴露组相比 ,噪声预暴露 +强噪声暴露组听阈位移以及毛细胞缺失率均显著降低 ,其中第 3排外毛细胞缺失率降低 2 4 .8% (P <0 .0 5 ) ,处理后第 6天听阈位移降低 6 7.9% (P <0 .0 1) ;与正常对照组相比 ,声暴露后HSP70在毛细胞表达均显著增加 (P <0 .0 5 ) ,以预暴露后强噪声暴露组表达最强 ,但预暴露组和单纯强噪声暴露组毛细胞HSP70的表达量无显著差别。结论适当的噪声预暴露能够减轻高强度噪声所致内耳毛细胞损伤 ,对听觉系统有一定的保护作用 ;噪声暴露诱导内耳毛细胞HSP70的高表达 ,可能是噪声预暴露保护效应机制之一     

不同气候地区武警士兵热休克蛋白71表达的差异性分析

目的　分析来自北京、郑州和广州三个地区武警士兵外周血淋巴细胞热休克蛋白 71(HSP71)基础和热应激后表达水平的差异性。方法　用流式细胞术检测淋巴细胞HSP71水平 ,用彗星试验检测淋巴细胞在基础和应激状态下DNA的损伤情况。结果　彗星试验显示 ,淋巴细胞在基础和热应激条件下 (41℃ ,1h)未发现有明显的DNA损伤 ,三个地区之间士兵淋巴细胞在基础和应激条件下DNA损伤的差异均无显著性 (P >0 .0 5 ) ;热应激后 ,三个地区士兵淋巴细胞HSP71均明显增高 ,差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ,不同地区比较发现 ,北京士兵HSP71基础和热应激水平 (平均荧光强度分别为 84 5 .87± 135 .6 0、12 5 4 .4 7± 2 39.0 5 )均比广州士兵 (平均荧光强度分别为 70 2 .73± 184 .70、86 1.72±2 2 5 .12 )明显升高 ,且差异有显著性 (P <0 .0 5 )。结论　不同气候地区武警士兵淋巴细胞HSP71基础和热应激水平存在差异性 ,提示可以将HSP71基础和热应激水平作为评价不同气候地区武警战士在热环境下耐受能力的指标     

中暑病人血浆中热应激蛋白(HSP70)及其抗体水平的意义

目的　探讨中暑病人热应激蛋白 (HSP70 )及其抗体水平变化和其在中暑发生中的可能作用。方法　应用Westernblot法 ,测定血浆HSP70水平 ;应用酶联免疫反应技术测定血浆HSP70抗体滴度。结果　HSP70在高温中暑组为 42 11.2± 12 86 .2 (积分光密度 )、重症中暑组为 4137.8±12 0 7.5 ,与对照组 (6 0 43.5± 135 4.8)比较 ,差异均有显著性 (P <0 .0 5 )。中暑病人HSP70抗体水平在 1∶10、1∶2 0、1∶40阳性率分别为 5 4.1%、48.9%、2 1.6 % ,显著高于对照组 (2 6 .7%、13.8%、0 % ) ,差异有显著性 (P <0 .0 5 )。结论　HSP70水平的下降和HSP70抗体的出现在中暑发生过程中具有一定的作用。     

冶炼工人铅暴露水平与HSP70表达的相关性研究

目的通过对冶炼工人血铅和热应激蛋白70（HSP70）的测定,分析铅作业工人铅暴露水平与HSP70表达的相关性,探讨HSP70作为铅暴露人群监控的生物性标志物的可行性。方法选取某铅冶炼厂铅作业工人155名为铅接触组,另选该厂管理、后勒人员56名为对照组,采集2组人员外周静脉血5ml,并测定血铅及血浆中HSP70含量,分析两者的相关关系。结果 HSP70含量和血中铅含量之间存在相关性,相关系数为0.322（P〈0.05）。结论血铅与HSP70含量之间具有正相关关系,HSP70可作为铅接触人群监控的生物性标志物。     

累积噪声暴露量与血浆热应激蛋白70抗体关系的分析

目的研究工业噪声作业工人血浆热应激蛋白70(HSP70)抗体水平是否与噪声暴露剂量有关.方法用横断面流行病学方法,选取438名噪声作业工人进行调查;用Western blot免疫印迹法测定其血浆HSP70抗体滴度;用累积噪声暴露量(CNE)评价工人实际噪声暴露.结果作业环境等效连续A声级为(83.20±7.99)dB(A),CNE为(91.50±8.50)dB(A)@年,HSP70抗体阳性检出率为19.4%,按CNE进行分层分析,HSP70阳性检出率与CNE间存在剂量一反应关系.为排除年龄、性别、吸烟等混杂因素,进一步进行Logistic回归分析,模型显示:累积噪声暴露量与HSP70抗体阳性显著相关OR=1.027(P=0.031).结论累积噪声暴露量是引起HSP70抗体阳性的主要危险因素.HSP70抗体阳性率可反映噪声实际暴露水平.     

钢铁作业工人热应激蛋白70抗体水平的血清流行病学调查

目的：探讨血清热应激蛋白70（HSP70）抗体作为工人长期接触某些环境应激后健康监测指标的可行性。方法：采用Western blot免疫印迹检测接触不同有害作业环境因素和相对无有害接触的某钢铁企业764名职工的血清HSP70抗体水平。结果：在排除年龄,工龄以及性别的影响后,多种有害接触均可使工人血清HSP70抗体水平升高。暴露于有害环境,如高温和粉尘和联合暴露,以及粉尘（石灰）暴露和噪声暴露工人血清HSP70抗体水平均明显高于对照组（OR值为2．3563－3．1526,P＜0．01）,而且噪声组工龄与HSP70抗体的产生具有相关性,且差异有显著性（OR＝2．040,P＝0．0103）。结论：血清HSP70抗体水平有可能作为评价工人经历某些环境应激（如粉尘,噪声）的血清学标记物或环境危害监测指标。     

二硫化碳接触工人热应激蛋白70及其抗体水平的变化

目的：探讨二硫化碳诱导人体产生热应激蛋白70（HSP70）及其抗体水平情况。方法：用免疫印迹法（Western blot)和酶联免疫吸附（ELISA）法对职业性接触二硫化碳工人HSP70和HSP70抗体水平进行检测。结果：接触组工人中血浆HSP70抗体阳性率明显高于对照组（P＜0．05），而HSP70蛋白含量在两组间比较差异没有显著性（P＞0．05）；但据HSP70抗体是否为阳性将工人分为阳性组和阴性组后，阳性组HSP70蛋白含量低于阴性组，差异有显著性（P＜0．05）。结论：HSP70及其抗体滴度可反映二硫化碳的接触状况，对接触二硫化作业工人的健康监护有一定意义。     

HSP 70高表达对射线诱导的前体血细胞凋亡的保护作用

目的研究诱导热休克蛋白(HSP70)高表达对射线引起的前体血细胞凋亡的保护作用。方法前体血细胞分别在41℃温浴2h和加入砷酸钠诱导HSP70，然后射线辐照。对照前体血细胞则只是射线辐照而不预热。并用HSP70反义寡核苷酸链抑制HSP70合成，进一步观察HSP70与细胞凋亡的关系。利用DNA碎片检测法检测细胞凋亡，HSP70的量利用Western Blotting检测。结果预热和砷酸钠都可以诱导前体血细胞HSP70高表达；预热同时可以增加细胞凋亡的基础量．HSP70高表达可以明显减少辐射诱导的细胞凋亡。在预热前导入HSP70反义核酸链到前体血细胞，就可以减少HSP70的抑制细胞凋亡的作用。结论不论何种因素诱导的HSP70高表达都可以保护前体血细胞因为辐射引起的细胞凋亡。     

热休克蛋白Hsp70在抗原呈递过程中的作用

目的研究热休克蛋白Hsp70家族在抗原呈递中的作用，探讨其与肿瘤免疫反应的关系。方法利用反义RNA技术，将反义Hsp70、反义Hsc70、B7表达质粒导入肿瘤细胞B16中，24h后检测细胞中热休克蛋白表达水平。利用混合淋巴细胞培养，检测T淋巴细胞增殖能力。结果在黑色素瘤细胞B16中转染pLXSN—antihsp70、pLXSN—antihsc70及2者共转染，转染反义质粒能够抑制B16细胞中Hsp70／Hsc70的表达，导致Hsp70表达下调。其刺激T淋巴细胞增殖能力均大幅下降。而将pLXSNmB7转染入B16细胞中，其刺激T细胞增殖的能力均有所上升。转染pLXSNmB7后，B16细胞中Hsp70／Hsc70的表达量有所提高。结论抑制各热休克蛋白Hsp70家族的表达能够导致T细胞增值数降低。在肿瘤细胞中导入B7分子能够提高Hsp70的表达水平，从而提高其抗原呈递的能力。     

冷库作业工人淋巴细胞中HSP70水平的研究

目的　研究冷应激对冷库作业工人体内HSP70水平的影响及可能的机制。方法　选取冷库作业工人为研究对象 ,其中保鲜冷库 ( 0℃组 ) 5 3人 ,水产冷库 ( -2 0℃组 ) 5 3人 ;另选年龄、性别、劳动强度与之匹配的、不从事有毒有害作业的村民 5 8人作为对照。用Westernblot法检测淋巴细胞HSP70水平。结果　 0℃组和 -2 0℃组分别与对照组相比 ,其淋巴细胞HSP70水平明显增高 ,差异有显著性 (P <0 0 5 ) ;0℃组与 -2 0℃组相比 ,HSP70水平差异无显著性 (P >0 0 5 )。结论　低温环境作为一种应激因素 ,可使体内热应激蛋白合成与表达增加。