抗氧化维生素对氧化密度脂蛋白作用的主动脉内皮细胞脂质过氧化损伤？…

为深入探讨抗氧化维生素（维生素Ｅ、维生素Ｃ及β－胡萝卜素）对氧化低密度脂蛋白（ｏｘＬＤＬ）损伤内皮细胞的防治作用及可能机理,我们以体外培养的小年主支脉内皮细胞为模型,在培养的主动脉内皮细胞中加入不同剂量的抗氧化维生素,共同培养１２ｈ,再与终浓度为０．１ｇ／Ｌ的ｏｘＬＤＬ继续培养２４ｈ,取贴壁细胞及培养液,通过硫代巴比妥酸荧光比色法（ＴＢＡ）和单核细胞（ＨＬ６０）粘附计数法观察不同浓度的抗氧化维生素     

抗氧化维生素对氧化低密度脂蛋白的影响

观察36例冠心病患者服维生素E（VE）和维生素C（VC）后血浆氧化低密度脂蛋白（oxLDL）水平的变化。实验组服维生素E和维生素C前后oxLDL水平分别为66.7±4.4μg／dl、59．1±3．7μg／dl（P＞0．01）。对照组服安慰剂前后oxLDL水平无明显变化（P＜0.05）。且冠心病患者血浆oxLDL水平高于正常人（P＜0．01）。结果提示：补充抗氧化维生素可以防止LDL氧化，且无不良反应。VE和VC将有益于冠心病的一级二级予防。     

抗氧化维生素对内皮细胞增殖及凋亡的影响

目的：　观察氧化低密度脂蛋白（ｏｘＬＤＬ）对内皮细胞增殖与凋亡的影响以及抗氧化维生素（维生素Ｅ、维生素Ｃ及β－胡萝卜素）对内皮细胞的防治效应。方法：　在体外培养的小牛主动脉内皮细胞中分别加入不同浓度的抗氧化维生素,作用１２ｈ 后,再与终浓度为０．１ｇ Ｐｒ／Ｌ的ｏｘＬＤＬ共同培养２４ｈ,采用噻唑蓝比色分析法和流式细胞仪分析法对贴壁内皮细胞进行检测,分别观察抗氧化维生素对经ｏｘＬＤＬ作用的内皮细胞的形态、生长增殖、细胞周期及凋亡的影响。结果：　（１）维生素Ｅ和维生素Ｃ能显著减轻ｏｘＬＤＬ对内皮细胞形态的损伤作用;β－胡萝卜素作用稍弱。（２）三种抗氧化维生素均可降低ｏｘＬＤＬ对内皮细胞生长增殖的抑制作用,使其抑制率降低。（３）三种抗氧化维生素均可促进内皮细胞由Ｇ１ 期进入ＤＮＡ合成的Ｓ期,促进内皮细胞的增殖并阻止内皮细胞凋亡的发生。结论：　维生素Ｅ、维生素Ｃ及β－胡萝卜素均可减轻ｏｘＬＤＬ在形态、增殖及凋亡等方面对内皮细胞的损伤作用,这可能是抗氧化维生素加速内皮细胞损伤后修复、促进内皮细胞增殖,从而发挥其抗动脉粥样硬化形成的部分机制。     

氧化型低密度脂蛋白诱导内皮细胞基因表达

目的 通过研究氧化型低密度脂蛋白(Oxidized low density lipoprotein。Ox-LDL)诱导血管内皮细胞基因表达谱的改变，为阐明氧化型低密度脂蛋白致内皮细胞功能障碍及动脉粥样硬化形成的分子机制提供科学依据。方法 采用含有4000条全长已知人类基因cDNA，以及96条参照基因cDNA克隆制作的基因表达谱芯片，筛查氧化型低密度脂蛋白(100mg／L)作用6h对人脐静脉血管内皮细胞的基因表达谱改变的影响。结果 Ox-LDL可诱导3条基因表达下调，5条基因表达上调。结论 氧化型低密度脂蛋白的早期作用即可诱导内皮细胞相关基因的表达改变；首次发现氧化型低密度脂蛋白可诱导内皮细胞H731蛋白，ST2蛋白，CyclinB1(细胞周期蛋白B1)和KDRF(KM-102-derived reductase-like factor。KM-102源性还原酶样因子)等基因表达的改变，为揭示氧化型低密度脂蛋白引起血管内皮细胞功能障碍的机制提供线索。     

铁负荷对大鼠脂质过氧化作用影响及抗氧化维生素对其抑制作用

目的研究铁负荷对大鼠脂质过氧化的影响及具有抗氧化作用的维生素 (维生素E和 β 胡萝卜素 )对铁负荷所产生影响的作用。方法将 80只雄性Wistar大鼠按体重随机分为 8组 ,前 4组给予的饲料铁浓度分别为 5 0、2 0 0、3 5 0和 5 0 0mg kg饲料。后 4组饲料铁浓度分别与前 4组相同 ,但同时在饲料中补充抗氧化剂(维生素E 10 0mg kg饲料、β 胡萝卜素 2 5mg kg .BW) ,喂养 8周。实验结束时 ,测定血清铁、血脂 (总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇 )、维生素E、维生素A ,血清丙二醛、氧化性低密度脂蛋白 ,超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶。结果铁负荷具有增加血清丙二醛、氧化性低密度脂蛋白及低密度脂蛋白胆固醇水平的趋势 ,5 0 0mg kg饲料组显著 ;各组谷胱甘肽过氧化物酶活性应激性增加 ,VE、VA含量下降。加入维生素类抗氧化剂可使丙二醛、氧化性低密度脂蛋白及低密度脂蛋白胆固醇降低 ,高密度脂蛋白胆固醇升高 ,超氧化物歧化酶降低。结论铁负荷可促进体内脂质过氧化反应 ,以十倍生理剂量最为显著 ,同时抗氧化酶类活性增加 ,以维持机体动态平衡 ;维生素类抗氧化剂可能通过非酶促反应体系发挥作用 ,抑制上述改变     

氧化修饰低密度脂蛋白对血管内皮细胞氧化损伤的研究

目的　用氧化修饰低密度脂蛋白 (OX LDL)建立对血管内皮细胞的氧化损伤模型。方法　将人脐静脉内皮细胞暴露于OX LDL环境下 ,测定细胞活力及丙二醛含量。结果　当内皮细胞暴露于OX LDL不同剂量组 (10、5 0、10 0 μg ml) 2 4h后 ,其细胞活力显著降低 ,丙二醛含量增加 ,特别是OX LDL高浓度组最为明显。结论　OX LDL对内皮细胞有明显损伤作用 ,能促发动脉粥样硬化的形成。     

脂质过氧化与抗氧化酶

一、脂质过氧化及其作用机理 对脂质过氧化的研究最早是从研究食物中脂肪类物质的“哈喇”现象开始的。一些不饱和脂肪酸在氧的作用下发生了过氧化,被降解为短链产物,导致脂肪类物质出现一种哈喇味。后来发现,脂质的过氧化过程在活体组织中也同样存在,并且与许多疾病的病理过程有密切关系。诸如肿瘤的发生、     

维生素A水平对孕期大鼠脂质过氧化及抗氧化系统的影响

目的研究维生素A(VA)水平对孕期大鼠脂质过氧化及抗氧化系统的影响.方法健康雌性受孕SD大鼠24只,按体重随机分为A(VA缺乏组),B(正常对照组),C(VA5倍剂量组),D(VA15倍剂量组)四组.每组6只,饲以实验合成饲料,实验期为合笼前两周至孕期第19天.观察指标有血清和肝脏中VA含量、丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性.结果D组大鼠血清和肝脏中SDD活性明显下降(P＜0.05),MDA含量显著升高(P＜0.05).结论大剂量的VA摄人可使孕期大鼠SOD活性下降,脂质过氧化反应明显增强.而VA轻度及5倍过量似对孕期大鼠脂质过氧化无影响.     

维生素A缺乏对大鼠脂质过氧化和抗氧化系统的影响

目的 :　研究维生素 A(VA)缺乏对 3w龄大鼠的脂质过氧化和抗氧化系统的影响。方法 :　健康 Wistar雄性大鼠 33只 ,按体重随机分为 A(VA完全缺乏组 ) ,B(VA轻度缺乏组 ) ,C(VA正常对照组 )三组。每组 1 1只 ,实验期为 84d。观察指标有 :血清 VA,血清、肝脏及脑组织的超氧物岐化酶 (SOD)活性 ,全血、肝脏及脑组织的谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH- Px)活性 ,血清、肝脏及脑组织的丙二醛 (MDA)含量 ,并采用电子自旋共振 (electron spin resonance,ESR)和自旋捕捉技术直接测定大鼠肝组织中的氧自由基。结果 :　 A、B组大鼠血清、肝脏及脑组织 SOD活性明显下降 ,全血、肝脏及脑组织 GSH- Px活性明显降低 ,血清、肝脏及脑组织 MDA含量显著升高 ,ESR图谱出现了 N- H偶合的三组双峰波。结论 :　 VA完全或轻度缺乏均可以使大鼠脂质过氧化反应明显增强 ,而抗氧化能力明显减弱     

镁对氧化低密度脂蛋白致内皮细胞损伤的保护作用

为探讨镁对内皮细胞的保护作用 ,用一次性密度梯度超速离心法制备人低密度脂蛋白 (LDL) ,以共轭二烯法和改良八木法检测Mg2 +(0 3、0 6、1 2和 2 4mmol L)对Cu2 +介导LDL氧化反应潜伏期和氧化修饰程度的影响。另将传至 2～ 3代的人脐静脉内皮细胞分为正常对照组、ox LDL对照组、补镁组和ox LDL +Mg2 +组 ,改良八木法测定细胞脂质过氧化物水平 ,黄嘌呤氧化法测定细胞外SOD活性 ,DTNB法测定含硒和不含硒GSH Px活性。结果显示 ,(1)Mg2 +各剂量组明显延长Cu2 +介导LDL氧化反应潜伏期 ,0 3和 0 6mmol LMg2 +显著降低TBARS的生成 ;(2 )与ox LDL组相比 ,ox LDL +Mg2 +各剂量组TBARS生成量显著下降 ,SOD活性显著升高 ,含硒GSH Px酶活力显著升高 ,不含硒GSH Px活力显著升高。提示镁抑制LDL的氧化修饰 ,补镁能降低细胞脂质过氧化物水平 ,增强抗氧化酶的的活性     

低密度脂蛋白影响巨噬细胞的SAPK信号通路

目的　研究氧化型低密度脂蛋白 (oxidizedlowdensitylipoprotein ,Ox -LDL)对巨噬细胞增殖、坏死及凋亡影响的非清道夫受体途径 ,及对应激活化蛋白激酶 (stress -activatedproteinkinase ,SAPK)信号通路的影响。 方法　采用 3个时间水平 (2 4,48,72h)、4个剂量水平 (0 ,50 ,10 0 ,2 0 0mg/L)的两因素析因设计 ,观察Ox -LDL对清道夫受体A(scavengerreceptorA ,SRA)基因敲除小鼠巨噬细胞增殖、坏死及凋亡影响的时间、剂量效应关系 ;Ox -LDL对该细胞SAPK活性的影响。结果　Ox -LDL可诱导SRA基因敲除小鼠巨噬细胞增殖、凋亡及坏死 ,并与其作用浓度和剂量相关 (P <0 0 1) ,同时Ox -LDL可引起SAPK活性水平发生变化。结论　Ox -LDL对SRA基因敲除小鼠腹腔巨噬细胞的影响主要为诱导增殖作用 ,高浓度时伴有一定致凋亡、坏死作用 ,其致细胞增殖、凋亡作用可能部分与SAPK信号途径有关 ,提示非清道夫受体途径在Ox -LDL导致巨噬细胞功能改变过程中可能起重要作用     

代谢综合征患者可溶性P-选择素、氧化型低密度脂蛋白与颈动脉粥样硬化的相关性

目的 探讨代谢综合征（MS）患者血清氧化型低密度脂蛋白（Ox-LDL）和可溶性P-选择素（SP-S）与颈动脉粥样硬化（CA）的关系及临床意义.方法 入选103例MS患者和44例健康体检者（对照组）,MS患者中具有3项MS诊断条件者为低危组（51例）,具有≥4项MS诊断条件者为高危组（52例）.所有入选者应用彩色多普勒超声仪测定颈动脉内膜-中层厚度（IMT）和斑块,应用酶联免疫吸附法测定血清Ox-LDL、SP-S,并进行Pearson直线相关和二分类非条件Logistic回归分析.结果 低危组和高危组Ox-LDL、SP-S、颈动脉IMT明显高于对照组[（36.42±7.17） μg/L和（54.44±8.10）μg/L）比（30.08±7.15） μg/L、（71.46±12.52）μg/L和（89.33±20.28）μg/L比（49.95±12.49） μg/L、（0.86±0.11） mm和（1.00±0.10） mm比（0.69±0.11） mm],差异有统计学意义（P＜0.01）.高危组和低危组斑块发生率明显高于对照组[55.8％（29/52）和45.1％（23/51）比15.9％（7/44）],差异有统计学意义（P＜0.01）.Pearson直线相关分析结果显示,Ox-LDL与SP-S呈明显正相关（P＜0.01）.结论 随着MS诊断条件的增加,血清Ox-LDL和SP-S升高,颈动脉IMT增厚,斑块发生率升高.血清Ox-LDL与SP-S呈明显正相关.     

白藜芦醇对铅诱导小鼠脂质过氧化的拮抗作用

目的探讨白藜芦醇对铅暴露引起的氧化损伤的拮抗作用。方法铅染毒动物模型用含铅(醋酸铅0.5%)饮用水构建。60只健康雄性昆明种小鼠随机分为6组,每组10只:正常对照组,铅染毒组,铅染毒+白藜芦醇低、中、高剂量干预组,白藜芦醇组。检测小鼠血铅和组织铅含量及肝、肾组织中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)活性和丙二醛(MDA)的含量和抗氧化能力指数。结果与铅染毒组相比,白藜芦醇处理组肝、肾组织中SOD、CAT和GSH-Px活性均上升(P<0.01),MDA含量降低(P<0.01)。白藜芦醇使用剂量在800～1 200mg/kg时能够显著地提高机体抗氧化酶的活力,增强机体的抗氧化能力。铅染毒小鼠血浆、肝组织及肾组织中ORAC值均有一定程度的减小,给予白藜芦醇可以拮抗铅毒性引起的ORAC值的下降。结论白藜芦醇通过提高抗氧化酶活性,以减轻铅毒引起的脂质过氧化损伤,提高小鼠机体的抗氧化能力,而实现保护肝、肾组织的作用。     

The inhibiting activity of areca inflorescence extracts on human low density lipoprotein oxidation induced by cupric ion

The oxidative modification of human low density lipoprotein (LDL) plays a significant role in atherosclerosis. In this study, the inhibiting activity of areca inflorescence extracts (AIEs) on LDL oxidation was investigated by an in vitro study with Trolox as the standard antioxidant. The kinetics of LDL oxidation, thiobarbituric acid reactive substances assay, ferric-reducing antioxidant power assay and copper chelation assay were also evaluated to assess the antioxidant activities of AIEs, and the results revealed that AIEs could delay the lag time and inhibit the formation of malondialdehyde in the process of LDL peroxidation induced by Cu²⁺. The boiled water extract displayed the highest antioxidant activity compared with the ambient water extract and ethanol extract. The total phenolic contents and phenolic components of AIEs were also measured by high performance liquid chromatography method. Epicatechin, gallic acid and coumalic acid were the primary phenolic acids in AIEs.     

银杏叶对低密度脂蛋白氧化修饰抑制作用的时效研究

目的　探讨银杏叶不同有效成分 [总提取物EGB76 1 ;银杏叶总黄酮 (GF) ;银杏叶总内酯 (GT) ]对Fe2 + 或Cu2 + 诱导的人血浆低密度脂蛋白 (LDL)氧化修饰的抑制作用与时间的变化关系。方法　使用荧光分光光度法测定了LDL在Fe2 + 或Cu2 + 诱导下 ,分别加入上述三种有效成分 ,作用 1、2、4、6h后自身荧光物质(LF)、丙二醛 (MDA)和维生素E(VitE)含量。结果　三种有效成分对LF和MDA的生成及VitE的消耗有抑制作用 ,抑制作用在 4h内随作用时间延长逐渐明显 ,6h时抑制作用明显减弱。结论　银杏叶对低密度脂蛋白氧化修饰抑制作用具有一定的时效关系