定量测定抗链球菌溶血素"O"的自动分析

目的　建立定量测定抗链球菌溶血素“O”的自动分析方法。方法　根据测定条件的优化实验 ,采用免疫透射比浊法测定。结果　批内 CV<2 .45 % ,日间 CV<4.46% ,总 CV<4.81 % ,平均回收率为 1 0 0 .6% ,加入 TG<5 .6mm-ol/L、BIL<3 66μmol/L、Hb<1 5 0 g/L、UA<740 μmol/L时对测定结果无显著干扰。结论　本法简便、准确、快速 ,适合全自动分析。     

免疫透射比浊法抗链球菌溶血素O试剂盒的评价

抗链球菌溶血素O(ASO)是临床检验的常规项目,目前常用的检测方法有溶血抑制法、胶乳凝集法、酶联免疫法、免疫透射比浊法和免疫散射比浊法[1]。免疫透射比浊法和免疫散射比浊法试剂比较稳定,操作可自动化,使用越来越广泛。我们对一种国产免疫透射比浊法ASO试剂盒做了评价,以探讨其在生化分析仪上应用的性能。一、材料和方法1.仪器和试剂奥林帕斯640(AU640)生化仪;ASO试剂、校准品、质控品均由上海复星长征医学科学有限公司提供,批号分别为D030901、CA191、CN252。参数按照仪器、试剂说明书设置。2.方法(1)精密度评价:ASO校准品、质…     

免疫透射比浊法抗链球菌溶血素O试剂盒的评价

抗链球菌溶血素O(ASO)是临床检验的常规项目,目前常用的检测方法有溶血抑制法、胶乳凝集法、酶联免疫法、免疫透射比浊法和免疫散射比浊法。免疫透射比浊法和免疫散射比浊法试剂比较稳定,操作可自动化,使用越来越广泛。我们对一种国产免疫透射比浊法ASO试剂盒做了评价,以探讨其在生化分析仪上应用的性能。     

临床抗链球菌溶血素“O”、类风湿因子检测结果分析

目的分析辽沈地区类风湿因子(RF)、血清中抗链球菌溶血素O(ASO)检测结果阳性率在不同性别患者间的差异和随年龄、季节的变化。方法对本地区患者RF、ASO检测结果的阳性率进行相关分析。结果 ASO阳性率男性高于女性(P<0.01),RF阳性率女性高于男性(P<0.01)。ASO男女患者阳性率随年龄增加下降(r2分别为0.8612、0.9445),阳性结果的严重程度也随年龄增加下降(r2分别为0.7309、0.7309);RF阳性率随年龄增加而上升(r2分别为0.8663、0.8079),但阳性结果的严重程度不随龄变化而变化。RF阳性率夏季均值为7.7%,冬季均值12.2%,冬、春、夏、秋的季节指数分别为117.450%、110.962%、72.837%和98.751%;ASO阳性率无明显季节性周期变化。结论临床RF、ASO阳性率男女间差异明显;ASO阳性率及阳性结果严重程度随年龄增加下降,而RF阳性率随年龄增加上升;RF阳性率呈冬季高、夏季低,且有明显的季节性周期变化。     

抗DNA酶B和抗链球菌溶血素“O”同时测定的临床价值

抗DNA酶B（Anti－DNase B）是A组溶血性链球菌产生的一种细胞外产物,刺激人体可产生抗DNA酶B（ADNs）;链球菌溶血素“O”是A组溶血性链球菌的重要代谢产物,可刺激人体产生抗链球菌溶血素“O”（ASO）。同时检测人体血清中ADNs和ASO升高与否对链球菌感染的诊断有重要的临床价值。风湿热诊断标准：1965年修订的Jones标准：（1）主要表现：a、心脏病;b、多关节炎;c、舞蹈病;d、环行红斑;e、皮下结节。（2）次要表现：a、有风湿热史或现患风湿性心脏病;b、关节痛;c、发热;d、红细胞沉降率加速或C反应蛋白阳性或白细胞数…     

免疫透射比浊法测定抗链球菌溶血素O和类风湿因子

目的建立免疫透射比浊法测定ASO、RF的方法。方法用免疫透射比浊法测定ASO、RF,并对其重复性、准确性、线性范围、相关性实验、干扰实验加以评价。结果高、中、低三种浓度ASO和RF批内CV分别为2.8%,2.9%,3.1%和3.0%,3.2%,3.3%;批间CV为3.9%,4.1%,4.1%和4.1%,4.3%,4.4%;线性范围分别为30～800U/L,10～90U/L;平均回收率分别为100.5%和100.1%。与特种蛋白仪测定结果具有很好的相关性(P＜0.05)。一定程度的溶血、脂血、黄疸对ASO、RF的测定无明显干扰。结论免疫透射比浊法的精确度好,快速,灵敏,与免疫散射比浊法有很好的相关性,可以作为测定ASO、RF的常规方法。     

Dia Sys公司抗链球菌溶血素O与类风湿因子试剂性能评价

我们对德赛公司生产的抗链球菌O溶血素（ASO）和类风湿因子（RF）免疫透射比浊定量试剂盒的性能进行了评估,报告如下。 1 材料与方法 1．1仪器试剂Olympus Au5400全自动生化分析仪（用DiaSys公司试剂测定ASO和RF）：Beckman-Coulter Access2化学发光仪（用配套试剂测定ASO和RF作为对照）     

用快速胶乳凝集法检测末梢血抗链球菌溶血素“O”的效果观察

用快速胶乳凝集法检测末梢血抗链球菌溶血素“Ｏ”的效果观察宗永学赵英壁段长虹王利军马俊江抗链球菌溶血素“Ｏ”（ＡＳＯ）胶乳凝集试验是诊断链球菌感染疾患的一种比较好的方法。通常测定ＡＳＯ取静脉血液分离血清，在５６℃３０分钟灭活后检测［１］。笔者采用末梢...     

干式时间分辨荧光免疫层析法检测血清抗链球菌溶血素“O”的方法学性能验证

目的　验证时间分辨荧光免疫层析法抗链球菌溶血素“O”（ASO）检测试剂的方法学性能。方法　参照 CLSI 对上海捷门生物技术有限公司生产的干式时间分辨荧光分析仪（FIT-1000）ASO 荧光免疫层析法检测的精密度、 正确度、线性及参考范围进行验证。并以贝克曼IMMAGE800 免疫散射速率法作为参考系统,对临床标本进行比对实验。 结果　正确度试验,检测ASO 浓度分别为83.2 ,136 和269 IU/ml 的校准品,相对偏倚分别为-1.03％,-0.99% 和-2.70%。 检测低、高两个浓度血清标本的ASO 精密度,CV 分别为8.32％,6.39％。ASO 浓度范围46.37 ～ 868.13 IU/ml 时,线 性方程为Y=0.958 8X-3.889（r2=0.998 5）。临床标本(n=61) 比对实验,Deming 回归方程Y=1.256X-6.51,r=0.950 6。性 能评价项目结果均达到厂商声明标准。结论　应用干式时间分辨荧光分析仪（FIT-1000）及配套试剂检测ASO,其正确性、 重复性良好,可满足临床尤其是基层医疗单位的要求。     

抗链球菌溶血素“O”试验定量与定性检测结果比较

目的探讨抗链球菌溶血素“O”试验定量与定性检测的临床意义。方法定量检测采用定时散射比浊法,定性检测采用胶乳凝集法。结果86例链球菌感染患者抗“O”定量大于200U／mL,定性阳性率分别为81．40％和60．47％,健康人分别为0．00％和4．67％。结论定量试验的敏感性高于定性试验,可以及时准确地为临床提供可靠的诊疗依据。     

640例关节痛患者的抗链球菌溶血素“O”结果分析

许多有关节痛症状的患者在未进行正规的临床检查之前便自以为是“风湿性关节炎”．或被医生冠名为“风湿性关节炎”．因此“风湿性关节炎”在国内几乎是一个家喻户晓的病名。其实确诊风湿性关节炎需要结合病史、体征以及抗链球菌溶血素“O”（S、ASO）等实验室检查。本文通过对2004年在嘉兴市中医医院和嘉兴市第一医院就诊的640例有关节痛症状的患者ASO结果的调查，来分析其临床意义。     

抗链球菌溶血素“O”、类风湿因子阳性率季节性变化趋势探讨

目的探讨辽沈地区临床抗链球菌溶血素"O"(ASO)、类风湿因子(RF)阳性率的时间变化趋势及规律。方法收集分析本地区2007年12月至2011年11月间的13161例RF、13261例ASO检测结果,利用分析软件SPSS分析两指标阳性率随时间变化的规律及特点。结果 RF、ASO阳性率4年间呈上升趋势,趋势方程分别为:y=0.0027x+0.0808(P<0.001);y=0.0041x+0.0908(P<0.001)。RF阳性率为夏季低(均值7.7%)冬天高(均值12.2%),且有明显季节性变化,四季季节指数分别为冬117.450、春110.962、夏72.837、秋98.751;ASO阳性率无明显季节性周期变化。结论辽沈地区RF、ASO阳性率呈逐年上升趋势,RF阳性率呈冬季高、夏季低,且有明显的季节性周期变化。     

60例抗“O”阳性血清与乙型溶血性链球菌凝集试验结果分析

抗“O”试验用于判定链球菌感染状态，诊断风湿热和肾小球肾炎。链球菌感染后血内产生多克隆抗酶抗体，其中包括AH和ADN—B抗体，这些抗体效价均可作为判定风湿热、肾小球肾炎、细菌性心内膜炎、猩红热及其它相关疾病的指标。目前一些健康带菌者有时效价增高，用抗生素治疗后效价可能降低，增高β脂蛋白水平可抑制链球菌溶血素“O”，出现假阳性，针对这种情况的出现，我们进行了抗“O”阳性血清与乙型溶血性链球菌(以下简称“乙链”)血清学凝集试验。     

链球菌溶血素O抗原的原核表达及条件优化

目的 构建链球菌溶血素O抗原(SLO)的重组表达质粒,并优化其在大肠杆菌中的最佳表达条件。方法 以A群链球菌DNA为模板,采用PCR法扩增SLO基因,将扩增的基因连接pET-32a(+)表达载体构建pET-32a(+)-SLO重组质粒,重组质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,转化后的表达菌经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导和自诱导的方式分别诱导及纯化,最终确定最佳的表达条件。结果 PCR扩增的基因大小与SLO基因大小一致,测序完全正确。不同浓度的IPTG诱导均为包涵体表达,且表达量均较低;自诱导的方式,不仅表达量明显提高,且实现了部分可溶性表达。结论 成功构建了SLO的原核表达质粒,优化筛选出能高效可溶性表达的诱导条件,纯化获得了SLO重组融合蛋白质,为进一步的基础及临床研究应用奠定基础。     

住院儿抗链球菌溶血素O状态再评估

目的探讨住院儿抗链球菌溶血素O(ASO)的性别、季节、年龄及疾病的分布情况。方法住院儿936例,年龄1～15岁,男567例,女369例。采用免疫比浊法测定ASO。结果①936例住院儿ASO阳性123例,总阳性率为13.14%。男性住院儿ASO阳性率明显高于女性者(χ2=8.23,P<0.01)。②2007年ASO阳性例数最高,2010年ASO阳性例数最低(χ2=7.74,P<0.01)。每个季度ASO阳性例数比较分布差异均无统计学意义(P均>0.05)。③1～3岁组住院儿ASO阳性例数最低(χ2值分别为16.60和83.59,P<0.001)。8～15岁组住院儿ASO阳性例数最高(χ2值分别为55.36和83.59,P<0.001)。④扁桃体炎、呼吸道感染、肠系膜淋巴结炎的住院儿ASO阳性率在11%～19%。肾炎、过敏性紫癜、癫痫、抽动症住院儿ASO阳性率在34%～46%。肾炎、过敏性紫癜、癫痫、抽动症住院儿ASO阳性率明显高于扁桃体炎、呼吸道感染、肠系膜淋巴结炎的住院儿(χ2=45.47,P<0.01)。结论 A组乙型溶血性链球菌(GABHS)仍然是小儿感染常见的致病菌,GABHS感染后的免疫反应与肾炎、过敏性紫癜、癫痫、抽动症密切相关。     

抗β2糖蛋白Ⅰ抗体、膜糖蛋白GPⅠb及抗链球菌溶血素O检测在类风湿关节炎急性阶段的诊断价值

目的探讨抗β_2糖蛋白Ⅰ抗体、膜糖蛋白GPⅠb、抗链球菌溶血素O检测在类风湿关节炎急性阶段的诊断价值。方法收集67例类风湿关节炎急性阶段患者为病例组,选取院内体检健康者50例为对照组。采用酶联免疫吸附试验检测抗β_2糖蛋白Ⅰ抗体,流式细胞术检测血小板膜糖蛋白GPⅠb的表达,免疫比浊法检测抗链球菌溶血素O的水平。采用Pearson分析进行相关分析,利用受试者工作特征曲线(ROC曲线)分析抗β_2糖蛋白Ⅰ抗体、血小板膜糖蛋白GPⅠb、抗链球菌溶血素O诊断类风湿关节炎急性阶段的曲线下面积(AUC)。结果病例组抗β_2糖蛋白Ⅰ抗体、膜糖蛋白GPⅠb、抗链球菌溶血素O水平均高于对照组,差异有统计学意义(P0.01)。Pearson相关性分析中,抗β_2糖蛋白Ⅰ抗体、膜糖蛋白GPⅠb、抗链球菌溶血素O与类风湿关节炎急性阶段呈正相关(r=0.514、0.620、0.710)。ROC曲线分析显示,抗β_2糖蛋白Ⅰ抗体、膜糖蛋白GPⅠb、抗链球菌溶血素O的AUC分别为0.82、0.82、0.91,最佳诊断界值分别为21.84RU/mL、14.79%、51.32IU/mL。结论抗β_2糖蛋白Ⅰ抗体、膜糖蛋白GPⅠb、抗链球菌溶血素O检测对类风湿关节炎急性阶段具有一定的诊断价值,可作为类风湿关节炎急性阶段的辅助诊断指标。     

不同检测系统抗链球菌溶血素"O"测定结果的可比性研究

目的:探讨不同检测系统抗链球菌溶血素“O”(ASO)测定结果的可比性。方法:在3个不同生化分析仪检测系统(大院岛津7200;二沙日立7170A;芳村日立7170A。)分别检测不同水平的质控物各20例和30例不同浓度的新鲜血清ASO,并对数据进行相关统计学分析。结果:经随机区组设计资料的方差分析,不同厂家、不同水平的质控物和不同浓度的患者新鲜血清的测定结果在各检测系统间差异均有显著性(P<0.001);各检测系统间的相关系数均大于0.975;可靠性分析信度系数α均接近1;以岛津7200作标准检测系统对其它检测系统作临床可接受性能评价,二沙日立7170A;芳村日立7170A临床不接受。结论:3个检测系统测定ASO结果精密度符合临床要求,但临床可接受性能评价存在不可比性。     

链球菌溶血素O提高细胞的通透性

背景：实验发现链球菌溶血素O引起的细胞通透在一定程度上是可逆的,链球菌溶血素O产生的孔道在Ca2＋存在的情况下可以自然封闭。目的：观察链球菌溶血素O是否可以使猪成纤维细胞的通透性发生改变,及不同质量浓度的链球菌溶血素O对细胞状态的影响。方法：分别使用质量浓度为0,230,300,400μg/L的链球菌溶血素O溶液处理猪成纤维细胞,孵育50min后,加入PI染液,观察细胞的通透率。加入含Ca2＋的培养液封闭细胞后,分别观察细胞的形态变化及增殖能力的变化。结果与结论：随着链球菌溶血素O溶液质量浓度的增加,细胞的通透率只轻度提高。链球菌溶血素O处理细胞后,细胞的形态没有发生明显的改变。质量浓度为230μg/L的链球菌溶血素O溶液对细胞的增殖能力无明显影响,而300μg/L和400μg/L的链球菌溶血素O溶液明显地降低了细胞的增殖能力。提示质量浓度为230μg/L的链球菌溶血素O溶液可以提高细胞的通透性,并保持细胞正常的形态及增殖能力。