薏苡仁油对人原位胰腺癌BxPC-3细胞生长及VEGF和bFGF表达的影响

目的研究薏苡仁油(康莱特注射液)体外对人原位胰腺癌BxPC-3细胞生长和血管生长因子的影响,探讨薏苡仁油抗肿瘤作用机制。方法薏苡仁油作用BxPC-3细胞后,经瑞氏染色观察细胞形态,Hoechst 33258荧光染色、DNA梯度电泳观察细胞凋亡;流式细胞仪检测细胞周期的变化;ELISA法检测血管内皮生长因子(VEGF)、成纤维细胞生长因子(bFGF)的变化。结果薏苡仁油(2 mg/mL,20μL/mL)作用于BxPC-3细胞后,瑞氏染色可见细胞出现典型的凋亡小体,Hoechst33258荧光染色可见BxPC-3细胞出现特征性凋亡变化,琼脂糖电泳观察到明显的细胞凋亡特征性DNA梯形条带;细胞周期阻滞在G0/G1期;细胞上清液中VEGF、bFGF的表达水平明显下调。结论薏苡仁油能影响BxPC-3细胞生长周期,导致细胞周期阻滞,下调VEGF和bFGF的表达水平,可能对抑制胰腺癌细胞的扩散产生一定作用。     

人参皂苷对低氧诱导ARPE-19细胞表达VEGF的影响

目的探讨人参皂苷对低氧诱导的人视网膜色素上皮细胞(ARPE-19)表达血管内皮生长因子(VEGF)的影响。方法体外培养ARPE-19细胞,分为正常组,缺氧模型组,人参皂苷组,并设立不同浓度及不同时间组。CCK-8法检测不同时间、不同浓度的人参皂苷对细胞毒性、增殖的影响;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组细胞中VEGF的表达。结果缺氧模型组与正常组比较,ARPE-19细胞的增殖及VEGF的表达高于正常组,差别具有统计学意义(P<0.05);缺氧后人参皂苷组与模型组比较,ARPE-19细胞的增殖及VEGF的表达低于模型组,差别具有统计学意义(P<0.05)。结论人参皂苷可抑制缺氧损伤后ARPE-19细胞的增殖及VEGF的表达。     

补肾活血中药动员大鼠骨髓EPC修复内皮功能的实验研究

目的探讨补肾活血中药对心肌梗死（MI）模型大鼠外周血、缺血心肌组织内皮祖细胞（EPC）数量及血管内皮功能的影响。方法结扎法建立大鼠MI模型,随机分为补肾活血中药高剂量组（H组）、低剂量组（L组）和模型组（M组）,正常大鼠为空白组（K组）,每组10只。H组、L组以补肾活血中药灌胃,M组、K组正常喂养,4周后外周血、缺血心肌组织EPC培养,7d后收集贴壁细胞运用流式细胞仪鉴定CD34／CD133表型,ELISA法检测血管内皮生长因子（VEGF）,硝酸还原酶法检测一氧化氮（NO）。结果H组、L组外周血和缺血心肌表达CD34／CD133阳性率、EPC数量均高于M组、K组（P〈0．05或P〈0．01）;H组、L组外周血和缺血心肌NO含量、VEGF表达均高于M组、K组（P〈0．05或P％0．01）。结论补肾活血中药具有动员骨髓EPC进入血液循环、修复血管内皮损伤的作用。     

大株红景天注射液对大鼠心肌缺血预处理血管内皮生长因子的影响

目的研究大株红景天注射液对大鼠急性心肌缺血预处理后血管内皮生长因子(VEGF)表达的作用机制。方法大鼠24只随机分为对照组、模型组、缺血预处理组。模型组、缺血预处理组经尾静脉注射垂体后叶素制作大鼠急性心肌缺血模型,分别于造模前、造模1 h及治疗1周后采用双抗体夹心ELISA法测定各组大鼠胎肝激酶1(FLK-1)、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、VEGF基因及蛋白表达情况。结果缺血预处理组在造模1 h及治疗1周后FLK-1及FLK-1mRNA、HIF-1α及HIF-1αmRNA、VEGF及VEGF mRNA的表达明显增高,与对照组、模型组及同组缺血预处理前比较差异均有统计学意义(P0.05)。结论大株红景天注射液可促使急性心肌缺血大鼠缺血心肌血管内皮新生,减轻血管内皮炎症反应及损伤程度,对大鼠急性心肌缺血再灌注损伤有一定的保护作用。     

大豆异黄酮对前列腺增生大鼠生长因子及受体的影响

目的研究大豆异黄酮对前列腺增生大鼠模型的抑制作用及生长因子调控机制。方法采用sc睾酮法诱导大鼠前列腺增生。大鼠随机分为对照、模型组、大豆异黄酮(60、120、240 mg/kg)组;ig给药4周后处死大鼠,测定大鼠前列腺湿质量、前列腺指数,酶联免疫法测定血清胰岛素样生长因-子1(IGF-1)、表皮生长因子(EGF)、血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、转化生长因子-β(TGF-β)水平,免疫组化法检测表皮生长因子受体(EGF-R)表达的变化情况。结果模型组大鼠前列腺湿质量明显增加,前列腺指数明显增加。与模型组相比,大豆异黄酮各组前列腺湿质量和前列腺指数明显下降,血清IGF-1、EGF、VEGF和bFGF水平均显著降低,血清TGF-β水平显著提高,前列腺上皮组织EGF-R表达显著下降,以120 mg/kg大豆异黄酮组效果最为明显。结论大豆异黄酮具有较好的抑制前列腺增生的作用,可能与其降低IGF-1、EGF、VEGF和bFGF水平,提高TGF-β水平,下调EGF-R表达有关。     

益气活血组方对大鼠缺血心肌血管新生作用及对血管内皮生长因子和碱性成纤维生长因子的影响

目的：探讨益气活血组方对急性心肌梗死后大鼠缺血心肌组织血管新生作用和对血管内皮生长因子（VEGF）和碱性成纤维生长因子（bFGF）表达的影响。方法：建立心梗模型后,将40只雄性SD大鼠,采用随机数字表法分为4组：模型组、假手术组、麝香保心丸、益气活血组方。运用免疫组化法检测梗死心肌边缘区微血管计数（MVC）和微血管密度（MVD）及VEGF和bFGF表达;同时应用Western blot技术检测各组大鼠缺血心肌VEGF和bFGF蛋白质水平表达变化。结果：益气活血组方和麝香保心丸组分别与模型组比较,梗死心肌边缘区微血管计数和微血管密度都显著高于后者(P<0.01）。益气活血组方、麝香保心丸组中缺血心肌VEGF和bFGF表达以及其蛋白表达水平较其余组显著升高（P<0.01）。结论：益气活血组方能明显促进心梗后大鼠缺血心肌血管新生,上调心肌VEGF和bFGF蛋白表达可能是其中一个重要的作用机制。     

活血利水法对兔视网膜静脉阻塞后视网膜组织中VEGF bFGF表达的影响

目的:探讨活血通脉利水明目之散血明目片对视网膜静脉阻塞(Retinal vein occlusion,RVO)的治疗作用及防治并发新生血管的作用机理。方法:将48只家兔(96只眼)随机分为4组,每组12只(24只眼)。分别为:A组:健康空白组;B组:模型组;C组:血栓通组;D组:散血明目片组。采用激光光凝法建立兔RVO模型,分别于术后第3、7、14、21天用空气栓塞法处死动物,即刻摘取眼球,取材、脱水、石蜡包埋切片。免疫组化法观察兔视网膜组织中血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的表达。结果:B、C、D3组72只眼成功建立了RVO模型。D组与B组比较,视网膜组织中VEGF、bFGF含量明显减少,差异有统计学意义(P0.05),与C组比较差异无统计学意义(P0.05)。结论:活血通脉利水明目之散血明目片能促进RVO后出血的吸收,改善视网膜组织缺血缺氧的状态,抑制VEGF、bFGF在视网膜面的高表达,进而治疗RVO,防治RVO后并发新生血管,保护视网膜。     

红花多糖对人宫颈癌Hela细胞增殖和VEGF表达的影响

目的:通过研究红花多糖对人宫颈癌Hela细胞增殖和血管内皮生长因子(VEGF)表达情况的影响,探讨红花多糖抗宫颈癌作用的分子机制。方法:体外培养人宫颈癌Hela细胞,加入含不同质量浓度(0.02,0.04,0.08,0.16,0.32,0.64和1.28 g·L-1)红花多糖的培养液,培养48 h,用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测红花多糖对Hela细胞增殖的影响;以不同质量浓度(0.16,0.32,0.64 g·L-1)的红花多糖处理Hela细胞48 h,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞上清液中VEGF的表达,实时定量荧光聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测VEGF mRNA的表达,免疫印迹法(Western blot)检测VEGF蛋白表达的变化。结果:与空白组比较,(0.16,0.32,0.64 g·L-1)的红花多糖作用于宫颈癌Hela细胞48 h后能显著抑制细胞的体外增殖,呈现剂量依赖性(P0.05)。红花多糖能明显下调Hela细胞VEGF mRNA和蛋白的表达(P0.05)。结论:红花多糖可通过抑制VEGF的表达抑制宫颈癌Hela细胞的增殖,发挥抗肿瘤作用。     

siRNA沉默HIF-1α在缺氧状态下对鼻咽癌细胞VEGF表达的影响

目的观察体外乏氧培养条件下鼻咽癌细胞系CNE-Ⅱ中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和血管内皮生长因子(VEGF)的表达,探讨HIF-1α在低氧条件下对鼻咽癌血管生成的调控作用。方法CoCI2化学缺氧法模拟肿瘤缺氧环境,RT-PCR、免疫印迹法(Western blot)分别检测缺氧状态下HIF-1α和VEGF在mRNA和蛋白水平的表达。采用化学合成小干扰RNA(siRNA)介导的RNA干扰技术(RNAi)转染CNE-Ⅱ细胞。观察转染后HIF-1α沉默效果。结果低氧条件下,CNE-Ⅱ细胞HIF-1αmRNA水平稳定,蛋白表达显著升高,而VEGF mRNA和蛋白的表达均显著升高。siRNA转染CNE-Ⅱ后能够显著下调HIF-1α的基因表达,同时VEGF基因的表达也受到明显抑制。结论缺氧促使CNE-Ⅱ细胞HIF-1α在蛋白水平表达升高,并通过转录激活VEGF的机制调控鼻咽癌血管生成。     

参麦注射液对兔实验性心肌缺血预处理的实验研究

目的观察参麦注射液对兔实验性心肌缺血预处理后血管内皮生长因子表达及氧化应激的作用,探讨其潜在机制。方法选取8只健康日本大耳白兔为对照组,另取24只随机分为缺血再灌注组、缺血预处理1组、缺血预处理2组,除对照组外,其余组均采用手术结扎左侧冠状动脉前降支45 min后再灌注60 min,反复3次以造成实验性心肌缺血再灌注损伤动物模型。缺血预处理1组、缺血预处理2组经耳缘静脉给予参麦注射液2 m L/(kg·d)、4 m L/(kg·d)连续缺血预处理7 d,对照组和缺血再灌注组给予等量生理盐水预处理7 d。采用双抗体夹心EUSA法测定兔缺血预处理7 d血清VEGF蛋白质及VEGF mRNA表达情况;酶联免疫吸附法检测兔血清乳酸脱氢酶(LDH)、血清总超氧化物歧化酶(T-SOD)及心肌丙二醛(MDA)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)等指标。结果预处理7 d后缺血预处理1组、缺血预处理2组VEGF蛋白质及VEGF mRNA表达和T-SOD酶活性均高于缺血再灌注组(P均<0.05),MDA及LDH、CK-MB含量均低于缺血再灌注组(P均<0.05)。结论参麦注射液对兔实验性心肌缺血再灌注损伤有一定的保护作用。其作用机制可能是促进VEGF分泌,抑制心肌缺血时脂质过氧化,促进氧自由基清除酶清除氧自由基,加快兔缺血心肌血管内皮新生进而改善再灌注损伤后受损血管内皮功能。