miRNA-1246靶向MAPK14在长波紫外线诱导人成纤维细胞光老化中机制的研究

【摘要】 目的 探讨长波紫外线（UVA）诱导人成纤维细胞（HSF）光老化中miRNA-1246的表达及上调miR-1246表达对靶基因MAPK14及细胞老化的影响。方法 HSF分离自苏州大学附属儿童医院收集的健康儿童包皮环切术后皮肤标本,每日以10 J/cm2 UVA照射HSF,在初次照射及照射3、7、14 d采用实时定量PCR检测miR-1246的表达。将HSF细胞分为空白对照组、UVA组、miR-1246组、UVA + miR-1246组,通过慢病毒转染上调miR-1246的表达和照射UVA 14 d后,收集各组细胞,采用MTT检测细胞增殖活性,β半乳糖苷酶染色检测细胞老化,RT-PCR和Western印迹检测MAPK14、基质金属蛋白酶1（MMP-1）的表达。多组间均数的比较用单因素方差分析,组间两两比较采用LSD-t检验。结果 在照射7 d、14 d时,UVA组HSF的miR-1246相对表达水平（4.69 ± 0.85、3.59 ± 0.45）均低于空白对照组（8.42 ± 0.75、7.61 ± 0.49）,差异均有统计学意义（t = 29.84、31.93,均P < 0.01）。上调miR-1246的表达和照射UVA后,MTT结果显示,空白对照组、UVA组、miR-1246组、UVA + miR-1246组细胞增殖活性（0.82 ± 0.03、0.23 ± 0.02、0.81 ± 0.02、0.61 ± 0.02）差异有统计学意义（F = 34.90,P < 0.05）,UVA组低于空白对照组（t = 28.14,P < 0.01）,UVA + miR-1246组低于miR-1246组（t = 10.61,P < 0.01）,高于UVA组（t = 20.30,P < 0.01）。β半乳糖苷酶染色检测显示,4组老化细胞阳性率（3.93% ± 1.11%、81.29% ± 2.53%、5.50% ± 1.15%、54.13% ± 2.09%）差异有统计学意义（F = 16.14,P < 0.05）,其中UVA组高于空白对照组（t = 48.46,P < 0.01）,而UVA + miR-1246组高于miR-1246组（t = 35.31,P < 0.01）,低于UVA组（t = 14.32,P < 0.01）。RT-PCR和Western 印迹均显示,4组细胞MAPK14、MMP-1的mRNA、蛋白相对水平差异均有统计学意义（均P < 0.05）,其中UVA组高于空白对照组（P < 0.05）,UVA + miR-1246组高于miR-1246组（P < 0.05）,低于UVA组（P < 0.05）。结论 UVA照射诱导的HSF光老化中,miR-1246的表达受到抑制,上调miR-1246的表达可抑制其靶基因MAPK14及老化相关蛋白MMP-1的表达,起到抗细胞光老化的作用。     

UVA-1及UVA照射对局限性硬皮病患者成纤维细胞I型胶原和MMP-1表达的影响

目的探讨UVA-1及UVA照射对局限性硬皮病患者成纤维细胞中I型胶原和基质金属蛋白酶1（MMP-1）表达的影响。方法局限性硬皮病患者（6例）和健康人（4例）皮肤活检标本进行成纤维细胞培养,荧光定量PCR法检测不同强度UVA-1照射前后及相同强度UVA／UVA-1照射后两组皮肤成纤维细胞中COL1A1和MMP-1mRNA的表达水平。结果局限性硬皮病组与健康对照组相比,成纤维细胞中COL1A1表达量增加（P〈0．05）,MMP-1表达量下降（P〈0．05）。UVA-1照射未能明显减少局限性硬皮病患者成纤维细胞中COL1A1表达（P〉0．05）,但可使MMP-1mRNA表达明显增加（P〈0．05）。相同剂量UVA对局限性硬皮病患者成纤维细胞中I型胶原的抑制作用和MMP-1的刺激作用优于UVA-1。结论UVA-1照射治疗可以抑制I型胶原的表达,刺激MMP-1的表达,且中等剂量UVA-1的疗效优于小剂量,相同照射剂量UVA疗效优于UVA-1。     

UVA-1及UVA照射对局限性硬皮病患者成纤维细胞Ⅰ型胶原和MMP-1表达的影响

目的 探讨UVA-1及UVA照射对局限性硬皮病患者成纤维细胞中Ⅰ型胶原和基质金属蛋白酶1(MMP-1)表达的影响.方法 局限性硬皮病患者(6例)和健康人(4例)皮肤活检标本进行成纤维细胞培养,荧光定量PCR法检测不同强度UVA-1照射前后及相同强度UVA/UVA-1照射后两组皮肤成纤维细胞中COL1A1和MMP-1 mRNA的表达水平.结果 局限性硬皮病组与健康对照组相比,成纤维细胞中COL1A1表达量增加(P＜0.05),MMP-1表达量下降(P＜0.05).UVA-1照射未能明显减少局限性硬皮病患者成纤维细胞中COL1A1表达(P＞0.05),但可使MMP-1 mRNA表达明显增加(P＜0.05).相同剂量UVA对局限性硬皮病患者成纤维细胞中Ⅰ型胶原的抑制作用和MMP-1的刺激作用优于UVA-1.结论 UVA-1照射治疗可以抑制Ⅰ型胶原的表达,刺激MMP-1的表达,且中等剂量UVA-1的疗效优于小剂量,相同照射剂量UVA疗效优于UVA-1.     

雌二醇对体外培养的人皮肤成纤维细胞基质金属蛋白酶-1基因表达的影响

绝经后女性皮肤老化的加速使人们很早就注意到了雌激素在皮肤老化中的作用.研究显示,在光老化和正常皮肤中,局部使用雌激素可以增加皮肤组织中胶原的含量,改善皮肤的厚度和弹性,本试验通过观察雌二醇对体外培养的人皮肤成纤维细胞基质金属蛋白酶-1(matrix metalloproteinase-1,MMP-1)mRNA水平的影响,探讨雌二醇减缓皮肤老化的机制.     

UVA照射对皮肤成纤维细胞组织蛋白酶K表达的影响

目的 探讨皮肤成纤维细胞中组织蛋白酶K(Cathepsin K,CatK)的表达随UVA照射后时间及其剂量的变化.方法 原代培养的皮肤成纤维细胞来自儿童包皮,10代以内的细胞行后续实验.先以10 J/cm2 UVA照射皮肤成纤维细胞,在照射后24、48、72 h提取照射组和对照组细胞蛋白和mRNA.再以10 J/cm2、20 J/cm2、30 J/cm2 UVA照射皮肤成纤维细胞,在照射后48 h收集细胞.用RT-PCR和Western印迹法分别检测各组间CatK mRNA、蛋白的表达的差异.结果 10 J/cm2 UVA照射后1、2、3d,照射组CatKmRNA表达分别为0.351±0.038(对照组0.177±0.006)、0.510±0.017(对照组0.176±0.002)、0.313±0.012(对照组0.173±0.002).照射组CatK蛋白灰度值分别为1.76±0.27(对照组0.82±0.45)、2.97±0.36(对照组1.58±0.15)、2.23±0.14(对照组1.29±0.32),照射组CatKmRNA、蛋白表达均较对照组升高(P＜0.05),且以照射后第2天表达最高.10、20、30 J/cm2UVA照射后,48 h皮肤成纤维细胞中CatK mRNA表达分别为对照组的2.34、2.91、3.18倍,CatK蛋白表达分别为对照组的1.77、2.82、3.64倍,均随UVA剂量的升高而增加,其差异有统计学意义(P＜0.05).结论 CatK在UVA照射后皮肤成纤维细胞中的表达升高.     

热休克对体外培养的成纤维细胞表达MMP-1和TIMP-1的影响

目的:确定体外培养的成纤维细胞热休克对表达基质金属蛋白酶(MMP-1)和基质金属蛋白酶组织抑制因子(TIMP-1)的影响.方法: 在体外培养的成纤维细胞热休克分别在37℃、43℃、45℃水浴30 min,24 h后应用ELISA法上清液检测MMP-1和TIMP-1表达,并与对照组比较.结果:体外培养的成纤维细胞热休克后,上清液中MMP-1明显增高,并呈温度依赖性.热休克对其表达TIMP-1无明显影响.结论:热休克早期成纤维细胞产生的MMP-1导致真皮基质降解,在皮肤光老化中有重要作用.     

溶菌酶对体外培养的人成纤维细胞基质金属蛋白酶-1和12及赖氨酸氧化酶基因表达的影响

目的 探讨溶菌酶对体外培养的人成纤维细胞基质金属蛋白酶-1和12及赖氨酸氧化酶基因表达的影响。方法 采用酶消化法进行体外人皮肤成纤维细胞原代培养,然后将不同浓度的溶菌酶（0,1 × 10-8,1 × 10-7 mol/L）加入体外培养的人皮肤成纤维细胞中,待药物作用后,提取总RNA,通过逆转录反应获得cDNA并进行体外扩增,对扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳,根据条带的平均光密度A值的比值来判断人成纤维细胞中基质金属蛋白酶（MMP）-1、MMP-12及赖氨酸氧化酶（LOX）mRNA的表达水平。结果 对体外培养的人成纤维细胞进行溶菌酶干预,经β肌动蛋白内参校正后,RT-PCR示对照组、低剂量组、高剂量组MMP-1、MMP-12 mRNA表达水平三组间差异具有统计学意义（F值分别为6.98和4.44,P值均 < 0.05）。SNK-q检验显示,低剂量组与对照组、高剂量组比较,差异均无统计学意义（P > 0.05）,高剂量组与对照组相比,差异有统计学意义（P < 0.05）。LOX mRNA表达水平三组间差异具有统计学意义（F = 5.24,P < 0.05）,SNK-q检验显示,低剂量组、高剂量组与对照组相比,差异具有统计学意义（P < 0.05）,低剂量组与高剂量组相比,差异无统计学意义（P > 0.05）。结论 溶菌酶可以下调MMP-1和MMP-12及上调LOX基因的转录水平。     

IL-1对UVA辐射成纤维细胞基质金属蛋白酶表达的影响机制探讨

目的探讨IL1(IL1α,IL1β)对长波紫外线(UVA)辐射后成纤维细胞基质金属蛋白酶(matrixmetalloproteinases,MMPs)表达的影响机制。方法用ELISA法检测UVA辐射后成纤维细胞培养上清MMP1和MMP2的表达。接着用IL1α和IL1β分别处理UVA辐射后的成纤维细胞,用Western免疫印迹法检测其丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)的活性;用RTPCR方法检测cfos和cjun的mRNA表达。结果不同剂量UVA(0,1,5,10J/cm2)辐射的成纤维细胞分泌MMP1逐渐上升,对MMP2分泌没有影响。IL1α和IL1β(0,1,10,100ng/ml)促进UVA(10J/cm2)辐射成纤维细胞的MAPK活性表达,并以剂量依赖方式促进cjun的mRNA表达。IL1α还显著增加cfosmRNA表达,但IL1β对cfosmRNA表达无明显影响。IL1α和IL1β促进UVA辐射成纤维细胞分泌MMP1,于100ng/ml时有显著性差异(P均<0.05),但对MMP2分泌无明显影响。结论UVA辐射成纤维细胞分泌MMP1增加,对MMP2分泌没有影响。IL1(IL1α和IL1β)通过促进MAPK活性和cjunmRNA表达,IL1α还促进cfosmRNA表达使UVA辐射成纤维细胞MMP1表达增加,表明IL1在皮肤光老化的真皮胶原过度降解中发挥着重要的作用。     

银屑病患者成纤维细胞生长因子1、丝裂原活化蛋白激酶1、CD34的表达及意义北大核心CSCD

目的探讨寻常性银屑病皮损成纤维细胞生长因子1（FGF-1）、丝裂原活化蛋白激酶1（MAPK-1）、CD34与临床病理的相关性。方法收集30例寻常性银屑病患者的皮损,记录患者的-般情况和临床表现。用组织芯片技术和免疫组化法检测银屑病皮损中FGF-1、MAPK-1、CD34蛋白的表达,反转录PCR（RT—PCR）法检测银屑病皮损中FGF-1mRNA的表达,统计分析患者的性别、年龄、临床分期、PASI评分、血管新生、表皮异常增生与FGF-1蛋白表达水平的相关性。结果与对照皮肤相比,寻常性银屑病皮损中FGF-1蛋白和mRNA表达均明显上调,差异有统计学意义（P〈0．05）。CD34和MAPK-1在银屑病皮损中均表达上调,且与FGF-1表达呈正相关。FGF-1表达上调与患者的性别和年龄无关,与临床分期和PASI评分相关,其中进行期FGF-1表达上调人数远多于静止期和低评分患者的人数,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论FGF-1可能参与了寻常性银屑病表皮异常增殖和真皮乳头层血管异常增生,表达上调与疾病进展和皮损加重相关。     

MMP-3和TIMP-1在不同类型慢性皮肤溃疡创面表达研究

目的观察基质金属蛋白酶-3(MMP-3)和基质金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)蛋白在不同类型慢性皮肤溃疡创面组织中的表达,探讨其病理机制。方法以静脉曲张性溃疡、血管炎性溃疡、压力性溃疡和坏疽性脓皮病患者及正常皮肤志愿者为研究对象,通过免疫组化法检测MMP-3和TIMP-1蛋白在不同类型慢性皮肤溃疡创面组织中的表达和分布规律。结果免疫组化显示:MMP-3和TIMP-1蛋白均呈核表达,相比正常皮肤,静脉曲张性溃疡、血管炎性溃疡和压力性溃疡MMP-3表达显著升高(P0.05);相比血管炎性溃疡,静脉曲张性溃疡、压力性溃疡、坏疽性脓皮病和正常皮肤组织TIMP-1表达均降低(P0.05)。结论 MMP-3和TIMP-1蛋白在不同类型慢性皮肤溃疡创面组织中表达存在差异:静脉曲张性溃疡和压力性溃疡创面组织中,MMP-3表达上调,TIMP-1表达下调;在血管炎性溃疡创面组织中TIMP-1表达上调。     

薏苡仁提取物对人皮肤原代成纤维细胞MMP1/3 mRNA表达的影响

目的 探讨薏苡仁提取物(ESC)对中波紫外线(UVB)照射、体外培养人皮肤成纤维细胞(HDF)的基质金属蛋白酶1、3(MMP1、MMP3)mRNA表达的影响.方法 采用酶消化法和组织块法培养HDF.四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT)检测ESC对HDF增殖的影响.用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)检测1、2.5、...     

强脉冲光照射对皮肤成纤维细胞活性及其分泌基质金属蛋白酶的影响

目的 探讨强脉冲光(IPL)照射对培养状态下的人成纤维细胞形态、增殖活性以及分泌基质金属蛋白酶l(MMP-1)和基质金属蛋白酶2(MMP-2)的影响.方法 由健康人皮肤标本中分离培养成纤维细胞,用一定剂量IPL分别照射后进行培养,光学显微镜观察成纤维细胞形态学变化,MTY法检测细胞增殖活性,ELISA法检测MMP-1及MMP-2水平.结果 成纤维细胞经IPL照射后形态无明显改变;能量密度为18,29,35J/cm²的IPL均可明显提高成纤维细胞活性,但无剂量依赖性.IPL照射后成纤维细胞MMP-1及MMP-2分泌水平无明显改变.结论 IPL照射能增强成纤维细胞增殖活性.     

紫外线对皮肤角质形成细胞和成纤维细胞产生MMP-1和MMP-3的影响

目的:研究中波紫外线辐射对体外培养的表皮角质形成细胞和真皮成纤维细胞产生基质金属蛋白酶-1(MMP-1)和MMP-3的直接和间接影响,研究绿茶中的主要活性成分表没食子儿茶酚没食子酸酯(EGCG)对此影响的保护作用。方法:体外培养角质形成细胞株HaCaT和真皮成纤维细胞,中波紫外线辐射、不同浓度IL-6刺激及EGCG处理后,ELISA方法测定上清液中Pro-MMP-1和MMP-3蛋白含量,半定量RT-PCR方法测细胞中mRNA含量。结果:UVB30mJ/cm2辐射后角质形成细胞分泌的pro-MMP-1和MMP-3并未增加(P>0.05),真皮成纤维细胞合成和分泌MMP-1和MMP-3mRNA含量和蛋白水平均显著增加(P<0.05),IL-6(8、16、24pg/mL)可显著增加成纤维细胞产生MMP-1和MMP-3(P<0.05)。EGCG(0.15、0.3mM)能够显著抑制紫外线诱导成纤维细胞产生MMP含量的增加(P<0.05),但IL-6刺激成纤维细胞所产生的MMP-1和MMP-3的增加不受EGCG的影响(P>0.05)。结论:中波紫外线辐射并不能直接导致角质形成细胞分泌MMP-1和MMP-3增加,但紫外线辐射后角质形成细胞分泌的IL-6可促进成纤维细胞产生MMP。EGCG对IL-6刺激成纤维细胞产生MMP增加没有影响,但它可以显著抑制紫外线辐射直接导致的成纤维细胞产生MMP-1和MMP-3的增加,对防治皮肤光老化可能有一定作用。     

UVA诱导人皮肤成纤维细胞光老化模型中miR-222的调节作用北大核心CSCD

目的探讨miR-222在长波紫外线(UVA)诱导的光老化模型中的调节作用。方法分离并培养人皮肤成纤维细胞(HDFs),用0,2.5,5.0和7.5J不同剂量UVA辐射诱导光老化模型,用实时定量PCR和Western-blot分别检测miR-222和基质金属蛋白酶1(MMP1)的表达情况。用miR-222的功能模拟物和miR-222的功能抑制物分别转染HDFs,检测MMP1表达情况。对HDFs细胞分别转染miR-222功能模拟物、miR-222阴性对照物、miR-222功能抑制物和miR对照的功能抑制物,转染24h后予UVA辐射诱导光老化模型,检测MMP1表达情况。结果 HDFs经不同剂量UVA辐射后,MMP1表达与对照组相比显著升高(P<0.01),同时miR-222表达与对照组相比显著降低(P<0.01)。miR-222转染HDFs后再予UVA辐射,miR-222转染组MMP1表达显著低于miR对照组(t=5.616,P<0.05),而miR-222抑制物转染组MMP1表达与miR对照组相比无显著的改变。结论人皮肤成纤维细胞光老化模型中UVA辐射可导致miR-222表达降低,从而上调MMP1表达。     

UVA1对人体皮肤成纤维细胞的影响及临床应用

UVA1作用于皮肤成纤维细胞,使其凋亡增加、酶活性及细胞因子的分泌改变,造成真皮层损伤,还可促进伤口愈合,被用于治疗某些与皮肤成纤维细胞增生相关的皮肤病,如硬皮病、瘢痕疙瘩及增生性瘢痕等。本文就UVA1对皮肤成纤维细胞的影响及其在皮肤病治疗中的应用作以综述。     

晚期糖基化终末产物对UVA照射皮肤成纤维细胞组织蛋白酶D表达及其活性的影响

目的：研究晚期糖基化终末产物（AGE）对长波紫外线（UVA）照射皮肤成纤维细胞组织蛋白酶D （CatD）表达和活性的影响。方法原代培养来自儿童包皮成纤维细胞。CCK?8法筛选对成纤维细胞无细胞毒性的AGE?牛血清白蛋白（BSA）浓度。分别以50、100、200 mg/L AGE?BSA孵育细胞24 h,以未处理细胞作为对照组,采用RT?PCR、Western印迹及荧光法检测AGE?BSA对细胞CatD表达和活性影响。将部分成纤维细胞分为6组,即对照组（正常皮肤成纤维细胞,不接受任何处理）、AGE?BSA组、BSA组、UVA组、UVA?AGE?BSA组、UVA?BSA组。AGE?BSA组加入最大无细胞毒性浓度AGE?BSA孵育24 h,BSA组加入相同浓度BSA孵育24 h,后3组除分别接受上述处理外再接受10 J/cm2 UVA照射。处理结束后,收集细胞mRNA和蛋白,采用RT?PCR、Western印迹及荧光法检测细胞CatD表达和活性。结果50、100、200 mg/L AGE?BSA对皮肤成纤维细胞增殖活性无显著影响。50 mg/L组、100 mg/L组、200 mg/L组细胞CatD mRNA水平分别为0.267±0.007、0.348±0.007、0.418±0.006,CatD蛋白水平分别为1.403±0.181、2.233±0.090、2.477±0.111,CatD活性分别为1.760±0.080、2.330±0.060、2.890±0.080,较相应对照组CatD mRNA（0.161±0.006）、CatD蛋白（0.903±0.200）以及CatD活性水平（1.100±0.090）均显著升高,均P<0.05。AGE?BSA呈剂量依赖性地刺激细胞CatD表达和活性。对照组、UVA组和UVA?AGE?BSA组细胞中CatD mRNA表达水平分别为0.155±0.005、0.480±0.005、0.394±0.008,蛋白表达水平分别为0.920±0.235、2.583±0.199、2.070±0.125,CatD活性分别为1.110±0.040、2.970±0.110、2.560±0.060;UVA组CatD mRNA水平、蛋白表达水平、酶活性均明显高于对照组（P<0.05）,但UVA?AGE?BSA组3种指标水平均显著低于UVA组（P<0.05）。结论 AGE可升高未接受UVA照射的皮肤成纤维细胞CatD表达和活性,但AGE却抑制UVA照射上调的CatD表达和酶活性。     

白藜芦醇对UVB照射的人皮肤成纤维细胞MMP-1水平及细胞凋亡的影响

目的初步探寻红葡萄酒中主要活性成分白藜芦醇对紫外线照射皮肤保护作用的可能机制。方法白藜芦醇对UVB照射的人皮肤成纤维细胞基质金属蛋白酶(MMP)-1水平及细胞凋亡的影响。将培养的人皮肤成纤维细胞分为5组,A组:无UVB照射无干预组,B组:UVB照射无干预组,C组:UVB照射1μmol/L白藜芦醇干预组,D组:UVB照射10μmol/L白藜芦醇干预组,E组:UVB照射100μmol/L白藜芦醇干预组。UVB照射剂量均为30mJ/cm2。用免疫组织化学方法分别检测5组细胞中MMP-1水平,用磷脂酰丝氨酸外翻分析(AnnexinV法)检测细胞凋亡率。结果 A～E组5组细胞MMP-1阳性细胞评分及凋亡率差异均有统计学意义(P均<0.05)。A组评分及凋亡率均明显低于B组,两组比较差异有统计学意义(P均<0.05),B组与C,D,E组评分及凋亡率比较差异均有统计学意义(P均<0.05),C～E组3组评分及凋亡率比较差异亦有统计学意义(P<0.05)。结论白藜芦醇可以抑制UVB照射诱导的人皮肤成纤维细胞MMP-1水平的升高,并可减少细胞因UVB照射引起的凋亡,白藜芦醇可能通过此机制对紫外线照射皮肤起到保护作用。     

蛋白酶活化受体在胎儿真皮成纤维细胞上的表达

成纤维细胞上存在蛋白酶活化受体(PARs),它是独特的跨膜受体,属G蛋白偶联受体(GPCR),目前人们在人与小鼠组织细胞中共发现4种PAR[1].凝血酶可激活PAR-1、PAR-3和PAR-4,而胰蛋白酶和类胰蛋白酶则激活PAR-2[1].不同器官来源的成纤维细胞表达不同类型的PAR,如皮肤成纤维细胞表达PAR-1和PAR-3基因.笔者前期研究证实培养的成人真皮成纤维细胞高表达PAR-1 mRNA,中度表达PAR-3 mRNA,弱表达PAR-2 mRNA,同时也表达PAR-1、PAR-3蛋白.胎儿皮肤原代成纤维细胞培养和表达PAR尚未见报道.为此我们建立体外培养胎儿原代皮肤成纤维细胞方法;检测并比较成人与胎儿皮肤成纤维细胞PAR的表达情况,为进一步研究其功能奠定基础.     

地塞米松对瘢痕疙瘩成纤维细胞基质金属蛋白酶1调控的研究

目的：探讨地塞米松对瘢痕疙瘩成纤维细胞基质金属蛋白酶1（又被称为间质胶原酶1）蛋白的分泌合成和mRNA表达的影响。方法：采用酶联免疫吸附实验（ELISA）和Northem杂交技术检测了培养瘢痕疙瘩成纤维细胞基质金属蛋白酶1蛋白的合成分泌和mRNA的表达。结果：培养瘢痕疙瘩成纤维细胞对照组基质金属蛋白酶1蛋白的浓度为（151．02±27．70）pg／mL；加入10^-9M和10^-6M含地塞米松培养基24小时后，基质金属蛋白酶的浓度分别为（121．27±45．57）pg／mL（P〈0．05）和（101．78±35．82）pg／mL（P〈0．01）。加入地塞米松24小时后，培养瘢痕疙瘩成纤维细胞的基质金属蛋白酶1mRNA的表达被显著抑制，经密度扫描定量分析：基质金属蛋白酶1mRNA的表达分别下降了大约36％和53％。结论：地塞米松可抑制培养瘢痕疙瘩成纤维细胞基质金属蛋白酶1蛋白的合成分泌及其mRNA的表达，可能是地塞米松在抗瘢痕疙瘩纤维化作用中，尤其是纤维化形成后，疗效欠佳的原因。     

UVB照射对皮肤成纤维细胞产生受体相互作用蛋白-1的影响

目的:评价UVB照射对培养皮肤成纤维细胞受体相互作用蛋白-1(RIP-1)的影响.方法:采用150 mJ/cm2 UVB照射体外培养的人皮肤成纤维细胞,照射后12、24、36和48 h,MTT法检测细胞活性,RT-PCR法检测细胞中RIP-1 mRNA的变化,Western blot检测RIP-1蛋白水平.结果: UVB照射后,细胞活性进行性下降,RIP-1 mRNA逐渐减少,RIP-1蛋白含量逐渐升高.结论: 在UVB引起的皮肤成纤维细胞急性损伤过程中,RIP-1可能发挥着重要作用.