抗-HCV阳性标本隔批拖带引起S/CO值升高结果分析

<正>随着全自动加样设备在血液检测中的广泛应用,其加样导致的阳性拖带现象已引起高度关注。拖带现象即遇到含高浓度抗原或抗体的标本时,同一加样针会使其后相邻的多个样本出现不同程度的污染。拖带现象发生在同一块酶标板上,国内已有多篇报道[1～4]。我们在进行血液标本加样     

加样针污染致不同项目拖带情况分析

目的探讨不同项目、不同值域的拖带规律,为制订拖带克服措施和献血者(血液)保留淘汰策略提供依据。方法各个项目均用RSP100(4针型)全自动加样仪加样,用同样的冲洗程序和冲洗量进行加样针冲洗,用FAME16/20全自动酶免分析仪进行后处理,从第2列开始,以列为序,阳性孔后每间隔3孔有1孔有反应,取原标本和重采标本经手工加样复检阴性即纳入拖带污染统计。将阳性孔按S/CO值进行分组,对不同阈值造成拖带的情况进行评价。结果不同项目的拖带程度和频率有明显差异,抗-HIV项拖带最为严重,抗-HCV项次之,TP和HBsAg最低,拖带率随着S/CO值的升高而升高,当样本测定值在Cut off值的20倍以上时,抗-HIV项可有80%的样本发生拖带,抗-HCV项可有40%的样本发生拖带。结论加样针老化是造成拖带率逐年上升的主要原因,各项目拖带情况不一与样本的阳性程度、试剂灵敏度、加样量有关,拖带的预防应从做好仪器维护保养、加大加样针的洗涤时间和洗涤量、推广使用一次性加样针、献血前进行快速检测筛除阳性程度较高的标本等方面进行考虑。     

全自动加样仪使用一次性加样针的必要性

近年来,全自动加样仪在血站血液标本检测中被广泛应用,全自动加样仪避免了检验人员手工加样易出现的错加,漏加样本、试剂以及加样精度不够而导致的差错和误差,确保了加样的准确性,大大提高了血站检测工作的效率,得到检验人员充分认可。但日常工作中,我们发现使用永久性钢针会造成拖带现象的发生,拖带现象不但会造成假阳性,更可怕的是造成假阴性,引起输血传播疾病。为彻底解决拖带现象,我们建议全自动加样仪使用一次性加样针。     

STAR全自动加样器引起血液检测阳性拖带现象分析

随着无偿献血事业的深入发展,自动化检测程度得到了很大的提高.全自动加样器在检验科的工作中发挥着重要作用,与手工加样相比,它可以降低劳动强度,避免加样错误,但它自身也存在缺点,由于目前绝大多数单位使用的都是永久性加样针,洗针时不能彻底冲洗干净,难以避免样本的污染,容易产生阳性拖带现象.     

梅毒螺旋体和乙肝表面抗原检测中阳性拖带现象与钩状效应的关系

目地探讨采用一步法检测梅毒螺旋体和乙肝表面抗原并发生阳性拖带现象时是否存在钩状效应。方法将出现阳性拖带现象的第一个阳性孔标本及反应板上其对应位置的前一个标本各34例分成I、Ⅱ两组,分别用一步法和二步法进行复检,并将一步法阴性而二步法阳性的标本进行倍比稀释后用一步法检测,直至检出阳性。结果复检后,I组34例标本有5例为阴性,Ⅱ组中有4例因钩状效应呈假阴性,并且这4例标本造成阳性拖带现象。结论采用酶联免疫反应（ELISA）一步法检测时可因钩状效应使强阳性标本漏检,如果用固定加样针加样还可能造成交叉污染使其后的标本出现阳性拖带。     

加样引起酶标板拖带及标本污染探讨

全自动加样器在国内血站系统的使用，避免了人为因素引起的漏加错加，使检测结果更加准确、可靠。但目前国内全自动加样器多采用永久性金属针连续加样，反复使用，尚无实现一人一针，当遇到高滴度的阳性标本耐，笔者发现可引起拖带污染，甚至样本的污染。     

全自动酶联免疫分析仪检测乙肝核心抗体的加样质量控制

目的选择TECAN全自动酶联免疫分析仪检测乙肝核心抗体(HBcAb)的理想检测程序。方法对同一样本设置不同的加样方式、加样顺序,获得相应的数据,比较检测结果以确定理想检测程序。结果 TECAN全自动酶联免疫分析仪检测HBcAb,加样针存在拖带现象,可能造成标本污染,出现假阳性结果,或污染阴性对照,使CO值降低,造成假阴性结果。通过改进加样程序,减少携带概率,避免阴性对照污染,提高检测质量。结论用单独加样方式,先加阴阳对照再加标本的顺序为理想的检测程序。     

1例HIV抗体强阳性标本引起的拖带阳性原因分析

目的观察全自动酶免检测系统进行ELISA检测时产生阳性拖带的原因。方法初试阳性标本再次将样管血和血辫血进行双孔复检，阳性标本送省疾病控制中心进行确认。结果使用全自动酶免分析系统时存在强阳性标本拖带现象。分析认为加样、洗板时的处理不当是造成拖带现象的主要原因。     

检测抗-HIV抗体时出现交叉污染分析

目的分析抗-HIV检测中出现的拖带污染现象。方法选用本地区无偿献血者血浆,用ELISA双抗原夹心法检测抗-HIV。结果同列连续4份标本初、复检阳性,双孔复试仍为阳性,重新采血样和血袋样本一起送市疾病预防控制中心确认,结果除D8对应标本阳性外,其余均为阴性。结论全自动酶免分析系统存在样本污染情况,定期用0．1N的HCI和NaOH切底冲洗和浸泡加样器管道,增加洗针液量可以有效避免标本污染。     

全自动酶免疫分析系统加样中携带污染问题及其解决方案

目的 评价全自动酶免疫分析系统ELISA实验中的HBsAg加样携带污染并探索解决方案。方法 利用分配HBsAg强阳性标本的加样针再分配阴性标本进行阳性携带污染评价,通过对不同洗针次数的洗涤效果比较选择阳性携带污染解决方法;利用洗涤后未干燥和已干燥的加样针分配0.5ng/mL HBSAg标本观察阴性携带污染(稀释效应)。结果 加样针在吸取强阳性标本进行分配后洗涤5次,再分配阴性标本,造成部分实验孔出现弱阳性结果,洗涤后未经干燥的加样针再分配低值弱阳性标本使部分实验孔出现阴性结果,造成弱阳性标本漏检。洗涤次数增加至10次和干燥后的加样针没有类似问题。结论 加过强阳性标本的加样针未经充分洗涤会对阴性标本造成携带污染,出现假阳性结果;洗涤后未经干燥的加样针存在稀释效应,造成弱阳性标本漏检。通过增加洗涤次数和对加样针进行干燥可以在一定程度上解决携带污染问题。     

全自动酶免疫分析系统加样中携带污染问题及其解决方案

目的 评价全自动酶免疫分析系统ELISA实验中的HBsAg加样携带污染并探索解决方案。方法 利用分配HBsAg强阳性标本的加样针再分配阴性标本进行阳性携带污染评价，通过对不同洗针次数的洗涤效果比较选择阳性携带污染解决方法；利用洗涤后未干燥和已干燥的加样针分配0.5ng/ml HBsAg标本观察阴性携带污染(稀释效应)。结果 加样针在吸取强阳性标本进行分配后洗涤5次，再分配阴性标本，造成部分实验孔出现弱阳性结果，洗涤后未经干燥的加样针再分配低值弱阳性标本使部分实验孔出现阴性结果，造成弱阳性标本漏检。洗涤次数增加至10次和干燥后的加样针没有类似问题。结论 加过强阳性标本的加样针未经充分洗涤会对阴性标本造成携带污染，出现假阳性结果；洗涤后未经干燥的加样针存在稀释效应，造成弱阳性标夏漏检。通过增加洗涤次数和对加样针进行干燥可以在一定程度上解决携带污染问题。     

永久性加样针造成标本交叉污染及其解决办法

目前,自动加样器在国内采供血机构的使用越来越普及,使用的自动加样器型号主要有ML ATPLUS、TECAN GENESIS RSP及DYNEX VI-VACE等。各实验室对全自动酶免分析系统的性能评价,主要集中反映为减轻工作人员劳动强度,提高工作效率和实验的灵敏度以及精密度等方面。本实验室在使用TECAN GENESIS RSP200型自动加样器时,发现由于使用永久性的加样针,可造成标本交叉污染,导致出现阳性拖带现象。为解决这一问题,笔和厂家技术人员共同探讨解决方法,取得了比较满意的结果。现以抗-HIV的检测为例报告如下。     

抗-HBs拖带对HBsAg测定的影响

目的 探讨血站自动化加样仪加高浓度抗-HBs标本拖带造成弱阳性HBsAg标本测定为阴性的概率,以采取防范措施。方法 通过采用不同的加样方式对弱阳性HBsAg进行测定,观测OD值的改变情况。结果 抗-HBs污染量越多,HBsAg的OD下降值越大。HBsAg含量越低（原始OD值小）,OD下降值就越小,但占原始OD值的百分比越大。不同自动化加样洗针方式的OD值差异元显著性。结论 手工加样不换吸头很容易造成假阴性,但在目前血站自动化加样仪加样方式下,高滴度抗-HBs标本拖带造成弱阳性HBsAg标本阴性的概率不到万分之一。     

关于全自动酶联免疫分析仪加样携带污染的探讨

目的 探讨全自动酶联免疫分析仪加样针的携带污染问题.方法 选取40例血清样本(20例阳性,20例阴性),在全自动酶联免疫分析仪上做乙型肝炎病毒表面抗原的酶联免疫吸附(ELISA)试验.结果 做出3例加样污染的假阳性结果.结论 全自动酶联免疫分析仪加样时会带来不同程度的携带污染,可以通过其他方式进行改进,以保证结果的可靠性.     

阳性拖带现象产生的原因和解决方法

全自动加样器在采供血机构检验科的日常工作中发挥着重要作用,不但大大降低了劳动强度,而且避免了手工加样中容易出现的差错,提高了血液检测的质量和水平,但有时会产生阳性拖带现象。1材料与方法1.1样本来源本中心2005年4月的无偿献血者血液16276份,均采用肝素钠抗凝。1.2试剂HBsAg检测试剂盒(初检为厦门新创,批号2004115108,复检为Merieux,批号B95NA);HIV抗体检测试剂盒(初检为万泰,批号20041212,复检为Merieux,批号A45HA);HCV抗体检测试剂盒(初检为金伟凯,批号20041218,复检为Ortho,批号EXE093);TP抗体检测试剂盒(初检为金豪,批…     

不同容量一次性加样针对全自动Addcare ELlSA检测的影响

目的 评价不同容量一次性加样针对全自动Addcare ELISA检测结果的影响,特别是加样量属微量的试验.方法分别用300μl和800μl的一次性加样针分配纯水10μl、50μl和100μl,称重并计算相对误差和精密度;各选一份HBsAg、抗-HBs、 抗-HCV、 抗-HEV IgM以及抗-HEV IgG室内定值弱阳性质控品,在全自动Addcare ELISA 600分析系统分别用300μl和800μl一次性加样针进行检测,计算该五个项目各孔间S/CO值和CV值,并进行统计学分析.结果两种容量加样针分配10μl、50μl和100μl纯水的相对误差E和精密度CV均达到移液器国家计量基准,使用300μl容量加10μl和50μl的准确度明显优于800μl(P<0.05),加100μl差异无统计学意义(P>0.05),使用300μl容量三种加样量的CV值均小于800μl;两种容量加样针检测抗-HBs、抗-HCV和抗-HEV IgM的S/CO值有显著差异(P<0.05),HBsAg和抗-HEV IgG无显著差异(P>0.05),使用300μl容量加10μl项目各孔间S/CO值的CV值明显小于800μl.结论不同容量一次性加样针对加样量10μl和50μl的检测项目影响较为明显,在使用全自动Addcare ELISA检测时,应当选择适当容量的加样针以满足微量样本分配准确度和精密度的要求.     

不同容量规格一次性加样针对抗-HCV酶联免疫吸附实验的影响

目的 评估帝肯Freedom EVO 150全自动加样仪使用1 000与200 μL两种不同容量规格的一次性加样针对抗-HCV酶联免疫吸附实验的影响.方法 选1份抗-HCV弱阳性标本和稀释后血清标准物质作为待检样本,用两种酶免试剂在全自动加样仪上使用不同规格的一次性加样针进行加样检测,并对检测结果进行灵敏度、孔间精密度和符合性对比分析.结果 应用200与1 000 μL两种不同容量规格一次性加样针加样后,在两种抗-HCV酶免试剂检测各孔间S/CO值统计结果CV值差异有统计学意义(P<0.05).结论 应用全自动加样仪进行加样时,应选用满足微量样本移取精度要求的一次性加样针,避免因使用不当容量规格的一次性加样针而导致血液检测质量事故的发生.     

全自动加样器阳性拖带现象产生原因及解决方法

目前，国家加大了对采供血机构的监管，对血液的质量要求越来越高，手工检测手段已不能满足更高的血液质量管理要求和实验室自动化、标准化需求。本站于2007年8月购进全自动加样器（Xantus 44 OH），其在检验科的日常工作中发挥着重要作用，不但大大降低了劳动强度，而且避免了手工加样中容易出现的差错，提高了血液检测质量，但有时强阳性标本会产生拖带现象。     

不同容量一次性加样针对全自动Addcare ELISA检测的影响

目的评价不同容量一次性加样针对全自动Addcare ELISA检测结果的影响,特别是加样量属微量的试验。方法分别用300μl和800μl的一次性加样针分配纯水10μl、50μl和100μl,称重并计算相对误差和精密度;各选一份HBsAg、抗-HBs、抗-HCV、抗-HEV IgM以及抗-HEV IgG室内定值弱阳性质控品,在全自动Addcare ELISA 600分析系统分别用300μl和800μl一次性加样针进行检测,计算该五个项目各孔间S/CO值和CV值,并进行统计学分析。结果两种容量加样针分配10μl、50μl和100μl纯水的相对误差E和精密度CV均达到移液器国家计量基准,使用300μl容量加10μl和50μl的准确度明显优于800μl(P0.05),加100μl差异无统计学意义(P0.05),使用300μl容量三种加样量的CV值均小于800μl;两种容量加样针检测抗-HBs、抗-HCV和抗-HEV IgM的S/CO值有显著差异(P0.05),HBs Ag和抗-HEV Ig G无显著差异(P0.05),使用300μl容量加10μl项目各孔间S/CO值的CV值明显小于800μl。结论不同容量一次性加样针对加样量10μl和50μl的检测项目影响较为明显,在使用全自动Addcare ELISA检测时,应当选择适当容量的加样针以满足微量样本分配准确度和精密度的要求。     

STAR加样器拖带污染情况分析及其解决办法

目前,国内STAR加样采用的针头有2种,一种是可反复使用的不锈钢加样针头(简称钢针),另一种是一次性的塑料针头.不锈钢加样针头可反复使用,节约成本,但可导致加样拖带污染后边的标本,而一次性的塑料针头虽没有拖带污染,但针头由于一次性使用,费用太高,两者各有优缺点,为此,我们利用本站2台STAR加样器,1台用一次性加样针头做初检,另1台用钢针做复检,通过大量标本同时进行常规检测,研究分析检测污染情况及解决拖带污染的方法,现报告如下.