地龙提取液对卵清蛋白诱导哮喘小鼠气道重塑及肺组织MMP2、MMP9、TIMP-1表达的影响

目的 探讨地龙提取液对哮喘小鼠气道重塑及肺组织基质金属蛋白酶(MMP)2、MMP9、基质金属蛋白酶组织抑制剂(TIMP)-1表达的影响.方法 将60只BALB/c小鼠随机均分为正常组,模型组,地龙提取液低、中、高剂量(50、100、200 mg·kg-1)组和地塞米松(0.5 mg·kg-1)组.除正常组外,各组小鼠采...     

CD147及MMP9在乳腺癌移植瘤模型中的表达及其意义

目的:探讨细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(CD147)及基质金属蛋白酶9(MMP9)在乳腺癌BCML-TAII 99模型移植瘤中的表达及其与肿瘤生长和转移的关系.方法:建立30只小鼠肺转移性乳腺癌BCML-TAII 99模型.用免疫组织化学SP法对小鼠肿瘤组织标本CD147及MMP9蛋白表达进行检测,并分析其与肿瘤大小及转移之间的关系.结果:CD147及MMP9蛋白表达阳性率分别为63.33%(19/30)和53.33%(16/30), CD147、MMP9均阳性表达者13只;两者均阴性者8只,两者表达呈正相关( χ~2 = 48.492,r = 0.786, P ＝ 0.025).CD147、MMP9在转移组与非转移组表达阳性率分别为92.31%、41.18%和76.92%、35.29%,差异有统计学意义(χ~2 = 6.238,P = 0.013和χ~2 = 5.129,P = 0.024).CD147和MMP9蛋白在≥3 g组和＜3 g组的阳性表达率分别为88.89%、25.00%和66.67%、33.33%,两者表达与肿瘤大小有关( χ~2 = 8.452,P = 0.009和χ2 = 4.652,P = 0.039, r分别为0.469和0.366 ).结论:CD147可能通过诱导MMP-9蛋白的产生在乳腺癌的浸润和转移过程中起重要作用.     

妇科千金片对急性盆腔炎模型大鼠ICAM1与MMP2的影响

目的观察妇科千金片对急性盆腔炎模型大鼠子宫、卵巢、输卵管细胞间黏附分子1（ICAM 1）与基质金属蛋白酶2（MMP 2）表达的影响,探讨该药治疗盆腔炎的机制。方法将80只雌性Wistar大鼠随机分为8组,除空白组和假手术组外,其他各组建立急性盆腔炎模型,给药21 d后取子宫、输卵管、卵巢,免疫组织化学法观察ICAM 1与MMP 2表达情况。结果与空白组和假手术组比较,模型组大鼠子宫、卵巢、输卵管组织ICAM 1表达升高,MMP 2表达降低（P＜0.05）;与模型组比较,妇科千金片中、高剂量组和妇炎康组、罗红霉素组大鼠子宫、卵巢、输卵管组织ICAM 1表达下降,MMP 2表达升高（P＜0.05）;与罗红霉素组和妇炎康组比较,妇科千金片高剂量组大鼠子宫、卵巢、输卵管组织ICAM 1和MMP 2阳性细胞数差异无统计学意义。结论妇科千金片可能通过调节大鼠盆腔组织MMP 2和ICAM 1表达,降解细胞外基质,减轻盆腔组织炎症反应。     

K562细胞外泌体选择性携带MMP9基因

目的检测人慢性粒细胞白血病K562细胞来源外泌体基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP9)和趋化因子受体-4(chemokine receptor 4,CXCR4)基因的表达,探讨K562细胞外泌体可能的功能。方法采用RT-PCR方法分别检测K562细胞和K562/Adr细胞(阿霉素耐药株)及两者分泌的外泌体MMP9、CXCR4基因的表达。结果在K562细胞和K562/Adr细胞中,均检测到MMP9和CXCR4基因的表达。而在K562细胞和K562/Adr细胞分泌的外泌体中,只检测到MMP9基因的表达。结论两种K562细胞都可以分泌一定量的外泌体;虽然两种K562细胞都表达MMP9、CXCR4基因,但外泌体只选择性携带和转运MMP9基因,推测其可能具有促血管新生功能。     

涎腺肿瘤中MMP2、MMP9与C-myc表达的研究

目的：研究38例肋腺良恶性肿瘤中基质金属蛋白酶MMP2与MMP9与癌基因c-myc表达的关系及肿瘤分化程度的关系。方法：应用免疫组化S－P法观察石蜡包埋组织中的MMP2、MMP9和c-myc表达。结果：MMP2、MMP9定位于细胞浆中，分布于肿瘤细胞及肿瘤细胞旁间质细胞中，特别见于肿瘤细胞与间质交界处。MMP2和MMP9与肿瘤分化程度有关，随着肿瘤细胞分化降低MMP2和MMP9表达增强.c-myc表达强弱与肿瘤分化呈正相关，与MMP2和MMP9表达之间亦有显著相关性。结论：MMP2和MMP9的分泌是肿瘤细胞和间质细胞共同事件，以肿瘤细胞占优势，恶性肿瘤细胞浸润和转移可能是由于过度表达的MMP2和MMP9所致。癌基因c-myc有可能促进癌细胞分泌更多的MMP2和MMP9。     

对NOD/SCID和SCID小鼠皮下接种的黑色素瘤生长特性比较

目的比较两种常用免疫缺陷小鼠皮下接种黑色素肿瘤细胞后肿瘤生长及小鼠生存情况。方法 7和17周龄的NOD/SCID及SCID小鼠左腋下接种小鼠黑色素瘤细胞,接种第8天开始隔1天测量肿瘤长径和短径,计算肿瘤体积,每天观察小鼠生存情况,记录生存时间,待1组小鼠完全死亡结束实验。结果 a.7周龄不同品系小鼠接种小鼠黑色素瘤后,NOD/SCID较SCID小鼠肿瘤生长速度更快、中位生存期更长;17周龄2种品系小鼠肿瘤生长情况无显著性差异。b.同品系NOD/SCID和SCID小鼠接种小鼠黑色素瘤后,小周龄较大周龄肿瘤生长速度更快,中位生存期更短。结论与7和17周龄SCID小鼠及17周龄NOD/SCID小鼠相比,7周龄NOD/SCID小鼠肿瘤生长情况更好,生存期较为适当,可能更适合作为黑色素瘤小鼠模型的实验动物。     

MMP9和CD44v6在食管癌组织中表达的研究

目的 探讨基质金属蛋白酶MMP9、细胞黏附因子CD44v6在食管癌表达的意义。方法 采用免疫组织化学法对60例食管癌组织进行检测及分析。结果 MMP9和CD44v6与食管癌的浸润及转移密切相关。浸润癌组织MMP9表达高于原位癌组织．淋巴结转移组明显高于无淋巴结转移组;原位癌组织CD44v6阳性表达高于浸润癌组织,而淋巴结转移组明显高于无淋巴结转移组。结论 MMP9和CD44v6的表达均与食管癌浸润转移有关,但两者的作用机制和途径不同。     

激动素对肝纤维化大鼠肝组织TIMP1和MMP2表达的影响

目的 探讨激动素对实验性肝纤维化大鼠肝组织表达基质金属蛋白酶 2（MMP2）及金属蛋白酶组织抑制因子1（TIMP1）的影响,初步探讨激动素抗肝纤维化的机制.方法 60只Wistar大鼠随机分为对照组、模型组及药物组各20只.模型组和药物组背部皮下注射40%四氯化碳溶液0.3 mL/(100 g),每周2次.药物组同时背部皮下注射0.1%激动素溶液0.5 mL/(100 g),qd;对照组仅给予等量0.9%氯化钠溶液背部皮下注射.12周后取大鼠肝组织,苏木精-伊红染色观察肝组织炎症和纤维化程度.采用免疫组化方法检测各组MMP2、TIMP1的表达情况.结果 模型组肝纤维化程度明显高于药物组,同时实验也表明激动素能够明显减少肝组织中MMP2及TIMP1的表达.结论 激动素具有逆转肝纤维化的作用,其机制可能是通过抑制肝组织中MMP2及TIMP1的表达,改善细胞外基质的合成与降解的失衡.     

大鼠佐剂性关节炎中MMP3、MMP9、MMP13及TIMP-1的mRNA表达

目的 研究大鼠佐剂性关节炎模型中爪部跖趾关节及膝关节的软骨及滑膜中的基质金属蛋白酶类（MMP3、MMP9、MMP13）及金属蛋白酶类组织抑制剂1（TIMP-1）在不同时期的表达情况。方法 制作大鼠佐剂性关节炎模型25只,分别于造模第1,2,5,7,9周各处死5只。取注射足（患爪）的跖趾关节和同侧膝关节的软骨及邻近滑膜,用反转录多聚酶链反应（RT-PCR）的方法检测基质水解酶1（MMP3）、明胶酶B（MMP9）、胶原酶3（MMP13）及TIMP-1的mRNA表达,同时取患侧爪部跖趾关节和膝关节软骨行病理切片检查。结果 造模第1、2周,患爪的软骨及滑膜中MMP3、MMP13均有表达,且MMP3相对表达水平较MMP13高,第5周MMP3尚有表达,MMP13未测到表达,第7周MMP3,MMP13均无表达。患爪滑膜及软骨中TIMP-1直到第7周才测到表达,MMP9表达不稳定。膝关节可以测到TIMP-1,各时间段均未测到MMP3、MMP9及MMP13的表达。病理光镜下第9周患爪部跖趾关节滑膜可见炎性反应,膝关节软骨无明显改变。结论 结果提示MMP-TIMP1的平衡关系紊乱可能在软骨破坏过程中起重要作用。     

SCID与NOD/SCID小鼠部分免疫指标的比较

目的测定SCID和NOD/SCID小鼠的免疫器官质量、血常规指标以及部分血液生化指标(immunoglobulin G,IgG),分析比较2个免疫缺陷小鼠在免疫方面的特点。方法对4~8、12~16和20~24周龄SCID与NOD/SCID小鼠眼眶静脉采血,测定血常规指标,剖取胸腺和脾脏进行称质量比较。对4~6、8~10、16~18周龄的SCID和NOD/SCID小鼠眼眶静脉采血,测定比较血清IgG含量。结果 a.同周龄SCID与NOD/SCID小鼠胸腺质量差异无显著性。3个年龄段(4~8、12~16和20~24周龄)的NOD/SCID小鼠脾脏显著低于各组SCID小鼠(P<0.05),SCID小鼠脾脏随年龄增加趋势明显;b.NOD/SCID小鼠白细胞数(white blood cell count,WBC)、淋巴细胞绝对值(lymphocytes,LYM#)、红细胞数(red blood cell,RBC)、血红蛋白含量(hemoglobin,HGB)及平均血红蛋白浓度(mean corpuscular hemoglobin concentration,MCHC)显著低于同周龄SCID小鼠(P<0.05),高龄SCID小鼠白细胞水平和淋巴细胞百分比显著高于低龄(4~8周龄)SCID鼠(P<0.05)。c.NOD/SCID小鼠血清IgG含量显著低于SCID小鼠(P<0.05)。结论SCID与NOD/SCID小鼠部分免疫指标存在显著性差异。     

In vivo therapeutic effects of IFN-gamma on human myelogenous leukemia in a severe combined immunodeficiency mouse model

BACKGROUND: Results of clinical trials of IFN-gamma on the treatment of various types of leukemia are not so promising, regardless of the antiproliferative activity against leukemic cells and expected immunomodulatory effects. In this study, we have re-evaluated the anti-leukemic effects of natural human IFN-gamma (nHuIFN-gamma) using an established human myelogenous leukemia model in SCID mice. MATERIALS AND METHODS: SCID mice transplanted with human myelogenous leukemia cell line ML-2S received subcutaneously 5 x 10(4) IU/mouse of nHuIFN-gamma at 5 times/week for 5 weeks. RESULT: nHuIFN-gamma significantly prolonged the lifespan of SCID mice in leukemic crisis. Percentages of ML-2S cells in the peripheral blood were also significantly decreased by the IFN-gamma treatment. Histopathological examination revealed that IFN-gamma treatment suppressed the replacement of pancreatic cells by tumor cells and the formation of tumor masses in the intestine. CONCLUSIONS: These results suggest that IFN-gamma is effective against human myeloid leukemia, especially extramedullary tumor mass-forming type in the peritoneal organs. Our results further suggest that studies employing SCID mice leukemia model would help in devising appropriate therapeutic strategies of IFN-gamma based on the specific characteristics of each leukemia subtype.     

人急性早幼粒细胞白血病小鼠模型的建立

目的:探索稳定、可靠且重复性较好的人急性早幼粒细胞白血病Nod/SCID小鼠模型的建立方法,并观察模型的病程特点.方法:Nod/SCID小鼠经60Coγ射线照射,照后第5天,外周血白细胞降至较低水平,此时尾静脉注射接种HL60细胞.通过流式细胞计数分析外周血中HL60细胞比例,以观察白血病细胞在外周血中分布变化;日常观察小鼠身体浅表部位实体瘤的形成及生长;并应用组织病理学方法确认组织脏器中肿瘤播散状况.结果:接种第7天,Nod/SCID小鼠外周血中可检测到HL60细胞;接种30 d左右,可观察到小鼠出现全身播散的实体瘤;40 d左右,动物体质状况显著衰退,小鼠陆续死亡.小鼠的造血系统及非造血系统的组织及脏器均出现肿瘤的浸润.重复实验结果一致.结论:Nod/SCID小鼠经60 Co γ射线照射后第5天,尾静脉注射接种HL60细胞,小鼠的病程可控制在40 d左右,且该模型符合临床疾病发展规律,可应用于骨髓毒性较低的受试药物的药效筛选及评价.     

Scorpion venom activates natural killer cells in hepatocellular carcinoma via the NKG2D-MICA pathway

Previous studies have demonstrated that polypeptides extracted from scorpion venom (PESV) inhibited cell proliferation in several tumors, however, the effect on dysfunctional and exhausted natural killer cells which contribute to tumor escape from immune surveillance remain to be elucidated. In this study, we determined the effect of PESV on NK infiltration into H22 cells orthotopic transplantation tumors and on the expression of MHC class I chain-related proteins A (MICA) in HepG2 cells. We found that tumor growth in mice was significantly inhibited by PESV and the survival time of tumor-bearing mice treated with PESV was significantly prolonged. Moreover, levels of tumor-infiltrating NK cells, NKG2D protein, perforin and granzyme B mRNA were significantly increased in the group treated with PESV compared with the tumor-bearing control group. In addition, In addition, up-regulation of MICA by PESV enhances the susceptibility of HepG2 cells to NK lysis in vitro. These results indicate that the inhibitory effects of PESV on hepatic carcinoma are likely mediated by up-regulation of NK cell activity via the MICA-NKG2D pathway.     

CD105在急性白血病中的表达及其临床意义

目的探讨CD105在急性白血病骨髓细胞的表达及其意义。方法分离骨髓单个核细胞,采用流式细胞仪（FCM）检测CD105的表达。结果CD105在急性白血病骨髓细胞表达率[（30．39±8．69）％]明显高于对照组[（1．90±0．61）％]（P〈0．05）;且急性淋巴白血病表达CD。阳性率[（49．92±16．71）％]高于在急性髓系白血病的表达率[（22．21±9．95）％]（P〈0．05）;化疗缓解后CD。表达率[（3．99±1．45）％]比化疗前[（48．74±16．45）％]显著减低（P〈0．05）;浸润组CD105表达率[（41．39±14．05）％]高于非浸润组[（21．06±9．14）％]（P〈0．05）。结论CD105在急性白血病细胞的异常表达,可能与白血病发病和预后有关。     

EB病毒膜潜伏蛋白LMP1和基质金属蛋白酶MMP9表达与鼻咽癌转移的关系

目的探讨EB病毒膜潜伏蛋白LMP1和基质金属蛋白酶MMP9在鼻咽癌组织表达的意义。方法采用免疫组织化学法对40例鼻咽癌组织进行标记及分析。结果鼻咽癌淋巴结转移组LMP1和MMP9阳性表达率明显高于无淋巴结转移组,二者阳性表达呈明显相关。结论 LMP1和MMP9的表达与鼻咽癌的浸润及转移密切相关,LMP1介导MMP9在鼻咽癌细胞扩散和转移起重要作用。     

Establishment of an in vivo human myeloid leukemia model in the SCID mouse

We succeeded in establishing a human myelogenous leukemia model in severe combined immunodeficient (SCID) mice by transplanting 2 x 10(7) ML-2 cells intraperitoneally (i.p.) with cyclophosphamide (CTX) pretreatment. Two months after transplantation, 9 of 10 mice developed leukemia and leukemia cells were detected in the peripheral blood (PB) and bone marrow (BM). The main findings at autopsy were peritoneal and pleural effusions and large tumor masses involving the peritoneal organs. However, successful transplantation required injection of a large number of cells. We therefore established a new cell line, ML-2S, from the PB of a mouse with ML-2 leukemia. Although only 2 x 10(6) ML-2S cells were inoculated, ML-2S induced the same pattern of leukemic dissemination reminiscent of the parent ML-2 cells. Compared to ML-2, progression of ML-2S was slow, suggesting that ML-2S is suitable as a leukemia model to study treatment. Furthermore, we confirmed that ML-2S cells are of human origin using isoenzyme analysis and also that ML-2S and ML-2 cells have the same phenotypic character by cell surface marker analysis.