红花黄素预处理对缺血再灌注大鼠心肌细胞凋亡的影响

目的研究红花黄素预处理对心肌缺血-再灌注大鼠心肌细胞凋亡的影响。方法采用在体左冠状动脉前降支结扎法制备心肌缺血-再灌注模型。24只SD大鼠分为3组:假手术组,缺血-再灌注组,红花黄素预处理组。缺血30 min,再灌注60 min。采用缺口末端标记法以及免疫组化法,观测心肌细胞凋亡指数(AI)、Bcl-2、Bax基因蛋白表达。结果与假手术组比较,缺血-再灌注组AI增加,Bax阳性表达增强,Bcl-2阳性表达减弱(P<0.01);与缺血再灌注组比较,红花黄素预处理组AI、Bax阳性表达下降(P<0.01),Bcl-2阳性表达上调(P<0.05)。结论红花黄素预处理通过抑制心肌细胞凋亡,下调Bax基因蛋白表达,上调Bcl-2基因蛋白表达,起到心肌缺血再灌注损伤的保护作用。     

红花黄素预处理保存离体心脏的实验研究

目的:观察红花黄素预处理对兔离体心脏保存的影响.方法:家兔分别用Krebs-Henseleit液灌注20min、红花黄素灌注20min、缺血5min再灌10min,反复3次.各组心脏均经历停灌30min(保温、保湿)、缺血自动停跳及再灌注60min复制全心缺血-再灌注模型.应用离体心脏Langendorff灌注模型观察各组的血液动力学、冠脉流出液心肌酶及分子生物学改变.结果:红花黄素预处理组左心功能、冠脉流量恢复明显优于对照组,心肌酶明显低于对照组,心肌诱导型一氧化氮合酶(iNOS)高于对照组.结论:红花黄素预处理对兔心肌有保护作用.     

红花黄素抗氧化作用在缺血再灌注损伤中的保护机制

红花是传统的活血化瘀类中药。红花黄素是其主要活性成分,红花黄素抗氧化作用、抗缺血再灌注损伤的保护机制主要通过清除氧自由基、对NO的调节、介导NMDA受体表达等途径实现的。文章对缺血再灌注损伤过程中红花黄素抗氧化作用保护机制的最新进展进行综述。     

红花黄色素改善大鼠缺氧心肌能量代谢的研究

目的 探讨红花黄色素(SY)缓解大鼠心肌缺氧性损伤作用及其对能量代谢的影响。方法 建立大鼠离体心脏的冠状动脉灌流模型，以2，4—二硝基苯肼比色法测心室肌组织乳酸脱氢酶(LDH)漏出量，以荧光素酶法测心室肌组织ATP含量，透射电镜观察心尖部组织超微结构；制备大鼠心室肌组织线粒体混悬液，分别以比浊法与荧光偏振法观察线粒体肿胀与膜流动性的变化。结果 SY可减少大鼠低灌流离体心脏LDH漏出，缓解心室肌组织ATP含量下降及其超微结构的损伤；SY可缓解大鼠心肌线粒体混悬液中线粒体的肿胀及其膜流动性下降。结论 SY可改善大鼠心肌能量代谢，进而缓解心肌缺氧性损伤。     

刺囊酸预处理对大鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用

 目的 研究刺囊酸预处理对心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用及其机制。方法 用终浓度分别为0.5, 5和50 μmol·L^-1的刺囊酸预处理原代培养SD大鼠乳鼠心肌细胞1 h, 予以缺氧3 h后, 再复氧2 h后,检测细胞存活率、乳酸脱氢酶、超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶活性、丙二醛含量及热休克蛋白70表达等指标,观察其对缺氧/复氧损伤的延迟保护作用,并探讨一氧化氮合成酶抑制剂0.1 mmol·L^-1的N-硝基-L-精氨酸甲酯、促分裂原活化蛋白激酶抑制剂50 μmol·L^-1的PD98059和1 μmol·L^-1K⁺-ATP通道阻断剂格列苯脲对其保护作用的影响。结果 与缺氧/复氧组比较,不同剂量的刺囊酸预处理组能显著提高细胞存活率,降低乳酸脱氢酶活性,呈剂量依赖性,且显著能增加超氧化物歧化酶及谷胱甘肽过氧化物酶活性,降低丙二醛含量,增加热休克蛋白70表达,能对抗缺氧/复氧损伤;而N-硝基-L-精氨酸甲酯和PD98059能部分取消刺囊酸预处理的上述保护作用。结论 刺囊酸预处理对心肌细胞缺氧/复氧损伤有显著抗氧化作用,且其保护作用机制可能与一氧化氮生成、促分裂原活化蛋白激酶活化及增加热休克蛋白70表达有关。     

川芎嗪预处理对大鼠心肌细胞缺氧复氧损伤的实验研究

目的:观察川芎嗪预处理对大鼠心肌细胞缺氧/复氧(A/R)损伤的保护。方法:利用心肌细胞缺氧/复氧损伤模型,川芎嗪注射液预处理对心肌细胞进行预处理。结果:川芎嗪提高心肌细胞缺氧/复氧损伤后心肌细胞存活率、减少细胞丙二醛产生、减少乳酸脱氢酶的漏出。结论:川芎嗪对乳鼠心肌细胞有预处理保护作用。其机制与提高心肌细胞抗氧自由基的能力,抑制脂质过氧反应,减轻心肌细胞膜脂质过氧化损伤,保持细胞膜结构的完整性来实现的。     

红花黄素磷脂复合物渗透泵胶囊的制备

目的:制备红花黄素磷脂复合物渗透泵胶囊,考察囊壳及内容物对药物释放行为的影响,并对处方进行优化.方法:以不同时间药物的累积释放度为指标,通过正交设计优化红花黄素磷脂复合物双层渗透泵胶囊的处方.结果:按最优处方制备的红花黄素磷脂复合物渗透泵胶囊遵从以渗透压差为释药动力的渗透泵释药模式,体外释药平稳,8 h以内呈现出良好的零级释药特征(r=0.9912).结论:采用适当的制备方法,可以制备出具有良好体外释药行为的渗透泵控释胶囊.     

红花中红花黄素A的分离工艺研究

目的:优选红花水提取物中有效成分红花素A的分离工艺.方法:以红花水提取物中进一步分离精制得到的红花黄素A的含量为指标,用HPLC法,并采用L9(34)正交试验优选红花黄素A的最优分离工艺条件.结果:红花水提取液,选用大孔吸附树脂H103,以上柱样品量与树脂量用量之比为1∶ 10(W∶ V),用去离子水洗脱,洗脱速度1.0 ml/min/cm2为最佳分离工艺.结论:本分离工艺条件稳定可行,可为红花水提取物进一步分离红花黄素A的生产工艺提供参考.     

山奈酚和芒柄花黄素对缺氧/复氧条件下H9C2心肌细胞活性氧水平的影响

目的:分析中药单体山奈酚和芒柄花素对缺氧复氧诱导的H9C2心肌细胞中活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平的影响。方法:采用缺氧复氧的造模方法对H9C2心肌细胞进行造模,选用夹竹桃作为阳性药组,通过四甲基偶氮唑蓝(MTT)实验阐明含药培养基对实验体系的影响,并初步确定中药单体的给药浓度;通过倒置荧光显微镜观察经乙酰乙酸双氯荧光素(DCFH-DA)染色的H9C2心肌细胞的荧光强弱,即细胞内活性氧的变化;通过流式细胞仪进一步测定细胞内活性氧的定量变化。结果:通过MTT实验确定各组给药浓度为10-6mol/L,用DCFH-DA法染色后经倒置荧光显微镜观察各组细胞内绿色荧光有显著变化,即正常组镜下观察细胞内的荧光很暗,模型组细胞内的绿色荧光很强,发光细胞数量也相对很多,给药组细胞内绿色荧光介于两组之间,与阳性药组相似;流式细胞仪测定结果显示除山奈酚组外,各给药组与模型组相比都有统计学差异,其中以芒柄花素组、混合组、夹竹桃组最为显著。结论:山奈酚和芒柄花素对心肌细胞有一定的保护作用,能够改善细胞贴壁的状态,增加细胞存活率,降低心肌细胞内ROS水平。     

牡荆素鼠李糖甙对缺氧再给氧损伤心肌细胞的保护作用研究

目的：观察牡荆素鼠李糖式对缺氧再给氧损伤心肌细胞的保护作用。方法：采用心肌细胞培养的方法，以缺氧再给氧造成心肌细胞损伤，分别以组织化学法、TAB反应比色法、荧光染色法测定细胞内乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)、游离Ca^2 ，酶动力法、RIA法测定细胞培养中LDH、6—酮—前列腺素F1α(6—Keto-PGF1α)、血栓素B2(TXB2)，膜片钳法测定细胞膜钙离子通道，及心肌细胞搏动情况等。结果：不同浓度的牡荆素鼠李糖甙均可减少细胞内Ca^2 浓度和MDA含量；使细胞内和培养上清中的LDH活性明显降低；对心肌细胞搏动频率有一定的降低作用；全细胞方式下可记录到细胞的原始电流和内向钙电流(ICa)，并呈电压依赖性，10^—3mmol／L的牡荆素鼠李糖甙对豚鼠心肌细胞ICa有增强作用；提高PGI2的含量及PGI2／TXA2比值，降低TXA2的含量。结论：牡荆素鼠李糖甙可通过稳定心肌细胞膜，减轻其损伤，调节PGs的表达，降低心肌细胞搏动频率等机制保护心肌细胞缺氧再给氧性损伤。     

红花总黄素对实验性心肌缺血模型冠脉流量及血流动力学的影响

目的:观察红花总黄素对实验性心肌缺血模型的影响,并探讨其与对抗氧自由基的关系。方法:采用异丙肾上腺素(10mg.kg-1)制备大鼠急性心肌缺血模型,随机分为对照组、红花总黄素(10,20mg和40mg.kg-1iv),行心导管插管术,观察血流动力学指标变化(MBP、LVSP、LVEDP、±dp/dtmax,等)。采用犬在位心脏测定冠脉流量法,分别观测给药前,给药后15,30,60min的冠脉流量和心肌耗氧量。结果:红花总黄素各组给药后15min均表现出不同程度的增加心脏冠脉流量(P<0.05或P<0.01),心肌耗氧量明显减少(P<0.05,P<0.01或P<0.001)。红花总黄素各组对心肌缺血大鼠血流动力学有明显改善作用(P<0.05或P<0.01)。结论:红花总黄素能增加冠脉流量,减少心肌耗氧量,并表现出剂量相关性变化。     

红花黄色素对急性血瘀大鼠微循环及血液流变学部分指标的影响

目的观察红花黄色素(saffioryellow,SY)对血瘀大鼠微循环和血液流变性的影响。方法通过皮下注射肾上腺素注射液0.07ml/(kg     

红花黄色素的综合提取

目的研究红花黄色素的较佳提取工艺。方法采用回流法通过各单因素及进一步的正交实验,对红花中的有效成分黄色素进行了综合提取。结果黄色素较佳提取工艺为:料液比1∶14,浸泡时间30 min,提取时间20 min。结论该方法简便、准确,适合红花黄色素的大规模提取。     

心痛灵滴丸预适应与缺血预适应对兔缺血再灌注损伤心肌保护作用的对比研究

目的:比较研究心痛灵滴丸预适应与缺血预适应对兔缺血再灌注损伤心肌的保护作用.方法:40只冠状动脉粥样硬化(AS)家兔随机分为假手术对照(SOC)组、缺血再灌注(I/R)组、心痛灵滴丸预适应(XTL)组和缺血预适应(IPC)组,观察心痛灵滴丸预适应和缺血预适应对心肌缺血再灌注时左室收缩压峰值(LVSP)、左室舒张末期压(LVEDP)、等容收缩期左室内压最大上升速率( dp/dtmax)、等容舒张期左室内压最大下降速率(-dp/dtmax)、乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸磷酸激酶同工酶(CK-MB)、三磷酸腺苷(ATP)、血清超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的影响.结果:心痛灵滴丸预适应与缺血预适应均能改善缺血再灌注时左心室功能,减少心肌LDH、CK-MB的漏出,提高心肌ATP含量和血清SOD活性,降低MDA含量.结论:心痛灵滴丸预适应能诱导心肌缺血预适应样保护作用.     

葛根素对大鼠心肌缺血/再灌注损伤中Apelin表达的影响

目的：观察葛根素对新发现的小分子活性肽Apelin在大鼠心肌缺血/再灌注损伤中表达的影响。方法：将SD大鼠60只,随机分成4组：缺血/再灌注（IR）组即缺血20min后再灌注180min;葛根素＋缺血/再灌注（IP）组;假手术（SH）组和正常对照（NC）组。体表心电图标Ⅱ导联全程记录,进行心律失常得分评估;用放免法测定各组大鼠血浆中Apelin-36蛋白含量变化;RT-PCR方法观察心肌Apelin mRNA表达。结果：（1）葛根素IP组心律失常得分仅为IR组的69.9%（P〈0.01）。（2）血浆Apelin-36浓度：SH组、IR组、IP组分别是NC组93.4%（P〉0.05）、51.5%（P〈0.01）和73.5%（P〈0.01）。IP组比IR组含量高,两者有统计学差异（P〈0.01）。（3）心肌Apelin mRNA的表达：IR组明显降低,仅为NC组的40.2%（P〈0.01）;IP组为NC组的68.1%（P〈0.01）;IP组比IR组高（P〈0.05）。结论：药物葛根素处理后能使大鼠血浆Apelin-36含量及心肌中ApelinmRNA表达升高。提示葛根素能影响小分子活性肽Apelin在大鼠心肌缺血/再灌注损伤过程中的表达。     

RP—HPLC法测定展筋酊中红花黄色素A的含量

目的建立展筋酊中红花黄色素A的HPLC测定方法。方法SymmetryC18色谱柱(4.6mm×150mm,5.0μm),流动相为甲醇-水-冰醋酸(7∶93∶2),pH=2.80,流速1.0mL·min-1,柱温为20℃,检测波长为402nm。结果红花黄色素A进样量在0.096～0.960μg范围内与峰面积积分值线性关系良好,r=0.9999;平均加样回收率为98.80%,RSD=2.85%(n=9)。结论该方法灵敏、准确、快速、专属性强,可用于展筋酊的含量测定。     

温阳益心中药对梗死大鼠心肌超微结构的影响

目的观察温阳益心中药对梗死大鼠心肌超微结构的影响,探讨其对心肌缺血-再灌注（IR）大鼠心肌的保护作用及其与心肌缺血预适应（IP）保护机制的关联性。方法选用雄性Wistar大鼠,随机分为4组,其中3组正常喂食,1组灌胃中药悬液,10d后建立大鼠心肌缺血模型。IR组：心肌缺血45min,再灌注48h。温阳益心中药预处理缺血-再灌注组（中药组）：每日灌胃温阳益心中药悬液0．36g／100g,连续10d;心肌缺血45min,再灌注48h。预适应处理缺血一再灌注组（IP组）：心肌缺血5min,再灌注5min,重复3次,然后心肌缺血45min,再灌注48h。采用电镜技术观察各组大鼠心室心肌超微结构改变。结果IR组肌膜破损,肌丝溶解断裂,排列松散,线粒体排列紊乱,有的线粒体呈空化或局部空化状,有的呈凝聚状,糖原减少。心肌损害较重,证实心肌缺血-再灌注后部分心肌坏死。中药组、IP组心肌细胞状态有所改善,肌膜完整,心肌细胞核呈椭圆形,核仁明显,线粒体较为明显,肌丝排列较为整齐,肌节明暗带清晰可见,线粒体较为整齐地排列在肌原纤维之间,但仍可见有些肌丝断裂及个别线粒体部分空化。结论心肌缺血预适应和温阳益心中药预处理可以通过减轻心肌超微结构损伤而保护缺血心肌,且二者对缺血再灌注大鼠心肌的超微结构损伤保护效应相近。     

芍药苷预处理对大鼠离体缺血再灌注损伤心脏的保护作用

目的观察芍药苷预处理对大鼠离体缺血再灌注损伤心脏的保护作用,探讨其可能机制。方法建立Langendorff离体心脏灌注模型。随机将SD雄性大鼠分为6组,即空白对照（Con）组、单纯缺血再灌注（I／R）组、缺血预处理（IPC）组、不同浓度（15mg／L,30mg／L,60mg／L）芍药苷预处理组（PF1-PF3组）。Chart5软件分析缺血前,再灌注后20min、40min心功能参数,包括：左心室收缩压（LVSP）、左心室内压变化最大速率（dp／dtmax）、心率（HR）、冠脉流出量（CF）;收集灌注末心脏标本,制备心肌匀浆,检测超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸激酶（CK）值;电镜观察再灌注末心肌细胞超微结构并拍照。结果IPC、PF预处理组在心功能恢复及心肌酶指标活力方面均优于I／R组（P〈0．01）;心肌超微结构损伤减轻。结论芍药苷预处理对大鼠离体心脏能产生保护作用。     

红花黄色素粉针剂中羟基红花黄色素A血浆蛋白结合率的研究

目的 测定红花黄色素粉针剂中羟基红花黄色素A的血浆蛋白结合率.方法 采用超滤离心法除掉血浆蛋白,并用高效液相色谱法对低、中、高剂量静脉注射后的羟基红花黄色素A血药浓度进行测定.结果 低、中、高剂量羟基红花黄色素A的血浆蛋白结合率分别为77.22％、78.31％、78.10％.结论 羟基红花黄色素A血浆蛋白结合率较高,在静脉给予5～20 mg/kg范围内血浆蛋白结合率不具有质量浓度依赖性.