雷公藤对哮喘豚鼠嗜酸性细胞凋亡及IL-5和GM-CSF mRNA表达的研究

目的：探讨雷公藤对哮喘豚鼠酸性细胞（Ｅｏｓｉｎｏｐｈｉｌ,Ｅｏｓ）凋亡及与白介素－５（ＩＬ－５）,粒细胞／巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）ｍＲＮＡ表达的作用。方法：实验豚鼠分为哮喘组,雷公藤治疗组和下沉对照组,采用原位细胞凋亡（ＴＵＮＥＬ）和原位杂交技术分别检测豚鼠支气管肺泡灌洗涤中的Ｅｏｓ的凋亡率和肺组织ＩＬ－５,ＧＭ－ＣＳＦ ｍＲＮＡ的表达强度均显著高于处理和对照组,哮喘组ＢＡＬＦ中Ｅｏｓ     

糖皮质激素对哮喘豚鼠肺组织IL-5 mRNA表达及嗜酸性粒细胞浸润的影响

目的：探讨哮喘时哮酸性粒细胞（Ｅｏｓ）浸润与ＩＬ－５ｍＲＮＡ表达的关系以及糖皮质激素对其影响。方法 采用孵蛋白（ＯＡ）吸入致敏制作豚鼠哮喘模型,在诱发哮喘２４ｄ后,检测气气管肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ）中不同密度的Ｅｏｓ的数量及其百分比,肺组织中原位ＩＬ－５ｍＲＮＡ的表达,以及地塞米松预防用药６ｄ对其变化的影响。结果：①哮喘组ＢＡＬＦ中Ｅｏｓ总数增加,低密度Ｅｏｓ（ＨＥｏ）增加尤为显著;肺组织中ＩＬ－５     

糖皮质激素对哮喘豚鼠支气管粘膜ICAM—1,E—选择素表达的影响

目的：研究糖皮质激素对哮喘豚鼠支气管组织中的细胞间粘附分子１（ＩＣＡＭ－１）ｍＲＮＡ，Ｅ－选择素ｍＲＮＡ表达的影响。方法：实验豚鼠被随机分为正常对照缚，地塞米松（Ｄｅｘ）治疗组和哮喘组，用原位杂交方法显示ＩＣＡＭ－１ｍＲＮＡ及Ｅ－选择素ｍＲＮＡ的表达变化，结果：原位杂交结果显示，ＩＣＡＭ－１ｍＲＮＡ，Ｅ－选择素ｍＲＮＡ在正常豚鼠支气管粘膜下的小血管，毛细血管内皮细胞及（或）支气管上皮细胞有基础表达     

哮喘中外周血单个核细胞白细胞介素5表达及意义研究

该文研究了哮喘豚鼠嗜酸性粒细胞（ＥＯＳ）在外周血及支气管肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ）中的变化,用ＲＴ－ＰＣＲ半定量测定了外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）及支气管组织白细胞介素５（ＩＬ－５）ｍＲＮＡ表达量。结晶显示哮喘豚鼠ＥＯＳ及ＩＬ－５ｍＲＮＡ表达量均较对照组及地塞米松干预组显著升高,ＰＢＭＣ中ＩＬ－５ｍＲＮＡ表达量与支这组织ＩＬ－５表达及外周血ＥＯＳ计数成正相关。提示哮喘豚鼠ＰＢＭＣ、ＩＬ－５ｍＲＮＡ表达     

雷公藤甲素对哮喘动物模型气道反应性的作用及机理

用卵白蛋白致敏和激发豚鼠，形成哮喘动物模型（哮喘组）。用雷公藤甲素（简称“雷公藤组”）处理哮喘模型后，测定以上二组和正常对照组豚鼠对组织胺的气道反应性、支气管肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ）中的嗜酸性粒细胞（Ｅｏｓ）绝对计数、低密度Ｅｏｓ（ＨＥｏｓ）百分比以及ＥＡＬＦ中的嗜酸性粒细胞活力增强活性（ＥＶＥＡ）。发现哮喘组气道反应性非常显著高于正常组（Ｐ＜０．００１）、雷公藤组（Ｐ＜０．０１），雷公藤组显著高于正常组（Ｐ＜０．０５）。而且，哮喘组Ｅｏｓ绝对计数和ＨＥｏｓ％均与气道反应值（ＰＣ２０值）显著相关（ｒ＝－０．７６和－０．８８，Ｐ＜０．０５和０．０１）。雷公藤甲素处理不能抑制哮喘模型肺内的Ｅｏｓ聚集，但却降低ＨＥｏｓ％至正常组水平。哮喘组ＢＡＬＦＥＶＥＡ显著高于对照组、雷公藤组。哮喘组ＢＡＬＦＥＶＥＡ与ＨＥｏｓ％呈显著的正相关（ｒ＝０．７５，Ｐ＜０．０５）。以上结果表明，雷公藤甲索具有降低哮喘动物模型气道反应性的作用，其机理可能与减少“活化”的ＨＥｏｓ有关。雷公藤甲素可能有潜在的临床应用价值。     

细胞凋亡及凋亡相关基因在下肢静脉曲张中的表达及意义

目的：探讨细胞凋亡和凋亡相关基因在下肢静脉曲张中的表达及意义。方法：采用凋亡细胞原位检测、原位杂交、免疫组化研究８３例曲张静脉和１０例对照组内皮细胞和平滑肌细胞凋亡及相关基因表达。结果：①曲张静脉囊性扩张型Ｅｃｓ及ＳＭＣ凋亡指数显著增高（Ｐ＜０．０１）；②曲张静脉囊性扩张型Ｂｃｌ－２　ｍＲＮＡ阳性细胞表达率均显著低于非囊性扩张型（Ｐ＜０．０５）；③非囊性扩张型其Ｂｃｌ－２基因蛋白阳性细胞表达率均显著高于囊性扩张型和对照组（Ｐ均＜０．０５）；④囊性扩张型其Ｂａｘ　和Ｆａｓ基因蛋白阳性细胞表达率均显著高于非囊性扩张型和对照组（Ｐ均＜０．０５）；⑤Ｂｃｌ－２　ｍＲＮＡ表达阳性细胞数和表达率（０．２５±０．２３）与Ｂｃｌ－２基因蛋白（０．３０±０．２７）呈显著正相关，相关系数ｒ分别为０．７９５３８１（Ｐ＝０．００１９８１）和０．６８８２１６（Ｐ　＝０．０００８４４）。结论：①细胞过度凋亡导致静脉血管重塑，可能是静脉曲张发病机制之一；②曲张静脉囊性扩张型其ＥＣｓ和ＳＭＣ过度凋亡可能与Ｂｃｌ－２　ｍＲＮＡ、Ｂｃｌ－２蛋白低水平表达及Ｂａｘ、Ｆａｓ高水平表达相关。     

ARDS患者肺组织细胞凋亡的变化及意义

目的：探讨细胞凋亡在急性呼吸窘迫综合征（ＡＲＤＳ）发病中的作用及基因调控机制,为进一步阐明ＡＲＤＳ的发病机制和在细胞凋亡水平防治本病提供理论依据。方法：ＡＲＤＳ组９例,对照组５例,采用ＴＵＮＥＬ法以及免疫组化技术观察ＡＲＤＳ患者肺组织细胞凋亡及Ｆａｓ／ＦａｓＬ系统表达的变化。结果：ＡＲＤＳ早期患者肺组织细胞凋亡率较对照组明显增加,且主要表现为肺泡上皮和肺血管内皮细胞凋亡增加;Ｆａｓ抗原、ＦａｓＬ在ＡＲＤＳ早期患者肺组织表达明显上调,并且Ｆａｓ、ＦａｓＬ表达的增加与肺组织细胞凋亡增加呈平行关系。结论：肺泡上皮和肺血管内皮细胞凋亡增加和Ｆａｓ／ＦａｓＬ系统活化可能参与临床ＡＲＤＳ早期的发病。     

雷公藤多甙对哮喘豚鼠炎症的抑制作用

目的：通过哮喘豚鼠模型研究雷公藤多甙（ｔｒｉｐｔｅｒｙｇｉｕｍｐｏｌｙｇｌｙｃｏｓｉｄｅ，ＴⅡ）对哮喘豚鼠炎症的抑制作用。方法：用卵白蛋白诱发致敏豚鼠哮喘发作，同时进行ＴⅡ与地塞米松（ｄｅｘａｍｅｔｈａｓｏｎｅ，ＤＥＸ）的对照治疗，观察豚鼠支气管－肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ）中细胞学、肺组织病理及超微结构的变化。结果：豚鼠诱发哮喘后２４ｈ和７２ｈＢＡＬＦ中炎性细胞、嗜酸细胞总数及其分类计数的结果显示，哮喘组较正常对照组明显增多，而ＴⅡ和ＤＥＸ治疗组尤其是ＴⅡ大剂量组则明显减少，与正常对照组比无显著差异（Ｐ＞０．０５），与哮喘组比有明显差异（Ｐ＜０．０５）。组织形态学也显示ＴⅡ对哮喘豚鼠迟发性哮喘反应有明显的抑制作用。结论：ＴⅡ对哮喘豚鼠炎症有明显的抑制作用。     

瘢痕成纤维细胞的MMP-3 mRNA表达及其基因转染

目的：探讨增生性瘢痕组织中细胞外间质（ＥＣＭ）的过度沉积机制，并探索其基因治疗途径。方法：体外培养瘢痕成纤维细胞（ＨＳＦ），构建间质溶解素１（ＭＭＰ－３）逆转录病毒载体，利用基因转染技术将ＭＭＰ－３基因转入ＨＳＦ，核酸分子杂交检测ＭＭＰ－３的ｍＲＮＡ表达水平。ＤＮＰ－多肽降解法检测间质金属蛋白酶（ＭＭＰｓ）活性，辅以正常皮肤成纤维细胞作对照。结果：ＨＳＦ表达ＭＭＰ－３ｍＲＮＡ水平及降解ＤＮＰ－多肽     

胆管细胞癌癌细胞中FasmRNA的原位杂交检测

胆管细胞癌癌细胞中ＦａｓｍＲＮＡ的原位杂交检测＊阎庆国王文亮黄高升（第四军医大学病理学教研室西安７１００３３）关键词胆管细胞癌凋亡Ｆａｓ原位杂交中图号Ｒ７３５．８Ｆａｓ又称Ａｐｏｌ或ＣＤ９５，为凋亡相关基因ｆａｓ的表达产物，是近年来细胞凋亡研究领域中...     

Fas抗原在超抗原诱导T细胞凋亡中的作用

目的：研究Ｆａｓ抗原介导的死亡效应在超抗原诱导Ｔ细胞凋亡中的作用。方法：ＳＥＡ诱导从人外周血建立的短期ＳＥＡ反应Ｔ细胞系凋亡,１．８％琼脂凝胶ＤＮＡ电泳观察凋亡的特征条带;ＦＣＭ检测Ｆａｓ,ＦａｓＬ的表达量变化,Ｆｕｒａ－２／ＡＭ荧光批示剂检测胞浆「Ｃａ＾２＋」ｉ的变化。     

半枝莲碱Ａ对ＥＢ病毒阳性弥漫性大Ｂ细胞淋巴瘤增殖、凋亡及细胞周期的影响

目的　探讨半枝莲碱Ａ对ＥＢ 病毒阳性弥漫性大Ｂ细胞淋巴瘤（ＥＢ ｖｉｒｕｓ-ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｄｉｆｆｕｓｅ ｌａｒｇｅ Ｂ-ｃｅｌｌ ｌｙｍｐｈｏｍａ,ＥＢＶ＋ＤＬＢＣＬ）细胞株Ｆａｒａｇｅ细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响。方法　将Ｆａｒａｇｅ细胞分为对照组和不同浓度半枝莲碱Ａ 处理组,采用ＣＣＫ ８法检测细胞增殖活性,流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期分布,ＲＴ-ｑＰＣＲ法检测半枝莲碱Ａ作用于Ｆａｒａｇｅ细胞后细胞周期蛋白Ｄ３（ｃｙｃｌｉｎＤ３）的ｍＲＮＡ 表达以及Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ法检测ｃｙｃｌｉｎＤ３蛋白表达。结果　ＣＣＫ ８结果显示,与对照组相比,半枝莲碱Ａ能够明显抑制Ｆａｒａｇｅ细胞增殖,差异有统计学意义（P＜０．０５）。流式细胞检测结果显示,半枝莲碱Ａ 诱导细胞凋亡呈剂量依赖性,且主要使细胞阻滞于Ｇ０／Ｇ１ 期。ＲＴ-ｑＰＣＲ 和Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ结果显示,半枝莲碱Ａ 以剂量依赖形式使Ｆａｒａｇｅ细胞ｃｙｃｌｉｎＤ３的ｍＲＮＡ 和蛋白表达减少,差异具有统计学意义（P均＜０．０５）。结论　半枝莲碱Ａ 具有抑制Ｆａｒａｇｅ细胞增殖并诱导其凋亡的作用,可使细胞阻滞于Ｇ０／Ｇ１期,并可能通过下调ｃｙｃｌｉｎＤ３表达发挥抗肿瘤作用。     

原发性肝癌血清可溶性Fas与可溶性FasL的表达

目的：进行原发性肝癌血清可溶性ＦａｓＬ（ｓＦａｓＬ）与可溶性Ｆａｓ（ｓＦａｓ）的检测,以探讨其在肝癌发病机制中的作用。方法：采用双抗体夹心ＥＬＩＳＡ法检测１８例原发性肝癌血清ｓＦａｓ与ｓＦａｓＬ水平。结果：肝癌组ｓＦａｓ与ｓＦａｓＬ均高于对照组（Ｐ〈０．０５）。结论：可溶性Ｆａｓ与膜Ｆａｓ竞争性地与ＦａｓＬ结合,抑制肿瘤细胞凋亡。可溶性ＦａｓＬ可能通过转式机制导致别的表达Ｆａｓ的免疫细胞发生凋亡。从而使肿瘤细胞躲避免疫攻击。     

DDPH对缺氧内皮细胞条件培养液致肺动脉平滑肌细胞PDGF mRNA表达的影响

利用地高辛标记的ｃＤＮＡ探针，原位检测ＤＤＰＨ［１－（２，６－二甲基苯氧基）－２－（３，４－二甲氧基苯乙胺基）丙烷酸盐］对缺氧内皮细胞条件培养液致猪ＰＡＳＭＣＰＤＧＦ基因表达的影响。实验分６组：常氧、低氧无血清培养液组（Ｎ、Ｈ组），常氧、低氧内皮细胞条件培养液组（ＮＥＣＣＭ、ＨＥＣＣＭ组），ＮＥＣＣＭ＋ＤＤＰＨ、ＨＥＣＣＭ＋ＤＤＰＨ组。用自动图像分析仪检测各组细胞ＰＤＧＦ－Ａ和－Ｂ链杂交产物的平均光密度（ＯＤ）值。结果：ＨＥＣＣＭ组ＰＤＧＦ－Ａ和－Ｂ链ｍＲＮＡ表达量分别是ＮＥＣＣＭ组的１．４０、１．４９倍（Ｐ＜０．０１），分别是Ｎ组的１．８倍、１．７倍（Ｐ＜０．０１），ＨＥＣＣＭ＋ＤＤＰＨ组ＰＤＧＦ－Ａ、－Ｂ链ｍＲＮＡ表达量分别为ＨＥＣＣＭ的０．７３倍、０．６５倍（Ｐ＜０．０１），与ＮＥＣＣＭ组相比，均无显著差异。提示ＤＤＰＨ在ＰＤＧＦ基因转录水平抑制ＨＥＣＣＭ诱导的ＰＡＳＭＣ的增殖。     

复方威爪龙制剂抗移植性肿瘤的实验研究

复方威爪龙制剂是根据临床抗癌验方应用现代药剂技术制备面而成的口服液和注射液,由白花蛇舌草（Ｏｌｄｅｎｌａｎｄｉａｄｉｆｆｕｓａ（Ｗｉｌｌｄ．）Ｒｏｘｄ．）ＤＧＶ ＶＯ ＷＭ （ｃＬＥＭＡＴＩＳＣＨＩＮＥＮＳＩＳｏＳＢＥＣＫ）,苓（Ｐｏｒｉａｃｏｃｏｓ（Ｓｃｈｗ．）Ｗｏｌｆ）,天花粉（ＴｒｉｃｈｏｓａｎｔｈｅｓｋｉｒｌｏｗｉｉＭａｘｉｍ．）ＴＦＦＵＱＱ ＫＦＩ ＷＦＸＹＫ ＡＪＪ ＡＸ ＲＮ ＸＥＤ     

地塞米松及雷公藤甲素对哮喘CD4、CD8细胞凋亡的影响

目的：探讨地塞米松（ＤＭ）和雷公藤对哮喘ＣＤ４、ＣＤ８细胞凋亡的作用。方法：采用卵蛋白致敏复制哮喘豚鼠模型。哮喘豚鼠经腹腔内注射ＤＭ和雷公藤甲素（ＴＰ）后,用淋巴细胞分离液的密度梯度离心分离外周血单个核细胞（ＰＢＭＣｓ）。采用免疫细胞化学（ＩＣＣ）与３’末端转移酶介导的脱碱磷酸尿苷（ｄＵＴＰ）缺口末端标记（ＴＵＮＥＬ）双标染色对ＣＤ４、ＣＤ８细胞凋亡进行检测。结果：ＤＭ和ＴＰ均能诱导哮喘外周血ＣＤ     

血管生成及细胞凋亡与喉粘膜上皮癌变的关系

目的：探讨血管生成及细胞凋亡与喉粘膜上皮癌变的关系．方法：应用免疫组化和原位末端标记（ＩＳＥＬ）方法分别检测正常喉粘膜（Ｎ）、炎症（ＩＦ）、不典型增生（ＤＹＳ）和鳞癌（ＳＣＣ）中间质的微血管数量及上皮的细胞凋亡情况,标记后的血管和凋亡细胞通过计数分别以微血管密度（ＭＶＤ）及凋亡指数（ＡＩ）表示．结果：ＭＶＤ值从Ｎ,ＩＦ,ＤＹＳ至ＳＣＣ依次增高,ＤＹＳ及ＳＣＣ组的ＭＶＤ值与Ｎ,ＩＦ组存在显著性差异（Ｐ＜０．０５）;ＤＹＳ组的凋亡指数（ＡＩ）在所有病变中最高;ＤＹＳ及ＳＣＣ组的ＡＩ值较正常Ｎ及ＩＦ组明显增多,且有显著性差异（Ｐ＜０．０５）．结论：血管生成及细胞凋亡与喉粘膜癌前病变和癌变关系密切,在喉粘膜上皮癌变发生中起着重要的作用．     

哮喘中IL—5和IL—10基因表达及其相关性研究

３１只健康豚鼠分为哮喘组、地塞米松干预组及对照组。测定各组豚鼠肺泡灌洗液细胞成分,应用ＲＴ－ＰＣＲ方法检测支气管组织白细胞介素－５（ＩＬ－５）和白细胞介素－１０（ＩＬ－１０）ｍＲＮＡ表达强度。结果显示,哮喘组豚鼠肺泡灌反。ＩＬ－５ｍＲＮＡ表达与ＥＯＳ百分比呈正相关,而与ＩＬ－１０ｍＲＮＡ表达呈负相关。说明ＥＯＳ,ＩＬ－以正相关参与了哮喘发病。哮喘时ＩＬ－１０表达受抑制,这可能是炎症细胞因子ＩＬ－５     

细胞粘附分子在炎症角膜中的表达

目的：研究细胞粘附分子（ｃｅｌｕｌａｒａｄｈｅｓｉｏｎｍｏｌｅｃｕｌｅｓ,ＣＡＭｓ）在炎症角膜中的表达,探讨其在角膜炎症发生机制中的作用。方法：采用冰冻切片免疫组织化学染色方法检测了１８只炎症角膜、３只正常角膜和２只圆锥角膜组织中细胞间粘附分子１（ｉｎｔｅｒｃｅｌｕｌａｒａｄｈｅｓｉｏｎｍｏｌｅｃｕｌｅ１,ＩＣＡＭ１）、人类白细胞抗原ＤＲ（ｈｕｍａｎｌｅｕｋｏｃｙｔｅａｎｔｉｇｅｎＤＲ,ＨＬＡＤＲ）、ＣＤ１１ａ、ＣＤ１１ｂ、ＣＤ１８、ＣＤ２和ＣＤ２０的表达及变化。结果：正常角膜中,ＩＣＡＭ１主要表达于角膜缘血管内皮细胞,基质细胞、角膜内皮细胞中仅有微弱表达或不表达。炎症角膜中,基质细胞、内皮细胞和血管内皮细胞的ＩＣＡＭ１表达增强,尤其在炎症细胞浸润处最为显著;原不表达ＩＣＡＭ１的上皮细胞亦出现异常表达;ＩＣＡＭ１和ＨＬＡＤＲ常共同表达于同一部位,炎症明显组角膜ＩＣＡＭ１和ＨＬＡＤＲ的表达水平明显高于炎症轻微组;炎症浸润细胞中表达ＬＦＡ１（ＣＤ１１ａ／ＣＤ１８）的细胞较表达Ｍａｃ１（ＣＤ１１ｂ／ＣＤ１８）的细胞多;浸润淋巴细胞以Ｔ（ＣＤ２）淋巴细胞为主;属非炎症性病变的圆锥角膜中Ｉ     

丙型肝炎患者外周血单个核细胞HCV和Fas抗原检测

目的：探讨丙型肝炎（丙型）患者外周血单个核细胞（ＰＢＭＣｓ）内丙型肝炎病毒抗原（ＨＣＶＡｇ）及Ｆａｓ抗原（ＦａｓＡｇ）表达状况及意义。方法：采用ＨＣＶ核心区及ＮＳ３区单克隆抗体,对２８例慢性丙肝患者ＰＢＭＣｓ进行免疫组化检测,并同步检测ＦａｓＡｇ。结果：ＨＣＶＡｇ及ＦａｓＡｇ阳性率分别为８５．７％（２４／２８）和８２．２（２３／２８）,经相关分析显示。两者表达呈显著正相关（ｒ＝０．５４６,Ｐ〈０．