人造矿物纤维对肺巨噬细胞的毒作用研究

比较１０种人造矿物纤维对肺泡巨噬细胞毒作用的差异。方法选用日本纤维状物质研究匠１０种标准人造造矿物纤维，在体外用豚鼠肺泡巨噬细胞作用靶细胞，分别对ＪＦＭ纤维作用于ＡＭ后超氧阴离子自由基、过氧化氢的产生，谷胱甘肽及细胞内游离Ｃａ＾２＋浓度的变化进行了测定。     

人造矿物纤维的体外细胞毒性研究

目的;比较１０种人造矿物纤维对细胞毒性作用。方法：选用日本纤维状物质研究协会提供的１０种标准人造矿物纤维（ＪＦＭ纤维）,在体外以大鼠肺巨噬细胞（ＡＭ）和兔红细胞为靶细胞。测定ＪＦＭ纤维作用后ＡＭ乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）活性,ＡＭ吞噬能力和红细胞溶血率。结果：１０种ＪＦＭ纤维都可引起ＡＭ中ＬＤＨ逸出和活性增高,ＲＦ１明显高于温石棉,其它接近或低于温石棉。ＪＦＭ纤维对ＡＭ吞噬能力实验中,ＷＯ１作用下的ＡＭ吞噬能力明显高于温石棉,ＲＦ１、ＲＦ２、 ＲＦ３低于温石棉。 ＲＦ１、 ＲＦ２对红细胞溶血率与温石棉接近,其它明显低于温石棉。结论：ＪＦＭ纤维具一般细胞毒性, ＲＦ１、 ＲＦ２接近于温石棉,其它均低于温石棉,其中以 ＷＯ１为最低。     

人造矿物纤维对细胞DNA损伤作用的体外研究

目的比较研究１０种人造矿物纤维（ＭＭＭＦ）对人肺泡上皮细胞（Ａ５４９细胞）ＤＮＡ的损伤及修复作用。方法选用日本纤维状物质研究协会提供的１０种标准人造矿物纤维（ＪＦＭ）,用单细胞凝胶电泳法,以Ａ５４９细胞作为靶细胞,测定了细胞ＤＮＡ链断裂、损伤后修复及ＤＮＡＤＮＡ链间交联。结果１０种ＪＦＭ纤维都可引起不同程度的ＤＮＡ链断裂、ＤＮＡＤＮＡ链间交联及抑制ＤＮＡ损伤后的修复功能。综合分析发现：微细玻璃纤维的遗传毒性最强,硅灰石的遗传毒性最低。它们的作用程度均低于温石棉。结论ＪＦＭ纤维均具有一定程度的体外遗传毒性,但均低于ＵＩＣＣ温石棉Ｂ。     

亚硒酸钠与细胞的作用

通过测定巨噬细胞的存活率、脂质过氧化、细胞内游离Ｃａ２＋、Ｍｇ２＋的浓度和红细胞膜Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶和Ｍｇ２＋－ＡＴＰ酶的活性，研究了亚硒酸钠与细胞的作用。结果表明高浓度的Ｎａ２ＳｅＯ３（≥１０－４ｍｏｌ·Ｌ－１）有明显的细胞毒性；Ｎａ２ＳｅＯ３对巨噬细胞的毒性作用引起细胞内游离Ｃａ２＋、Ｍｇ２＋浓度升高；但Ｍｇ２＋浓度升高比Ｃａ２＋慢；较高浓度的Ｎａ２ＳｅＯ３（≥１０－５ｍｏｌ·Ｌ－１）能抑制红细胞膜Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶和Ｍｇ２＋－ＡＴＰ酶的活性，但对Ｍｇ２＋－ＡＴＰ酶活性的抑制作用要低于对Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶活性的抑制作用。     

蛋白激酶C抑制剂对温石棉诱导肺成纤维细胞增殖的影响

目的 探讨蛋白激酶Ｃ（ＰＣＫ）信号通路在温石棉诱导的肺泡巨噬细胞因子致人胚肺成纤维细胞（ＨＥＰＦ）增殖中的作用。方法 采用体外细胞培养技术,用四甲基偶氮唑蓝（ＭＴＴ）颜色反应法检测温石棉处理兔肺泡巨噬细胞（ＡＭ）的上清液刺激ＨＥＰＦ增殖和ＰＫＣ抑制剂对其产生的影响,同时设空白对照、正常对照（未加粉尘处理的ＡＭ培养上清液）、阴性对照（标准ＴｉＯ２）和阳性对照（标准ＳｉＯ２）。结果 温石棉处理ＡＭ２４ｈ后的培养上清液再处理ＨＥＰＦ４８ｈ,ＨＥＰＦ增殖,且与粉尘浓度存在显著的剂量－效应关系（ｒ＝０．６７１８,Ｐ〈０．０１）;１００ｕｇ／ｍｌ温石棉染尘组ＨＥＰＦ的净增殖率达４０．５６％,是正常对照组的２．６５倍,高于标准ＳｉＯ２组和标准ＴｉＯ２组。１００ｕｇ／ｍｌ粉尘处理ＡＭ的培养上清液的稀释程度与其促使ＨＥＰＦ增殖的     

温石棉与吸烟对肺泡巨噬细胞产生一氧化氮的影响

为探讨石棉与吸烟对人体健康影响的机制，用Ｇｒｅｉｓｓ法测定了温石棉及香烟烟雾溶液分别与共同作用下肺泡巨噬细胞（ＡＭ）产生的ＮＯ终产物ＮＯ－２。结果显示：温石棉可使ＡＭ产生的ＮＯ－２明显增加，且有剂量－效应关系，但烟溶液不能使ＡＭ产生的ＮＯ－２增加或减少，在两者共同作用时，烟溶液反而抑制温石棉诱导ＡＭ产生ＮＯ－２。当测定ＡＭ的吞噬功能时，发现烟溶液可明显抑制ＡＭ的吞噬功能。提示：烟溶液对温石棉诱导ＡＭ产生ＮＯ具有抑制作用，这种作用主要是由于其抑制了ＡＭ吞噬温石棉的能力造成的     

净肺剂对SiO2作用下肺泡巨噬细胞胞浆游离钙的平衡作用

应用Ｆｕｒａ－２荧光染料技术及阳离子测定系统，通过离体细胞实验，发现ＳｉＯ２使人肺泡巨噬细胞（ＡｌｖｅｏｌａｒＭａｃｒｏｐｈａｇｅ，ＡＭ）单细胞胞浆游离钙［Ｃａ２＋］ｉ升高，且存在明显的量效和时效关系。利用兔ＡＭ细胞培养，加入ＳｉＯ２及Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ号净肺剂共培养，结果发现Ⅰ、Ⅲ两剂对ＳｉＯ２所致兔ＡＭ［Ｃａ２＋］ｉ升高有明显的平衡作用。     

实验性煤矽肺大鼠氧化和抗氧化损伤的动态观察

大鼠经气管注入煤石英尘，观察肺泡巨噬细胞（ＡＭ）和支气管肺泡冲洗液（ＢＡＬＦ）中脂质过氧化产物和抗氧化物质的动态变化。结果表明，染尘后７天ＡＭ中ＭＤＡ含量增加，ＳＯＤ活性下降，以后恢复至正常，ＧＳＨＰｘ活性和ＧＳＨ含量染尘后７～３０天升高。ＢＡＬＦ中ＭＤＡ含量、ＳＯＤ活性无变化，ＧＳＨＰｘ活性、ＧＳＨ含量均低于石英组。说明煤石英尘诱发ＡＭ脂质过氧化反应发生于染尘初期，且明显弱于石英尘。说明脂质过氧化反应在煤矽肺病变形成中不起主要作用     

支链氨基酸对大鼠心肌缺血损伤的防护作用

目的：观察支链氨基酸（ＢＣＡＡ）对大鼠心肌缺血损伤的预防作用。方法：选用Ｗｉｓｔａｒ大鼠３０只，随机分成三个组，每组１０只。Ａ组：正常对照组；Ｂ组：异丙肾上腺素（ＩＳＯ）对照组；Ｃ组：ＩＳＯ＋ＢＣＡＡ组，其中Ｂ、Ｃ组用ＩＳＯ造成大鼠心肌缺血性损伤。用酶试剂盒和原子吸收法测定了血清、心肌中ＬＤＨ、ＧＯＴ、α－ＨＢＤＨ、ＣＫ、ＰＫ的酶活力及心肌中Ｋ＋、Ｍｇ２＋、Ｃａ２＋离子的含量。结果：Ｂ组大鼠血清和心肌中ＬＤＨ、ＧＯＴ、α－ＨＢＤＨ、ＣＫ、ＰＫ的酶活力均明显升高，心肌中Ｃａ２＋的含量也显著升高，而Ｍｇ２＋的含量明显降低，Ｋ＋含量也有下降的趋势，但变化不显著。Ｃ组大鼠血清中ＬＤＨ、α－ＨＢＤＨ、ＣＫ、ＰＫ的酶活力明显低于Ｂ组，而且ＣＫ的活力接近正常水平；心肌中ＬＤＨ、ＧＯＴ、α－ＨＢＤＨ、ＣＫ的活力均低于Ｂ组并达到正常水平。补充ＢＣＡＡ后能有效地拮抗心肌细胞内钙的增加，使心肌内Ｃａ２＋含量明显低于Ｂ组，与正常对照组无显著差异，但ＢＣＡＡ不能升高受损心肌中Ｍｇ２＋的含量。结论：给予ＢＣＡＡ对心脏缺血性损伤具有一定的防护效果     

石英和温石棉致兔肺泡巨噬细胞谷胱甘肽过氧化物酶活性改变的比较研究

为了探讨石英、石棉对抗氧化酶活性的影响,利用改良Ｍｙｖｉｒｋ 法收集兔肺泡巨噬细胞进行体外培养,采用酶－ 底物反应形成有色物来测定巨噬细胞的细胞裂解液中谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨＰｘ）的酶活性。结果发现,随着粉尘浓度的增加,石英组和温石棉组巨噬细胞内的ＧＳＨＰｘ的酶活性相应降低,存在显著的剂量反应关系（Ｐ＜ ０．０１）。在不同的粉尘剂量组,温石棉组和石英组的ＧＳＨＰｘ 酶活性均显著低于二氧化钛组（Ｐ＜ ０．０５）,温石棉组低于石英组,但未发现显著的统计学差异。石英组和温石棉组的巨噬细胞死亡率均随粉尘浓度的增加而增大,存在着剂量反应关系,且温石棉组的死亡率高于石英组。石英组、温石棉组巨噬细胞内ＧＳＨＰｘ 酶活性和巨噬细胞的死亡率之间的相关系数分别为－ ０．９３１８ 和－ ０．８９８４,而二氧化钛组只有－ ０．３６３７。这说明石英、温石棉均可致巨噬细胞内ＧＳＨＰｘ 酶活性呈剂量反应关系的降低,使得胞内自由基Ｈ２Ｏ２ 不能正常消除,促使脂质过氧化加重,损害细胞;且温石棉的效应强于石英。提示ＧＳＨＰｘ 酶活性的降低在石英、温石棉致病中具有一定的作用     

Biological effects of man-made mineral fibers (I)--Reactive oxygen species production and calcium homeostasis in alveolar macrophages

10 types of standard mineral fiber samples (JFM fibers) were tested for their cytotoxicity in alveolar macrophages (AM) in vitro experiments, in which UICC chrysotile B was used as a positive control. The cytotoxicity included the production of superoxide anion radical and hydrogen peroxide, depletion of glutathione (GSH) and increase of intracellular free calcium. The results showed that chrysotile and most of the 10 mineral fibers could increase the production of superoxide anion and hydrogen peroxide, deplete the concentration of GSH and increase the level of free intracellular Ca2+ in AM. But all the effects of JFM fibers were lower than that induced by UICC chrysotile B. Although the cytotoxicity of JFM fibers were lower than that of asbestos, these mineral fibers should be used with highly care for workers in industries.     

Biological effects of man-made mineral fibers (II)--their genetic damages examined by in vitro assay.

In order to study and compare genetic damage induced by 10 kinds of man-made mineral fibers (JFM fibers) in cells, human lung epithelial cells (A549) were exposed to JFM fibers and chrysotile for 1 h, then single-cell gel electrophoresis (SCGE) assay was used to detect DNA strand breaks, DNA-DNA interstrand crosslink and the ability of DNA to repair; The results showed that all 10 JFM fibers could induce DNA strand breaks, DNA-DNA interstrand crosslinks and inhibit the ability of DNA repair. When human embryo lung (HEL) cells were exposed to JFM fibers and chrysotile for 24 h respectively, the chromosomal aberration was analyzed and the results showed that chrysotile and most of JFM fibers at 5.0 micrograms/ml induced structural chromosomal aberration, but all of these effects were lower than that of chrysotile and were different among them, suggesting that 10 types of JFM fibers had genotoxicity with different degree in vitro, but all of them were lower than that of chrysotile.     

用单细胞凝胶电泳法检测人造矿物纤维对DNA的损伤

目的 比较研究１０种人造矿物纤维（ＭＭＭＦ）对人淋巴细胞的损伤作用。方法 采用日本纤维物质研究协会提供的１０种标准人造矿物纤维（ＪＦＭ）,用单细胞凝胶电泳法,以人淋巴细胞为靶细胞,用迁移率和迁移度评价对细胞ＤＮＡ链断裂程序。     

几种化合物对石棉诱发肺泡巨噬细胞产生一氧化氮的抑制作用

为了寻求一种适宜的石棉表面改性剂，利用体外细胞培养技术，通过测定培养液中亚硝酸根（ＮＯ－２）含量，观察了茫崖产温石棉对豚鼠肺泡巨噬细胞（ＡＭ）产生一氧化氮（ＮＯ）的诱导作用以及混合稀土、亚硒酸钠、柠檬酸铝对石棉诱发ＡＭ产生ＮＯ的影响。结果显示，温石棉纤维可使培养液中ＮＯ－２浓度升高，并呈明显的剂量反应关系；混合稀土、亚硒酸钠、柠檬酸铝均可抑制石棉诱发ＡＭ产生ＮＯ，而且随上述化合物浓度的升高，抑制作用增强。提示用混合稀土和亚硒酸钠拮抗石棉的致病作用有实际应用的可能。     

Cytotoxicity of a short-fiber chrysotile asbestos for human alveolar macrophages: preliminary observations

Studies were performed to compare the cytotoxicity for human alveolar macrophages of a naturally occurring short-fiber chrysotile asbestos (RG 144) to that of a standard reference mixed-fiber (long and short) chrysotile asbestos (UICC chrysotile A. Rhodesian). Parallel studies were also performed with quartz (Min-U-Sil 15), a known macrophage toxin. On a mass basis, and after 24 hr incubation, RG 144 was more cytotoxic than the UICC standard reference fiber and less toxic than quartz (silica). The cytotoxic potential of RG 144 chrysotile was further enhanced after size reduction by milling. These findings may have important biologic implications with respect to the use of short-fiber asbestos in industry.     

温石棉对细胞膜脂质流动性及通透性的影响

用荧光探针ＤＰＨ标记肺泡巨噬细胞，观察到随温石棉剂量增加，茫棉及涞棉均可增加细胞膜脂质的流动性，表现为膜脂质荧光偏振度及脂区徽粘度的降低。茫棉及涞棉亦可增加膜通透性，使胞内Ｋ＋含量下降，该作用存在剂量一效应关系。茫棉及涞棉所致膜脂质流动性改变与膜通透性改变存在明显相关关系。因此，两种温石棉所致的膜脂质流动性增加可能与膜通透性增加一样与细胞受损有关。     

纤维水镁石与经铝剂处理的温石棉对巨噬细胞毒性比较

应用体外试验，比较了水镁石与经氯化铝处理后的两种温石棉（新康温石棉和四川温石棉）对豚鼠肺泡巨噬细胞的毒性作用。结果显示，经氯化铝处理后的温石棉所引起巨噬细胞产生的Ｏ２＾－、细胞膜脂流动性增加及细胞钾外漏等毒性指标变化，明显低于相同剂量的水镁石组（Ｐ〈０．０５或Ｐ〈０．０１）；引起肺泡巨噬细胞释放乳酸脱氢酶、酸性磷酸酶及致细胞死亡率等指标变化与水镁石组相近似。表明氯化铝拮抗温石棉的致病生物学活性有实