氟尿嘧啶联合重组人生长激素对肾癌细胞株作用的研究

目的　研究氟尿嘧啶 ( 5 -Fu)联合重组人生长激素 (rhGH)对肾癌细胞株的作用 ,探讨提高肾癌化疗效果的方法。方法　取对数生长期的人肾癌细胞株 (GRC -1) ,分为空白对照、rhGH、5 -Fu、rhGH +5 -Fu四组进行体外培养 ,2 4小时后测定各增殖周期的细胞比例值等指标。结果　在空白对照组 ,G0 -G1 期的细胞数占 5 3 .4%,S期细胞数占 42 .1%。在rhGH组 ,G0 -G1 期细胞数降低 ( 4 1.1%) ,S期细胞增高 ( 5 2 .7%)。在 5 -Fu组 ,G0 -G1 期细胞数增高( 62 .3 %) ,S期细胞数降低 ( 3 7.5 %) ;在rhGH +5 -Fu组 ,G0 -G1 期细胞数进一步增加 ( 67.4%) ,S期细胞数进一步降低( 3 2 .5 %) ,与 5 -Fu组比较差异有显著性 (P <0 .0 5 )。结论　重组人生长激素在体外能增强氟尿嘧啶抗肾癌细胞增殖作用。     

重组人生长激素对肾癌细胞株作用的研究

目的: 研究重组人生长激素(rhGH)对肾癌细胞株生长的作用,提高肾癌化疗的效果。方法: 取对数生长期的人肾癌细胞株(GRC-1),分为空白对照、rhGH、5-Fu、rhGH+5-Fu四组进行体外培养,24 h后测定各增殖周期的细胞比例值等指标。结果: 空白对照组G₀~G₁期的细胞数占53.4%,S期细胞数占42.1%。rhG H组G₀~G₁期细胞数降低(41.1%),S期细胞数增高(52.7%),与空白对照组比较差异均有显著性(P<0.01和P<0.05)。5-Fu组G₀~G₁期细胞数增高(62.3%),S期细胞数降低(37.5%);rhGH+5-Fu组G₀~G₁期细胞数进一步增加(67.4%),S期细胞数进一步降低(32.5%),与5-Fu组比较差异无显著性(P>0.05)。结论: rhG H在体外具有促进肾癌细胞生长增殖的作用,但未见到能明显增强氟尿嘧啶抗肾癌细胞的作用。     

重组人生长激素在体外对人胃癌细胞作用的研究

目的：研究重组人生长激素（rhGH）在体外对胃癌细胞生长的影响。方法：设对照组、rhGH组、5-氟尿嘧啶（5-FU）组和rhGH加5-FU组共4组,依rhGH浓度不同,rhGH和rhGH加5-FU组又各分4个亚组。利用体外细胞培养、MTT比色、流式细胞仪及免疫细胞化学等方法,测定不同浓度的rhGH对人胃癌细胞株MGC803肿瘤抑制率、细胞周期、细胞增殖指数（PI）及核增殖抗原Ki-67表达的影响。结果：rhGH在体外无明显促进MGC803细胞分裂增殖作用;对照组与各rhGH组比较,肿瘤抑制率、PI、Ki-67表达强度差异均无显著性（P〉0.05）;rhGH各亚组间比较差异亦无显著性;5-FU组与rhGH组及对照组比较,各rhGH加5-FU组与rhGH组及对照组比较细胞抑制率增加,阻滞于G0-G1期的细胞数增加,S期细胞明显减少,PI明显降低（P〈0.05）,Ki-67表达强度明显下降。结论：重组人生长激素在体外不会促进胃癌细胞的增殖。     

重组人生长激素联合奈达铂在体外对人食管癌细胞株EC109作用的实验研究

目的 研究重组人生长激素(rhGH)在体外对人食管癌细胞生长的影响.方法 实验分为对照组、rhGH组、奈达铂(nedaplatin,NDP)组和rhGH NDP 组共4组,利用体外细胞培养、MTT比色法、流式细胞术及免疫细胞化学等方法,测定不同浓度的rhGH对人食管癌细胞株EC109细胞抑制率、细胞周期、增殖指数(PI)及核增殖抗原Ki-67表达的影响.结果 rhGH在体外不能明显促进EC109细胞分裂增殖,对照组与rhGH组、rhGH NDP组与NDP组比较细胞抑制率、PI、Ki-67表达强度差异均无统计学意义(均P＞0.05);rhGH各亚组间比较差异亦无统计学意义(均P＞0.05);NDP组、rhGH NDP组与rhGH组、对照组比较细胞抑制率增加,阻滞于G0～G1期的细胞数增加,S期细胞明显减少,PI明显降低,Ki-67表达强度明显下降(均P＜0.05).结论 重组人生长激素在体外不能明显促进食管癌EC109细胞生长.     

重组人生长激素对肝癌细胞株细胞周期动力学的影响

目的了解重组人生长激素(r-hGH)对肝癌细胞有无促增殖和分化作用.方法取对数生长期的人肝癌细胞株7402,以不同浓度的r-hGH和(或)顺铂体外培养24 h,用流式细胞仪测定其细胞增殖周期及细胞凋亡等指标.结果 r-hGH组与对照组比较,G0～G1期细胞数率降低(P<0.05),S期百分率增高(P<0.05),顺铂与r-hGH合用,与单纯顺铂组比较,细胞凋亡率增加(P<0.05).结论 r-hGH在体外作用人肝癌细胞株7402,能诱导细胞分化,促进细胞DNA合成,减少导致肿瘤复发的静止期细胞,提高肿瘤对时相特异性化疗药物的敏感性.与化疗药物同用,能增加肿瘤细胞的凋亡.     

生长激素对结肠癌肿瘤细胞体外影响

目的: 检测生长激素对体外培养的结直肠癌细胞的影响,并探讨其作用机制?方法:结肠癌细胞株Lovo细胞随机分组,加或不加不同浓度的生长激素孵育不同时间后,以MTT法检测细胞增殖情况,流式细胞术分析细胞周期,Annexin V/PI双染色法检测细胞凋亡情况?结果:MTT法测定表明,生长激素对Lovo细胞有明显的促进增殖效应,12~24 h起效,48 h时达高峰,生长激素达到一定浓度后,其促增殖作用不再增加?流式细胞仪检测生长激素对结肠癌细胞的影响显示:浓度为200 ng/ml的生长激素作用Lovo细胞24 h后,G0/G1细胞比例下降,S期细胞比例明显上升,G2/M期细胞比例稍上升,凋亡指数无明显变化(P=0.187);72 h时, G0/G1期细胞下降更为明显,S期细胞比例上升亦更为明显,G2/M期细胞上升明显,凋亡细胞比例明显增高(P < 0.01)?结论:生长激素对Lovo细胞有明显的促增殖作用,并有受体饱和效应?该作用是通过改变细胞周期分布,促进G0/G1期细胞向S期?G2/M期细胞转变实现的?     

氯通道阻断剂NPPB对肾癌细胞系GRC-1生长的抑制作用

目的：研究NPPB对肾癌细胞系GRC—1增殖的抑制作用．方法：采用倒置光学显微镜观察、MTT比色实验、流式细胞仪检测细胞周期研究NPPB对肾癌细胞系GRC—1生长的抑制作用．结果：倒置光学显微镜观察和MTT比色实验显示NPPB对肾癌细胞系GRC—1的生长具有明显抑制作用，流式细胞仪检测NPPB使肾癌细胞系GRC—1绝大多数细胞的生长停滞于G0／G1期．结论：NPPB对肾癌细胞系GRC—1生长的抑制作用明显，其作用机制为NPPB抑制肾癌细胞系GRC—1的生长停滞于G0／G1期。     

抑癌基因p27对肾癌细胞系GRC-1生长的抑制作用

目的：探讨p27基因对肾癌GRC－1细胞系生长的抑制作用,为肾癌发生机制的研究和基因治疗提供理论依据。方法 采用基因转染技术,将p27 cDNA转染到肾癌GRC－1细胞系中,了解其对细胞增殖能力及细胞周期的影响。结果 转染p27基因的肾癌细胞生长受到抑制,其在软琼脂上克隆形成能力降低了大约4倍。对细胞周期分析表明,处在G0－G1期的细胞由32．2％增加到66．9％,经Dot blot和Western blot杂交证实,p27 mRNA表达有明显差异（P＜0．01）,p27的蛋白表达量有明显差异（P＜0．01）,说明p27蛋白具有生长抑制功能,其作用点为G1－S。结论 提高肾癌细胞中p27的表达,能抑制肿瘤细胞的生长,导入p27基因是一种治疗肾癌的新途径。     

重组人生长激素与5-FU联合应用对人乳腺癌细胞株 MCF-7细胞周期作用的实验研究

目的探讨重组人生长激素（r-hGH）对人乳腺癌细胞株MCF-7（MCF-7）有无促进增殖和分化作用,以及r-hGH与5-氟尿嘧啶（5-FU）联合应用对MCF-7的化疗协调作用.方法以不同浓度r-hGH,以及不同浓度的r-hGH联合不同浓度的5-FU分别加入处于对数生长期的MCF-7中进行体外培养,48 h后流式细胞仪检测细胞周期的变化,与对照组进行比较.结果①不同浓度的r-hGH与MCF-7作用后,其细胞周期的G0～G1期、S期、G2～M期的细胞百分比变化,差异均无统计学意义（P＞0.05）;②不同浓度的5-FU与MCF-7作用后,其细胞周期的G0～G1期细胞百分比显著增高（P＜0.05）,S期显著下降（P＜0.01）,G2～M期差异无统计学意义（P＞0.05）;③不同浓度的r-hGH联合不同浓度的5-FU与MCF-7作用后,其细胞周期的G0～G1期细胞百分比显著增高（P＜0.01）,S期和G2～M显著降低（P＜0.01,P＜0.05）.结论单独应用r-hGH对MCF-7的细胞周期无明显影响;r-hGH与5-FU联合应用对MCF-7的化疗具有协调作用,r-hGH能增强5-FU对MCF-7的化疗效果.     

人生长激素对人胰腺癌细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨人生长激素在体内对人胰腺癌细胞增殖和凋亡的影响。方法建立裸鼠胰腺癌移植瘤皮下模型,分为对照组、顺铂（DDP）组、重组人生长激素（rhGH）组和DDP＋rhGH组,通过流式细胞仪、免疫组化和TUNEL法检测移植瘤的细胞周期、核增殖抗原、凋亡细胞。结果 DDP组和DDP＋rhGH组比对照组或rhGH组S期细胞、核增殖抗原明显降低（P〈0.05）,凋亡指数明显升高（P〈0.05）;而rhGH组与对照组各项指标比较无明显差异（P〉0.05）。结论外源性人生长激素在体内对人胰腺癌细胞的增殖和凋亡无明显作用。     

草分枝杆菌制剂对人结肠癌细胞周期动力学的调控

目的：探讨草分枝杆菌制剂对人结肠癌细胞周期动力学的影响。方法：以不同浓度的草分枝杆菌制剂（商品名乌体林斯，Utilin S）体外处理人结肠癌细胞株Lovo，48h后以流式细胞仪检测细胞周期动力学指标的变化。结果：4种不同浓度的药物均能调控Lovo细胞的细胞周期，使G0－G1期细胞数率非常显著地上升（P＜0．01），G2－M期细胞数率显著地上升（P＜0．05），同时使S期细胞数率非常显著地下降（P＜0．01）。结论：乌体林斯能直接抑制结肠癌细胞株Lovo增殖，并可能通过G2－M期细胞阻滞而促进Lovo癌细胞凋亡的发生。     

葡萄糖对人血管内皮细胞周期和凋亡的影响

目的：观察高浓度葡萄糖对人血管内皮细胞周期和凋亡的影响。方法：用不同浓度葡萄糖（Glu）作用体外培养的人脐静脉内皮细胞（HUVECS）24h、48h、72h，绘制细胞增殖曲线，用流式细胞仪分析细胞周期和凋亡的变化。结果：高浓度Glu(20mmol/L、40mmol/L)对内皮细胞的生长增殖有明显抑制作用，使G0/G1期细胞比例增加，S和G2/M期细胞比例下降，同时诱导了内皮细胞的凋亡，并随作用浓度增加、时间延长更为明显。结论：高糖使培养的HUVECS凋亡加速，同时抑制细胞增殖。细胞可能被阻滞在G1/S转变期。     

顺铂引起卵巢癌细胞周期变化及凋亡的观察

目的 :了解顺铂 (DDP)引起卵巢癌细胞COC1、COC1/DDP细胞周期变化及凋亡规律。方法 :用光镜、电镜及流式细胞术等方法观察细胞凋亡规律及进行细胞周期分析。结果 :DDP引起COC1、COC1/DDP细胞周期变化主要表现为S期阻滞 ,P <0 .0 1;细胞死亡方式主要是凋亡 ,凋亡细胞发生在S期 ,P <0 .0 1;COC1、COC1/DDP细胞凋亡率不同 ,COC1凋亡率高 ,两组相比差异有显著性 (P <0 .0 1)。结论 :DDP引起COC1、COC1/DDP细胞S期阻滞、S期细胞凋亡 ,细胞凋亡与获得性耐药有关     

重组人生长激素对肝癌细胞MHCC-97H的作用及机制

目的 探讨重组人生长激素(rhGH)对肝癌细胞MHCC-97H的作用及机制.方法 以无血清培养液诱导肝癌细胞MHCC-97H凋亡,再以浓度为0 μg/L(GH0组)、5 μg/L(GH5组)、25 μg/L(GH25组)、50 μg/L(GH50组)、100 μg/L(GH100组)和500 μg/L(GH500组) 的rhGH完全培养液进行培养,MTT法观察MHCC-97H细胞生长情况,流式细胞技术检测细胞凋亡率、细胞周期和细胞增殖指数,RT-PCR和Western blotting法分别检测凋亡相关基因Bax和Bcl-2 mRNA和蛋白表达情况. 结果 与GH0组比较,GH25组、GH50组、GH100组和GH500组MHCC-97H细胞增殖明显,S期细胞百分比和细胞增殖指数显著增加 (P<0.05);GH25组、GH50组和GH100组细胞凋亡率显著降低(P<0.05),Bax mRNA和蛋白表达显著降低(P<0.05),Bcl-2 mRNA和蛋白表达显著增加(P<0.05).结论 rhGH体外显著促进肝癌细胞MHCC-97H增殖,并通过调节凋亡相关基因Bax和Bcl-2的表达来抑制无血清培养液诱导的细胞凋亡.     

重组人生长激素对肝癌细胞MHCC-97H的作用及机制

目的探讨重组人生长激素（rhGH）对肝癌细胞MHCC-97H的作用及机制。方法以无血清培养液诱导肝癌细胞MHCC-97H凋亡,再以浓度为0μg/L（GH0组）、5μg/L（GH5组）、25μg/L（GH25组）、50μg/L（GH50组）、100μg/L（GH100组）和500μg/L（GH500组）的rhGH完全培养液进行培养,MTT法观察MHCC-97H细胞生长情况,流式细胞技术检测细胞凋亡率、细胞周期和细胞增殖指数,RT-PCR和Western blotting法分别检测凋亡相关基因Bax和Bcl-2 mRNA和蛋白表达情况。结果与GH0组比较,GH25组、GH50组、GH100组和GH500组MHCC-97H细胞增殖明显,S期细胞百分比和细胞增殖指数显著增加（P〈0.05）;GH25组、GH50组和GH100组细胞凋亡率显著降低（P〈0.05）,Bax mRNA和蛋白表达显著降低（P〈0.05）,Bcl-2 mRNA和蛋白表达显著增加（P〈0.05）。结论 rhGH体外显著促进肝癌细胞MHCC-97H增殖,并通过调节凋亡相关基因Bax和Bcl-2的表达来抑制无血清培养液诱导的细胞凋亡。     

短程全反式维甲酸对人结肠癌LoVo细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨短程全反式维甲酸(ATRA)对人结肠癌LoVo细胞增殖和凋亡的影响。方法四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测ATRA对LoVo细胞的生长抑制率并筛选合适的药物用量,流式细胞仪检测ATRA诱导的肿瘤细胞周期和凋亡率变化。结果选择1.0μmol·L-1ATRA作为进一步实验的工作浓度。1.0μmol·L-1ATRA作用12 h后G1期细胞开始增多,48 h后G1期细胞明显增多并伴S期、G2/M期细胞减少(P<0.05)。1.0μmol·L-1ATRA作用48、72 h组的早期凋亡率和总凋亡率与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.01);ATRA作用48、72 h组的早期凋亡率和总凋亡率的组间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论短程1.0μmol·L-1ATRA主要通过阻滞LoVo细胞于G1期并诱导其细胞发生早期凋亡,可明显抑制肿瘤细胞的增殖。     

外源性p27与GRC-1细胞端粒酶活性及细胞凋亡关系的实验研究

目的 :观察p2 7蛋白表达水平与肾癌GRC - 1细胞端粒酶活性的关系及对其诱导凋亡的作用。方法 :采用脂质体介导的方法将 p2 7质粒导入GRC - 1细胞中 ,应用TRAP -PCR -ELISA、电镜及Tunel等技术检测外源性 p2 7蛋白对GRC - 1细胞端粒酶活性、细胞凋亡的影响。结果 :转染 p2 7质粒的GRC - 1细胞端粒酶活性显著下降 ,伴有细胞凋亡、细胞生长停滞。结论 :外源性p2 7基因的表达可使GRC - 1细胞端粒酶活性降低 ,细胞生长停滞 ,诱发细胞凋亡。提示细胞端粒酶活性的改变与细胞周期的调控密切相关。