血清新喋呤高效液相色谱测定及其初步应用

用反相高效液相色谱法测定肝癌和正常人血清中新喋呤的浓度。测定条件：荧光激发波长为３６０ｎｍ，发射波长为４４０ｎｍ，流动相为甲醇－水。线性范围为１．９７－１９．７６ｎｍｏｌ／Ｌ，ｒ＝０．９９９７，回收率分别为１０８．０％和１０１．８％相应的变异系数分别为６．５７％和２．０９％。     

液－固萃取高效液相色谱测定全血环孢菌素A

为了达到省时经济、简便敏感、准确快速的检测全血汗孢菌素Ａ，我们根据液－固萃取的原理，用自制Ｃ＿（１８）小柱进行样本的预处理，乙睛、水、三氟乙酸体系为洗脱剂、Ｃ＿（１８）分析柱（柱温７０℃），检测波长２１０ｎｍ，以环孢菌素Ｄ为内标的全血环孢菌素反相高效液相色谱测定法。本方法的线性范围为５０～１５００ｎｇ／ｍｌ，回收率为９９％～１０４％，批内变异系数＜４．７％，批间变异系数＜６．５％，临床上与ＣｙｓＡ常同时使用的３５种药物的病人全血按上述前处理，再使用ＨＰＬＣ分析表明在ＣｙｓＡ和ＣｙｓＤ的保留时间内均未见干扰峰；本方法使用了自制Ｃ＿（１８）小柱替代了进口小柱，效果满意，因而适合在国内临床上推广使用。     

超高效液相色谱－串联质谱联用检测血清胆汁酸谱方法的建立及初步临床应用

目的 建立超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)联用方法检测血清中胆汁酸表达的方法,并初步探讨胆汁酸亚型与肥胖的关系.方法 采用固相萃取方法处理血清标本,经UPLCHSS T3色谱柱梯度洗脱后,用负离子多反应监测模式对血清中的胆汁酸组分进行质谱检测,并根据中国国家食品药品监督管理局(SFDA)的指导原则对该方法的特异性、线性范围、灵敏度、不精密度和相对回收率进行性能验证.利用UPLC-MS/MS方法检测10例单纯性肥胖者和10名健康对照者血清胆汁酸浓度,并采用秩和检验进行统计分析.结果 UPLC-MS/MS方法可同时检测人血清中14种胆汁酸亚组分,在10～20 000 nmol/L范围内线性相关良好.其对不同亚组分的最低检出限(LOD)为0.02～7.90 nmol/L,最低定量限(LOQ)为0.07～44.20 nmol/L;其日内不精密度为0.35％～12.41％;日间不精密度为1.11％ ～13.04％;相对回收率为89.8％～114.6％.初步临床应用显示,单纯性肥胖者及健康对照者血清胆汁酸谱色谱图有一定差异,单纯性肥胖者血清中游离胆汁酸和结合胆汁酸浓度分别为0.49(0.45 ～1.90)、1.44(0.84～3.72) μmol/L,均低于健康对照组的0.98(0.53～3.06)、1.99(0.67 ～2.88) μmol/L,但差异均无统计学意义(Z=-0.958、-0.801,P均＞0.05).结论 建立的UPLC-MS/MS方法可有效分离并定量检测血清中各种胆汁酸亚型,其线性范围广、灵敏度高、精密度好,可用于临床标本游离胆汁酸和结合胆汁酸的分析测定.     

高效液相色谱检测胆红素及其临床应用

由于常规的血清胆红素检测方法不能灵敏，准确的测定结合胆红素。笔者参考国外文献采用国产填料和试剂建立了敏感和特异的高效液相色谱胆红素测定法，结果表明本法可对血清胆红素作出较为灵敏和准确的测定，未结合胆红素批内和批间变异系数（Ｖ）值分别为９．８％～１０．９％和７．３％～１２．７％，结合胆红素批内和批弹ＣＶ值分别为２．５％～９．２％和９．７％～１１．０％；未结合和结合胆红素的最低检出浓度分别为０．０５μ     

高效液相色谱检测胆红素及其临床应用

由于常规的血清胆红素检测方法不能灵敏、准确的测定结合胆红素。笔者参考国外文献采用国产填料和试剂建立了敏感和特异的高效液相色谱胆红素测定法，结果表明本法可对血清胆红素作出较为灵敏和准确的测定，未结合胆红素批内和批间变异系数（ＣＶ）值分别为９．８％～１０．９％和７．３％～１２．７％，结合胆红素批内和批间ＣＶ值分别为２．５％～９．２％和９．７％～１１．０％；未结合和结合胆红素的最低检出浓度分别为０．０５μｍｏｌ／Ｌ和０．０２μｍｏｌ／Ｌ。同时采用本法分析了部分肝病患者和健康人血清胆红素，并对其临床意义进行了初步探讨。     

高效液相色谱快速测定尿假尿苷

介绍一种不用苯硼酸亲和柱的高效液相色谱法快速测定尿假尿甙。本法只需简单的标本预处理，使用ＰＨ３．３磷酸盐缓冲液动相和２６８ｎｍ检测，每个标本测定只需１２分钟，批内和批间变异分别为３．２７％和４．８６％，线性范围超过１７００μｍｏｌ／Ｌ，常见的１０种抗肿瘤药物不干扰测定。     

高效液相色谱测定血红蛋白A_2

血红蛋白A_2的测定主要用于小细胞贫血的鉴别诊断。国际血液学标准委员会(ICSH)建议用洗脱醋酸纤维素电泳后的血红蛋白区带或用阴离子交换色谱(微色谱)测定血红蛋白A_2。其他测定法有扫描密度测定术和放射免疫扩散法。本文报告将用于测定血红蛋白AIC的模数高效液相色谱法(HPLC)测定血红蛋白A_2的结果。血液样品来自已知β—地中海贫血性状的个体,同时用HPLC和微色谱进行分析,测定若干“正常”的个体,以作比较和制定参考范围。微色谱用DE—52纤维素,按Efremov等小塑料柱测定血红蛋白A_2的方法进行。将50μl血溶解物(10g/l)加于柱的顶端,待血红蛋白分离后,用pH8.3和pH7.2、0.05mol/l Tris缓冲液洗脱,血红     

高效液相色谱分析血清胆红素组分及初步临床应用

用一种简单快速的反相高效液相色谱法（ＲＰ－ＨＰＬＣ）分离并测定了四种胆红素组分比，这四种胆红素组分是：未结合胆红素（Ｂａ）、胆红素单葡萄糖醛酸酯（Ｂβ），胆红素双葡萄糖醛酸酯（Ｂ７）及与白蛋白紧密结构的胆红素（Ｂδ），所用色谱柱用Ｃ４宽孔短链的国产柱子。标本处理简单，不需除去蛋白质，血清经稀释后高速离心取上清液直接进样。采用线性梯度洗脱，在波长４３６ｎｍ处，Ｂ７，Ｂβ，Ｂδ及Ｂα依次出峰，２２分钟     

高效液相色谱荧光检测法测定尿雌三醇

报告用高效液相色谱测定孕妇尿内总雌三醇的方法，尿标本在酸水解后用乙醚提取Ｅ３，蒸于乙醚，残留物用流动相重组，标本成分用Ｃ８柱分离，以２８５ｎｍ波长激发，在６１０ｎｍ测定Ｅ３的自然荧光。本法批内ＣＶ为１．２％－１．５％批间ＣＶ分别为２．３％和４．０％本法在４．３３－１３８．７１μｍｏｌ／Ｌ（１．２５－４０．００ｍｇ／Ｌ）间呈线性，最低检出１．８μｍｏｌ／Ｌ（０．５２ｍｇ／Ｌ，信号／噪声比为３）。     

高效液相色谱荧光检测法测定尿雌三醇

报告用高效液用色谱（ＨＰＬＣ）测定孕妇尿内总雌三醇（Ｅ＿３）的方法。尿标本在酸水解后用乙醚提取Ｅ＿２，蒸干乙醚，残留物用流动相（甲醇／乙腈／水＝４０／１７／４３）重组。标本成分Ｃ＿８柱分离，以２８５ｎｍ波长激发，在６１０ｎｍ测定Ｅ＿３的自然荧光。本法批内ＣＶ为１２％～１．５％（ｘ＝３２．７～１２８．２ｕｍｏｌ／Ｌ），批间ＣＶ别为２．３％和４０％（分别是３８．４和９８．９ｕｍｏｌ／Ｌ）。本法在４．３３～１３８．７ｕｍｏｌ／Ｌ（１２５～４０．００ｍｇ／Ｌ）间呈线性，最低检出１．９ｕｍｏｌ／Ｌ（０．５２ｍｇ／Ｌ，信号／噪声比为３）。     

四种钙离子拮抗剂的高效液相色谱测定

介绍采用ＢｏｎｄＥｌｕｔＣ１８小柱提取以反相高效液相色谱法同时测定尼弗地平、尼卡地平、尼群地平和尼莫地平４种钙离子拮抗剂的方法。应用Ｗａｔｅｒｓ高效液相色谱仪，Ｃ１８分析柱及乙腈／ＫＨ＿２ＰＯ＿４＝４６／５４流动相，在１．５ｍ１／ｍｉｎ流速下分离上述４种药物。回收率分别为１０１％～１０９％，９５％～１０１％，９９％～１０４％和１０３％～１０８％，批内变异系数（ＣＶ）＜７．４％，批间ＣＶ＜８．７％。本方法特异性好，操作简便、迅速，适合于临床和药代动力学研究应用。     

高效液相色谱荧光检测法测定血浆同型半胱氨酸

[目的]建立使用高效液相色谱、等度洗脱、荧光检测法测定血浆同型半胱氨酸的方法。[方法]血浆同型半胱氨酸经Tris(2-Carboxyethyl)phosphate(17CEP)还原后，与7-Fluoro-benzo-2-oxa-1．3-diazole-4-sulohonate(SBD-F)衍生化，以胱氨为内标，C18反相色谱柱分离、等度洗脱，荧光检测器测定，以峰面积比进行定量。[结果]线性范围可达100μmol／L，最低检测限0．3μmol／L，批内不精密度1．2％-2．4％，批间不精密度1．4％-2．5％，平均回收率96．3-103％。[结论]本方法洗脱条件简单，准确性、特异性好，适用于临床实验室测定血浆同型半胱氨酸的含量。     

胸水中多胺的高效液相色谱测定

本文采用丹酰氯试剂作为柱前衍生剂，用反相高效液相色谱法检测胸水中多胺的浓度。实验条件：荧光激发波长３４０ｎｍ，发射波长５１５ｎｍ。液动相为甲醇－水，本法测得多胺的回收率为：腐胺９３％￣１０７％，精脒８９％￣１０３％，精胺９８％￣１０５％。变异系数分别为：腐胺７．４％￣９．５％，精脒４．３％￣６．１％，精胺３．３％￣４．２％，方法稳定，可靠。     

四种钙离子拮抗剂的高效液相色谱测定

介绍采用Ｂｏｎｄ ＥｌｕｔＣ１８小柱提取以反相高效液相色谱法同时测定尼地平、尼卡地平、尼群地平和尼莫地平４种钙离子拮抗剂的方法。应用Ｗａｔｅｒｓ高效液相色谱仪，Ｃ１８分析柱及尼腈／ＫＨ２ＰＯ４＝４６／５４流动相，在１．５ｍｌ／ｍｉｎ流速下分离上述４种药物，回收率分别为１０１％～１０９％，９５％～１０１％，９９％～１０４％和１０３％～１０８％，批内变异系数（ＣＶ）＜７．４％，批间ＣＶ＜８．７％。本方     

高效液相色谱与荧光法测定细菌染色体碱基组成的比较

目的 比较连续荧光检测法（荧光法）与高效液相色谱（ＨＰＬＣ）法测定细菌染色体鸟嘌呤胞嘧啶百分比（ＧＣ％）的稳定性、准确性和适应性。方法 应用双股ＤＮＡ结合染料和能够快速速升降温度的连续荧光检测仪、测定９株细菌染色体的变性温度℃值,并根据相应的公式算出ＧＣ％：Ｃ ＨＰＬＣ法直接检测细菌染色体的ＧＣ％。结果 ＤＮＡ纯度对荧光法测得的ＧＣ％结果无显著影响,但影响ＨＰＬＣ的测定结果,荧光法３次检测获得的９     

高效液相色谱在蛋白质及同工酶分析中的应用

高效液相色谱又名高压液相色谱或高速液相色谱(HPLC)。它是近十年来,在经典柱色谱的基础上发展起来的新型的分离、分析技术,具有高效、快速、操作自动化及试样不受沸点和热稳定性限制等特点。目前已用于蛋白质及同工酶等大分子物质的分析,是生化研究中的一种重要的分离、分析手段。常用的HPLC系统由泵、色谱柱、检测器及自动控制装置组成。作蛋白质及同工酶分析时,对仪器的要求更高,所用的色谱柱     

骨组织中吡嗪酰胺浓度的高效液相色谱测定

背景：测定结核病化疗药物在病变椎体组织中的生物分布对脊柱结核的治疗具有重要价值。目的：建立吡嗪酰胺在骨组织中药物浓度的高效液相色谱分析法并测定其在脊柱结核病椎组织中的浓度。方法：取10例脊柱骨折患者前路椎体次全切除减压的椎骨制备成空白骨匀浆,高效液相色谱法测定吡嗪酰胺骨组织药物浓度。取18例脊柱结核患者（2HRZ/H2R2Z2化疗方案）的病椎硬化骨、亚正常骨、坏死组织以及髂骨为骨组织标本,采用高氯酸蛋白沉淀法获得骨匀浆吡嗪酰胺上清,对方法的专属性、回收率与精密度以及线性范围进行评价。结果与结论：吡嗪酰胺在265nm波长下有较大吸收,保留时间7.48min,无干扰峰出现。在0.048～3.120μg/g骨匀浆浓度范围内吡嗪酰胺峰面积与骨样本浓度线性关系良好（r=0.99991）,绝对回收率在89.18%～93.75%,方法回收率为96.30%～100.45%,日内、日间精密度分别为4.26%～8.78%和5.12%～9.01%。应用此方法测得吡嗪酰胺在病椎硬化壁为最低抑菌浓度,壁外亚正常骨及对照髂骨达到有效治疗浓度,壁内核心病灶未检测到分布。提示吡嗪酰胺在脊柱结核病椎中存在明显的组织分布差异,硬化壁是其经正常椎体向核心病灶穿透的组织屏障。