Survivin、Bcl-2、HPV 16/18在宫颈上皮内瘤变及宫颈癌中的表达及临床意义

目的:研究Survivin、Bcl-2、HPV 16/18在宫颈上皮内瘤变(CIN)及宫颈癌中的表达,探讨三者与宫颈癌的相关性.方法:采用原位杂交法检测正常宫颈组织(对照组)、CIN(CIN组)和宫颈癌(宫颈癌组)中Survivin mRNA及HPV 16/18 DNA的表达.采用免疫组织化学法检测Bcl-2蛋白在各组中的表达.结果:①Bcl-2蛋白、HPV16/18DNA、Survivin mRNA的阳性率在对照组、CIN组、宫颈癌组中逐渐升高,差异有高度统计学意义(P=0.000).②Bcl-2蛋白和Survivin mRNA在宫颈癌的组织分化程度中,低分化组的表达高于高、中分化组(P<0.01),ⅡB～Ⅲ期显著高于I～ⅡA期(P<0.05);Survivin mRNA在淋巴结转移组中高于无淋巴结转移组(P<0.01);Survivin mRNA及Bcl-2与组织类型及肿块类型无关(P>0.05);HPV 16/18感染与宫颈癌组织类型、组织分化程度、临床分期、肿块类型均无关(P>0.05).(③Survivin与Bcl-2及HPV 16/18在宫颈癌中的表达均呈正相关.结论:Survivin、Bcl-2及HPV 16/18在宫颈癌中有异常表达.三者可能与宫颈癌的发生发展有密切关系.     

MACC1、c-Met蛋白在宫颈癌中的表达及与盆腔淋巴结转移的关系研究

目的:探讨结肠癌转移相关基因1(MACC1)、肝细胞生长因子受体(c—Met)蛋白在宫颈癌中的表达及与盆腔淋巴结转移的关系。方法:采用免疫组织化学检测10例正常宫颈组织、17例中~重度宫颈上皮内瘤变组织(CINⅡ~Ⅲ)和91例宫颈癌组织中MACC1、c—Met蛋白的表达情况,分析两者在宫颈癌组织中表达的相关性及与宫颈癌盆腔淋巴结转移的关系。结果:MACC1、c—Met蛋白在宫颈癌组织、CINⅡ~Ⅲ组织中的阳性表达率分别依次为83.5%、76.5%,80.2%、70.6%,均显著高于正常宫颈组织(P0.05)。宫颈癌中MACC1蛋白的表达与c—Met蛋白的表达呈正相关(r=0.672,P0.05)。将宫颈癌盆腔淋巴结转移组与无转移组进行单因素比较分析,MACC1蛋白表达、c-Met蛋白表达、组织学分化程度、脉管浸润、肌层浸润深度与宫颈癌盆腔淋巴结转移有关(P0.05),进一步Logistic回归分析表明,MACC1蛋白表达、肌层浸润深度是宫颈癌盆腔淋巴结转移的独立危险因素(P0.05)。结论:MACC1、c-Met蛋白异常表达可能协同参与宫颈癌的恶性进展,MACC1蛋白高表达是宫颈癌盆腔淋巴结转移的独立危险因素。     

宫颈鳞癌组织C-Fos、PDGFR蛋白的表达及意义北大核心CSCD

目的探讨宫颈鳞癌组织C-Fos、PDGFR蛋白的表达及意义。方法选取2015年1月至2017年10月河北省承德医学院附属医院保存的宫颈癌组织58例,宫颈上皮内瘤变(CIN)组织47例,正常宫颈组织43例,采用免疫组化染色检测C-Fos、PDGFR蛋白阳性表达,western blot检测C-Fos、PDGFR蛋白表达量。结果宫颈癌组织C-Fos和PDGFR蛋白阳性表达率分别为58.62%和62.07%,C-Fos和PDGFR蛋白表达量分别为(0.987±0.221)和(0.872±0.206),明显高于CIN和正常宫颈组织(P <0.05);CIN组织C-Fos和PDGFR蛋白阳性表达率分别为21.28%和27.66%,C-Fos和PDGFR蛋白表达量分别为(0.344±0.157)和(0.550±0.214),明显高于正常宫颈组织(P <0.05);Ⅲ～Ⅳ期宫颈癌C-Fos和PDGFR蛋白表达量分别为(1.012±0.220)和(1.012±0.220),明显高于Ⅰ～Ⅱ期宫颈癌(P <0.05);中低分化宫颈癌PDGFR蛋白表达量为(0.892±0.184),明显高于高分化宫颈癌(P <0.05);宫颈癌组织C-Fos和PDGFR蛋白表达量无相关性(P>0.05)。结论宫颈鳞癌组织C-Fos、PDGFR蛋白表达明显高于CIN和正常宫颈,与临床分期和分化程度具有一定的相关性,可能在宫颈癌发生过程中发挥一定的作用。     

宫颈鳞癌组织C-Fos、PDGFR蛋白的表达及意义

目的探讨宫颈鳞癌组织C-Fos、PDGFR蛋白的表达及意义。方法选取2015年1月至2017年10月河北省承德医学院附属医院保存的宫颈癌组织58例,宫颈上皮内瘤变(CIN)组织47例,正常宫颈组织43例,采用免疫组化染色检测C-Fos、PDGFR蛋白阳性表达,western blot检测C-Fos、PDGFR蛋白表达量。结果宫颈癌组织C-Fos和PDGFR蛋白阳性表达率分别为58.62%和62.07%,C-Fos和PDGFR蛋白表达量分别为(0.987±0.221)和(0.872±0.206),明显高于CIN和正常宫颈组织(P 0.05);CIN组织C-Fos和PDGFR蛋白阳性表达率分别为21.28%和27.66%,C-Fos和PDGFR蛋白表达量分别为(0.344±0.157)和(0.550±0.214),明显高于正常宫颈组织(P 0.05);Ⅲ～Ⅳ期宫颈癌C-Fos和PDGFR蛋白表达量分别为(1.012±0.220)和(1.012±0.220),明显高于Ⅰ～Ⅱ期宫颈癌(P 0.05);中低分化宫颈癌PDGFR蛋白表达量为(0.892±0.184),明显高于高分化宫颈癌(P 0.05);宫颈癌组织C-Fos和PDGFR蛋白表达量无相关性(P0.05)。结论宫颈鳞癌组织C-Fos、PDGFR蛋白表达明显高于CIN和正常宫颈,与临床分期和分化程度具有一定的相关性,可能在宫颈癌发生过程中发挥一定的作用。     

NF-κBp65,c-IAP2,Caspase-3在宫颈癌中的表达及意义

目的:探讨核因子-κB(NF-κB)p65、细胞凋亡抑制蛋白-2(c-IAP2)和半胱氨酸蛋白水解酶-3(Caspase-3)在宫颈癌组织中表达的意义。方法:应用免疫组织化学方法检测NF-κBp65、c-IAP2和Caspase-3在44例宫颈癌、50例宫颈上皮内瘤变(CIN)及30例正常宫颈组织中的表达情况。结果:宫颈癌和CIN中NF-κBp65,c-IAP2的阳性表达率高于正常宫颈组织(P<0.05),而Caspase-3的表达率低于正常宫颈组织(P<0.05),3个指标在CINⅠ和正常宫颈组织中的表达无差异(P>0.05),在CINⅡ～Ⅲ中NF-κBp65,c-IAP2的表达高于正常宫颈组织(P<0.05),而Caspase-3的表达低于正常宫颈组织(P<0.05);NF-κBp65,c-IAP2,Caspase-3在宫颈癌的不同临床分期中的表达无差异(P>0.05),NF-κBp65,c-IAP2在低分化和有淋巴结转移组宫颈癌组织中的表达高于高分化组织和无淋巴结转移组(P<0.05),而Caspase-3的表达低于高分化组织和无淋巴结转移组(P<0.05);NF-κBp65与c-IAP2在宫颈癌中的表达呈正相关,NF-κBp65,c-IAP2在宫颈癌中的表达与Caspase-3的表达呈负相关。结论:宫颈癌中NF-κBp65、c-IAP2高表达而Caspase-3低表达可能和宫颈癌的发生发展有关。     

磷酸化蛋白激酶B和p27在宫颈癌组织的表达及意义

目的:探讨宫颈癌组织中磷酸化蛋白激酶B(P-PKB)和p27蛋白的表达及其在子宫颈癌发生、发展中的意义。方法:采用免疫组化SP法检测51例宫颈癌组织,36例宫颈上皮内瘤变(CIN)组织和20例正常宫颈组织中P-PKB蛋白和P27蛋白的表达,并分析它们与宫颈癌临床病理因素的关系。结果:宫颈癌组织中P-PKB的阳性表达率(74.5%)明显高于CIN组(52.8%)和正常宫颈组(15%)(P<0.05),P-PKB蛋白的表达随宫颈癌分化程度下降、临床分期升高而升高(P<0.05),在无淋巴结转移的宫颈癌中的表达明显低于有淋巴结转移癌(P<0.05)。p27蛋白在宫颈癌组织中的阳性表达率(49.0%)明显低于CIN组(80.1%)和正常宫颈组(90.0%)(P<0.05),p27蛋白的表达随宫颈癌分化程度下降、临床分期升高而降低(P<0.05),在无淋巴结转移的宫颈癌中的表达明显高于有淋巴结者(P<0.05)。宫颈癌中P-PKB蛋白表达与p27蛋白表达呈负相关(r=-0.326,P<0.05)。结论:P-PKB蛋白在宫颈癌中过表达,p27蛋白在宫颈癌中表达明显降低,与P-PKB蛋白表达呈负相关,P-PKB蛋白可能通过抑制p27蛋白的表达,促进肿瘤的发生发展。     

吲哚胺2,3-二氧酶在CIN及宫颈鳞癌中的表达及其意义

目的:探讨吲哚胺2,3-二氧酶(indoleamine 2,3-dioxygenase,IDO)在宫颈上皮内瘤变(CIN)及宫颈鳞癌中的表达及意义.方法:选择经病理确诊为CIN Ⅰ～CIN Ⅲ和宫颈鳞癌患者的石蜡标本116例,以同时期因子宫肌瘤行全子宫切除患者的正常宫颈组织石蜡标本20例作为对照,采用免疫组化方法检测宫颈CIN及宫颈鳞癌中IDO表达情况.结果:正常宫颈组织和CIN Ⅰ,CIN Ⅱ～CIN Ⅲ,宫颈鳞癌ⅠA期～ⅠB期,ⅡA期～ⅣB期4组之间IDO阳性表达强度差异有高度统计学意义(P＜0.01).在宫颈鳞癌Ⅰ～Ⅳ期IDO总阳性表达率为100%,ⅠA期～ⅠB期IDO总阳性表达率显著高于CIN Ⅱ和CIN Ⅲ(P＜0.01),ⅡA～ⅣB期IDO阳性表达强度显著高于ⅠA期～ⅠB期(P＜0.01).IDO表达与宫颈鳞癌进展有关(OR=0.779,JP＜0.01);在宫颈鳞癌淋巴转移阳性组IDO阳性表达强度显著高于淋巴转移阴性组(P＜0.01);IDO表达与肿瘤分化程度无相关性(P＞0.05).结论:从CIN Ⅱ开始,肿瘤组织已逐步建立起有利于肿瘤发展的免疫逃逸机制.IDO的表达与疾病进展有关而与肿瘤组织分化程度无关,IDO可能成为宫颈鳞癌预后的预测因子及治疗靶点.     

Rsf-1/HBXAP基因在宫颈癌中的表达及临床病理意义

目的:探讨宫颈癌中染色体空间重组因子(Rsf-1/HBXAP)的表达及临床意义,为宫颈癌的发生发展机制和靶向治疗提供实验依据。方法:选取2008年12月31日至2014年1月1日在山东省肿瘤医院妇瘤科治疗的患者宫颈组织标本共234例,采用免疫组化SP法检测Rsf-1/HBXAP蛋白在17例正常宫颈组织、35例宫颈上皮内瘤变(CIN)组织和182例宫颈癌组织中的表达,并采用Kaplan-Meier生存分析揭示其与宫颈癌临床病理以及患者预后的关系。应用Real-time PCR技术及Western blot技术检测Rsf-1/HBXAP基因在不同宫颈细胞系中的表达,分析不同细胞系中Rsf-1/HBXAP表达水平差异。结果:正常宫颈组织、CIN组织及宫颈癌组织中Rsf-1/HBXAP蛋白的阳性表达率分别为5.88%(1/17)、37.14%(13/35)及79.12%(144/182),差异有统计学意义(P0.05)。宫颈癌组织中,Rsf-1/HBXAP蛋白表达与肿瘤分化程度、肿瘤分期及淋巴结转移有关(P0.05),但与患者年龄、肿瘤大小无关(P0.05)。He La及Siha细胞系中Rsf-1/HBXAP mRNA、蛋白表达显著高于293T细胞系。Kaplan-Meier生存分析表明,宫颈癌患者中Rsf-1/HBXAP蛋白高表达组其总体生存率显著低于低表达组(P0.05)。结论:Rsf-1/HBXAP在宫颈癌组织及其细胞系中高度表达,预示其可能参与了宫颈癌的发生和进展,为其作为诊断及判断预后的新的肿瘤标志物以及作为宫颈癌个体化治疗的新靶点提供了依据。     

HPV16基因整合与FHIT蛋白缺失在宫颈癌变中的作用

目的 探讨HPV16的基因型整合状态及FHIT基因缺失在宫颈癌发生发展中的作用及相关性。方法选取44例宫颈癌、58例宫颈上皮内瘤样病变(CIN)和20例宫颈正常组织的患者,免疫组化检测宫颈FHIT蛋白的表达;并用多重PCR法检测HPV16 E2/E7表达。结果 122例单一HPV16阳性标本HPV16总整合率为78.69%,在正常宫颈组织、CIN1、CIN2、CIN3和宫颈癌中整合率分别为60.00%、66.67%、75.00%、86.96%和88.63%,随病变加重,整合率增强,组间差异有统计学意义(P0.05);FHIT蛋白的总缺失率为43.44%,FHIT蛋白在正常宫颈组织、CIN1、CIN2、CIN3和宫颈癌中的缺失率分别为15.00%、20.00%、25.00%、43.48%和72.73%。FHIT蛋白的缺失率,随病变加重,缺失率增高,组间差异有统计学意义(P0.05)。FHIT蛋白缺失在不同HPV16整合时不同,差异有统计学意义(P0.05)。结论 HPV16基因整合和FHIT蛋白缺失在宫颈癌的发生、发展中起重要作用,HPV16基因整合可能通过诱导FHIT基因低表达从而促使宫颈癌发生发展。     

ABCG2与CD133在宫颈癌的表达及意义

目的:探讨ABCG2及CD133蛋白在宫颈癌的表达及临床意义。方法:用免疫组化SP法检测92例宫颈癌、40例宫颈上皮内瘤变(CIN)和30例正常宫颈组织中AB-CG2及CD133蛋白的表达。结果:ABCG2在宫颈癌、CIN和正常宫颈组织的阳性表达率分别为69.6%、42.5%、23.3%,CD133为57.6%、37.5%、23.3%,两者在宫颈癌的表达均高于CIN及正常组织,差异均有统计学意义(P0.05);两者表达与宫颈癌患者年龄、肿瘤大小、临床分期无相关性(P0.05),而在不同分化组间表达的差异有统计学意义(P0.05)。结论:ABCG2和CD133蛋白异常表达与宫颈癌的发生、发展有关,二者联合检测可作为评估宫颈癌恶性程度、指导治疗的重要参考指标。     

宫颈癌RASSF2A基因启动子甲基化与其临床病理特征的关系

目的:检测宫颈癌组织中Ras相关区域家族2A(RASSF2A)基因启动子甲基化状态,并分析RASSF2A基因甲基化率与临床病理特征的关系。方法:采用甲基化特异性PCR(MSP)检测46例宫颈癌、38例宫颈上皮内瘤变(CIN)和25例正常宫颈组织中RASSF2A基因启动子甲基化状态。结果:宫颈癌组织中RASSF2A基因甲基化率显著高于CIN组织及正常宫颈组织(P0.05)。RASSF2A甲基化阳性率随着淋巴结转移而升高,具有明显的相关性(P0.05);不同年龄、临床分期、组织分级及病理性类型与RASSF2A基因甲基化无显著相关性(P0.05)。结论:RASSF2A基因启动子甲基化为频发事件,可能与宫颈癌的发生和淋巴结转移有关。     

E-钙黏素和骨桥蛋白在子宫颈癌患者中的表达及意义

目的探讨E-钙黏素(E-cadherin)和骨桥蛋白(osteopontin,OPN)在宫颈癌中的表达及意义。方法采用免疫组化链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结法(SP)检测78例宫颈癌、40例宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)、30例正常宫颈组织中E-cadherin和OPN的表达水平,并分析二者的表达与宫颈癌临床病理特征的关系。结果 E-cadherin在宫颈癌(48.7%,38/78)、CIN(60%,24/40)中的阳性表达率明显低于正常宫颈组织(100%,30/30)的表达(P均<0.05),但宫颈癌组与CIN组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。OPN在正常宫颈组织、CIN和宫颈癌中的阳性表达率分别为13.3%(4/30)、55%(22/40)和86.7%(65/75),宫颈癌组与正常宫颈组和CIN组比较,差异均有统计学意义(P均<0.05),CIN组与正常宫颈组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。E-cadherin的阳性表达率与宫颈癌患者的临床分期、病理分级及淋巴结转移有关(P<0.05)。OPN的阳性表达率与病理分级及淋巴结转移有关(P<0.05),与临床分期、浸润深度无关(P>0.05)。E-cadherin与OPN的表达呈负相关(r=-0.321,P<0.01)。结论 E-cadherin表达降低或缺失及OPN的高表达与宫颈癌的发生、浸润及转移密切相关,联合检测E-cadherin和OPN可为宫颈癌的治疗和预后提供有价值的临床信息。     

子宫颈癌组织中水通道蛋白8和bcl-2蛋白的表达及其相关性

目的 探讨水通道蛋白(AQP)8、bcl-2蛋白在宫颈癌组织中的表达及其相关性.方法 采用免疫组化Envision二步法检测AQP8和bcl-2蛋白在74例宫颈癌(其中鳞癌46例、腺癌28例)、34例宫颈上皮内瘤变(CIN)和15例正常宫颈组织中的表达情况,并分析两者的相关性.结果 AQP8和bcl-2蛋白主要在CIN异型细胞和宫颈癌细胞的细胞质内表达,AQP8蛋白在宫颈鳞癌、腺癌、CIN和正常宫颈组织中的阳性表达率分别为98%、61%、71%和53%,鳞癌高于腺癌、CIN和正常宫颈组织,差异有统计学意义(P＜0.01);腺癌与CIN、正常宫颈组织比较,CIN与正常宫颈组织比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).bcl-2蛋白在宫颈鳞癌、腺癌、CIN和正常宫颈组织中的阳性表达率分别为74%、71%、53%和20%,鳞癌与腺癌组织比较,差异无统计学意义(P＞0.05);鳞癌、腺癌高于CIN、正常宫颈组织,CIN也高于正常宫颈组织,差异均有统计学意义(P＜0.01).AQP8和bcl-2蛋白在宫颈癌组织中的表达呈明显正相关(rs=0.463,P=0.000).结论 AQP8和bcl-2蛋白在宫颈癌组织中的表达呈明显正相关,AQP8蛋白表达上调可能与宫颈癌的发生、发展有一定的关系.     

宫颈癌中抑癌基因FHIT表达与HPV16基因状态

目的:探讨抑癌基因FHIT表达及人乳头瘤病毒16(HPV16)的基因型整合状态在宫颈癌发生发展中的作用及相关性。方法:选取柳州市人民医院2013年6月至2014年12月收治的42例宫颈癌、55例宫颈上皮内瘤样病变(CIN)和20例宫颈正常组织的患者,免疫组化法检测宫颈组织中FHIT蛋白表达;多重PCR法检测HPV16 E2/E7表达。结果:FHIT蛋白的总阳性表达率为57.26%(67/117),正常宫颈组织、CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ和宫颈癌中FHIT蛋白阳性率分别为85.00%、80.00%、75.00%、60.00%和26.19%。随着宫颈病变加重,FHIT蛋白阳性表达率下降,组间差异有统计学意义(χ~2=7.335;P=0.003)。117例单纯HPV16阳性标本HPV16总整合率为81.20%,正常宫颈组织、CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ和宫颈癌中整合率分别为60.00%、66.67%、75.00%、95.00%和92.86%;随病变加重,整合率增强,组间差异有统计学意义(χ~2=5.713,P=0.003);FHIT蛋白阳性表达在不同HPV16整合时不同,差异有统计学意义(χ~2=11.989,P=0.000)。结论:HPV16基因整合可能通过诱导FHIT基因低表达从而促使宫颈癌发生发展。     

CD13在宫颈癌中的表达及意义

目的:探讨CD13在宫颈癌患者中的表达及临床意义。方法:用免疫组化SP法检测60例宫颈癌、60例宫颈上皮内瘤变(CIN)和30例正常宫颈组织中的CD13表达情况。结果:CD13在宫颈癌、CIN和正常宫颈组织中的阳性表达率分别是81.7%、31.7%、20.0%,CD13在宫颈癌中的表达均显著高于CIN及正常组织(P均<0.05)。CD13表达与宫颈癌患者年龄无相关性(P>0.05),而与淋巴转移、临床分期以及分化程度有相关性(P<0.05)。结论:CD13在宫颈癌的异常表达与宫颈癌的发生、发展有关,可作为评估宫颈癌的恶性程度、指导治疗、评价预后的重要参考指标。     

低氧诱导因子-1α在血管生成与宫颈癌化疗耐药性的相关研究

目的探讨缺氧在宫颈癌血管生成拟态(VM)与化疗耐药性的相关性。方法观察宫颈癌(宫颈癌组)、宫颈上皮内瘤变(CIN组)及正常宫颈组织(正常组)VM、低氧诱导因子-1α(HIF-1α)、血管内皮钙粘素(VE-cadherin)阳性表达情况及HIF-1α、多耐药基因1(MDR1)、P糖蛋白(P-gp)mRNA表达量,并分析其与临床病理参数及预后的关系。结果宫颈癌组、CIN组VM、HIF-1α阳性表达率及HIF-1α、MDR1、P-gp mRNA表达量高于正常组(P0.05),宫颈癌组高于CIN组(P0.05),VM、HIF-1α阳性表达率与分化程度、临床分期、淋巴结转移、5年生存率有关,HIF-1α、MDR1、P-gp mRNA表达量与肿瘤直径、分化程度、临床分期、淋巴结转移、5年生存率有关(P0.05)。结论 HIF-1α可能通过上调VE-cadherin表达水平,参与宫颈癌组织VM形成,且可能通过上调MDR1、P-gp表达参与耐药发生。     

EGFR、蛋白激酶B在宫颈癌中表达及EGFR胞外区基因突变的研究

目的:探讨宫颈癌中表皮生长因子受体(EGFR)、蛋白激酶B(PKB/Akt)的表达及EGFR胞外区基因突变的规律和临床意义,为宫颈癌的发生发展机制和靶向个性化治疗提供实验依据。方法:采用免疫组化SP法检测EGFR、Akt蛋白在16例正常宫颈组织、40例宫颈上皮内瘤变(CIN)组织和60例宫颈癌组织中的表达,并分析其与宫颈癌临床病理的关系。采用酚氯仿法抽提60例宫颈癌组织中DNA,PCR+DNA双向测序法检测EGFR胞外IV亚区基因突变。结果:正常宫颈组、CIN组及宫颈癌组中EGFR蛋白的阳性表达率分别为13.33%、43.33%及76.67%,Akt蛋白的阳性表达率分别为6.25%、35.00%及68.33%,差异有统计学意义(P0.05)。宫颈癌组织中,EGFR表达水平与病理类型、细胞分化程度和临床分期有关(P0.05),但与患者年龄和淋巴结转移无关(P0.05);Akt表达水平与细胞分化程度和临床分期有关(P0.05),但与患者年龄、病理类型和淋巴结转移无关(P0.05)。60例宫颈癌中EGFR基因外显子15突变率为3.33%(2/60),突变类型G→A,未发现外显子14突变。宫颈癌组织中EGFR、Akt表达呈正相关性(r=0.556,P0.05)。结论:EGFR、Akt可作为检测宫颈癌及癌前病变的重要参考指标,也为宫颈癌的多靶点联合治疗提供新思路;宫颈癌中EGFR胞外区可有基因突变,但突变率很低,关于其突变的规律和意义有待进一步研究。     

HPV16感染的宫颈鳞癌中微小染色体维持蛋白-5和P16~(INK4A)表达的研究

目的 探讨微小染色体维持蛋白-5(MCM5)与P16~(INK4A)在HPV16感染的宫颈鳞癌中表达及意义。方法 采取实时荧光定量PCR及免疫组化,测定存在HPV16感染的正常宫颈、CIN 1、CIN 2/3及宫颈鳞癌组织中MCM5、P16~(INK4A)的mRNA、蛋白表达情况。结果 (1)MCM5 mRNA及蛋白在HPV16感染的不同程度宫颈病变组织中表达趋势一致,随CIN程度的增加表达增高。MCM5 mRNA及蛋白在鳞癌中表达显著较各级别上皮内病变及正常组织高(P0.01)。MCM5蛋白的表达和年龄无关联(P0.05);与病理分级、临床分期相关(P0.01);(2)不同程度宫颈病变中P16~(INK4A)mRNA、蛋白表达趋势一致,随CIN程度增加表达增高。P16~(INK4A) mRNA及蛋白在鳞癌中的表达明显高于正常及CIN 1组织(P0.01);和CIN2/3之间差异无统计学意义(P0.05)。P16~(INK4A)蛋白在宫颈癌中的表达和患者年龄及临床分期没有关联(P0.05);和病理分级有关(P0.01);(3)MCM5和P16~(INK4A)蛋白表达呈正相关(r=0.497,P0.01)。结论 宫颈鳞癌中MCM5和P16~(INK4A)存在高表达,可能与其发生、进展相关。MCM5可较好的反映宫颈的恶性增生,与P16~(INK4A)联合检测对于完善CIN分级及预后的判断具有一定的参考价值。     

环氧合酶-2、bcl-2蛋白在宫颈鳞癌组织中的表达及意义

目的:探讨宫颈鳞癌组织中环氧合酶(COX-2)、bcl-2蛋白的表达及其与宫颈癌临床分期、病理分级、淋巴转移的关系。方法:采用免疫组化法对40例宫颈癌组织中COX-2和bcl-2蛋白的表达进行检测分析,以10例正常宫颈组织作为对照。结果:COX-2和bcl-2蛋白在正常宫颈组织中阳性表达率均为0(0/10)。COX-2在宫颈原位癌、Ⅰ~Ⅱ期及Ⅲ期的阳性表达率分别为50.0%、54.5%和66.7%,宫颈鳞癌及正常宫颈组织组之间比较差异有显著性(P<0.05),宫颈原位癌、宫颈鳞癌Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期间差异无显著性(P>0.05)。COX-2在Ⅰ~Ⅱ期宫颈鳞癌表达与淋巴结转移有关(P<0.05)。bcl-2在宫颈原位癌、宫颈鳞癌Ⅰ~Ⅱ期、Ⅲ期癌细胞胞浆中未着色,但在癌间质有不同程度染色。bcl-2在宫颈癌及正常宫颈组织组之间差异有显著性(P<0.05)。宫颈原位癌、宫颈癌Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期间差异无显著性(P>0.05)。bcl-2与癌细胞分化程度及淋巴结转移无关(P>0.05)。COX-2与bcl-2在宫颈鳞癌组织中表达无相关性(P>0.05)。结论:COX-2和bcl-2蛋白在正常宫颈组织中均不表达。COX-2在宫颈鳞癌中的表达与临床分期和病理分级无关,与淋巴结转移有关。二者在宫颈癌中的表达无相关性。检测宫颈鳞癌组织中COX-2的表达有利于早期诊断及估计宫颈癌患者的预后。     

分析人雄激素受体基因判断子宫颈癌及子宫颈上皮内瘤变组织的克隆状态

目的　通过分析人雄激素受体 (humanandrogenreceptor,HUMARA)基因 ,检测宫颈癌及宫颈上皮内瘤变 (CIN)组织的X染色体失活方式 ,从而判断其克隆状态。方法　对 2 6例宫颈浸润性癌 (宫颈癌组 )、31例CIN(CIN组 )及 33例正常宫颈 (正常宫颈组 )组织标本 ,提取其DNA ,经甲基化敏感性限制性核酸内切酶HhaⅠ消化后 ,对HUMARA基因片段行PCR扩增并电泳 ,通过观察电泳条带判断其克隆状态。结果　HUMARA基因的杂合率为 89%。宫颈癌组、CIN组及正常宫颈组组织的单克隆率分别为 92 %、38%和 10 % ,宫颈癌组分别与CIN组及正常宫颈组比较 ,差异均有极显著性 (P <0 0 0 1) ,CIN组与正常宫颈组比较 ,差异有显著性 (P =0 0 12 )。宫颈癌组中 ,临床分期Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期组织的单克隆率分别为 6 / 7、90 % (9/ 10 )及 7/ 7,两两比较 ,差异均无显著性 (P >0 0 5 )。CIN组中 ,CINⅠ、Ⅱ、Ⅲ组织的单克隆率分别为 2 0 % (2 / 10 )、38% (3/ 8)及 6 3% (5 / 8) ,呈逐级增高趋势 ,但各级CIN间比较 ,差异均无显著性 (P >0 0 5 )。结论　宫颈癌是癌细胞克隆性增殖的结果。对单克隆状态的CIN应给予积极干预或严密随访。HUMARA基因分析可能成为研究宫颈癌发生机制的一种分子生物学检测手段。