高效液相色谱法测定聚乳酸中乳酸单体残留量

目的通过高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)测定聚乳酸材料中乳酸单体的残留量,完善此类材料的质量评价方法。方法用三氯甲烷溶解聚乳酸材料样品后,加入等体积磷酸二氢钾水溶液(20 mmol/L,pH=2.87)涡旋振荡,静置分层后取上清液,采用C18 Synergi4u Hydro-RP 80A色谱柱,进样20μL,以流速0.6 m L/min,磷酸二氢钾水溶液为流动相,柱温30℃,紫外检测波长210 nm,外标法定量并进行方法学研究,包括液相色谱系统适应性、线性范围、检出限、定量限、回收率。结果本方法中理论塔板数为10660,拖尾因子为1.32,分离度为3.81,重复性相对标准偏差为0.54%(n=5),乳酸在浓度1.05~105μg/m L范围内与峰面积保持良好的线性关系(r=0.999979),检出限为0.42μg/m L,定量限为1.05μg/m L,萃取平均回收率为94.76%(n=6),其相对标准偏差为3.04%。聚乳酸样品中乳酸单体平均残留量为144.17μg/g。结论高效液相色谱法测定聚乳酸中乳酸单体残留量具有良好的线性范围,准确度高,重复性好,萃取回收率较高且操作简单,可用于聚乳酸材料中乳酸单体残留量测定。     

高效液相色谱法测定赤芍中芍药苷的含量

目的 建立赤芍中芍药苷的含量测定方法,探讨不同溶液提取对芍药苷含量的影响.方法 采用甲醇和70%乙醇超声提取样品,用Agileni1100型高效液相色谱仪,Agilent EeliPse XDB C18(4.6mm×250mm,5靘)色谱柱,柱温:25℃,流动相:V(乙腈):V(0.1%磷酸溶液)=14:86,流速:1.0ml/min,检测波长:230nm,进样体积10μL.结果 芍药苷进样量在0.27μg～1.60μg范围内与峰面积呈良好线性关系,R=0.9998;平均回收率为100.34%,RSD=0.46%.乙醇提取液中芍药苷的平均含量为0.0700μg/ml(n=3),甲醇提取液中芍药苷的平均含量为0.0462μg/ml(n=3).结论 采用70%乙醇作为溶液提取赤芍芍药苷得率高;本实验所建立的方法重复性良好,准确度较高,可用于赤芍中芍药苷的质量控制.     

羧甲基交联淀粉止血颗粒中环氧氯丙烷残留量的测定

本研究建立了顶空气相色谱法测定羧甲基交联淀粉止血颗粒中环氧氯丙烷残留量的方法。使用Agilent DB-624(30 m×530μm×3.0μm)毛细管色谱柱,柱温为程序升温(50℃,保持2 min;50℃/min升温至180℃,保持5 min),进样口温度为200℃,检测器温度为250℃,载气为N_(2,)流速为3 mL/min,分流比为3∶1。精密度相对标准偏差为1.22%;环氧氯丙烷的浓度为0.84～6.72μg/mL,其峰面积与浓度线性关系良好,相关系数为0.9997;检测限为0.336μg/mL,定量限为0.84μg/mL;平均回收率为101.7%(n=9)。该方法重现性好,灵敏度高,简单准确。     

反相高效液相色谱法测定血清中的5-羟色胺

建立了一种简便、快速测定血清中5-羟色胺的反相高效液相分析方法。采用的色谱柱为Bondapak C18不锈钢柱(5μm,250mm×4.6mmi.d.),流动相为:甲醇—水—乙酸(70:30:0.1 V/V),流速:1ml/min,荧光监测器,激发波长278nm,发射波长333 nm。结果表明:该方法线性关系良好(r=0.99992),5-羟色胺测定的线性范围为0.10~2.00μg/mL,最低检测限为0.02μg/mL(S/N=3)。5-羟色胺在血清样品中的加标回收率为92.37%~100.12%。该测定方法结果准确,可用于临床研究。     

HPLC测定百炎净合剂中磺胺甲噁唑和甲氧苄啶含量

目的建立用高效液相色谱法(HPLC)对医院制剂百炎净合剂中磺胺甲恶唑(SMZ)和甲氧苄啶(TMP)进行含量测定。方法用色谱柱Waters Spherisorb ODSI 5μm(250*4.6mm)No.2104390911D,以水-三乙胺-乙腈(800:1:200)(以冰醋酸调节pH5.3)为流动相,检测波长为230nm,流速1.0ml/min。结果两种成分能很好分离;SMZ和TMP的线性范围分别为8～64μg/mL(r=0.9992,n=5),1.6～13ug.mL(r=0.9999,n=5);平均回收率分别为99.7%(RSD=1.6%,n=5)和99.6%(RSD=1.8%,n=5)。结论方法简便,快速准确,重现性好,适用于该复方制剂中两种有效成分含量的同时测定。     

高效液相色谱法测定赤芍中芍药苷的含量

目的建立赤芍中芍药苷的含量测定方法 ,探讨不同溶液提取对芍药苷含量的影响。方法采用甲醇和70%乙醇超声提取样品,用Agileni1100型高效液相色谱仪,Agilent Eelipse XDBC18（4.6mm×250mm,5μm）色谱柱,柱温：25℃,流动相：V（乙腈）：V（0.1%磷酸溶液）=14：86,流速：1.0ml/min,检测波长：230nm,进样体积10μL。结果芍药苷进样量在0.27μg～1.60μg范围内与峰面积呈良好线性关系,R=0.9998;平均回收率为100.34%,RSD=0.46%。乙醇提取液中芍药苷的平均含量为0.0700μg/ml（n=3）,甲醇提取液中芍药苷的平均含量为0.0462μg/ml（n=3）。结论采用70%乙醇作为溶液提取赤芍芍药苷得率高;本实验所建立的方法重复性良好,准确度较高,可用于赤芍中芍药苷的质量控制。     

离子色谱法测定血液透析液中乳酸根的含量

目的：建立离子色谱法测定血液透析液中乳酸根的含量测定方法并进行方法验证,为乳酸盐透析液的质量控制和市场监管提供重要的技术参考。方法用DIONX ICS?1100离子色谱仪进行检测,色谱柱为AS9?HC柱（4 mm×250 mm）,淋洗液为9 mmol／L碳酸钠,流速1 mL／min,电导检测器,外标法定量。结果乳酸根的线性范围为5?03～80?54μg／mL（ r＝0?9999）,定量限为0?1007μg／mL,平均加样回收率为101?4％。结论该方法准确,分析时间短,样品无需前处理,不受样品中其他组分的干扰,可用于血液透析液中乳酸根的含量测定。     

锌、铜、镁含量在ICP及FGR母体血清中含量的变化

目的探讨妊娠期肝内胆汁淤积症(ICP)及胎儿生长受限(FGR)患者血清中锌、铜、镁含量的变化。方法以原子吸收分光光度法分别测定35名ICP患者、11例FGR患者及20例正常妊娠女性血清锌、铜、镁浓度。结果ICP患者血清锌含量为0.40±0.16μg/mL,较对照组明显降低(P0.05),铜含量1.88±0.43μg/mL,镁含量0.66±0.73μg/mL,均与对照组无显著性差异(P0.05);FGR组铜含量2.31±0.53μg/mL,较对照组明显升高,锌含量为0.46±0.13μg/mL,镁含量为0.47±0.44μg/mL,均较对照组明显降低,有显著性差异(P0.05);ICP组铜含量较FGR组低,有显著性差异(P0.05),而锌、镁含量两组相比较无显著性差异(P0.05)。结论针对孕妇血清锌、铜、镁含量变化进行饮食调整对孕期健康有重要意义。     

PTA球囊扩张导管中2-氯乙醇残留量的评价方法

目的建立气相色谱-质谱(GC-MS)联用的方法分析ECH残留量,以便对PTA球囊扩张导管中的ECH残留量水平进行安全性评价。方法以丙酮为溶剂,超声提取样品中的2-氯乙醇。色谱柱ZB-624,进样口温度180℃,分流比1∶1,载气为高纯He,流速1.5 g/m L。升温条件:50℃(1 min),5℃/min升至100℃。质谱条件:离子源温度230℃,接口温度250℃,电子能量70 e V。以保留时间和质谱全扫描方式进行定性分析,质荷比m/z 35~500。选择离子监测模式外标法定量,定量离子m/z=43。结果该方法理论塔板数在56753以上,在1.44~22.96μg/m L浓度范围,线性关系良好,r=0.999,平均加样回收率为99.1%(n=5,RSD5%),检出限为0.41μg/m L。样品中未检出ECH残留。结论建立的基于GC-MS的2-氯乙醇残留量的分析方法灵敏、快速、准确,可供企业对PTA球囊扩张导管产品的质量控制和检测同行参考。     

叶酸对宫颈癌细胞生物学行为及自噬的影响

目的探讨叶酸对宫颈癌细胞增殖、迁移和凋亡及细胞自噬的影响。方法以宫颈癌细胞株SiHa作为研究对象,用不同质量浓度梯度叶酸培养SiHa细胞,其中中等剂量10.0μg/mL为对照组,0.1μg/mL和1.0μg/mL为低叶酸组,100.0μg/mL和1 000.0μg/mL为高叶酸组;用CCK-8法检测细胞的增殖活性,划痕实验检测细胞的迁移能力(划痕宽度占初始划痕宽度的比值:划痕宽度比值),流式细胞仪检测细胞的凋亡率;Western blot检测Beclin1、LC3和p62蛋白的表达水平。结果 CCK-8法结果显示,质量浓度100.0μg/mL、1 000.0μg/mL叶酸明显抑制SiHa细胞增殖活性(0.79±0.01、0.52±0.09 vs 1.24±0.03),且随着叶酸浓度增加,对宫颈癌SiHa细胞增殖的抑制作用越强。细胞划痕实验结果显示,随着叶酸质量浓度的增加,培养48 h的划痕宽度比值增加,叶酸质量浓度为1 000.0μg/mL时划痕宽度比值比原始划痕宽度还宽且随着叶酸质量浓度的增加而增加(1.25±0.03 vs 0.59±0.06),对SiHa细胞迁移的抑制作用更强。细胞凋亡实验结果显示,100.0μg/mL、1 000.0μg/mL质量浓度的叶酸显著提高SiHa细胞的凋亡率(12.74%±5.12%、26.62%±4.80%vs 6.80%±2.30%),且随着叶酸质量浓度增加,细胞凋亡率越大;随叶酸质量浓度的增加(≥1.0μg/mL),Beclin1、LC3蛋白表达水平升高,p62蛋白表达水平下降。结论叶酸质量浓度≥100.0μg/mL抑制宫颈癌SiHa细胞的增殖及迁移,促进其凋亡,且具有剂量依赖性,可能与细胞自噬的激活有关。     

Simultaneous Determination of Contents of Three Active Components in Jiejia Tincture by HPLC Method

The objective of the study was to determine the contents of three active components in Jiejia tincture by establishing HPLC method. Test articles were prepared by ultrasonic extraction. Separation was performed using a Kromasil C18 (250 mm × 4.6 mm, 5 µm) chromatographic column, and gradient elution was performed with acetonitrile-0.3% phosphoric acid solution as the mobile phase at a volumetric flow rate of 0.80 mL/min. The contents of catechin, baicalin and berberine in Jiejia tincture were determined at the wavelength of 276 nm and a column temperature of 30 □. The results revealed that catechin showed a good linear relationship at the range of 100∼800 µg/mL (r=0.9997); baicalin showed a good linear relationship at the range of 15∼120 µg/mL (r=0.9996), and berberine at the range of 7∼56 µg/mL (r=0.9995). Their average recovery rates were 99.67% (RSD 1.01%, n=6), 98.7% (RSD 1.93%, n=6) and 100.5% (RSD 2.88%, n=6) respectively. The study concluded that the high-performance liquid chromatography established in this study was simple, accurate and reproducible, and can also be used in the determination of catechin, baicalin and berberine contents in Jiejia tincture.     

Determination of an arylether antiarrhythmic and its N-dealkyl metabolite in rat plasma and hepatic microsomal incubates using liquid chromatography-tandem mass spectrometry

A method was developed and validated for the quantification of (+/-)-trans-[2-morpholino-1-(1-naphthalene-ethyloxy]cyclohexane monohydrochloride (RSD1070) and its N-dealkyl metabolite in rat plasma and hepatic microsomal incubates. Chromatographic separations were achieved using reversed-phase high-performance liquid chromatography coupled with positive ion electrospray ionization and detection by tandem mass spectrometry. The assay was linear from 2.5 to 100 ng/ml and this range was used for validation. Inter- and intra-assay variability (n=6), extraction recovery, and stability in plasma were assessed. The estimated limit of quantitation was in the range 2.5-3 ng/ml for both analytes in rat plasma. The analytical method was used in a pharmacokinetic study of RSD1070 in rats after a single i.v. bolus of 12 mg/kg.     

HPLC法测定米铂白蛋白结合型纳米制剂中米铂的含量

目的 建立米铂白蛋白结合型纳米制剂中米铂含量测定的高效液相色谱(HPLC)法.方法 采用HPLC测定米铂白蛋白结合型纳米制剂中米铂的含量.色谱条件:辛烷基硅烷键合硅胶色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),甲醇-乙腈-水(91:1:8)洗脱,流速1.0 ml/min,检测波长210 nm,柱温30℃,进样量20μ...     

HPLC法测定癌痛消方及其拆方中松脂醇二葡萄糖苷和芍药苷的含量

目的 建立癌痛消方及其拆方中松脂醇二葡萄糖苷和芍药苷的测定方法。方法 采用十八烷基硅烷键合硅胶柱（Inertsil ODS-3柱 250×4.6 mm,5 μm）;流动相:乙腈-0.1%磷酸（15∶85）为流动相,进行梯度洗脱;检测波长:230 nm（0~16 min,松脂醇二葡萄糖苷）,277 nm（16~30 min,芍药苷）;流速:1.0 ml/min;柱温:30oC。结果 癌痛消-补虚组中松脂醇二葡萄糖苷在1.0~5.0 μg范围内呈现良好的线性关系,r=0.9992,平均回收率为97.23%（RSD=1.31%,n=6）;癌痛消-抑癌组中芍药苷在1.0~5.0 μg范围内呈现良好的线性关系,r=0.9993,平均回收率为97.08%（RSD=1.38%,n=6）;癌痛消-全方中松脂醇二葡萄糖苷在1.0~5.0 μg范围内呈现良好的线性关系,r=0.9992,平均回收率为98.01%（RSD=1.30%,n=6）;癌痛消-全方中芍药苷在1.0~5.0μg范围内呈现良好的线性关系,r=0.9993,平均回收率为96.97%（RSD=1.54%,n=6）;结论 本方法专属性强,准确度高,重现性良好,可用于癌痛消方的质量控制。     

左旋加替沙星的高效液相色谱测定方法的建立

目的建立左旋加替沙星的HPLC测定方法。方法色谱柱:UhimateXB-C18柱(5μm,4.6 mm×250 mm);流速:1.0 mL/min;柱温:29℃;流动相:甲醇:0.08 mol/L磷酸二氢钾溶液为40:60,磷酸调节pH为3.87);检测波长:285nm;进样量:20μL。结果左旋加替沙星在浓度为10.3～51.5 μg/mL时线性关系良好,r=0.9995,平均回收率为98.0%;RSD为1.2%(n=6)。保留时间为9.887。结论该方法简单、准确,可作为开发左旋加替沙星制剂的质量控制。     

基于高效液相色谱法的聚乳酸-羟基乙酸共聚物体外降解产物的测定

目的建立准确、不受基质干扰的测定聚乳酸-羟基乙酸共聚物[poly(lactic-co-glycolic acid),PLGA]降解液中降解产物乙醇酸和乳酸的分析方法并进行方法验证,为PLGA类产品的降解液的质量分析提供重要的技术参考。方法通过优化色谱柱、色谱条件和不同p H值的乳酸和乙醇酸标准溶液的色谱峰面积的比较等方法,确定色谱条件和样品降解液预处理方法,用Waters 1525高效液相色谱仪进行检测,紫外检测器检测波长210 nm,外标法定量。结果亲水性C18柱,20 mmol/L的KH2PO4水溶液为流动相(p H=2.8)和0.6 m L/min的流速等色谱条件可使降解液中的乙醇酸和乳酸得到良好的分离;同时,样品降解液的p H值宜调节至2.8~3.5范围内以对降解液中的乙醇酸和乳酸进行准确定量。此外,方法学验证结果显示,降解液中乙醇酸的线性范围为2.500~250.0μg/m L(r=0.9999),定量限为0.48μg/m L,加标回收率为99.4%~102.6%;降解液中乳酸的线性范围为2.642~264.2μg/m L(r=0.9999),定量限为1.0μg/m L,加标回收率为97.9%~103.2%。结论该方法简便、准确,实验成本较低,且不受磷酸盐缓冲液p H值的影响,稳定性好,可用于聚乳酸-羟基乙酸共聚物材料体外降解的降解产物的含量分析。     

HPLC法测定对乙酰氨基酚片的含量

目的 建立HPLC法测定对乙酰氨基酚片的含量。方法 色谱柱为Agilent Eclipse XDB-C18柱（4.6 mm×150 mm,5 μm）;流动相为甲醇-水（20∶80）,流速为1.0 ml/min,检测波长为244 nm,柱温30 ℃。结果 对乙酰氨基酚浓度在10.16~30.48 μg/ml范围内线性关系良好,r=0.9998（n=5）;平均加样回收率为100.04%,RSD=0.95%（n=6）。结论 HPLC法操作简便、结果准确、重复性好、专属性强,适用于测定对乙酰氨基酚片中对乙酰氨基酚的含量。     

Determination of 2-(2-nitro-4-trifluoromethylbenzoyl)-1,3-cyclohexanedione in plasma by direct injection into a coupled column liquid chromatographic system.

The chemical substance 2-(2-nitro-4-trifluoromethylbenzoyl)-1,3-cyclohexanedione (NTBC) is in clinical use for the treatment of hereditary tyrosinemia type 1. In the present study, the plasma concentration of NTBC was determined by a coupled column liquid chromatographic method. A 20-microl volume of plasma was diluted with phosphate buffer, pH 2, and injected into a small precolumn (BioTrapAcid C18) with a mobile phase containing sulfuric acid. The precolumn was based on the restricted access principle, i.e., retention of NTBC within the lipophilic pores, while polar and large endogenous compounds were eluted with the void volume. NTBC was transferred to the analytical column using a mobile phase with a high content of acetonitrile. The compound was monitored by UV detection at 278 nm. The standard curve was linear between 0.3 and 69 microM, and the between-day precision (RSD) was 3% (n=6 days) at 13.8 microM and 14% (n=6 days) at 0.3 microM NTBC in plasma. The quantitation limit was approximately 0.3 microM using 20 microl of plasma.