淡色库蚊乙酰胆碱酯酶Ι基因单链构象多态性分析

为了解不同地区淡色库蚊样本乙酰胆碱酯酶Ι基因(ace1)多态性,探讨单链构象多态性分析(SS-CP)技术在蚊虫抗性分子监测中应用的可行性,本文采集浙江省杭州、舟山、湖州、金华等市区淡色库蚊样本,对其进行ace1基因PCR扩增及SSCP分析。结果显示,浙江省淡色库蚊现场品系以及敏感品系ace1基因片段共存在2个SSCP型,分别命名为ace1-A型(杭州、舟山、湖州现场品系以及敏感品系)和ace1-B型(金华现场品系)。经序列测定,SSCP型ace1-A和ace1-B之间存在两个碱基的差异。实验证明PCR-SSCP可快速高效分析淡色库蚊ace1基因的多态性,适于蚊虫抗性分子监测使用。     

淡色库蚊和缺乏库蚊基因组多态性DNA的研究

本文应用随机引物扩增多态性ＤＮＡ聚合酶链反应技术（ＲＡＰＤ－ＰＣＲ）筛选出３种引物，对淡色库蚊，致乏库蚊的细胞基因组ＤＮＡ进行扩增，分别扩增出不同条带状数和分子大小的多态ＤＮＡ图谱，两种库蚊细胞的基因组ＤＮＡ扩增产物除了有相同分子大小的ＤＮＡ带外，还有一半条带为各自独特的条带，用淡色库蚊成蚊作ＲＡＰＤ－ＰＣＲ的扩增带与相应的细胞株产生的主要条带相符，实验结果表明，此技术方法简便，快速，精确，可用于     

浙江省淡色库蚊种群密度和抗药性研究

目的了解浙江省淡色库蚊种群密度变化情况和对常用杀虫剂的抗药性水平,为蚊虫防制提供依据。方法采用诱蚊灯法检测淡色库蚊密度,采用幼虫浸渍法检测淡色库蚊对常用杀虫剂的抗药性水平。结果淡色库蚊全年密度呈现单峰曲线变化,高峰在6月,此时各种生境中以农户的淡色库蚊平均密度最高;各地淡色库蚊种群对拟除虫菊酯类杀虫剂的抗性在1.31～20.43倍之间,对有机磷杀虫剂的抗性在1.88～10.14倍之间,对氨基甲酸酯类杀虫剂抗性在0.82～4.96倍之间。大部分现场淡色库蚊种群对拟除虫菊酯类杀虫剂产生了抗药性。结论 6月是浙江省淡色库蚊成蚊密度的高峰,也是防制的关键月份;针对蚊虫对拟除虫菊酯类杀虫剂普遍产生抗药性的问题,应该提倡蚊虫的综合防制,延缓蚊虫抗药性的发展。     

浙江省不同地区淡色库蚊杀虫剂抗药性监测

目的对浙江省不同地区淡色库蚊抗药性水平进行调查,了解淡色库蚊的抗性表型与有关基因特征及其相关性,为浙江省蚊虫控制提供科学依据。方法淡色库蚊抗药性表型采用幼虫浸渍法;对浙江省4个区域的淡色库蚊进行抗药性测定,基因型研究采用PCR扩增后测序确定。结果不同地区淡色库蚊抗药性表型差异较大,对高效氯氰菊酯、溴氰菊酯、丙烯菊酯、敌敌畏、三氯杀虫酯、残杀威的半数致死浓度（LC50）分别在同类药物抗性差异变化范围为2．1～42．8倍,其中以高效氯氰菊酯抗性差异最高。舟山种群拟除虫菊酯类药物抗性水平明显高于其他地区,其拟除虫菊酯抗性相关基因YSSC基因具有较高多态性,部分样本V3$C基因内含子区域出现3个紧邻的大小分别为20、53和40bp的片段缺失。结论浙江省不同地区淡色库蚊抗性表型差异较大,抗性基因监测发现舟山种群kdr基因存在较复杂的多态性,是否为导致其抗性表型变化的直接原因还有待进一步研究证实。     

5种食源致病菌16SrRNA基因单链构象多态性分析

目的 对5种常见食物中毒致病菌16SrRNA基因单链构象多态性(Single-strand-conformationpolymorphism,SSCP)进行分析,探讨该技术在食物中毒致病菌快速鉴别诊断中的可能作用.方法 5种常见食源性致病菌标准株增菌后,提取DNA,通过特异引物对菌株的16SrRNA序列的可变区进行扩增,扩增产物进行SSCP分析.结果 各菌株均分离出两条或以上特异性条带,条带间距离及相对位置差异明显,并有良好的重复性.该方法的灵敏度可达10～15个鼠伤寒沙门菌细胞.结论 5种常见食物中毒致病菌16SrRNA基因单链构象多态性具有种属特异性,PCR-SSCP分析法有助于快速、准确的从基因水平上对食物中毒致病菌进行分析检测.     

辽宁省淡色库蚊抗药性研究

目的：探讨辽宁省不同地区淡色库蚊的抗药性状况，以期合理使用杀虫剂。方法：采用浸渍法测定淡色库蚊幼虫的ＬＣ５０。结果：各地试虫对３种杀虫剂的敏感性有差异，采自朝阳、盘锦者对溴氰菊酯和敌敌畏较敏感，采自阜新、营口者具一定抗药性，二者对三氯杀虫酯的敏感性相差６倍。结论：抗药性的产生与用药史和使用频度有关；对溴氰菊酯应控制使用，不同地区对敌敌畏可区别使用。     

陕西省淡色库蚊抗药性研究

目的了解陕西省不同地区淡色库蚊对常用杀虫剂的抗性水平。方法采用区分剂量法测定淡色库蚊幼虫对4种杀虫剂的24 h死亡率;采用半数致死浓度（LC50）法测定淡色库蚊幼虫对8种杀虫剂的LC50。结果区分剂量法测定结果显示,除榆林市淡色库蚊对氯菊酯属初步抗性群体外,其余均为抗性群体;LC50测定结果显示,5个市的淡色库蚊对高效氯氰菊酯、氯菊酯、溴氰菊酯、氯氰菊酯、DDT、DDVP、双硫磷、残杀威的LC50分别为0.001 82～0.012 24、0.008 16～0.094 19、0.000 58～0.005 59、0.002 76～0.020 17、0.100 96～1.296 86、0.144 11～0.512 40、0.001 47～0.007 06、0.234 60～1.182 37 mg/L。宝鸡市淡色库蚊的抗药性普遍较高,除溴氰菊酯、氯氰菊酯、双硫磷3种药剂外,其余抗性倍数均在全省最高,而榆林市淡色库蚊的抗药性则普遍较低,除双硫磷和残杀威外,其余各药抗性倍数均为全省最低。结论蚊虫抗药性的产生与杀虫剂的使用密切相关,在创建卫生城市、卫生县城工作中要科学合理用药,开展抗药性监测,以减缓蚊虫抗药性的产生。     

淡色库蚊生物学的实验研究

在实验室条件下，对淡色库蚊进行了生物学的观察研究，得出该蚊的生殖营养周期为６．７天，平均每块卵筏含卵９４．２粒，卵的孵化率、幼虫及蛹的存活率均高达９０％以上；成蚊平均寿命为２７天，羽化后第２天即可交配，５天后受精率达５０％以上；１只雄蚊可与多只雌蚊有效交配，但在小空间范围内则不易交配；平均每蚊产卵３４１．０７粒，净增殖率为１７０．５３０３．内禀增长率为０．１９９５；３０天内种群增殖高达４００倍，生命力、繁殖力极其旺盛。根据结果，对该蚊种群传播丝虫病和防治措施加以讨论     

济宁市淡色库蚊抗药性发展趋势研究

目的：了解纹虫对常用杀虫剂抗药性发展趋势。方法：在济宁市区采集淡色库蚊,采用区分剂量法和ＷＨＯ浸渍法测定每种杀虫剂致蚊虫的死亡率和半数致死浓度（ＬＣ５０）,并计算抗性指数。结果：淡色库蚊对ＤＤＶＰ和溴氰菊酯抗药性较强,ＤＤＶＰ抗性指数由８．３０倍上升到２０．６３倍,溴氰菊酯波动在１３．０９～４４．２１倍之间,对ＤＤＴ由１．１１倍上升到１１．５３倍,对马拉硫磷由１．７６倍上升到６．１６倍,     

上海市金山区淡色库蚊抗药性研究

关于蚊类的抗药性时有报道。淡色库蚊(Culex pipienspallens)是金山区的优势蚊种。为了解金山区淡色库蚊抗药性,我们于2002年对3种杀虫剂做了敏感性测定,以期在杀虫剂的合理使用上有参考作用。1 材料与方法1.1试剂 已标定含量的药剂80%敌敌畏、95％氯氰菊酯和98％溴氰菊酯,均系上海市疾病预防控制中心提供。1.2 试虫 野外虫种,采集滋生在城区内的淡色库蚊卵块,在本站养虫室饲养,测试虫态为子1代3龄末4龄初幼虫。1.3 测试方法采用WHO幼虫浸渍法,用吸幼管挑选3龄     

鲁西南湿地蚊虫分布及淡色库蚊抗药性调查

目的通过对鲁西南湿地蚊媒进行种群调查和淡色库蚊抗性测定,以便更好地应对该地区蚊媒防治。方法采用人饵帐诱捕蚊法对成蚊种群进行调查,采用幼虫浸渍法测定淡色库蚊幼虫对5种杀虫剂的抗性。结果共捕获成蚊16 926只,经鉴定共5属21种。其中菏泽浮龙湖湿地共4属16种、济宁太白湖湿地共5属18种、枣庄红荷湿地共5属14种。3个监测点的淡色库蚊对敌敌畏、残杀威、三氯杀虫酯、溴氰菊酯和氯氰菊酯的抗性倍数分别为5.51～13.67、2.73～4.10、0.84～2.33、32.75～80.25、35.83～100.96。结论应及时开展鲁西南湿地蚊虫的综合治理工作。     

杭州市淡色库蚊对杀虫剂的抗性及抗性基因研究

目的了解杭州市淡色库蚊对杀虫剂的抗性及抗性基因,为蚊虫防制提供依据。方法浸液法和PCR技术。结果杭州市淡色库蚊对溴氰菊酯的抗性倍数为9．10倍,敌敌畏为4．52倍,三氯杀虫酯为2．77倍,残杀威为2．04倍,高效氯氰菊酯、丙烯菊酯未形成抗性;经PCR扩增,检测到11个与抗性相关的基因,其中P450类1个,钠离子通道基因2个,酯酶基因2个,乙酰胆碱酯酶受体基因1个,超氧化物歧化酶基因1个,其他相关基因4个。结论杭州市淡色库蚊对溴氰菊酯和敌敌畏产生了抗性;PCR检测,存在11个抗性相关基因。     

浦东国际机场致倦库蚊和淡色库蚊的调查研究

目的了解致倦库蚊和淡色库蚊在浦东机场的分布与活动规律。方法帐诱法、灯诱法、人诱法、捞勺法和人工小时法。结果致倦库蚊和淡色库蚊是浦东国际机场的优势蚊种,4-11月均有危害;灯诱法调查,季节消长呈坡型,蚊虫于4月出现,5-6月达到高峰,10-11月逐渐减少至消失;蚊虫活动（帐诱法）主要在晚上,黄昏时有群舞习性,活动高峰为日落后1～4h,白天基本不活动;刺叮（人诱法）高峰时间为21：00,叮人频率最高为42次/15min;入室蚊虫以19：00-22：00为多,入室率最高为9只/15min;幼虫主要孳生于池塘、水坑、洼地、下水道和容器等污染或干净的静止水体中。结论致倦库蚊和淡色库蚊是浦东国际机场危害人类的常见蚊种,其活动规律的研究对媒介控制和虫媒病的预警提供了技术支撑。     

北京台湖地区淡色库蚊对3种常用杀虫剂的抗药性及kdr基因多态性研究

目的了解北京台湖地区淡色库蚊对常用杀虫剂的抗药情况和当地淡色库蚊kdr基因多态性,为该地区淡色库蚊防治提供科学指导。方法采用幼虫浸渍法对氯菊酯、残杀威和毒死蜱进行抗药性生物检测,以等位基因特异性PCR(AS-PCR)为检测方法确定当地淡色库蚊kdr基因型的频率。结果当地淡色库蚊对氯菊酯、残杀威和毒死蜱的抗性系数分别为15.9、4.2和3.6;当地淡色库蚊中kdr基因存在一种突变(L1014F型),突变基因占基因总数的25.7%。结论北京台湖地区的淡色库蚊已对氯菊酯产生较强抗性,建议在以后的防治工作中通过杀虫剂的复配和交替用药达到蚊虫防治目的。     

安阳市淡色库蚊的抗药性调查研究

目的了解淡色库蚊对常用杀虫剂的抗性现状，指导合理用药。方法浸渍法。结果安阳市淡色库蚊对DDVP、马拉硫磷、溴氰菊酯、氯氰菊酯的LC50分别为0．802 9、0．161 6、0．006 4、0．0086mg/m^3，与标准敏感品系相比，相对抗性倍数分别是18．7、2．2、33．7、29．8。结论安阳市的淡色库蚊对上述4种药物均产生了不同程度的抗性，对溴氰菊酯的抗性最高，其次是氯氰菊酯，对马拉硫磷的抗性最低，尚处敏感水平。     

淡色库蚊幼虫饲料的比较研究

笔者选用11种饲料配方,观察对淡色库蚊幼虫生长发育的影响。结果显示,11种饲料配方由优至劣的排列顺序是:肝粉、肝粉 酵母粉(1∶2)、肝粉 酵母粉(1∶4)、肝粉 炒面粉(1∶2)、酵母粉、肝粉 妙面粉(1∶4)、酵母粉 炒面粉(1∶2)、酵母粉 炒面粉(1∶4)、蛋黄粉、炒面粉、花生饼粉。     

南京地区淡色库蚊抗药性调查研究

目的了解南京市淡色库蚊幼虫对常用杀虫剂的抗性现状,为制定防治对策提供科学依据。方法幼虫浸渍法。结果南京市淡色库蚊幼虫对敌敌畏产生中等抗性,LC50为0．2728mg／L;对高效氯氰菊酯产生低抗,LC50为0．0010mg／L,对溴氰菊酯、双硫磷、仲丁威均敏感,LC50分别为0．0018、0．0008、0．0825mg／L。结论在南京蚊虫防治中,应减少敌敌畏、高效氯氰菊酯的使用,增加溴氰菊酯、双硫磷等杀虫剂的使用;加强淡色库蚊幼虫抗药性监测工作,合理使用杀虫剂,预防和延缓淡色库蚊幼虫抗药性的产生与发展。