氟对体外培养人牙乳头细胞分泌I型胶原的影响

目的　了解氟对体外培养人牙乳头细胞分泌I型胶原的影响。方法　对人牙乳头细胞体外培养 ,分别给予 0 .0 g/L、0 .2× 10 -6g/L、1.0× 10 6g/L、5 .0× 10 6g/L、2 5 .0× 10 -6g/L氟处理 ,采用Westernblot方法分析氟对细胞培养外I型胶原的影响。结果　体外培养的人牙乳头细胞合成Ⅰ型胶原可以分泌Ⅰ型胶原。 0 .0g/L、0 .2× 10 -6g/L、1.0× 10 6g/L、5 .0× 10 6g/L氟对细胞外Ⅰ型胶原量无显著差异 (P >0 .0 5 ) ;2 5 .0× 10 -6g/L氟处理组细胞外I型胶原量较其它组高 (P <0 .0 5 )。结论　过量氟可能抑制细胞外I型胶原降解     

TGF—β对人牙乳头间充质细胞碱性磷酸酶的影响

目的： 探讨ＴＧＦ－ β对人牙乳头间充质细胞碱性磷酸酶（ＡＬＰａｓｅ） 的影响。方法：采用酶动力学方法，测定不同浓度的ＴＧＦ－ β在不同时间内对体外培养的人牙乳头间充质细胞ＡＬＰａｓｅ 的影响。结果：５μｇ／Ｌ 组促进细胞内ＡＬＰａｓｅ 活性；５０μｇ／Ｌ组抑制细胞内ＡＬＰａｓｅ 活性；ＴＧＦ－ β不影响细胞外ＡＬＰａｓｅ 活性。结论：ＴＧＦ－ β可调节人牙乳头间充质细胞碱性磷酸酶活性，在牙乳头间充质细胞分化和矿化过程中可能具有重要意义。     

釉基质蛋白对成骨细胞碱性磷酸酶和I型胶原合成的影响

目的 :观察釉基质蛋白 (EMPs)对成骨细胞碱性磷酸酶和I型胶原合成的影响 ,进一步探讨EMPs促进牙槽骨再生的机制。方法 :体外培养MC3T3 E1成骨细胞 ,在培养液中加入不同浓度的EMPs ,用酶动力学方法和MTT法作碱性磷酸酶 (ALP)比活性测定 ,同位素掺入结合细菌胶原酶消化法测定I型胶原的合成。结果 :EMPs能明显促进MC3T3 E1成骨细胞的碱性磷酸酶合成以及I型胶原合成。结论 :EMPs对成骨细胞的生物学活性有明显促进作用 ,提示这可能是EMPs促进牙槽骨再生的一个重要原因     

釉基质蛋白对成骨细胞碱性磷酸酶和Ⅰ型胶原合成的影响

目的观察釉基质蛋白(EMPs)对成骨细胞碱性磷酸酶和Ⅰ型胶原合成的影响,进一步探讨EMPs促进牙槽骨再生的机制.方法体外培养MC3T3-E1成骨细胞,在培养液中加入不同浓度的EMPs,用酶动力学方法和MTT法作碱性磷酸酶(ALP)比活性测定,同位素掺入结合细菌胶原酶消化法测定Ⅰ型胶原的合成.结果EMPs能明显促进MC3T3-E1成骨细胞的碱性磷酸酶合成以及Ⅰ型胶原合成.结论EMPs对成骨细胞的生物学活性有明显促进作用,提示这可能是EMPs促进牙槽骨再生的一个重要原因.     

尼古丁对牙乳头间充质细胞碱性磷酸酶活性的影响

目的：探讨尼古丁对牙乳头间充质细胞碱性磷酸酶的影响。方法：彩和酶动法用不同浓度尼古丁硫酸盐在不同时间内作用于牙乳头间充质细胞，观察细胞A值的改变。结果：尼古丁硫酸盐抑制了碱性磷缓酶活性，并且与浓度和时间呈正相关关系。结论：尼古丁可抑制牙乳头间充质细胞碱性磷酸酶的活性，可能对牙乳头间充 细胞伯分化和矿化产影响进一步影响牙轮发育。     

新生大鼠牙乳头细胞的体外培养和矿化特征

目的：观察体外培养的新生大鼠牙乳头细胞的生物学特征。方法：体外培养出生1d大鼠磨牙牙乳头细胞，进行组织学染色，透射扫描电镜观察。结果：体外培养的新生大鼠牙乳头细胞能形成细胞克隆，第3代细胞在含2mmol／L β-甘油磷酸钠、50mg／L抗坏血酸、10^-8moL/L地塞米松的培养液中培养7～8d后可呈现复层生长，培养14～16d后细胞结节中出现矿化，茜素红染色呈阳性反应；透射电镜观察细胞内出现大量含有致密小体的基质小泡样超微结构。结论：发育阶段较早的大鼠牙乳头细胞具有增殖和矿化能力。     

牙乳头细胞体外培养研究

在牙齿发育形成过程中，由神经嵴细胞迁移分化而来的牙乳头细胞，作为牙胚发育过程中唯一具有分化为成牙本质细胞的间充质细胞群体，扮演着重要的调节作用，受到口腔医学研究者的高度重视。由于体内原位研究的困难性，许多学者通过体外培养的方法来弥补这一缺憾。现将有关牙乳头细胞体外培养研究的资料综述回顾如下。１　牙乳头细胞培养类型和方法文献报告的牙乳头细胞体外培养主要有两种类型，一种是单层细胞培养，一种是组织器官培养。Ｋｏｌｌａｒ［１］在１９７２年就报道成功地进行了牙乳头细胞的单层培养，但未对细胞的表型特征进行描…     

人类牙乳头细胞的体外培养及细胞生物学性状研究

目的　体外分离培养人类牙乳头细胞,并对传代细胞的生物学特性进行研究。方法　选择3~4月胎龄 的自然流产人胚胎,分离牙乳头,组织块法培养人类牙乳头细胞并鉴定。观察细胞的生长特性,经Ⅰ型胶原、纤维 粘连蛋白和层粘连蛋白免疫细胞化学染色及细胞矿化诱导后的钙盐染色对细胞的生物学性状进行研究。结果　 分离培养的人类牙乳头细胞在体外生长良好,细胞及分泌基质中的Ⅰ型胶原、纤维粘连蛋白和层粘连蛋白表达阳 性。将培养细胞行矿化诱导后,细胞可形成钙化基质。结论　通过机械分离及贴壁法可获得人类牙乳头细胞,其 传代细胞在基质形成和矿化能力方面与体内人牙乳头细胞有相似性,有潜力作为牙组织工程的种子细胞。     

人牙本质涎蛋白对体外培养的人牙乳头间充质细胞增殖和碱性磷酸酶活性的影响

目的 :观察人牙本质涎蛋白对体外培养的人牙乳头间充质细胞增殖和碱性磷酸酶活性的影响。方法 :分对照组和实验组 ,对照组是转染不含目的基因的空白质粒 pcDNA3的培养上清 ,实验组是转染pcDNA3 -hDSP重组质粒的培养上清。取第 5代人牙乳头间充质细胞 ,接种于 96孔板 ,对照组 6孔 ,实验组 10孔 ,用MTT法检测hDSP对体外培养的人牙乳头间充质细胞增殖的影响 ,用碱性磷酸酶检测试剂盒检测hDSP对体外培养的人牙乳头间充质细胞碱性磷酸酶活性的影响。结果 :hDSP能明显抑制体外培养的人牙乳头间充质细胞增殖 (P <0 .0 1) ,但能促进细胞内和培养上清中碱性磷酸酶的分泌 (P <0 .0 1)。结论 :hDSP能促进人牙乳头间充质细胞的分化和矿化     

甲状旁腺激素对培养的人牙乳头间充质细胞碱性磷酸酶？…

目的：观察甲状旁腺激素（Ｐａｒｃｉｔｈｙｒｏｉｄ ｈｏｒｍｏｎｅ，ＰＴＨ）对人牙乳头间充质细胞内外碱性磷酸酶活性的影响。方法：酶动力学方法。结果；在观察期间（３－７ｄ），ＰＴＨ使人牙乳头间充质细胞内ＡＬＰ活性降低，而使细胞外ＡＬＰ活性增加，且有浓度依赖性。     

矿化液对体外培养的人牙囊细胞碱性磷酸酶活性的影响

目的：探讨矿化液对体外培养的人牙囊细胞中碱性磷酸酶表达的影响。方法：取12～13岁患者因正畸原因拔除的下颌第三磨牙牙囊，原代培养人牙囊细胞，将第5代细胞加入矿化液培养，应用碱性磷酸酶组织化学方法染色、碱性磷酸酶试剂盒检测人牙囊细胞中碱性磷酸酶的活性。结果：培养的牙囊细胞呈长梭形、不规则多角形。免疫细胞化学染色显示抗波形丝蛋白染色阳性。矿化液诱导7d，碱性磷酸酶染色呈阳性，碱性磷酸酶活性检测第3、5、7d明显升高，与对照组均有显著性差异。结论：矿化液能增强体外培养的人牙囊细胞中碱性磷酸酶的表达。     

激素和生长因子对人牙乳头细胞碱性磷酸酶活性的影响

目的：探讨激素和生长因子对人牙乳头细胞碱性磷酸酶活性的影响。方法：采用改良酶动力学的方法，测定不同浓度的１，２５（ＯＨ）２Ｄ３、胰岛素、ＥＧＦ及ＴＧＦ－β在不同时间内对体外培养人牙乳头细胞碱性磷酸酶活性的影响。结果：１，２５（ＯＨ）２Ｄ３对酶活性有增强作用，并与其浓度及作用时间呈正相关关系；胰岛素、ＥＧＦ和ＴＧＦ－β对酶有抑制作用，随作用时间延长，抑制越明显。结论：激素和生长因子对人牙乳头细胞的碱性磷酸酶作用不同，对人牙乳头细胞的生理功能可能有调节作用     

大鼠牙乳头细胞体外培养和矿化的实验研究

目的　观察体外培养的大鼠第一磨牙牙乳头细胞的生物学特征。方法　大鼠第一磨牙牙乳头细胞培养 ,免疫组织化学染色、钙盐染色。结果　培养的大鼠牙乳头细胞表达Ⅲ型胶原、纤维黏连蛋白、碱性磷酸酶 ,当细胞培养于含 5mmol/Lβ-磷酸甘油钠和 5 0 μg/mlL -维生素C的培养液中时 ,细胞可形成矿化的胞外基质。结论　培养的大鼠牙乳头细胞保留体内的某些特征 ,并可用于研究牙髓组织的钙化调节。     

体外培养的SD大鼠三种牙周细胞表达骨钙素和碱性磷酸酶的比较研究

目的：旨在研究SD大鼠牙周的类成牙骨质细胞、成骨细胞和牙周韧带成纤维细胞表达骨钙素和碱性磷酸酶的情况,探讨区分此三种细胞的方法。方法：体外分别培养12周龄SD大鼠第一磨牙牙周的上述三种细胞,利用计算机图像分析仪和免疫酶联仪对细胞分别进行骨钙素免疫组化染色和碱性磷酸酶活力定量分析。结果：骨钙素在类成牙骨质细胞和成骨细胞中呈强阳性表达,在牙周韧带成纤维细胞中几乎不表达。成骨细胞碱性磷酸酶活性最强,在成纤维细胞中适中,在类成牙骨质细胞中几乎无活性。结论：体外培养的SD大鼠三种牙周细胞表达骨钙素和碱性磷酸酶有各自特点,可以依此对二三种细胞加以区分。     

机械牵张对人成骨细胞ALP活性及I型胶原表达的影响

目的　观察机械张力对成骨细胞碱性磷酸酶 (ALP)活性和I型胶原基因表达的影响。方法　通过Flexercell细胞体外拉伸力学装置对人成骨细胞MG 6 3进行牵张加载实验 ,用生化方法和RT PCR反应检测细胞受张力刺激 6、12、2 4和 4 8h后的ALP活性和I型胶原mRNA的表达变化。结果　机械张力能明显增强MG 6 3细胞的ALP活性。I型胶原mRNA的表达在张力作用后 6～ 12h减弱 ,2 4h后表达升高 ,4 8h最高。结论　机械张力不仅能促进成骨细胞ALP的分泌活性 ,而且还能对成骨细胞胶原合成产生影响。     

辛伐他汀对大鼠成骨细胞增殖和分化功能的实验研究

目的 :研究辛伐他汀对大鼠成骨细胞增殖和分化功能的影响 ,探讨其刺激成骨的作用机制。方法 :体外培养4周龄大鼠骨髓基质细胞 ,在条件培养液诱导下 ,分化为成骨细胞。以不同浓度辛伐他汀 (0.062μmol/l ,0.125μmol/l,0.25μmol/l ,0.5μmol/l,1.0μmol/l)作用于成骨细胞 ,用MTT法测定细胞增殖情况 ;PNPP法测定细胞碱性磷酸酶 (ALP)活性 ;检测培养液中羟脯氨酸 (Hpro)含量反映细胞I型胶原的分泌情况 ;通过矿化结节计数反映细胞的矿化能力。结果 :辛伐他汀抑制细胞增殖 ,在10 -7mol/l浓度组与对照组比较有统计学意义 (P<0.05) ;各浓度组的ALP活性均增加 ,以0.5μmol/l对酶活性的影响最显著 (P<0.05) ;羟脯氨酸含量增加 ,以10-7mol/l浓度组与对照组比较有统计学意义 (P<0.05) ;辛伐他汀显著提高细胞的矿化能力 ,0.5μmol/l浓度作用最显著 ( +43.2 %,P<0.05)。结论 :辛伐他汀抑制细胞增殖 ,促进细胞ALP活性增加 ,I型胶原分泌增强 ,提高成骨细胞的矿化能力     

甲状旁腺激素对培养的人牙乳头间充质细胞环磷酸腺苷含量的影响

目的：观察甲状旁腺激素（Ｐａｒｃｉｔｈｙｒｏｉｄ ｈｏｒｍｏｎｅ,ＰＴＨ） 对人牙乳头间充质细胞内外碱性磷酸酶活性的影响。方法：酶动力学方法。结果：在观察期间（３ ～７ｄ） ,ＰＴＨ 使人牙乳头间充质细胞内ＡＬＰ活性降低,而使细胞外ＡＬＰ活性增加,且有浓度依赖性。ＤＢｃＡＭＰ组可模拟ＰＴＨ 组的结果;ＰＴＨ＋ ＩＢＭＸ 组ＡＬＰ活性的变化大于单纯的ＰＴＨ 组,提示：ＰＴＨ 的作用通过细胞内ｃＡＭＰ介导。结论：ＰＴＨ 可能是成牙本质细胞分化的重要介质。     

体外培养的人牙乳头间充质细胞的矿化特征

目的;观察体外２的人牙乳头间充质细胞矿化特征,深入研究成牙本质细胞的分化和牙本质形成。方法：第４代人牙也头间充质细胞连续培养３５ｄ后,进行组织学染色,透射电镜和扫描电镜观察。结果：人牙乳头间质细胞可出现复层生长和形成矿化结节,ｖｏｎ Ｋｏｓｓａ杂色提示细胞结节中有明显的钙盐沉积;细胞可出现与成牙本质细胞相似的超微结构特征并出现典型的矿化影像。     

碱性磷酸酶在牙周组织中表达的研究近况

碱性磷酸酶在人体中分布广泛,在硬组织的矿化与再生中具有重要意义。本文就碱性磷酸酶在牙周组织中的表达及意义、与牙周组织再生的关系等作一综述。     

Ⅰ、Ⅱ、Ⅹ型胶原及碱性磷酸酶在鼠胚髁突软骨发生中的意义

目的　探讨髁突软骨发生中Ⅰ、Ⅱ、Ⅹ型胶原及碱性磷酸酶(ALP)的组织学分布特征及髁突软骨内成骨的 分子机制。方法　取14~18 d鼠胚,分别行Ⅰ、Ⅱ、Ⅹ型胶原及ALP抗体免疫组织化学染色。结果　胚胎第14天, 髁突形成的位置可见间充质细胞聚集并与骨膜相连,间充质细胞及骨膜中Ⅰ型胶原及ALP阳性;第15天,肥大软 骨细胞中Ⅹ型胶原表达阳性,其周围的间充质细胞中Ⅰ、Ⅱ型胶原阳性,ALP在两种细胞中均呈阳性;第16天,软骨 膜、纤维层间充质细胞至肥大软骨细胞上层中Ⅰ型胶原表达阳性,多形细胞层下方至肥大软骨细胞下层中Ⅱ型胶 原表达阳性,Ⅹ型胶原仅表达于肥大软骨细胞,ALP在软骨膜及肥大软骨细胞中呈阳性,但在多形细胞层呈阴性或 弱阳性。结论　髁突软骨的发生机制与长骨不同,其软骨内成骨的早期Ⅰ、Ⅱ、Ⅹ型胶原均有表达,可能始发于ALP 阳性的下颌骨膜间充质细胞。