CD146 mRNA在人肝细胞癌组织中的表达及其临床意义

目的:探讨CD146mRNA在人肝细胞癌(hepatocellularcarcinoma,HCC)组织中的表达及其临床意义。方法:用荧光实时定量聚合酶链反应(realtimePCR)技术定量检测70例HCC患者癌组织、癌旁肝组织及18例非癌肝组织中CD146mRNA的表达情况。结果:CD146mRNA在肝癌组织(0.044±0.0178)明显高于在癌旁肝组织(0.0367±0.0121)中的表达水平(P<0.01),癌旁肝组织中的表达水平明显高于非癌肝组织(0.0263±0.0102)中的表达水平(P<0.05)。CD146mRNA在人肝癌组织中的含量与临床分期、门静脉癌栓、肝外转移及术后复发明显有关,而与肿瘤个数、肿瘤直径、血清AFP水平及分化程度无明显关系。结论:本研究结果提示CD146可能与肝癌的发生、发展及术后转移复发有关;可作为预测肝癌转移复发的参考指标之一。     

CCL20-CCR6-Th17轴与肝细胞癌血管浸润转移的关系

目的 探讨CCL20-CCR6-Th17轴在肝细胞癌血管浸润转移中的作用.方法 采用SYBR Green实时定量PCR测定人肝细胞系L-02、肝细胞癌细胞系Hep3B、Huh7和HepG2中CCL20mRNA的表达,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测上清中CCL20蛋白的分泌,Transwell迁移实验检测肝细胞癌细胞系对人外周血单个核细胞的趋化作用.采用ELISA定量检测93例肝细胞癌患者(转移组51例,无转移组42例)术前外周血中白细胞介素1α(IL-1α)、IL-1β 、IL-6 、IL-8 、IL-10、IL-17、IL-23、γ-干扰素、肿瘤坏死因子α和CCL20的水平,采用SYBR Green RT-PCR检测41例肝细胞癌癌组织及其相应的癌旁组织中CCL20和CCR6的表达水平,免疫组织化学染色检测肝细胞癌及其对应的癌旁组织和正常人供肝组织中CCL20的表达水平.结果 人肝细胞癌细胞系中CCL20的表达水平高于正常肝细胞,对外周血表达CCR6的T细胞具有趋化作用.93例肝细胞癌患者血清中CCL20蛋白的表达水平为(38.2±28.4) pg/ml,高于肝血管瘤患者[(7.8±17.8) pg/ml,P＜0.01].肝细胞癌患者血清中CCL20蛋白的表达水平与肿瘤直径呈正相关(r=0.32,P=0.0018).41例肝细胞癌组织CCL20 mRNA的表达水平高于癌旁组织(P＜0.05),CCL20蛋白主要在肝细胞癌细胞质中表达,某些浸润的免疫细胞也有一定程度表达.多因素分析结果显示,血清中IL-17和CCL20水平是影响肝细胞癌患者发生血管浸润转移的独立影响因素(均P ＜0.05).41例肝细胞癌患者癌组织及对应的癌旁组织中CCL20 mRNA的表达水平与肝细胞癌发生血管浸润转移均无关(均P＞0.05).在发生血管浸润转移患者的癌组织及其对应的癌旁组织中CCR6 mRNA的表达水平分别为5.75 (1.79,19.13)和7.99(4.49,19.54),均高于未发生血管浸润转移的患者[分别为1.69 (0.76,2.87)和3.58(1.84,4.32)],差异均有统计学意义(均P＜0.05).结论 CCL20/CCR6/Th 17轴可能促进肝细胞癌的血管浸润转移.     

TC21/R-Ras 2在肝癌中的表达、亚细胞定位及意义

目的:探讨TC21基因在肝癌细胞、肝癌及癌旁组织中的表达、亚细胞定位及意义。方法:用RT-PCR检测TC 21在肝癌细胞系及人肝癌及癌旁组织中mRNA水平的表达,用免疫组化及Western印迹检测TC21蛋白在肝癌相关组织中的表达差异,用组织芯片技术结合免疫组化检测TC21蛋白的亚细胞定位。结果:RT-PCR检测结果表明TC21 mRNA在SMMC-7721、BEL-7402、Huh-7、Hep3B、HepG2、MHCC-97L、MHCC-LM3 7个肝癌细胞系及L-02和Chang liver 2株永生化人肝细胞系、7对肝癌及对应癌旁肝组织中均有较高表达;Western印迹结果表明上述细胞系中TC21蛋白表达与mRNA表达一致,TC21在4对肝癌及癌旁组织中均呈较高水平的表达;免疫组化检测结果表明TC21在人原发性肝癌、癌旁组织、硬化肝组织与正常肝组织中的表达阳性率分别为84.2%、77.2%、41.7%、0%,肝癌与肝硬化、正常肝相比显著高表达(P<0.05,P<0.01),与癌旁组织比无统计学意义(P>0.05);统计学分析结果表明TC21蛋白表达与肿瘤大小呈正相关(P<0.05),与是否肝硬化呈负相关(P<0.05);肝癌组织中TC21主要定位于肝癌细胞核,部分定位于胞质,膜定位不明显,TC21蛋白在肝癌细胞中的核定位显著高于癌旁肝细胞(P<0.001)。结论:本研究首次揭示TC21蛋白在肝癌组织中的高表达及核定位预示其在肝细胞恶性转化及肝癌发生发展中发挥重要作用。     

RECK及MMP-14在肝细胞肝癌组织中的表达及其临床意义

目的:探讨RECK及MMP-14与肝细胞肝癌(HCC)的侵袭转移以及预后的关系。方法:用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测61例HCC患者癌组织、癌旁肝组织以及18例正常肝组织中RECK及MMP-14的mR-NA表达情况;并分析RECK及MMP-14的mRNA的表达与相关临床参数的关系。结果:RECKmRNA在HCC组织中的表达水平显著低于在癌旁肝组织和正常肝组织中的表达水平(P<0.01),而在癌旁肝组织和正常肝组织中的表达水平差异无显著性(P>0.05);MMP-14mRNA在肝癌组织的表达水平显著高于在癌旁肝组织中的表达水平(P<0.01),在癌旁肝组织中的表达水平显著高于在正常肝组织中的表达水平(P<0.01)。RECKmRNA和MMP-14mRNA在HCC组织中的表达呈负相关(P=0.027),而两者在癌旁肝组织及正常肝组织中的表达无相关性。RECKmRNA在HCC组织中的表达水平与临床分期、门静脉癌栓、肝外转移及术后复发等明显相关,而与肿瘤直径、肿瘤个数、血清AFP水平、肿瘤分化程度以及癌旁有无肝硬化等无明显关系。MMP-14mRNA在HCC组织中的表达水平与临床分期、门静脉癌栓、肝外转移、术后复发、肿瘤直径大小明显相关,而与肿瘤数目、血清AFP水平、肿瘤分化程度以及癌旁有无肝硬化等无明显关系。结论:本研究提示RECK及MMP-14的mRNA表达与HCC的浸润转移有关,RECK及MMP-14可能在肝细胞肝癌的发生、发展中起重要作用,有可能作为预测肝癌复发、转移的参考指标。     

基质金属蛋白酶-9基因及RECK基因在肝癌组织中的表达

目的探讨肝癌患者基质金属蛋白酶-9（MMP-9）基因及RECK基因表达的情况。方法33例原发性肝细胞癌患者术中取癌组织及癌旁组织;提取组织总RNA;用逆转录共扩增定量PCR方法测定MMP-9基因及RECK基因表达水平。结果肝癌组织MMP-9基因表达水平明显高于癌旁的肝硬化组织及正常肝组织,肝癌组织RECK基因表达水平明显低于癌旁的肝硬化组织及正常肝组织。肝癌患者MMP-9基因表达水平与血清AFP浓度、肿瘤大小无关。RECK基因及MMP-9基因在肝癌组织中的表达呈负相关（P=0．019）。结论RECK与MMP-9在肝癌组织中的表达呈负相关;MMP-9及RECK基因在肝癌的进展中可能起重要作用。     

ALCAM基因在肝癌中的表达及其临床意义

[目的]探讨活化白细胞黏附分子（ALCAM）基因在原发性肝细胞癌（HCC）中表达的特征及其临床意义。[方法]应用RT—PCR及免疫组化Elivision法检测ALCAM基因在42例肝癌组织及相应42例癌旁组织中的表达,分析其与HCC临床病理特征的相关性。[结果]RT—PCR显示HCC中ALCAM mRNA水平显著高于癌旁组织．Elivision法显示HCC中ALCAM蛋白的表达较癌旁组织明显升高．ALCAM mRNA表达水平及ALCAM表达与HCC组织分化程度及肝内转移有关,与患者性别、HBsAg状态、术前AFP水平、肿瘤包膜、肿瘤大小、癌肿数目无关。[结论]HCC中ALCAM基因的表达能促进HCC的发生、发展和转移,可作为判断HCC恶性程度、评价预后的指标。     

DFF45在肝细胞肝癌中的低表达及其临床意义

背景与目的:研究表明DNA裂解因子45(the DNA fragmentation factor 45,DFF45)在肿瘤细胞中表达异常与肿瘤细胞凋亡、分化、恶性表型密切相关.本研究探讨DFF45在肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)组织、癌旁肝组织、正常肝组织、3种不同的肝癌细胞株、永生化的肝细胞株L02中的表达,并分析其与肝癌患者临床参数的相关性.方法:采用免疫组化、Western blot及RT-PCR检测35例HCC组织及相应癌旁组织、10例正常肝组织中DFF45蛋白及mRNA表达;Western blot、RT-PCR检测肝癌细胞株QGY-7701、SMMC-7721、HepG2及永生化的肝细胞株L02中DFF45蛋白及mRNA表达.结果:免疫组化显示DFF45在HCC组织、癌旁组织、正常肝组织阳性率分别为48.6％ (17/35)、77.1％(27/35)和90％ (9/10),HCC组织中DFF45蛋白表达明显低于癌旁及正常组织(P＜0.05).DFF45蛋白的表达与肿瘤大小、病理分级相关.Western blot检测进一步验证了该免疫组化结果.RT-PCR结果显示,DFF45 mRNA在HCC组织中表达(0.453±0.111)同样低于癌旁组织(0.518±0.094)及正常肝组织(0.535±0.112),差异有统计学意义(P＜0.05).DFF45蛋白及mRNA在3种肝癌细胞株中表达均低于永生化的细胞株.结论:DFF45在HCC组织及肝癌细胞系中呈低表达,可能参与了肝癌的发生发展,并有可能成为肝癌治疗的新靶点.     

肝细胞癌组织XAF1表达及其临床意义的研究

目的:探讨XAF1在原发性肝细胞癌发生中的作用。方法:应用RT-PCR技术检测人胎肝细胞株LO2、人肝癌细胞株SMMC7721、HepG2和30例肝癌及其相应癌旁组织XAF1mRNA的水平,同时应用免疫组织化学方法及蛋白质印迹检测上述细胞株及组织中XAF1蛋白的表达。结果:人胎肝细胞株LO2检测到XAF1mR-NA和蛋白的表达,人肝癌细胞株SMMC7721、HepG2XAF1mRNA和蛋白的表达低。肝癌组织XAF1mRNA和蛋白表达较癌旁组织显著降低(mRNA:0.587&#177;0.064,1.013&#177;0.159,t=2.392,P=0.000;蛋白:43179&#177;11412,95541&#177;30153,t=3.532,P=0.000)。免疫组化染色显示,XAF1蛋白表达集中在肝细胞胞质和胞核中,表达下调的XAF1蛋白与原发性肝细胞癌患者病理分期有显著相关性。结论:XAF1mRNA及蛋白在肝癌组织及肝癌细胞系中表达水平降低,提示可能是促进肝细胞癌发生的一个重要因素。     

转化生长因子在原发性肝癌中的表达及其意义探讨

目的:探讨转化生长因子β1(TGF-β1)与原发性肝癌(PHC)发生发展的关系.方法:采用TGF-β1多克隆抗体对29例人原发性肝癌组织进行ABC免疫组化标记,并做半定量分析.结果:在25例肝细胞肝癌中TGF-β1表达显著高于正常肝组织及癌旁组织.高危转移组患者其表达明显高于低危转移组.TGF-β1表达与肝细胞损伤血清学指标GPT及γ-GT有相关关系.结论:TGF-β1与肝细胞肝癌的发生发展密切相关,TGF-β1水平增高可增加肝细胞肝癌的转移危险性.     

Dll4分子在肝细胞癌中的表达及其与预后的关系

目的:探讨Dll4分子在肝癌组织中的表达及其在肝癌术后患者预后中的作用。方法:采用免疫组化方法检测28例肝癌组织以及癌旁组织中Dll4的表达水平。并结合患者随访情况分析Dll4蛋白表达水平与肝细胞癌术后患者预后的关系。结果:免疫组化结果显示Dll4蛋白表达主要定位于细胞浆,肝癌组织中Dll4蛋白表达明显高于癌旁组织（P＜0.05）。Cox模型多因素分析结果显示肝癌合并微血管侵犯与Dll4蛋白表达情况是患者预后的独立危险因素。结论:Dll4分子高表达的肝癌术后患者相对于低表达患者预后更差,术后生存时间更短。可能成为肝细胞癌新的预后标志物。