人参美白霜中人参皂苷的SPE-ESI-MS/MS分析

目的：应用固相萃取-电喷雾串联质谱（SPE-ESI-MS/MS）法对人参美白霜中人参皂苷进行定性鉴别。方法：通过SPE-ESI-MS/MS联用技术鉴定了人参美白霜中存在人参皂苷。结果：鉴定了人参美白霜中存在8种人参皂苷分别为人参皂苷Rb2,Rc,Rd,Re,Rg1,Rg2,Rh1和三七皂苷R2。结论：本方法简便、可靠,为添加人参皂苷成分的化妆品的质量控制提供了有效的方法。     

中药提取物对照品应用研究：（一）人参皂苷成分的质量分析

摘要：目的 使用人参对照提取物（Ginseng Extract Reference Substance,GS ERS)对人参样品进行定性鉴别及定量分析。方法 使用薄层色谱法用硅胶高效薄层板,以氯仿：乙酸乙酯：甲醇：水=20：40：22：10（10 ℃以下分层的下层溶剂）为展开剂,对人参样品进行定性鉴别。采用Kromasil 100-5C18色谱柱（4.6×250 mm,5 μm）,流动相为乙腈-水,梯度洗脱;流速1.0 mL?min-1,柱温25 ℃,检测波长203 nm,进样量10 μL。用已知含量的人参提取物对照品(ERS)外标法测定人参样品中人参皂苷Rg1,Re,Rf,Rb1,Rc,Rb2,Rd 7个成分的含量。结果 高效薄层色谱显示人参提取物对照品与人参药材图谱具有一致性,且与西洋参有明显区别;使用人参提取物对照品(ERS)外标法测定人参及西洋参样品中的人参皂苷成分,结果与使用化学对照品外标法测定结果一致,两种方法相对平均偏差（两数之差/两数之和）在0.02 %～2.90 %之间。结论 人参提取物对照品用于人参样品的定性鉴别以及人参药材中人参皂苷Rg1,Re,Rf,Rb1,Rc,Rb2,Rd7个成分的含量测定,方便有效,经济实惠。提取物对照品符合中药整体性和复杂性的特点,更适合中药整体质量控制。     

石柱参中8种人参皂苷的含量测定

目的:测定石柱参中8种人参皂苷Rg1,Re,Rf,Rg2,Rb1,Rc,Rb3,Rd的含量,并建立同时测定8种人参皂苷含量的方法。方法:采用HPLCAgilent TC-C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm),流动相乙腈-0.05%磷酸水,梯度洗脱,体积流量1 mL.min-1,柱温30℃,检测波长203 nm。结果:8种人参皂苷Rg1,Re,Rf,Rg2,Rb1,Rc,Rb3,Rd质量分数分别为1.32,2.08,0.72,0.24,2.12,1.06,0.35,0.55 mg.g-1。结论:首次对石柱参药材中的人参皂苷进行了含量测定,所建立的方法分离度高,方法学验证符合要求,可作为参类药材同时测定8种人参皂苷含量的方法。     

三七叶抗抑郁活性组分与其它来源人参皂苷提取物的成分比较

目的比较三七叶抗抑郁活性组分PnGL与其它不同来源的人参皂苷提取物成分上的差异,为基于PnGL开发抗抑郁新药提供依据。方法采用HPLC法测定PnGL中人参皂苷Rb1、Rb2、Rc、Rb3的含量,并与不同来源的人参皂苷提取物作比较。结果 PnGL中4种成分的含量达到30%以上,其中Rb3、Rc为主要成分,含量分别为17.66%、9.32%。而三七(根)总皂苷、人参茎叶总皂苷、人参(根)总皂苷均不含Rb3,且Rc的含量最高不超过3%。结论 PnGL与其它人参皂苷提取物存在明显的成分差异。     

人参总皂苷主要成分大鼠体内药动学研究

目的研究人参总皂苷中9种人参皂苷Rb1、Rb2/Rb3、Rc、Rd、Re、Rf、Rg1和Rh1在大鼠体内的药动学。方法大鼠ig 200 mg/kg人参总皂苷后于不同时间点眼底静脉丛取血。生物样本采用正丁醇液-液萃取,经C18柱,应用梯度洗脱程序进行色谱分离(体积流量0.2 m L/min),应用液质联用(LC-MS)技术检测。结果大鼠ig人参总皂苷后,血浆中可测得6种人参皂苷(Rb1、Rb2/Rb3、Rc、Rd、Re和Rg1),其中二醇型的人参皂苷(Rb1、Rb2/Rb3、Rc和Rd)的体内暴露程度及半衰期显著高于三醇型的人参皂苷(Re和Rg1)。结论建立的人参皂苷血药浓度测定方法简便、灵敏、特异,适用于大鼠血浆中各人参皂苷的测定及人参总皂苷的药动学研究。     

人参美白霜中人参皂苷的SPE—ESI—MS／MS分析

目的：应用固相萃取一电喷雾串联质谱（SPE—ESI—MS／MS）法对人参美白霜中人参皂苷进行定性鉴别。方法：通过SPE—ESI—MS／MS联用技术鉴定了人参美白霜中存在人参皂苷。结果：鉴定了人参美白霜中存在8种人参皂苷分别为人参皂苷Rb2,Rc,Rd,Re,Rg1,Rg2,Rh,和三七皂苷Rz。结论：本方法简便、可靠,为添加人参皂苷成分的化妆品的质量控制提供了有效的方法。     

基于人参皂苷含量的西洋参等级规格标准研究

目的：分析不同产地、不同等级规格西洋参中人参皂苷的含量,评价西洋参的化学信息,为其行业标准的制定提供实验依据。方法：采用UPLC测定主要活性成分人参皂苷Rg1、Re、Rb1、Rb2、Rb3、Rc、Rd、Rg2含量,用SPSS16.0软件进行统计分析。结果：建立了不同产地西洋参样品人参皂苷分布特征图谱;西洋参中Rg1、Re、Rb1的含量之和符合《中国药典》标准;方差分析表明产地、长度对同一个规格的西洋参中人参皂苷的含量影响具有统计学意义（P〈0.01）。结论：由于西洋参中人参皂苷含量受产地、长度、重量等多因素影响,在等级规格评价中,符合《中国药典》标准基础上不宜采用人参皂苷含量为指标进行等级规格划分。     

人参与西洋参皂苷类成分的比较研究

目的：研究人参和西洋参中人参皂苷含量的差异性.方法：采用高效液相法测定人参与西洋参中的各单体皂苷含量.结果：西洋参中人参总皂苷大约是人参中的2 倍以上;西洋参中人参皂苷Rb1 含量远高于人参中Rb1 的含量,人参皂苷Re 含量是人参中Re 的4.8 倍,人参皂苷Rd 含量是人参中Rd 的2 倍.而人参中人参皂苷Rg1 含量是西洋参中Rg1 的2.4 倍,人参皂苷Rf、Rg2、Rb2 的含量明显高于西洋参中相应单体皂苷的含量,而人参单体皂苷Rc、Rb3 在人参和西洋参中的含量相差不大.结论：人参与西洋参的总皂苷和各单体皂苷的含量差异性较大,期望结合人参单体皂苷的药理活性,更合理地指导临床应用.     

园参叶及林下参叶中人参皂苷含量比较

目的 建立UPLC法同时测定园参叶及林下参叶中人参皂苷Rg1、Re、Rf、Rb1、Rg2、Rc、Rb2、Rd的含量,并比较两者人参皂苷含量。方法 采用UPLC CORTECS C₁₈色谱柱(2.1 mm×150 mm, 1.6μm);流动相乙腈-水,梯度洗脱;体积流量0.25 mL/min;柱温30℃;检测波长203 nm。对8种人参皂苷进行偏最小二乘法判别分析。结果 8种人参皂苷在各自范围内线性关系良好(r≥0.999 9),平均加样回收率97.47%～103.41%,RSD<3.0%。正交偏最小二乘法判别分析可区分2种药材,人参皂苷Rb1、人参皂苷Re、人参皂苷Rg2的VIP值大于1。结论 该方法稳定可靠,原人参三醇类(人参皂苷Rg1、Re、Rg2)和原人参二醇类(人参皂苷Rc、Rb1、Rb2、Rd)人参皂苷的比值可作为园参叶和林下参叶区别的重要依据。     

8种人参皂苷在人参全草中的分布情况

目的:建立一种同时检测8种人参皂苷的HPLC检测方法,分析人参皂苷在人参全草各部位中的分布情况。方法:采用Discovery C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),柱温35℃,流动相乙腈-水进行梯度洗脱,流速1 m L·min-1,检测波长203 nm,检测六年生人参的花蕾、叶、茎、芦头、支根、须根以及主根木栓层、韧皮部、木质部9个部位中人参皂苷Rg1,Re,Rf,Rb1,Rc,Rb2,Rb3,Rd的含量。结果:所建方法具有良好的重复性和溶液稳定性,8种成分可达到基线分离,并且具有较宽的线性范围和良好的线性关系,回收率在98%~102%。结论:首次对8种人参皂苷在人参全草中的分布进行了研究,所建方法可用于同时测定人参全草不同部位中8种人参皂苷的含量;8种人参皂苷在须根、花蕾中含量高,在茎中含量最低,主根中的人参皂苷则主要分布于木栓层。     

In Vivo radioprotective effect of Panax ginseng C.A. Meyer and identification of active ginsenosides

This study evaluated the effect of water extracts of Panax ginseng C.A. Meyer (PG), panaxadiol (PD), panaxatriol (PT), ginsenoside Rb(1), Rb(2), Rc, Rd, Re and Rg(1) on jejunal crypt survival, endogenous spleen colony formation and apoptosis in jejunal crypt cells in gamma-irradiated mice. Jejunal crypts were protected by pretreatment with PG, Rc and Rd. Administration of PG, PD, Rd and Re prior to irradiation resulted in an increase in the formation of endogenous spleen colonies. The frequency of radiation-induced apoptosis in intestinal crypt cells was also reduced by pretreatment with PG, PD, Rb(2), Rc, Rd, Re and Rg(1). In experiments on the effects of the individual ginsenosides, the rank order of activity was Rc > Rd > Rg(1) > Rb(2) > Re > Rb(1) on intestinal crypt survival assay, Re > Rb(2) > Rd > Rg(1) > Rb(1) > Rc on the spleen colony formation assay, and Rg(1) > Re > Rd > Rc > Rb(2) > Rb(1) on inhibiting the death of cells caused by apoptosis. The results indicated that Rc, Rd and Re may have a major radioprotective effect in mice irradiated with high and low doses of radiation. When the same experiments were performed using PD and PT, it was observed that most of the inhibitory effects came from PD rather than PT.     

不同规格红参中皂苷的比较分析

目的:测定几种不同规格中国红参主根及须根中人参皂苷Rg₁,Re,Rb₁,Rc,Rb₂,Rd的含量。方法:应用超声波提取法及反相高效液相色谱法分析。结果:6种皂苷的和分别为15支(每500 g)1.21%,20支1.46%,30支1.54%;红参须根8.16%。结论:人参根随着体积增大,皂苷含量减少。     

HPLC法测定乌参醒脑滴丸中人参皂苷Rg1、Re、Rb1和Rd

目的建立乌参醒脑滴丸(人参、首乌,银杏叶提取物)中人参皂苷Rg1、Re、Rb1和Rd的HPLC测定方法。方法采用Diamonsil-C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,5.0μm),柱温30℃;流动相为乙腈和水进行梯度洗脱,体积流量为1.0mL/min;检测波长为203 nm。结果人参皂苷Rg1、Re、Rb1和Rd分别在11.68～58.4μg/mL、15.30～153.0μg/mL、13.25～132.5μg/mL、7.65～76.5μg/mL质量浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系,4种皂苷类成分的平均回收率为97.5%(RSD为1.56%)、100.3%(RSD为2.13%)、97.6%(RSD为1.98%)、98.6%(RSD为1.53%)。结论该法灵敏、简便、准确,可用于乌参醒脑滴丸的质量控制。     

HPLC/LTQ-FTMS用于白参中的丙二酰基人参皂苷的研究

在15mM 甲酸铵作为流动相添加剂条件下,采用HPLC/LTQ-FTMS 实现了白参样品中酸性人参皂苷的优化分离。根据高分辨质谱、多级质谱信息,结合保留规律验证,在白参萃取液中共检测和识别了八种丙二酰基人参皂苷,包括丙二酰基人参皂苷Rg1、Re、Rf、Rb1、Rc、Rb2、Rb3 和Rd。     

药典法和新方法测定人参皂苷含量比较简

目的：探寻更高效的人参皂苷提取方法,提高人参皂苷检出率,简化操作。方法：以人参皂苷Rg1、人参皂苷Re和人参皂苷Rb1的含量为评价指标,乙醇为提取溶液,采用正交试验法,以高效液相色谱法进行含量测定,得出最佳的人参皂苷Rg1、人参皂苷Re和人参皂苷Rb1的检测方法。结果：优选的提取条件为将人参药材粉碎成中粉,以60％的乙醇浸泡提取24h。结论：乙醇浸泡提取法简化了制样步骤,减少了溶剂消耗,可以同时测定人参皂苷Rg1、人参皂苷Re和人参皂苷Rb1的含量,为人参的质量评价提供参考。     

HPLC／LTQ—FTMS用于白参中的丙二酰基人参皂苷的研究

在15mM甲酸铵作为流动相添加剂条件下,采用HPLC／LTQ—FTMS实现了白参样品中酸性人参皂苷的优化分离。根据高分辨质谱、多级质谱信息,结合保留规律验证,在白参萃取液中共检测和识别了八种丙二酰基人参皂苷,包括丙二酰基人参皂苷Rg1、Re、Rf、Rb1、Rc、Rb2、Rb3和Rd。     

西洋参不同器官中皂苷量与鲨烯合成酶和鲨烯环氧酶基因表达的相关性

目的探讨西洋参不同组织器官中总皂苷和单体皂苷量的差异及其与人参皂苷合成途径中鲨烯合成酶(SQS)和鲨烯环氧酶(SQE)基因表达量之间的关系。方法以4年生西洋参的14个组织器官为材料,索氏回流法提取总皂苷,采用HPLC法测定6种单体皂苷(人参皂苷Rg1、Re、Rb1、Rc、Rb2和Rd)的量,用香草醛-硫酸比色法测定总皂苷量。通过实时荧光定量PCR分析SQS和SQE基因在西洋参14个组织器官中的表达量。结果总皂苷和单体皂苷量在西洋参不同组织器官中差异非常显著(P<0.01)。除人参皂苷Rb2外,各单体皂苷及总皂苷之间均呈非常显著的正相关关系(P<0.01)。SQS和SQE基因在14个组织器官中的表达量具有非常显著的差异(P<0.01)并与人参皂苷Re、Rg1、Rb1、Rd和总皂苷量之间有显著的正相关关系(P<0.05)。结论西洋参不同组织器官中皂苷的量存在差异,SQS和SQE基因在人参皂苷合成途径中起着极其重要的作用。     

西洋参中皂苷类成分提取方法对比

目的:选择更好的西洋参提取方法,提高人参皂苷的提取率。方法:以人参总皂苷、人参皂苷Rb1、Rb2、Rc、Rd、Re、Rg1、Rg2等7种主要单体皂苷收率为指标,用高效液相色谱法进行含量测定,比较热回流提取、超声波提取、罐组式逆流提取、组罐式超声波提取四种方法各自的优劣。结果:组罐式超声波提取是最佳的提取方法,它可以在保证提取效率的前提下,减少溶剂的用量,降低提取温度。结论:组罐式超声波提取法可望广泛地应用在制药工业上。     

Triterpene saponins from Vietnamese ginseng (Panax vietnamensis) and their hepatocytoprotective activity

The methanol extract of Vietnamese ginseng (Panax vietnamensis) was found to possess hepatocytoprotective effects on D-galactosamine (D-GalN)/tumor necrosis factor-alpha (TNF-alpha)-induced cell death in primary cultured mouse hepatocytes. Further chemical investigation of the extract afforded two new dammarane-type triterpene saponins, ginsenoside Rh(5) (1) and vina-ginsenoside R(25) (2), as well as eight known dammarane-type triterpene saponins, majonoside R(2) (3), pseudo-ginsenoside RT(4) (4), vina-ginsenosides R(1) (5), R(2) (6), and R(10) (7), ginsenosides Rg(1) (8), Rh(1) (9), and Rh(4) (10), and a known sapogenin protopanaxatriol oxide II (11). Their structures were elucidated on the basis of spectral analysis. In addition, by the using LC-electrospray ionization (ESI)-MS method, five known saponins, ginsenosides Rb(1), Rb(2), Rc, Rd, and Re (12--16), were also identified in the extract. Among the compounds isolated, majonoside R(2) (3), the main saponin in Vietnamese ginseng, showed strong protective activity against D-GalN/TNF-alpha-induced cell death in primary cultured mouse hepatocytes. This demonstrates that the hepatocytoprotective effect of Vietnamese ginseng is due to dammarane-type triterpene saponins that have an ocotillol-type side chain, a characteristic constituent of Vietnamese ginseng.     

高效液相色谱法测定血塞通胶囊中人参皂苷Rg1、Re、Rb1、Rd及三七皂苷R1的含量

[目的]建立血塞通胶囊中5种皂苷的含量测定方法。[方法]采用高效液相色谱法对制剂中的人参皂苷Rg1、Re、Rb1、Rd和三七皂苷R1进行定量测定。[结果]人参皂苷Rg1、Re、Rb1、Rd和三七皂苷R1的线性范围均符合要求,5种皂苷样品回收率均合格,RSD在3．00％以内。[结论]所建立的方法简便、快捷,重复性好,可用于该制剂的质量控制。