钙敏感受体对乳鼠心肌细胞凋亡的诱导作用

探讨在缺氧/复氧所诱导乳鼠心肌细胞凋亡中,钙敏感受体（calcium - sensing receptor,CaSR）对Fas/Fas配体（Fas L）途径的影响。方法对8只2日龄Wistar大鼠心肌细胞进行原代培养,后随机分为三组：(1)对照组：细胞不经缺氧/复氧处理,在其他组复氧开始时培养基内加入与用药组等体积的生理盐水;(2)缺氧/复氧组：心室肌细胞缺氧2h/复氧24h,细胞培养基内于复氧开始时加入与用药组等体积的生理盐水;(3) CaSR激动剂氯化钆(GdCl3)组：细胞培养基内于复氧开始时加入300μmol/L CaSR激动剂GdCl3。流式细胞仪分析细胞凋亡率,透射电镜观察细胞超微结构,蛋白印迹法检测CaSR、Fas和FasL蛋白的表达。结果流式细胞仪检测显示,缺氧/复氧组心肌细胞凋亡为12.18％±1.54％,与对照组相比,心肌细胞凋亡明显增加(P＜0.01)。CaSR激动剂GdCl3使心肌细胞凋亡进一步增加至20.25％±2.87％ (P＜0.01)。透射电镜下可见线粒体絮状变、线粒体嵴溶解、空泡样变;CaSR激动剂使CaSR、Fas和FasL表达进一步上调,明显高于缺氧/复氧组(P＜0.05)。结论CaSR激活参与了缺氧/复氧所诱导的乳鼠心肌细胞凋亡,CaSR可通过激活Fas/FasL死亡受体途径导致乳鼠心肌细胞凋亡。     

钙敏感受体在缺氧/复氧诱导乳鼠心肌细胞凋亡中的作用

目的 探讨钙敏感受体(CaSR)对缺氧/复氧(A/R)所诱导乳鼠心肌细胞凋亡的影响及其机制.方法 原代培养乳鼠心室肌细胞缺氧2 h/复氧24 h,建立A/R心肌细胞损伤模型.心肌细胞随机分为三组:对照组、A/R组和CaSR激动剂氯化钆(GdCl3)组.四氮唑嗅盐法(MTT)检测细胞的存活率,原位缺口末端标记法(TUNEL)分析细胞凋亡率,蛋白印迹法检测CaSR、半胱氨酸天冬酶(caspase)-3、9和细胞色素c(Cytc)蛋白的表达.结果 TUNEL染色显示A/R后心肌细胞凋亡为(17±3)%,与对照相比,心肌细胞凋亡明显增加,CaSR表达也增加.CaSR激动剂GdCl3使心肌细胞凋亡进一步增加至(28±4)%,MTT检测表明心肌细胞存活率仅为(51.2±6.8)%;CaSR、caspase-3、caspase-9和Cytc表达进一步上调,明显高于A/R组.结论 CaSR通过线粒体Cytc-caspase-3途径参与了A/R所诱导的心肌细胞凋亡.     

钙敏感受体及相关分子在新生大鼠持续肺动脉高压发病中的作用

目的探讨钙敏感受体(CaSR)及相关分子在持续肺动脉高压(PPH)新生大鼠肺组织中的表达及在PPH发病机制中的作用。方法选取6只Sprague-Dawley(SD)孕鼠,孕第19天时随机分为PPH组和对照组,每组3只。PPH组孕鼠置于12%氧浓度的缺氧箱中并腹腔内注射吲哚美辛0.5 mg/kg,2次/天,连续3天,建立胎鼠肺动脉高压模型;对照组孕鼠暴露在空气中并腹腔内注射等量生理盐水。两组孕鼠均于孕第22天行剖宫产,对照组、PPH组分别获取新生大鼠26、28只,两组各随机抽取15只仔鼠用于后续实验。采用RT-PCR技术检测新生大鼠肺组织CaSR mRNA及Ⅱ型11β羟基类固醇脱氢酶(11β-HSD2)mRNA表达,采用蛋白质印迹法检测新生大鼠肺组织CaSR蛋白和一氧化氮(NO)含量。结果与对照组比较,PPH组新生大鼠肺组织中CaSR mRNA[(0.592±0.052)比(0.408±0.017)]及蛋白表达[(0.717±0.027)比(0.445±0.011)]升高,NO含量[(1.50±0.20)μmol/g比(0.37±0.16)μmol/g]升高,11β-HSD2 mRNA[(0.413±0.073)比(0.978±0.079)]表达降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 CaSR及相关分子在新生大鼠PPH发病中可能发挥重要作用。     

Shh和Fgf8介导的视黄酸对22q11.2微缺失综合征心肌细胞TBX1表达的影响

目的探讨Shh和Fgf8介导的视黄酸(RA)对22q11.2微缺失综合征中心肌细胞TBX1基因的调节机制。方法出生1～2 d SD乳鼠26只,分离培养乳鼠心肌细胞,48 h后用流式分选方法分选纯化心肌细胞,纯化的心肌细胞继续培养48 h。分为空白对照组;阴性对照组;处理1组:1×10-7mol/L RA;处理2组:3×10-7mol/L RA;处理3组:5×10-7mol/L RA。采用RT-PCR和Western blot方法分别检测乳鼠心肌细胞Shh、Fgf8 mRNA和蛋白相对量表达的变化。结果Shh和Fgf8在乳鼠心肌细胞有少量的表达,给予RA刺激后,与空白对照组比较,3×10-7mol/L RA使细胞内Shh mRNA和蛋白水平分别增加1.51倍和1.10倍(t=11.328,15.598 Pa<0.05),5×10-7mol/LRA使细胞内Shh mRNA和蛋白水平分别增加2.21倍和2.38倍(t=13.761,18.982Pa<0.05);3×10-7mol/L RA使细胞内Fgf8 mRNA和蛋白水平分别增加2.50倍和0.80倍(t=14.368,24.226 Pa<0.05),而5×10-7mol/LRA使细胞内Fgf8 mRNA和蛋白水平分别增加3.48倍和2.04倍(t=23.926,26.364 Pa<0.05)。结论RA可以上调乳鼠心肌细胞Shh和Fgf8的表达,且呈剂量依赖效应。Shh和Fgf8参与了RA对心肌细胞TBX1的调节过程。     

胆红素诱导原代培养神经细胞内Ca2+含量的变化及MgSO4的拮抗作用

目的　探讨胆红素诱导原代培养神经细胞内Ca2 + 含量的变化 ,以及MgSO4 的拮抗作用。方法　采用胎鼠大脑皮层细胞作原代神经细胞培养 ,观察 10 0 μmol/L胆红素对不同成熟程度神经细胞内Ca2 + 含量的影响。原代培养神经细胞经Fura- 2 /AM负载 ,荧光图像分析测定细胞内Ca2 + 含量。结果　未成熟神经细胞 (培养2天 )暴露于 10 0 μmol/L胆红素 4h ,细胞内Ca2 + 从 75 .3nmol增加到 32 0 .8nmol;继续暴露 4h ,细胞内Ca2 + 增加到 40 0 .7nmol;去除胆红素暴露 ,细胞内Ca2 + 不能逆转。成熟神经细胞 (培养 8天 )暴露于 10 0 μmol/L胆红素 4h ,细胞内Ca2 + 从 70 .6nmol增加到 15 0 .8nmol;继续暴露 4h ,细胞内Ca2 + 不再增加 ;去除胆红素暴露 ,细胞内Ca2 + 浓度可显著降低。培养液中Mg2 + 加至 2mmol/L可减轻胆红素诱导的神经细胞内Ca2 + 含量变化。结论　胆红素可诱导原代培养的、未成熟的神经细胞Ca2 + 超载 ,MgSO4 可拮抗胆红素诱导的神经细胞Ca2 + 超载。     

胆红素诱导原代培养神经细胞内Ca2+含量的变化及MgSO4的拮抗作用

目的　探讨胆红素诱导原代培养神经细胞内Ca2 + 含量的变化 ,以及MgSO4 的拮抗作用。方法　采用胎鼠大脑皮层细胞作原代神经细胞培养 ,观察 10 0 μmol/L胆红素对不同成熟程度神经细胞内Ca2 + 含量的影响。原代培养神经细胞经Fura- 2 /AM负载 ,荧光图像分析测定细胞内Ca2 + 含量。结果　未成熟神经细胞 (培养2天 )暴露于 10 0 μmol/L胆红素 4h ,细胞内Ca2 + 从 75 .3nmol增加到 32 0 .8nmol;继续暴露 4h ,细胞内Ca2 + 增加到 40 0 .7nmol;去除胆红素暴露 ,细胞内Ca2 + 不能逆转。成熟神经细胞 (培养 8天 )暴露于 10 0 μmol/L胆红素 4h ,细胞内Ca2 + 从 70 .6nmol增加到 15 0 .8nmol;继续暴露 4h ,细胞内Ca2 + 不再增加 ;去除胆红素暴露 ,细胞内Ca2 + 浓度可显著降低。培养液中Mg2 + 加至 2mmol/L可减轻胆红素诱导的神经细胞内Ca2 + 含量变化。结论　胆红素可诱导原代培养的、未成熟的神经细胞Ca2 + 超载 ,MgSO4 可拮抗胆红素诱导的神经细胞Ca2 + 超载。     

人参二醇对β-淀粉样蛋白介导原代培养胎鼠皮质神经元毒性的保护作用

目的研究β-淀粉样蛋白(Aβ)1-40对原代培养胎鼠皮质神经元的毒性作用及人参二醇对Aβ1-40毒性的拮抗作用。方法通过测定原代培养胎鼠皮质神经元培养液中LDH的活力变化,并用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定神经元存活率,观察Aβ1-40对神经元的毒性及人参二醇对神经细胞的保护作用。结果终浓度为3、6、12μmol/LAβ1-40作用于皮质神经元48h后,培养液中LDH的活力增高,神经细胞的存活率下降,与不作任何处理的空白对照组比较差异有显著性(P<0.05,P<0.01);与单独加入12μmol/LAβ1-40损伤组相比,经10、20、40mg/L人参二醇预处理24h再加入12μmol/LAβ1-40作用48h,LDH活力下降,细胞存活率升高,与仅加入12μmol/LAβ1-40的损伤组比较有统计学差异(P<0.05,P<0.01)。结论人参二醇能拮抗Aβ1-40诱导的神经细胞凋亡,对Aβ1-40引起的神经细胞毒性有一定保护作用。     

外源性视黄酸调节乳鼠心肌细胞Tbx1的表达

目的 研究视黄酸(RA)对心肌细胞Tbx1基因表达的影响.方法 分离培养乳鼠心肌细胞,经不同浓度的RA处理后,采用RT-PCR和Western blot方法分别检测乳鼠心肌细胞Tbx1基因在mRNA和蛋白水平表达的变化.结果 Tbx1基因在乳鼠心肌细胞有少量基础的表达,在予以RA刺激后,1×10-7mol/L RA使细胞内Tbx1基冈mRNA和蛋白含量表达分别增加1.51倍和1.10倍(P均<0.05),1×10-6 mol/L RA使细胞内Tbx1基因mRNA和蛋白含量表达分别增加2.21倍和2.38倍(P均<0.05).结论 RA可以上调乳鼠心肌细胞Tbx1的表达,且此作用呈剂量依赖效应.     

川芎嗪对柯萨奇B3病毒感染乳鼠心肌细胞的保护作用及信号转导机制研究

目的：临床显示川芎嗪对病毒性心肌炎有治疗作用,但机制不明,该研究拟探讨川芎嗪对病毒感染的心肌细胞的作用及信号转导机制。方法：利用培养的Sprague-Dawley乳鼠心肌细胞,分为空白对照组（心肌细胞正常培养）、阴性对照组（心肌细胞加入川芎嗪至终浓度100 μmol/L后培养）、病毒感染组［心肌细胞感染柯萨奇病毒B3(CVB3)］、川芎嗪干预组(心肌细胞感染病毒后加入终浓度100 μmol/L川芎嗪干预)。观察心肌细胞搏动频率及培养液中乳酸脱氢酶(LDH)活性。采用Western blot测定NF-κB蛋白表达变化,MTT法检测心肌细胞活性。结果：病毒感染组与川芎嗪干预组比较,心肌细胞搏动频率明显降低(32.0±3.6次/min vs 84.3±3.5次/min, P<0.01),细胞病变加重,LDH活性显著升高(P<0.05)。川芎嗪干预组细胞NF-κB蛋白表达明显低于病毒感染组(P<0.01),存活率明显高于病毒感染组［(86.7±2.7）％ vs （35.3±3.4）%, P<0.01］。结论：在病毒性心肌炎时川芎嗪可以抑制NF-κB的表达,起到保护心肌细胞的作用。［中国当代儿科杂志,2009,11（8）：687-690］     

分子伴侣介导的自噬对胆红素诱导的小鼠小胶质细胞损伤的影响

目的探讨分子伴侣介导的自噬（chaperone-mediated autophagy,CMA）对未结合胆红素（unconjugated bilirubin, UCB）诱导的小鼠小胶质细胞BV2损伤的影响。方法 BV2细胞实验分为两部分。（1） CMA激活实验分为：对照组（等体积二甲基亚砜处理）、QX77组（20μmol/L QX77处理24 h）、UCB组（40μmol/L UCB处理24 h）、UCB+QX77组（20μmol/L QX77和40μmol/L UCB共处理24 h）。（2）细胞转染实验分为：LAMP2A沉默对照组（等体积二甲基亚砜处理）、LAMP2A沉默对照+UCB组（40μmol/L UCB处理24 h）、LAMP2A沉默组（等体积二甲基亚砜处理）、LAMP2A沉默+UCB组（40μmol/L UCB处理24 h）。采用改良MTT法检测细胞存活率,蛋白免疫印迹法检测p65、核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor protein 3, NLRP3)、半胱氨酸天冬...     

宫内急性缺血缺氧后胎鼠肾脏钙离子腺苷三磷酸酶动态变化的研究

目的：研究宫内急性缺血缺氧后(HI)胎鼠肾脏钙离子腺苷三磷酸酶(Ca2+-ATPase)的动态变化,探索围产期窒息后肾损伤发生细胞内钙超载的机制。方法：通过钳夹孕21 d大鼠供应子宫的动静脉血管,制成胎鼠宫内不同程度HI模型和HI后再灌注不同时间模型。采用化学方法测定胎鼠肾脏细胞膜和线粒体Ca2+-ATPase的活性变化。结果：假手术组胎肾细胞膜和线粒体Ca2+-ATPase活性分别为(7.476±0.353)和(3.470±0.270) 微摩尔磷/毫克蛋白·小时(μmol.Pi/mgprot.h),宫内HI 15 min后Ca2+-ATPase活性均明显减弱,分别为(6.411±0.210)和(2.886±0.245) μmol.Pi/mgprot.h,(P0.05),但线粒体Ca2+-ATPase活性(3.234±0.143) μmol.Pi/mgprot.h,仍低于假手术组(P<0.05)。结论：宫内HI后胎肾Ca2+-ATPase活性的降低是发生细胞内钙超载导致肾损伤的重要机制。     

Pentoxifylline does not prevent hypoxia/reoxygenation-induced necrotizing enterocolitis. An experimental study

Hypoxia/reoxygenation (H/R)-induced intestinal injury plays a significant role in the development of necrotizing enterocolitis (NEC). We experimentally explored the effect of pentoxifylline (PTX) on an NEC model. Twenty-one newborn rabbits were divided into three groups: group 1 (control), group 2 (H/R) and group 3 (H/R + PTX). Five minutes of reoxygenation following 5 min of hypoxia was performed three times a day during 3 days. Before each H/R procedure in the H/R + PTX group, the rabbits were treated with PTX 25 mg/kg intraperitoneally. Animals were sacrificed on the third day and ileum samples were taken for histopathological examination and biochemical enzyme studies [superoxide dismutase (SOD), glutathione peroxidase (GPx), glutathione reductase (GR), and glutathione S-transferase (GST)]. There was a significant difference in the grade and number of the intestinal lesions between controls and the H/R and H/R + PTX groups (p < 0.001), but no significant difference was found between the H/R and the H/R + PTX groups (p > 0.05). Intestinal SOD, GR and GST activities in the H/R and H/R + PTX groups were significantly higher than in the control group (p < 0.05); however, there was no significant difference between the H/R and H/R + PTX groups (p > 0.05). Significantly reduced GPx activity was found in the H/R and H/R + PTX groups compared with the controls (p < 0.05). No significant difference in GPx activity existed between the H/R group and the H/R + PTX group (p > 0.05). Ischemia/reperfusion injury was responsible for mediating hypoxia-induced intestinal necrosis in NEC and PTX pretreatment did not have a protective effect on NEC.     

Protective effects of vitamin E and omeprazole on the hypoxia/reoxygenation induced intestinal injury in newborn rats

Evaluation of prophylactic effects of omeprazole and/or vitamin E on the formation of free oxygen radicals (FOR) and bowel histopathology in the newborn rat model of hypoxia/reoxygenation (H/R) that resembles human necrotizing enterocolitis (NEC). Eighty newborn rats were randomly divided into eight groups. H/R was done using airtight chamber. Rats were exposed to 100% CO(2) for 15 min followed by a reoxygenation for the next 15 min with 100% O(2). Group 1 (n = 10) was the control group. Group 2 (n = 10) rats received vitamin E. In Group 3 (n = 10) omeprazole was administrated. Group 4 (n = 10) rats received omeprazole and vitamin E. Group 5 (n = 10) rats were subjected to H/R two times for 2 days and one time for 3 days. Group 6 (n = 10) received vitamin E in addition to H/R for 5 days and in Group 7 (n = 10) omeprazole in addition to H/R for 5 days. In Group 8 (n = 10), vitamin E and omeprazole and H/R were applied for 5 days. Rats were killed at the end of the each process and bowel specimens were harvested for histopathological and biochemical investigations. We administrated vitamin E intramuscularly 300 unit/kg per day and omeprazole orally 20 mg/kg per day. Malondialdehyde (MDA), xanthine oxidase (XO), xanthine dehydogenase (XDH) and XO/(XO + XDH) were measured. Vitamin E and/or omeprazole treated rats had significantly less XO% levels than H/R only group (0.36, 0.38 and 0.57, respectively). Similarly, the MDA levels were significantly lower in vitamin E and/or omeprazole received rats than H/R only rats (88.8, 97.9 and 122.6, respectively). All rats treated with omeprazole and/or vitamin E had better biochemical and histopathological levels compared to H/R rats (p < 0.05). Histopathological results show that Group 5 (H/R only) had significantly more intestinal damage when compared with Group 6 (vitamin E + H/R), Group 7 (omeprazole + R/H) and Group 8 (vitamin E + omeprazole + H/R) (p < 0.001). Grade 2 and 3 intestinal damages were only in Group 5 and there were no statistical difference between in Groups 6, 7 and 8 (p > 0.001). Omeprazole and/or vitamin E may protect the biochemical and histopathological intestinal damage of H/R injury in rats. These drugs may be beneficial in the prophylaxis of NEC in humans as well.     

毒胡萝卜素诱导肾小管上皮细胞内质网应激后中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白的变化

目的 观察毒胡萝卜素引起肾小管上皮细胞内质网应激后中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(neutrophil gelatinase associated lipocalin,NGAL)的改变及意义.方法 使用毒胡萝卜素构建人肾小管上皮细胞内质网应激模型,免疫印迹法检测模型中内质网应激蛋白CHOP、GRP78表达水平,验证模型构建情况.Western-blot检测实验组(毒胡萝素组)与对照组(正常肾小管上皮细胞)中NGAL蛋白的表达情况.结果 毒胡萝卜素的最佳给药浓度分别为2.5 μmol/L和5rnol/L,分别作用4h和8h.与毒胡萝卜素作用4h比较,作用8h后细胞中内质网应激指标CHOP和GRP78蛋白的表达量显著增加(0.785±0.049比0.585±0.045),(0.728±0.064比0.523±0.030),差异有统计学意义(P＜0.05).与毒胡萝卜素作用4h细胞中NGAL蛋白的表达量比较,作用8h后表达量显著增加(0.826±0.057比0.567±0.024),并随着内质网应激的加重增加得更为明显(P＜0.05).结论 用毒胡萝卜素诱导正常人肾小管上皮细胞,能够出现内质网应激现象,可引起CHOP、GRP78和NGAL表达增加.随着内质网应激的加重,NGAL增加得更为明显.在内质网发生应激时NGAL表达增加,两者可能存在相关性.     

一氧化氮与肾小球疾病关系的初步研究

目的　了解一氧化氮（ＮＯ）与肾小球疾病发病关系。方法　采用Ｇｒｉｅｓｓ 硝酸盐还原法对４４ 例急性肾炎,３２ 例肾病综合征,１８ 例紫癜性肾炎进行了血清亚硝酸／硝酸盐（ＮＯ２－／ＮＯ３ －） 测定,并以２８ 例健康儿童作对照。结果　疾病组血清ＮＯ２ －／ＮＯ３ － 的浓度（ 急性肾炎：７０ ．８ ±３４．７ μｍｏｌ／Ｌ;肾病综合征：６６ ．６ ±２７．９;紫癜性肾炎：４７ ．４ ±２１．４ μｍｏｌ／Ｌ） 显著高于对照组（３０．３ ±８ μｍｏｌ／Ｌ,Ｐ＜０ ．０１）,疾病急性期高于缓解期（ Ｐ＜ ０．０５）,伴有感染者（９３ ．５ ±３２．９ μｍｏｌ／Ｌ） 高于无感染者（４８ ．７±１４ μｍｏｌ／Ｌ,Ｐ＜ ０．０１）。肾病综合征血清ＮＯ２－／ＮＯ３ － 浓度与胆固醇水平呈负相关（ Ｐ＜ ０ ．０１） ,与血浆白蛋白及尿蛋白定量无相关（Ｐ＞ ０．０５） 。结论　ＮＯ 可能参与这３ 种肾小球疾病发病及病理损伤过程。     

塞来昔布对神经母细胞瘤细胞生长周期的影响及机制的研究

目的 探讨特异性环氧化酶-2(COX-2)抑制剂塞来昔布(celecoxib)对人神经母细胞瘤细胞系SH-SY-5Y细胞生长周期的影响及其分子生物学作用机制.方法 不同浓度组塞来昔布处理SH-SY-5Y细胞,倒置显微镜观察药物作用后的细胞形态学变化,MTT法检测各浓度组作用48 h后细胞的增殖情况,流式细胞仪检测不同浓度塞来昔布作用后对细胞周期的影响,Western blot检测药物作用前后细胞周期蛋白CyclinD1、P16、P21蛋白表达的变化.结果 ①不同浓度塞来昔布作用后,倒置显微镜观察到细胞形态学改变,SH-SY-5Y细胞为细长的梭形,少数呈类三角形,随着药物浓度的增加,细胞变短、变圆.整个细胞的形态由梭形逐渐变为类多角形,最后细胞间隙增大,细胞变圆;②MTT法显示,塞来昔布以10、20、40、80μmol/L分别作用于SH-SY-5Y细胞48 h时,其细胞增殖率分别为(90.1±3.6)%、(69.3±3.7)%、(44.2±4.6)%、(10.2±2.9)%,不同浓度组间比较,差异有统计学意义(P＜0.05),塞来昔布在一定剂量范围内以剂量依赖性的方式抑制SH-SY-5Y细胞的生长;③流式细胞仪检测发现随药物作用浓度增加,当塞来昔布以0、10、20、40、80 ttmol/L分别作用于SH-SY-5Y细胞48 h时,G0/G1期细胞比例分别为(50.7±4.0)%,(55.1±5.2)%,(67.2±3.9)%,(71.1±3.8)%,(75.5±4.8)%,其中20、40、80μmol/L组与未加药组比较,差异有统计学意义(P＜0.01);④Western blot显示随着药物浓度的增加,细胞中CyclinD1蛋白的表达水平逐渐降低,细胞巾P21、P16蛋白的表达水平逐渐增加.结论 塞来昔布抑制SH-SY-5Y细胞的牛长并阻滞细胞牛长在G1期,其机制与通过抑制细胞周期蛋白CyclinD1的表达及增加细胞周期蛋白抑制因子P21、P16表达可能有关.塞来昔布可望成为神经母细胞瘤治疗的新的药物.     

参麦注射液 生长激素 硫酸锌 维生素C对心肌细胞存活力的保护作用

目的：氧自由基和血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)过多是造成心肌损害的重要机制,为有效保护心肌,为心肌损害治疗开辟一个新途径,本文研究参麦注射液(SMI)、生长激素(GH)、硫酸锌(ZnSO4)、维生素C(VitC)对过氧化氢(H2O2)或AngⅡ损伤下降的心肌细胞存活力(CMV)的影响。方法：用新生大鼠心肌细胞加入H2O2(200 μmol/L,500μmol/L)或AngⅡ(10-6mol/L,10-7mol/L)使CMV下降作为对照组(共4组);在加入H2O2或AngⅡ的同时加入SMI(5 ml/L和10 ml/L),VitC(50 mg/L),ZnSO4(15μmol/L和60 μmol/L)或GH(250 μmol/L和500μmol/L)作为保护组。检测各组在加药24 h后的CMV增高率。结果：SMI,GH,ZnSO4和VitC均可显著提高因H2O2损伤而下降的CMV增高率。以SMI 10 ml/L的效果最好;其次为ZnSO4 60 μmol/L;再其次为SMI 5 ml/L,VitC 50 mg/L;最差为GH 500 μmol/L,GH 250 μmol/L和ZnSO4 15 μmol/L,其中SMI 5 ml/L和VitC 50 mg/L间差异无显著性,后3者间差异也无显著性。SMI和GH可显著提高AngⅡ所致的CMV下降,以SMI 10 ml/L效果最好;其余依次为SMI 5 ml/L,GH 500 μmol/L和GH 250μmol/L,但后2者间差异无显著性(P>0.05)。结论：SMI和GH对因H2O2或AngⅡ损伤下降的CMV有显著提高作用。     

新生儿期至青春期血中肉碱和酰基肉碱的变化

目的 用串联质谱测定不同年龄儿童血中游离肉碱和各种酰基肉碱浓度,为诊断肉碱缺乏和各种有机酸和脂肪酸代谢病奠定基础.方法 研究对象是围产期新生儿1376例,大于1周的新生儿49例,小于1岁的婴幼儿64例,1～15岁儿童401例.围产期新生儿是无选择的产院出生儿,包括了少量早产儿和低出生体重儿.其余主要是排除了发热、腹泻、肝病、严重疾病等影响脂肪代谢的门诊小手术的体检儿童.用非衍生法前处理滤纸血片,串联质谱测定其中游离肉碱和30种酰基肉碱浓度.结果 游离肉碱(C0)、短链酰基肉碱(C2、C3、C4、C5)、中链酰基肉碱(C6、C8、C 10)及其烯酰基、羟基、二酰基肉碱和总肉碱水平新生儿阶段较低,1～3个月时最高,之后降低,2～15岁在相同水平维持.长链酰基肉碱(C12、C14、C16、C18)及其烯酰基肉碱、羟基酰基肉碱及其总和新生儿阶段最高,逐渐降低,2～15岁在相同水平维持.游离肉碱浓度(23.387±7.702)μmol/L,(30.064±8.252)μmol/L,(25.021±6.630)μmol/L,总长链酰基肉碱浓度(4.998±1.557)μmol/L,(2.854±0.821)μmol/L,(2.459±0.553)μmol/L,肉碱酰基肉碱总浓度(43.497±12.632)μmol/L,(49.013±12.497)μmol/L,(39.656±9.257)μmol/L在新生儿组、小于1岁组和大于1岁组差异有统计学意义(P＜0.01).围产期新生儿男婴组肉碱(24.115±7.715)μmol/L和肉碱和酰基肉碱总和(43.65±5.252)μmol/L分别高于女婴(22.696±7.246)μmol/L和(41.90±5.038)μmol/L(P＜0.05).新生儿组游离肉碱占总肉碱比值(54.0%±7.1%)明显小于非新生儿组(62.1%±6.1%,P＜0.05),而长链(33.5%±6.0%)、中链(1.3%±0.3%)和短链脂酰基肉碱(11.6%±2.5%)与总肉碱比值分别高于非新生儿组(30.1%±4.9%;0.9%±0.6%;6.5%±2.3%,P＜0.05).结论 1岁以内血中肉碱和酰基肉碱水平和构成变化较大,在评价肉碱营养状态和诊断有机酸和脂肪酸代谢病时要考虑年龄因素.围产期新生儿男婴肉碱和酰基肉碱略高于女婴.