精液中一氧化氮含量与精子凋亡关系的初探

目的研究精液中一氧化氮（NO）含量对精子凋亡的影响及其与男性不育之间的相关性,寻找治疗男性不育的有效途径。方法依据世界卫生组织（WHO）标准进行精液常规检测。应用硝酸还原酶法测定不育组和对照组精液中NO的含量。应用末端脱氧核苷酸转移酶（TdT）介导的原位末端标记（TUNEL）法检测精子凋亡情况,观察不育组精子凋亡的形态结构改变,统计2组间精子凋亡率。结果不育组精液中NO含量[（58．37±14．14）μmol/L]高于对照组[（35．20±8．23）μmol／L]（P〈0．01）;对照组精子凋亡率为9．67％±2．54％,低于不育组精子凋亡率33．98％±10．54％（P〈0．01）。将不育组分为弱精组、少精组和畸形精子组,以畸形精子组NO含量最高,凋亡率也为最高,弱精组及少精组次之。结论不育组高浓度NO和精子凋亡率呈正相关,随着NO浓度增高,精子凋亡率增加。精液中高浓度NO可能是男性生育力下降的原因之一。     

精液抗氧化物尿酸与生殖细胞凋亡的关系

目的探讨人精液抗氧化物尿酸与生殖细胞凋亡的关系。方法参照WHO标准方法,进行精液常规分析,按精子密度(×109/L)、活动率(%)不同分为4个组(正常、<20、20~40、>40)。采用尿酸酶—过氧化物酶偶联法检测精液尿酸含量。用脱氧核苷酸末端转移酶(T dT)介导的缺口末端标记(TUNEL)和瑞-姬染色法,分别检测和观察生殖细胞的凋亡。结果75例不育者精液尿酸含量和生殖细胞的凋亡率分别为163.37±57.15μm o l/L和(16.38±1.25)%,与正常生育组397.60±52.1μm o l/L、(4.61±1.23)%比较呈显著性差异(P<0.01)。精子密度和活动率随精液尿酸含量减少而降低,生殖细胞凋亡率随之上升(P<0.01)。不育组精液尿酸含量与生殖细胞的凋亡率呈显著性负相关(r=0.93,P<0.05)。凋亡的生殖细胞体积缩小,核染色质致密,凝聚在核周围形成新月形,或核裂解形成凋亡小体。结论精液尿酸含量与生殖细胞的凋亡有着密切关系。精液低尿酸含量时睾丸生殖细胞凋亡率高,精子密度和活率下降致男性不育。     

人精液白细胞密度与活性氧和尿酸的关系研究

目的:探讨白细胞精子症不育患者精液中白细胞(WBC)密度与活性氧(ROS)和尿酸(UA)之间的关系。方法:依据WHO诊断标准,选择白细胞精子症不育者45例,非白细胞精子症不育者35例,生育者30例,采用过氧化物酶染色法进行精液WBC密度计数;用硫代巴比妥酸(TBA)显色法测定丙二醛(MDA)值;采用尿酸酶-过氧化物酶偶联法测定UA含量。结果:白细胞精子症组精液MDA值[(20.795±8.132)μmol/L]、WBC计数[(1.785±0.686)×109/L]显著高于生育组MDA值[(8.415±3.673)μmol/L]、WBC计数[(0.038±0.024)×109/L],而UA含量[(146.9±67.1)μmol/L]低于生育组UA含量[(398.6±52.3)μmol/L](P<0.01)。结论:白细胞精子症不育患者精液ROS产生增多,致抗氧化物UA含量下降,使精子中毒受损。提示临床在治疗时应加用抗氧化药物,可提高疗效。     

精浆锌含量与精液质量关系分析

目的 分析精浆锌含量与精液质量之间的关系.方法 采集79例男性不育患者和24例有生育健康男性(对照组)精液样本,采用彩色精液质量图文分析仪进行精液参数检测,采用改良巴氏染色法进行精子形态分析,采用改良PAR化学比色法测定精浆锌含量.结果 少精组、弱精组精浆锌含量均低于对照组(P<0.05),精浆锌含量与精子密度呈正相关(r=0.301,P<0.05),精浆锌含量不影响精子活力及形态.结论 有生育健康男性精浆锌含量高于不育患者,精浆锌含量降低可导致精子密度下降,但对精子活力和形态没有显著影响.     

男性不育患者AsAb及精液中No水平与Na~+-K~+-ATP酶检测的临床评价

目的探讨抗精子抗体(AsAb)及精液中一氧化氮(NO)水平Na+-K+-ATP酶活性与男性不育的关系。方法分别采用ELISA法、硝酸还原酶法、钼蓝分光光度法测定132名男性不育患者及56名正常生育男性血清AsAb(IgGI、gM、IgA),精液中NO水平及Na+-K+-ATP酶活性。结果男性不育组AsAb阳性率37.12%,显著高于正常生育组3.57%(P<0.0 1);男性不育组精液中N0水平151.6±29.7μmol/L,显著高于正常生育组78.9±23.5μmol/L(P<0.01);男性不育组精液中Na+-K+-ATP酶活性为24.42±8.47μmol Pi/mg(Prot).h-1,显著低于正常生育组46.63±9.41μmolPi/mg(Prot).h-1(P<0.05)。结论血清AsAb是男性不育的确诊指标之一,精液中高水平NO与低Na+-K+-ATP酶活性可能是导致男性不育的原因之一。     

流式细胞术结合FITC-Annexin V/PI荧光染色检测人精子凋亡

男性不育 ,是一种病因比较复杂的临床综合征 ,其病因很多 ,有的病因已清楚 ,但仍有不少病因不明确。为从分子水平上了解特发性男性不育症 (特发性少精、弱精、畸精子症 )的分子机理 ,我们应用流式细胞术 (flowcytometry ,FCM )结合FITC AnnexinV/PI荧光染色定量检测正常生育与特发性不育症患者精子凋亡的情况 ,同时建立一种从分子水平评估精子功能和男性生育力的新方法。一、对象与方法1.对象 :( 1)特发性不育组 :3 6例 ,来自不育门诊患者、婚后 2年以上不育。根据WHO精液常规检测标准选择特发性少精、弱精、畸形精子症患者 ,年龄 2 4…     

人精液中白细胞与NO和UA的关系探讨

目的探讨白细胞精子症不育精液中白细胞(W BC)密度、一氧化氮(NO)和尿酸(UA)之间的关系。方法依据WHO诊断标准,选择白细胞精子症不育者40例,非白细胞精子症不育者35例,生育者30例,采用过氧化物酶染色法进行精液W BC密度计数;采用镀铜镉还原荧光法检测NO代谢产物硝酸盐(NO3-);UA含量测定采用尿酸酶-过氧化物酶偶联法。结果白细胞精子症组精液NO 106.95±4.13μm o l/L,W BC(1.985±0.696)×109/L显著增高,而UA含量166.9±68.1μm o l/L降低;生育组NO 41.31±3.67μm o l/L,W BC(0.038±0.024)×109/L和UA含量398.6±52.3μm o l/L(P<0.01)。UA与NO及W BC均呈显著性负相关(r=-0.795,P<0.01;r=-0.857,P<0.01)。结论白细胞精子症患者精液NO产生增多致UA含量下降,使精子中毒受损。提示临床在治疗时应加用抗氧化药物,可提高疗效。     

NRF2启动子甲基化与男性不育

目的探讨抗氧化基因NRF2启动子上游CpG岛内408⁹94 bp位置处的甲基化水平与男性不育之间的关系。方法酚氯仿法手提精子DNA,建立重亚硫酸盐修饰精子DNA后克隆测序法(即BSP-克隆测序法),选择正常男性及不育中少、弱、畸精症男性患者每份精液样本DNA的抗氧化基因NRF2的三个片段,每个片段选择15994 bp位置处的甲基化水平与男性不育之间的关系。方法酚氯仿法手提精子DNA,建立重亚硫酸盐修饰精子DNA后克隆测序法(即BSP-克隆测序法),选择正常男性及不育中少、弱、畸精症男性患者每份精液样本DNA的抗氧化基因NRF2的三个片段,每个片段选择15²0个正确的克隆结果并比较其甲基化水平。结果不育男性少、弱精组和正常精液组其抗氧化基因NRF2启动子上游40820个正确的克隆结果并比较其甲基化水平。结果不育男性少、弱精组和正常精液组其抗氧化基因NRF2启动子上游408⁹94 bp处99%甲基化位点均为非甲基化状态,正常男性精子DNA第7个甲基化位点缺失率(18.14%)明显比少弱精组(24.9%)缺失率低(P<0.05)。结论虽然正常生育男性及不育男性少、弱精患者抗氧化基因NRF2启动子上游408994 bp处99%甲基化位点均为非甲基化状态,正常男性精子DNA第7个甲基化位点缺失率(18.14%)明显比少弱精组(24.9%)缺失率低(P<0.05)。结论虽然正常生育男性及不育男性少、弱精患者抗氧化基因NRF2启动子上游408⁹94 bp区均呈现非甲基化状态但其第7个甲基化位点缺失可能与精子成熟障碍有关。     

吸烟对男性精液质量的影响

目的:探讨吸烟对精液质量的影响。方法:选择2003-01/2005-06右江民族医学院附属医院男性不育门诊诊疗的不育男性174例,根据吸烟与否及吸烟量和吸烟时间分为3组:对照组66例,为不育非吸烟男性;小烟量短烟龄组66例,吸烟量≤20支/d,吸烟时间≤10年;大烟量长烟龄组42例,吸烟量>20支/d,吸烟时间>10年。受检者取精液前禁欲3～5d,用手淫法采集精液,全部收集于无菌玻璃容器中,置于37℃水浴箱中恒温30min,准确观察和计时精液的液化时间。待精液液化后进行精液质量分析及精子穿透力实验(玻片法,毛细管法)。用改良巴氏染色法进行染色、封固后观察精子形态。所有标本均使用重庆产的XSSeed2070精液质量分析系统按WHO规定的标准分析精子的所有动、静态参数。取精浆测定其锌、铁、铜、钙、镁无机元素,检测方法采用高频等离子发射光谱法。结果:纳入患者174例,均进入结果分析。①精液各参数比较:3组患者精液量、pH比较差异无显著性(P>0.05);小烟量短烟龄组和大烟量长烟龄组精子密度、精子活动率、Ⅲ级活动精子率、精子形态正常率与对照组比较显著下降眼小烟量短烟龄组分别为(39.6±18.4)×109L-1,(58.4±17.8)%,(23.4±14.2)%熏(76.5±14.5)%熏大烟量长烟龄组分别为(31.7±18.3)×109L-1,(52.7±18.1)%,(19.1±14.3)%熏(70.6±14.3)%熏对照组分别为(45.9±17.8)×109L-1,(64.7±18.6)%,(28.4±14.6)%熏(81.8±14.6)%熏P<0.05演,而0级活动精子率、精子头部畸形率与对照组比较显著上升眼小烟量短烟龄组分别为(42.7±15.3)%,(16.6±8.2)%熏大烟量长烟龄组分别为(47.3±16.0)%,(20.2±9.2)%熏对照组分别为(36.3±16.1)%熏(13.8±7.6)%熏P<0.05演;而且大烟量长烟龄组体部畸形率、尾部畸形率也显著上升(P<0.01)。②精液液化时间、精子活动度及精子穿透力比较:大烟量长烟龄组精液液化时间、精子活动度及精子穿透力异常率与对照组比较差异显著(大烟量长烟龄组分别为33.3%,73.8%熏45.23%,对照组分别为15.1%熏51.5%熏25.7%,P<0.05),但小烟量短烟龄组与对照组比较差异无显著性(P>0.05)。③精浆中无机元素含量比较:锌含量与吸烟量和吸烟时间呈一定程度的负相关(P<0.05～0.01),大烟量长烟龄组铜含量与对照组比较差异显著眼分别为(0.39±0.18),(0.48±0.25)mg/L熏P<0.05演,而铁、钙、镁的含量与吸烟无相关关系(P>0.05)。结论:吸烟对精液质量的影响存在着量效和时效的关系,大量吸烟和长期吸烟可能是引起男性不育的原因之一。     

不育男性精子形态和解脲支原体感染的相关性研究

目的通过对郑州地区解脲支原体感染患者精子形态的研究,探讨解脲支原体感染与不育男性精子形态之间的相关性,为临床诊断和治疗男性不育症提供参考。方法收集285例郑州市地区男性不育症患者的精液,并以是否感染解脲支原体分为阳性组和阴性组,比较2组精子的形态及活力,分析解脲支原体对男性不育的影响作用。结果解脲支原体阳性组精子头部和尾部畸形率高于阴性组,差异有统计学意义[头部畸形:(53.40±5.21)%,(50.10±4.35)%;尾部畸形:(8.70±2.31)%,(3.60±4.36)%;P0.05];解脲支原体阳性组头部、体部和尾部畸形率都明显高于正常组,差异有统计学意义[头部畸形:(53.40±5.21)%,(34.20±3.78)%;体部畸形:(9.30±5.98)%,(4.50±5.31)%;尾部畸形:(8.70±2.31)%,(4.10±3.57)%;P0.05];解脲支原体阳性组精子活力A级+B级和A级百分率[(32.30±3.82)%,(12.50±4.45)%]均低于阴性组[(38.50±5.29)%,(14.60±3.67)%],且明显低于正常组,差异有统计学意义[(55.00±4.95)%,(29.60±5.31)%;P0.05]。结论解脲支原体感染能够影响精子形态和活力,从而导致男性不育。     

男性不育者精液中一氧化氮和顶体酶、透明质酸酶、酸性磷酸酶的变化

目的探讨男性不育者精液中一氧化氮(NO)和顶体酶(ACE)、透明质酸酶(HYD)、酸性磷酸酶(ACP)的变化。方法参照世界卫生组织(WHO)标准方法进行精液常规分析,按精子密度、活动率不同分组。采用镀铜镉还原荧光法检测NO代谢产物硝酸盐(NO3-);用改良的Kennedy法检测精子ACE活性;用Singer法测定HYD活性;采用磷酸苯二钠法检测ACP。结果72例不育各组NO含量明显高于正常生育组(P<0.01),而ACE、HYD、ACP活性则明显低于正常生育组(P<0.01),随精子密度、活动率减少和畸形率增高而NO含量升高,ACE、HYD、ACP活性降低。结论精液酶类是评价精子成熟、活动率及穿卵受精能力的重要指标,NO对精子酶活性有抑制灭活作用,可影响精子的受精能力,对男性不育的诊断治疗具有重要价值。     

尼古丁对雄性小鼠睾丸中一氧化氮含量的影响

目的研究尼古丁损伤雄性小鼠生殖功能的可能机制。方法选用8周龄的昆明小鼠24只,随机分成两组,实验组皮下注射尼古丁(4.286 mg.kg-1.d-1)8周,对照组皮下注射等量0.9%氯化钠注射液。8周后,检测小鼠附睾中精子数目及精子活力、睾丸和血清中睾酮含量、睾丸中一氧化氮(NO)含量和相关诱导型NO合酶的蛋白表达情况。结果实验组较对照组精子数目减少(P<0.05),精子活力下降(P<0.05),睾丸和血清中睾酮含量下降(P<0.05),睾丸中NO含量增加(P<0.05),诱导型NO合酶表达增加(P<0.05)。结论在尼古丁的刺激下,睾丸中NO的含量增加,可能是导致生殖功能损伤的机制之一。     

Modulation of apoptosis by nitric oxide: implications in myocardial ischemia and heart failure

The purpose of this review is to summarize the regulation of apoptosis by nitric oxide (NO) and to discuss the potential role that NO plays in cardiomyocyte apoptosis during myocardial ischemia/reperfusion and development of heart failure. NO is an important regulator of apoptosis within the mammalian system, capable of both inducing and preventing apoptosis, depending upon the level of NO production and environmental milieu. This bifunctional capacity is well illustrated in the heart. It appears that high levels of NO produced by inducible nitric oxide synthase (iNOS) promote apoptosis while basal levels of NO production from endothelial nitric oxide synthase (eNOS) protect cardiomyocytes from apoptosis. Since permanent loss of cardiomyocytes due to apoptosis contributes to the development of heart failure, inhibition of cardiomyocyte apoptosis may have therapeutic implications. Given its pro- and anti-apoptotic capacity within the heart, NO may serve as a valuable therapeutic target in myocardial ischemia and heart failure.     

精子凋亡与精子密度、活力、形态关系探讨

目的 探讨精子凋亡与精子密度、活力、形态关系。方法 分析69例男性不育患者精液样本,采用计算机辅助精液分析进行精液参数检测,采用精子形态检测系统下人工修正方法进行精子形态分析,瑞-姬染色检测精子凋亡率。结果 精子凋亡率与精子密度之间没有显著相关性（P〉0.05）,精子凋亡率与精子活力、正常形态精子百分率之间有显著负相关性（P〈0.01,P〈0.05）;活力异常组精子凋亡率高于活力正常组,两组比较差异有显著性（P〈0.05）;严格标准下,形态异常组精子凋亡率高于形态正常组,两组比较差异有显著性（P〈0.01）。结论 精子凋亡率与精子活力和正常形态精子有相关性,精子凋亡率增加可能是弱精子症和畸形精子症患者不育的原因之一。     

幽门螺杆菌与一氧化氮及胃粘膜病理变化的关系

目的 :通过观察 Hp感染后血清 NO及 NOS水平变化及其对胃粘膜病理改变的影响 ,来探讨 Hp的可能致病机理。方法 :随机选取 Hp阳性患者 5 0例 ,Hp阴性患者 35例 ,病理学检查的同时检测其血清中 NO及 NOS的含量。结果 :Hp阳性组血清 NO和 NOS含量分别高于 Hp阴性组 (P<0 .0 1)。在 Hp阳性患者中 ,血清中 NO和 NOS含量在慢性炎症组明显低于其他 3组 (P<0 .0 5 )。但在 Hp阴性组中 ,慢性胃炎患者血清中 NO含量低于其他 3组 (P<0 .0 5 ) ,而血清中 NOS含量在各组之间无明显差异。结论 :Hp诱导的 NO表达水平可能与胃癌前期病变相关。除 Hp可导致 NO合成增加外 ,癌前期病变还可通过其他炎症介质激活 NO的产生途径。     

小儿心血管疾病血浆NO测定的临床意义

目的 探讨先心病合并心衰、心肌炎病儿血浆ＮＯ测定的临床价值。方法 取外周血采用硝酸还原酶法测定ＮＯ以及一氧化氮合酶（ＮＯＳ）。结果 先心病合并心衰、心肌炎组ＮＯ分别高于对照组（Ｐ〈０．０１）。结论心衰时ＮＯ升高可抵消心衰神经激素导致的血管收缩反应,心肌炎对ＮＯ升高说明ＮＯ与心肌炎发病机制有一定关系。     

癫痫与热性惊厥患儿血清催乳素及一氧化氮/一氧化氮合酶测定的临床意义

目的探讨血清催乳素（PRL）、一氧化氮／一氧化氮合酶（NO／NOS）体系用于癫痫与热性惊厥的诊断和鉴别诊断的意义。方法分别采用化学发光法和分光光度法测定25例癫痫患儿、20例热性惊厥患儿及15例正常儿的血清PRL和NO／NOS水平。结果癫痫组血清PRL水平显著高于热性惊厥组和对照组（P〈0．05），癫痫组与热性惊厥组血清NO／NOS水平均显著高于对照组（P〈0．05），癫痫组显著高于热性惊厥组（P〈0．05）。结论检测癫痫与热性惊厥患儿血清中PRL、NO／NOS水平，可为临床诊断和鉴别诊断提供依据。     

雾化吸入氯胺酮对哮喘大鼠肺组织一氧化氮及一氧化氮合酶的影响

目的通过建立大鼠支气管哮喘模型,观察不同浓度氯胺酮对哮喘大鼠肺组织iNOS活性及NO含量的影响。方法SD大鼠随机分成对照组(N组)、哮喘模型组(A组)、不同浓度氯胺酮预处理组(分别为K1组、K2组)和地塞米松组(D组),每组8只。A组大鼠用卵白蛋白辅以百日咳杆菌菌苗和氢氧化铝为佐剂注射致敏,2周后雾化吸入卵蛋白激发哮喘;氯胺酮处理组大鼠用同样方法致敏,但在激发前分别给予雾化吸入氯胺酮25 g/L(K1组)和50 g/L(K2组);D组在激发前给予雾化吸入0.01%地塞米松;N组用生理盐水替代卵蛋白进行注射和吸入。每组分别测定其肺组织NO2-/NO3-水平、肺组织诱导型NOS(iNOS)和原生型NOS(cNOS)活性水平,并用免疫组织化学法观察iNOS在大鼠哮喘模型肺组织中的分布。结果A组肺组织中NO2-/NO3-和iNOS水平升高,iNOS和肺组织NO2-/NO3-水平呈高度正相关;K1、K2组肺组织中NO2-/NO3-和iNOS水平低于A组(P<0.05);D组肺组织中NO2-/NO3-和iNOS水平亦低于A组(P<0.05)。结论25 g/L或50 g/L的氯胺酮雾化吸入可抑制哮喘大鼠肺组织iNOS活性,降低NO含量,减轻大鼠肺部炎症。     

保心汤对冠心病心绞痛血浆一氧化氮的影响

目的：观察保心汤对冠心病心绞痛(气虚血瘀证)患者血浆一氧化氮(NO)的影响。方法：62例患者分为保心汤组和对照组，分别采用保心汤和西药治疗4周后观察2组患者血浆一氧化氮的变化和治疗心绞痛的疗效。结果：2组治疗后心肌缺血心绞痛及心电图明显改善(P＜0．05)，2组间比较，差异无显著性(P＞0．05)，血浆NO保心汤组明显升高(P＜0．001)，与对照组比较差异有显著性(P＜0．01)。结论：保心汤能提高冠心病心绞痛(气虚血瘀证)患者的一氧化氮水平，从而保护血管内皮功能。