明党参多糖对NF—kB结合活性的影响

目的：观察明党参多糖对转录活化核蛋白因子ＮＦ－ｋＢ结合活性的影响。方法：在内毒素（ＬＰＳ）诱导Ｊ７４４．ａ．１小鼠的巨噬细胞析,可诱生出同的ＮＦ－ｋＢ活性,分别采用ＬＰＳ先刺激,ＬＰＳ后刺激和ＬＰＳ与明党参多糖同时刺激等３种方法对其处理,并分离核蛋白,行聚丙酰凝胶电泳及光密度扫描定量分析。结果：发现明党参多糖在３种情况下均可降低ＬＰＳ刺激所致的ＮＦ－ｋＢ结合活性。结论：明党参多糖要显著降低ＬＰＳ刺     

脑缺血与转录因子NF—kB

转录因子ＮＦ ｋＢ (Ｎｕｃｌｅａｒｆａｃｔｏｒ ｋａｐｐａＢ)是一种广泛存在于真核细胞内 ,能将信息从胞浆传至胞核引起相应基因表达的重要转录因子。它在机体免疫和炎症反应、生产、发育和死亡等有关基因转录过程中具有重要的调控作用。研究表明ＮＦ ｋＢ在由细胞因子、炎症介质和蛋白酶类参与的疾病的发病过程中发挥重要作用[1] 。1　ＮＦ ｋＢ与ＩｋＢＮＦ ｋＢ属Ｒｅｌ蛋白家族成员[2 ] ,由多肽 ｐ5 0和ｐ6 5亚基形成 ｐ5 0和ｐ6 5同源二聚体及 ｐ5 0 - ｐ6 5异源二聚体 ,其中发挥主要生理功能的是ｐ5 0 - ｐ6 5异源二聚体。Ｒｅｌ家…     

mm—LDL对内皮细胞转录因子NF—kB活性的影响

目的 研究轻微修饰低密度脂蛋白（mm-LDL）激活内皮细胞转录因子NF－kB的信号传导途径以及NF－kB对血小板源性生长因子B链（PDGFb）表达的调控作用。方法 以FeSO4修饰法制备mm-LDL,以正常LDL（n-LDL）作对照,作用于培养内皮细胞后提取核蛋白,用凝胶阻滞实验检测转录因子NF－kB停车场 及结合活性的变化。观察自由基清除剂probucol及PDTC对mm-LDL激活内皮细胞转录因子NF－kB的影响。通过检测报告基因探讨核因子诱导激酶（NIK）和核因子－kB抑制亚基激酶（IKK）在激活内皮细胞转录因子NF－kB的信号传导途径中的作用以及mm-LDL激活的NF－kB对PDGFb基因启动子的作用。结果 mm-LDL能激活培养内皮细胞转录因子NF－kB,自由基清除剂probucol和PDTC对mm-LDL激活内皮细胞转录因子NF－kB还能增加带有PDGFb基因上游调控序列（－189／＋43)的报告基因荧光素酶的活性。Slot blot结果显示变异型NIK能显著减少受mm-LDL刺激的内皮细胞PDGFb mRNA含量。结论 mm-LDL可通过NIK－IKK途径激活内皮细胞转录因子NF－kB并促进PDGFb基因表达。     

小剂量茶碱对大鼠气道上皮细胞NF-κB活性的影响

目的 :观察小剂量茶碱是否对体外培养的哮喘模型大鼠气道上皮细胞中NF κB的活性存在影响。以进一步阐明茶碱类药物抗炎作用和免疫调节作用的机制。方法 :雄性Wistar大鼠随机分为 2组 ,对照组 (5只 ) ,哮喘模型组 (15只 ) ;模型组以卵清蛋白致敏和激发 ,建立哮喘模型。体外培养哮喘模型组和对照组大鼠的气道上皮细胞。分别观察加入脂多糖 (LPS)刺激前后NF κB活性的变化 ;在哮喘模型组大鼠的气道上皮细胞中加入不同浓度的氨茶碱与LPS(1μg·ml- 1 )共同培养 4h后 ,以及加入同一浓度氨茶碱和LPS(1μg·ml- 1 )共同培养不同时间后NF κB活性的变化。NF κB活性采用免疫组织化学方法检测 ,以细胞核染色作为阳性标准 ,以细胞核阳性的百分比表示NF κB的活性。结果 :经LPS刺激前 ,对照组和哮喘组大鼠气道上皮细胞胞浆NF κB均有一定程度的表达。细胞核表达的细胞 ,哮喘组为 (6 .4 %± 1.2 ) % ,而对照组为 (4 .7%± 1.7) % ,二者相比较 ,其差异具有统计学意义 (P <0 .0 5 )。经 1μg·ml- 1 脂多糖刺激 2h后 ,两组细胞胞核NF κB表达均明显上升 ,哮喘组为 (82 .5± 5 .2 ) % ,对照组为(79.3± 3.4 ) % ,两者相比 ,无统计学差异 (P >0 .0 5 )。在哮喘组大鼠上皮细胞中加入 1μg·ml- 1 脂多糖及各种浓度氨茶碱     

凝胶滞留电泳法测定大鼠肝组织细胞核NF—kB结合活性

应用大鼠肝组织细胞核蛋白提取物与特异NF－kB基因探针序列结合,经凝胶滞留电泳分析其结合能力。方法操作简便易行、重复性好。该方法的建立,为进一步研究核转录因子活性及其调控基因的表达,提供了一种可行的方法。     

小剂量茶碱对大鼠气道平滑肌细胞表达NF-κB与ICAM-1的影响

目的：观察小剂量茶碱对培养的大鼠气道平滑肌细胞表达核因子kB（NF-kB）与细胞间黏附分子1（ICAM-1）的影响，探讨小剂量茶碱在气道发挥抗炎作用的可能机制。方法：体外培养正常大鼠鼠婴的气道平滑肌细胞，将培养出的细胞随机分为3组：空白对照组、肿瘤坏死因子α（TNF-α）刺激组、茶碱干预组。采用免疫组织化学SP法检测经TNF—α刺激的大鼠的气道平滑肌细胞中加入不同浓度的茶碱共同培养4h，以及加入同一浓度茶碱共同培养不同时间，NF-kB活性和ICAM-1表达的变化。结果：TNF-α刺激组与空白对照组的NF—kB活性和ICAM-1表达相比较，差异均有显著性（P〈0．05）。经TNF-α刺激的大鼠的气道平滑肌细胞中加入5，10，15mg／L的茶碱共同培养4h，NF-kB活性和ICAM-1表达均有所下降。与TNF-α刺激组相比，5mg／L组无统计学差异（P〉0．05），余两组差异均有显著性（P〈0．05）。且茶碱干预组内两两比较，差异均有显著性（P〈0．05）。经TNF-α刺激的大鼠的气道平滑肌细胞中加入10mg／L茶碱共同培养2，4，24h。与TNF—α刺激组相比，茶碱处理组的差异均有显著性（P〈0．05）。但茶碱处理组内不同处理时间两两比较，差异无显著性（P〉0．05）。结论：茶碱可能通过抑制气道平滑肌细胞NF—kB活性和ICAM-1的表达，进而减少炎症细胞在气道的浸润。     

NF—kB及其活化的研究进展

核因子 -κＢ／Ｒｅｌ蛋白（ＮＦ -κＢ）是一种分布和作用均十分广泛的真核细胞转录因子 ,因首先发现于Ｂ细胞Ｉｇκ轻链转录调控而得名。ＮＦ -κＢ可双向调控一系列基因的表达 ,这些基因的表达产物主要是参与调控机体的免疫反应和炎症反应。在静止细胞中 ,ＮＦ -κＢ与其抑制蛋白ＩκＢ（ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎκＢ）结合 ,以无活性形式存在于细胞质中。细胞受ＴＮＦ -α、ＩＬ -１等刺激后 ,ＩＫＫ（ＩκＢ激酶）激活使ＩκＢ经快速磷酸化、泛素化后降解 ,释放出的ＮＦ -κＢ核易位 ,引起相应靶基因的转录激活或转录抑制。本文拟就ＮＦ -…     

核因子—kB在大鼠肺纤维化中的活性和表达及红霉素治疗对它？…

观察博莱素（ｂｌｅｏｍｙｃｉｎ,ＢＬＭ）致大鼠肺纤维化中核因子－ｋＢ（ｎｕｃｌｅａｒｆａｃｔｏｒ－ｋＢ,ｎｆ－Ｋｂ）活性和表达及红霉素治疗对其的影响。方法：用Ｗｉｓｔａｒ雄性大鼠一次性气管内注射ＢＬＭ制成肺纤维化模型,治疗组于ＢＬＭ灌注后每日胃内注入红霉素,对照组气管内,胃内注射生理盐水。     

NF—kB诱饵双链核苷酸在大鼠心脏移植中的作用

目的　利用大鼠异位心脏移植模型 ,探讨转染入心肌细胞中 NF- decoy诱饵双链核苷酸在心脏移植中的作用 ,并探讨其可能的作用机制。　方法　在建立大鼠颈部异位心脏移植模型的基础上 ,用不同浓度阳离子脂质体 L ipofectmine2 0 0 0与 NF- decoy诱饵 ds ODN混合物处理供心 ,比较其在心肌细胞内存活时间长短和移植后供心在 L angendorff-Neeley离体心脏顺灌左心做功模型中功能表现 ,测定心脏组织损伤生化学指标 ;半定量 RT- PCR法测定 ICAM- 1、VCAM、i NOS m RNA的表达。用 1 0 OD诱饵 ds ODN脂质体混合物处理供心 ,观察移植术后供心存活情况、心室组织组织切片排斥反应分级的差别和抗 ICAM- 1免疫组织化学染色。　结果　 L ipofectamine2 0 0 0可将 ds ODN转染入心肌细胞内 ,存在时间与 ds ODN浓度有关。乱序 ds ODN不能对供心提供缺血再灌注的保护作用 ,5 OD及 1 0 OD的 dsODN处理的供心功能较好 ,降低心肌组织中损伤的生化学指标以及减少心肌 m RNA中 ICAM- 1、VCAM、i NOS表达。1 0 OD ds ODN能延长供心的存活时间与亚治疗剂量 (2 .5m g/ kg)免疫抑制剂 CSA所获得的效果类似 ,而与亚治疗剂量 CSA合用可进一步延长供心的存活时间 ,减轻病理切片中排斥反应的分级和免疫组织化学染色 ICAM- 1的表达。　结     

普罗布考对体外培养的主动脉平滑肌细胞NF—kB活性的影响

目的：观察普罗布考（probucol)对血管平滑肌细胞（VSMCs)核因子kB(NF-kB)活性的调控作用,以探讨probucol在动脉粥样硬化（AS）和经皮腔内冠状动脉成形术后再狭窄（RS）防治中的某些可能的作用机制。方法：采用电泳迁移位移测定法观察probucol对VSMCsNF-kB活性的影响。结果：H2O2或胎牛血清（NCS）处理VSMCs72h后,NF-kB活性均明显增强;而加入100umol/Lprobucol后,NF-kB活性受到部分抑制,抑制率分别为37.1%和14.8%。结论：Probucol抑制NCS、H2O2诱导的VSMCsNF-kB的活性,可能是其临床有效防治RS及AS的作用机制之一。     

大鼠脑缺血再灌注后核因子—kB的表达及纳洛酮的影响

目的：探讨核因子－kB（nuclear factor-kB,NF-kB)在缺血再灌注大鼠海马神经元中的表达及纳洛酮的影响。方法：用插法制作大鼠大脑中动脉闭塞（middle cerebral artery occlusion,MCAO)局灶性脑缺血再灌注模型，海马区NF-kBP65亚单位的水平通过过免疫组化来测定，苏木精－分染色观察缺血侧脑组织形态学变化，结果：缺血再灌注组大鼠缺血侧海马区P65亚单位的表达较假手术组显著增强（P＜0．01），给予络洛酮处理后，P65的表达减弱（P＜0．01）。缺血再灌注组缺血侧海马区许多神经元有凋亡现象，缺血再灌注纳洛酮组凋亡神经元减少，假手术组未见凋亡神经元，结论：短暂的脑缺血可导致海马区NF-kB的表达增加，凋亡神经元增多，海马区NF-kB的激活与神经元的凋亡相关，纳洛酮可抑制海马区NF-kB的表达，减少神经元的凋亡。     

CRP和LPS致正常人外周血单核细胞NF—kB活化及IL—6合成的比较

目的：观察C—反应蛋白(CRP)和脂多糖(LPS)诱导人外周血单核细胞合成白细胞介素—6水平及两致单棱细胞NF—kB活化的程度，比较其致炎作用。方法：Ficoll密度梯度离心法分离人外周血单棱细胞，应用酶联免疫吸附试验(ELISA)法观察CRP和LPS刺激单核细胞产生IL—6的时间效应，比较其峰值。免疫细胞化学观察两致单棱细胞NF—kB活化的程度。结果：CRP和LPS刺激IL—6合成开始的时间分别是4小时和2小时。呈时间依赖性，在24小时达高峰。LPS组峰值高于CRP组。在刺激16小时后，LPS组NF—kB活化的程度高于CRP组。结论：CRP和LPS均能活化NF—kB，并诱导单核细胞产生IL—6：10ng/mlLPSI的致炎作用强于20ug／mlCRP。     

小剂量茶碱治疗对轻中度哮喘患者肺功能的影响

目的：探讨小剂量茶碱治疗中度哮喘患者肺的影响及临床意义。方法：选择轻中度哮喘患者28例,每晚予口服茶碱控释片400mg/d（优喘平,每片400mg无水茶碱）,偶用β2受体兴奋剂控制症状,且测定血清茶碱浓度,在治疗前均作肺功能检查,并采用家庭用峰流速仪监测肺功能,进行PEF监测,每天早晚各一次,观察前、治疗1周及6周后的FCV、FEV1、PEFR值变化情况,并了解患者治疗前、治疗期间、治疗6个月后哮喘发作时的急诊、住院情况,结果：T线晚1次优喘平400mg口服治疗,轻中度哮喘患者肺功能前后对比有明显改善（P＝0．001）。结论口服小剂量茶碱控释片,对轻中度哮喘患者肺功能有改善作用。     

小剂量茶碱对大鼠气道平滑肌细胞表达NF-κB与ICAM-1的影响

目的:观察小剂量茶碱对培养的大鼠气道平滑肌细胞表达核因子κB(NF-κB)与细胞间黏附分子1(ICAM-1)的影响,探讨小剂量茶碱在气道发挥抗炎作用的可能机制。方法:体外培养正常大鼠鼠婴的气道平滑肌细胞,将培养出的细胞随机分为3组:空白对照组、肿瘤坏死因子α(TNF-α)刺激组、茶碱干预组。采用免疫组织化学SP法检测经TNF-α刺激的大鼠的气道平滑肌细胞中加入不同浓度的茶碱共同培养4 h,以及加入同一浓度茶碱共同培养不同时间,NF-κB活性和ICAM-1表达的变化。结果:TNF-α刺激组与空白对照组的NF-κB活性和ICAM-1表达相比较,差异均有显著性(P<0.05)。经TNF-α刺激的大鼠的气道平滑肌细胞中加入5,10,15 mg/L的茶碱共同培养4 h,NF-κB活性和ICAM-1表达均有所下降。与TNF-α刺激组相比,5 mg/L组无统计学差异(P>0.05),余两组差异均有显著性(P<0.05)。且茶碱干预组内两两比较,差异均有显著性(P<0.05)。经TNF-α刺激的大鼠的气道平滑肌细胞中加入10 mg/L茶碱共同培养2,4,24 h。与TNF-α刺激组相比,茶碱处理组的差异均有显著性(P<0.05)。但茶碱处理组内不同处理时间两两比较,差异无显著性(P>0.05)。结论:茶碱可能通过抑制气道平滑肌细胞NF-κB活性和ICAM-1的表达,进而减少炎症细胞在气道的浸润。     

IL—1β和TNF—α对培养的气道上皮细胞E钙粘着蛋白表达的影响

应用酶消化法体外培养猪气道上皮细胞（ＡＥＣ）,加入一定浓度梯度的白细胞介素－１β（ＩＬ－１β）和肿瘤坏死因子β（ＴＮＦ－α）,应用免疫细胞化学染色和原位杂交方法观测ＡＥＣ中Ｅ钙粘着蛋白（ＥＣＤ）表达的变化,结果发现,正常ＡＥＣ中ＥＣＤ表达相邻上皮细胞间的胞膜上,其ｍＲＮＡ也有一定含量。一定浓度样度的ＩＬ－１β和ＴＮＦ－作用２４ｈ后,胞膜上ＥＣＤ表达产,而胞浆内ＥＣＤ表达的在低浓度时升高,高浓度时     

双黄连对呼吸道合胞病毒感染的气道上皮细胞炎症因子释放的影响

目的：探讨双黄连及其含药血清对呼吸道合胞病毒(RSV)感染的气道上皮细胞(A549)的炎症因子释放的影响及其药物作用机理。方法：以ELISA法测定炎症介质的含量，观察复方双黄连及其含药血清以不同的给药方式(Ⅰ组：感染前给药、Ⅱ组：感染时给药、Ⅲ组：感染后给药)对RSV刺激A549细胞引发的炎症介质IL-8、IL-6、TNF-α释放的作用。结果：RSV刺激气道上皮细胞A549后IL-8的分泌水平增加，而对IL-6、TNF-α影响不大；双黄连复方及其含药血清均能显降低RSV诱导A549释放的IL-8水平，并以感染前给药的途径下调IL-8的作用最为明显。结论：RSV能诱导气道上皮细胞释放炎症因子IL-8，双黄连可通过抑制RSV引起的IL-8释放，并在病毒感染的气道炎症控制中起着一定的作用。     

细胞凋亡信息分子Fas、FasL和NF—kB在氟化物作用后破骨样细胞凋亡过程中的表达

目的：研究氟化物作用后破骨细胞样细胞凋亡过程中细胞凋亡配体Fas、FasL（Fas Ligand)和核因子NF－kB的表达变化,方法：在培养基中分别加入不同浓度的氟化钠培养破骨样细胞,以免疫组织化学染方法观察细胞的Fas、FasL和NF－kB表达,结果：Fas、FasL在破骨样细胞表达量随培养基中氟化钠浓度增高而增高,NF－kB的表达量随培养基中氟化钠浓度增高而降低,两者均具有剂量依赖关系,结论：在氟化钠所致的破骨细胞凋亡过程中,Fas、FasL的表达氟化物浓度增高而加强,而核因子NF－kB的表达随氟化物浓度增高而减弱,两者都具有剂量依赖关系。