青少年特发性脊柱侧凸患者椎体生长板中Runx2及X型胶原表达

目的：观察青少年特发性脊柱侧凸（AIS）患者上、下端椎和顶椎椎体生长板凸、凹侧软骨细胞的生物活性差异．探讨其在AIS发生和发展中的作用。方法：在对12例AIS患者行胸椎侧凸前路松解手术或前路矫形手术时获取上、下终椎和顶椎椎体生长板，分成凸、凹侧2组，共72枚标本，应用免疫组织化学方法检测Runx2和X型胶原蛋白的表达．原位杂交方法检测Runx2mRNA表达。所有染色结果通过图像分析系统进行半定量分析。结果：AIS患者顶椎椎体生长板凸、凹两侧的X型胶原、Runx2和Runx2 mRNA表达总量存在显著性差异（P〈0．05）。顶椎椎体生长板凹侧X型胶原的表达总量低于下终椎椎体生长板凹侧的表达总量（P〈0．05）。顶椎椎体生长板凹侧Runx2的表达总量低于上、下终椎椎体生长板凹侧的表达总量（P〈0．05）。顶椎椎体生长板凹侧单一软骨细胞Runx2表达量高于凸侧和上、下终椎椎体生长板凹侧单一软骨细胞的表达（P〈0.05）。顶椎椎体生长板凹侧高倍视野下平均Runx2mRNA表达总量低于上、下终椎椎体生长板的凹侧（P〈0．05）。顶椎椎体生长板凸侧单一细胞Runx2 mRNA表达量低于凹侧（P〈0.05）。顶椎椎体生长板凹侧高倍视野下平均X型胶原阳性细胞密度和Runx2阳性细胞密度低于凸侧和上、下终椎椎体生长板凹侧阳性细胞密度（P〈0．05）。结论：AIS患者上、下终椎和顶椎椎体生长板凸、凹侧软骨细胞存在不同的生物活性和细胞动力学，这可能是力学条件改变后的一种继发性改变，但其可能在AIS的进展中发挥重要作用。     

Ⅱ型胶原、转化生长因子β1和碱性成纤维细胞生长因子在脊柱侧凸患者关节突软骨中分布及表达的实验研究

目的研究青少年特发性脊柱侧凸（AIS）和先天性脊柱侧凸（CS）畸形最严重部位一顶椎凸、凹侧下关节突软骨中Ⅱ型胶原、转化生长因子β1（TGF—β1）和碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）的表达特点。方法22例AIS患者,18例CS患者作为研究对象。取两组患者的顶椎和端椎凸、凹侧的下关节突,采用苏木素-伊红（HE）染色、免疫组化和原位杂交方法观察关节突的病理改变和Ⅱ型胶原、TGF-β1及bFGF在关节突中分布的特点。将所得的免疫组化和原位杂交图像输入图像分析系统,进行半定量分析,并作统计学分析。结果Ⅱ型胶原、TGF-β1、bFGF在AIS和CS中的有基本相似的表达特点,免疫组化和原位杂交方法均显示顶椎凹侧的表达高于凸侧,差异有统计学意义（P〈0．05）;上下端椎的凸凹侧之间及凸凹侧的上下端椎之间的表达差异无统计学意义,顶椎、上下端椎各对应部位在AIS与CS之间的表达差异无统计学意义;Ⅱ型胶原在凸侧与凹侧顶椎的表达高于同侧上、下端椎,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论AIS和CS顶椎关节突软骨呈现退变及发育不全等征象,凹侧较凸侧明显。AIS和CS中Ⅱ型胶原、TGF—β1及bFGF在顶椎凹侧表达的增高可能为脊柱畸形后异常的生物力学引起了关节突细胞间基质重建而进行代偿的结果。压应力可引起TGF—β1及bFGF的表达增高;压应力和张应力均可以引起Ⅱ型胶原的表达增高,但顶椎凹侧压应力比凸侧张应力的影响更大。     

特发性脊柱侧凸患者两侧椎旁肌中肌梭与运动终板病理学变化的对比研究

目的：对青少年特发性脊柱侧凸（AIS）患者两侧椎旁肌中肌梭与运动终板的病理学变化进行对比研究，探讨其与脊柱侧凸病因学可能存在的关系。方法：选取手术治疗的脊柱病变患者共41例．分3组．其中AIS组20例，平均年龄15．3岁，平均Cobb角56．8^o，顶椎位于T7～T12；先天性脊柱侧凸（CS）组ll例。平均年龄13．9岁，平均Cobb角66．7^o，顶椎位于T7～T12；对照组10例，均为非脊柱侧凸病例，其中l例腰椎滑脱、l例腰椎管肿瘤、2例Scheuermann’s病、6例腰椎间盘突出症，平均年龄17．3岁。经患者知情同意，所有病例均于术中取材，AIS组和CS组取顶椎区两侧椎旁肌，对照组取非病变区两侧椎旁肌。标本分别行HE染色和非特异性酯酶（ANAE）染色，对3组病例两侧椎旁肌中肌梭的形态结构、梭内肌纤维数目、平均横截面积以及运动终板的类型进行比较。结果：AIS组患者两侧椎旁肌标本共发现19个肌梭，CS组患者两侧椎旁肌标本共发现13个肌梭，对照组两侧椎旁肌标本共发现5个肌梭。AIS和CS组患者凸侧椎旁肌肌梭内的肌纤维数目及平均横截面积显著大于凹侧椎旁肌（P〈0．05）。AIS和CS组凹侧椎旁肌哟型终板数目和病变终板数目均显著多于凸侧椎旁肌（Pl〈0．05）。对照组两侧椎旁肌哟型终板数目和病变终板数目无显著差异（P＞0．05）。结论：AIS患者两侧椎旁肌中肌梭的形态结构和运动终板的类型存在差异，这种差异可能是脊柱侧凸的继发性改变。     

青少年特发性脊柱侧凸软骨Sox9表达及意义

[目的]检测Sox9及软骨特异性标记物Ⅱ型胶原及Aggrecan在青少年特发性脊柱侧凸(adolescent idiopathic scoliosis, AIS)患者关节突软骨细胞中的表达,探讨其与AIS发生、发展的关系。[方法]收集我院行后路脊柱侧凸矫形术的15例AIS患者的关节突软骨标本,设为AIS组;取同年龄段无脊柱侧凸行脊柱融合术的10例患者正常软骨标本,设为对照组。分别分离软骨细胞体外培养,分别采用RT-PCR,免疫组化,免疫荧光染色和Westen-blotting等方法检测AIS组及对照组软骨Sox9及Ⅱ型胶原及Aggrecan的表达情况,进行两组间比较和AIS组凸侧与凹侧间比较。[结果] AIS组患者软骨细胞内的Sox9及软骨特异性标记物CollagenⅡ及Aggrecan的表达明显高于非AIS组患者。相比于凹侧,AIS患者顶椎凸侧原代软骨细胞中Sox9及软骨特异性标记物CollagenⅡ及Aggrecan表达明显升高。[结论] Sox9在AIS患者体内及原代软骨细胞中的表达异常是AIS患者体内软骨发育异常及脊柱不平衡生长的重要原因,可能是AIS发生、发展的原因之一。     

青少年特发性脊柱侧凸患者椎体生长板中Runx2及Ⅹ型胶原表达

目的:观察青少年特发性脊柱侧凸(AIS)患者上、下端椎和顶椎椎体生长板凸、凹侧软骨细胞的生物活性差异;探讨其在AIS发生和发展中的作用.方法:在对12例AIS患者行胸椎侧凸前路松解手术或前路矫形手术时获取上、下终椎和顶椎椎体生长板;分成凸、凹侧2组;共72枚标本;应用免疫组织化学方法检测Runx2和Ⅹ型胶原蛋白的表达;原位杂交方法检测Runx2 mRNA表达.所有染色结果通过图像分析系统进行半定量分析.结果:AIS患者顶椎椎体生长板凸、凹两侧的Ⅹ型胶原、Runx2和Runx2 mRNA表达总量存在显著性差异(P＜0.05).顶椎椎体生长板凹侧Ⅹ型胶原的表达总量低于下终椎椎体生长板凹侧的表达总量(P＜0.05).顶椎椎体生长板凹侧Runx2的表达总量低于上、下终椎椎体生长板凹侧的表达总量(P＜0.05).顶椎椎体生长板凹侧单一软骨细胞Runx2表达量高于凸侧和上、下终椎椎体生长板凹侧单一软骨细胞的表达(P＜0.05).顶椎椎体生长板凹侧高倍视野下平均Runx2 mRNA表达总量低于上、下终椎椎体生长板的凹侧(P＜0.05).顶椎椎体生长板凸侧单一细胞Runx2 mRNA表达量低于凹侧(P＜0.05).顶椎椎体生长板凹侧高倍视野下平均Ⅹ型胶原阳性细胞密度和Runx2阳性细胞密度低于凸侧和上、下终椎椎体生长板凹侧阳性细胞密度(P＜0.05).结论:AIS患者上、下终椎和顶椎椎体生长板凸、凹侧软骨细胞存在不同的生物活性和细胞动力学;这可能是力学条件改变后的一种继发性改变;但其可能在AIS的进展中发挥重要作用.     

重组腺病毒介导外源性SOX9在正常关节软骨细胞中诱导软骨基质合成的体外表达

背景：关节软骨损害是临床一种常见的损伤,软骨形成转录因子SOX9是一种调控Ⅱ型胶原合成的关键因子。 目的：观察以表达外源性SOX9的腺病毒体外成功感染关节软骨细胞后对Ⅱ型胶原和蛋白聚糖（Aggrecan）合成的影响,探讨软骨损伤后修复软骨缺损的基因治疗方法。 方法：体外构建腺病毒载体AdSOX9和AdGFP,成功感染培养的人关节软骨细胞,分别以逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）技术检测了病毒感染前后SOX9、II型胶原和蛋白聚糖基因mRNA的表达,同时以免疫组化技术检测了病毒感染前后关节软骨细胞中Ⅱ型胶原的表达。 结果：应用AdEasy腺病毒构建专利技术体外成功构建了能高效表达外源性SOX9的腺病毒AdSOX9和只表达绿色荧光蛋白GFP的腺病毒AdGFP;以腺病毒AdSOX9和AdGFP体外成功感染人关节软骨细胞后48h,未感染对照组和AdGFP感染组,均检测到了Ⅱ型胶原和蛋白聚糖的表达;而AdSOX9感染组的细胞中,检测到了SOX9基因mRNA的表达明显增高,与未感染对照组和AdGFP感染组相比有显著性差异（P〈0．05）,同时,Ⅱ型胶原和蛋白聚糖的表达也较未感染对照组和AdGFP感染组明显增高,差异显著（P〈0．05）。 结论：以外源性SOX9为目的基因的腺病毒介导基因治疗方法,在促进关节软骨细胞Ⅱ型胶原和蛋白聚糖合成方面得出了初步满意的结果,SOX9可能是关节软骨缺损基因治疗研究领域一个新的理想靶点,值得继续深入研究。     

青少年特发性脊柱侧凸患者下关节突软骨的组织形态学研究

目的：观察青少年特发性脊柱侧凸（adolescent idiopathic scoliosis，AIS）患者上、下端椎及顶椎凸、凹侧下关节突软骨组织学分级和软骨细胞的增殖与凋亡，探讨其软骨内成骨性生长在侧凸进展中的作用。方法：16例AIS患者，平均年龄13．5岁。取上、下端椎和顶椎凸、凹侧下关节突进行组织学观察及免疫组织化学测定其软骨细胞的增殖指数（proliferation cell nuclear antigen，PCNA）和凋亡指数（Poly ADP-ribose pdymerase，PARP）。采用PCN/PARP比值及组织学分级作为软骨内成骨活跃程度的指标，并对其进行比较。结果：AIS患者上、下端椎和顶椎凸、凹侧下关节突软骨组织学分级、软骨细胞的增殖指数（PCNA）、凋亡指数（PARP）和PCNA／PARP比值的比较均没有统计学差异（P〉0．05）。结论：AIS患者上、下端椎和顶椎凸、凹侧下关节突软骨内成骨活跃程度没有差异，关节突软骨内成骨性生长发育可能对脊柱侧凸进展没有明显的作用。     

青少年特发性脊柱侧凸患者终板软骨的组织形态学研究

目的:观察青少年特发性脊柱侧凸(adolescent idiopathic scoliosis;AIS)患者终板软骨的组织学形态;探讨其与AIS发生、发展的关系.方法:20例AIS患者;前路手术时分别获取20份顶椎及18份下端椎终板软骨;每份均包含凸侧与凹侧.切片行HE染色;光镜下观察终板软骨组织形态;采用病理图像分析系统测量终板软骨肥大区的厚度、细胞巢面积、巢内细胞数及增殖区细胞数(个/视野).参照Enileking法设定曲度因子(factor of curve;FC);将顶椎标本分为FC≤6组(11例)和FC＞6组(9例).比较上述指标在不同部位、不同FC分组下的差异.结果:顶椎凸侧的上述指标均显著高于凹侧(P＜0.05);下端椎仅凸侧肥大区细胞巢平均面积显著大于凹侧(P＜0.05);顶椎与下端椎间同侧比较;仅下端椎凹侧肥大区的细胞数显著大于顶椎(P＜0.05).FC＞6组的顶椎凸侧和凹侧终板软骨肥大区的巢内细胞数显著小于FC≤6组(P＜0.05);FC＞6组的凸侧增殖区细胞数也显著小于FC≤6组(P＜0.05).结论:AIS患者终板软骨的组织学变化特征更倾向于与脊柱不同部位、不同状态下机械应力差异有关的继发性改变;但组织学变化与机械应力变化之间不完全平行;AIS的发生、发展可能伴有生物力学以外的因素.     

青少年特发性脊柱侧凸软骨终板蛋白质组学研究

目的 通过对青少年特发性脊柱侧凸(adolescent idiopathic scoliosis,AIS)患者侧凸顶椎椎间盘软骨终板进行蛋白质组学鉴定,尝试寻找诱发或加重椎间盘不均衡发育的分子因素.方法 经一期前路脊柱侧凸矫形术获取6例AIS患者主弯顶椎椎间盘的软骨终板组织,提取蛋白组织,用Brad-ford法对所获取蛋白质样品进行浓度测定;通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶蛋白电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)对蛋白质总量和分子量范围进行初步鉴定;最后用鸟枪法蛋白质组鉴定技术比较凸、凹侧所含蛋白成分的异同,分析蛋白的种类和功能.结果 Bradford法测量软骨组织中获得的平均蛋白质浓度为3.02 mg/ml;SDS-PAGE显示顶椎凸侧终板软骨内所含蛋白质的种类明显多于凹侧;从凸侧软骨终板中鉴定出103种蛋白质,凹侧软骨终板内鉴定出55种蛋白质,其中凸侧特有蛋白58种,凹侧特有蛋白10种.结论 对AIS患者侧凸顶椎软骨终板蛋白质进行分类研究后表明侧凸顶椎软骨终板凸、凹两侧的特有蛋白与脊柱侧凸顶椎椎间盘的不对称发育存在一定的联系.     

硫酸化相关酶在青少年特发性脊柱侧凸关节突软骨中的表达研究

[目的]分析硫酸化相关酶在AIS患者关节突软骨中的表达特点,为软骨细胞的力学研究和延缓脊柱侧凸进展提供参考。[方法]选取18例Lenke 1型AIS患者顶椎和下端椎凹、凸侧和对照组(15例)的下关节突软骨作为研究对象,固定脱钙后制成石蜡切片。免疫组化染色测定分析硫酸化反应相关酶PAPSS2、PAPST1和CHST1在Lenke 1型AIS患者顶椎和下端椎关节突软骨中的表达,利用Leica显微镜对免疫组化图像进行观察,用Image-pro Plus软件将每个视野中的着色面积、光密度以及目标数目转换成累积光密度值(IOD),代表相应酶的表达强度,最后进行统计学分析。[结果]PAPSS2主要分布在软骨细胞质和软骨囊基质;PAPST1特异性分布在软骨细胞质;CHST15主要分布在软骨细胞质和软骨囊基质。硫酸化反应相关酶PAPSS2、PAPST1和CHST15的表达转换成IOD有以下分布特点:对照组两侧的表达差异无统计学意义;顶椎凹侧高于凸侧,顶椎凸侧高于对照组,差异有统计学意义;顶椎高于同侧下端椎,差异有统计学意义;下端椎的凹凸侧的表达差异无统计学意义;下端椎的表达与对照组的表达比较差异无统计学意义。[结论]青少年特发性脊柱侧凸顶椎关节突硫酸化反应相关酶的表达增强与特发性脊柱侧凸进展相关。     

青少年特发性脊柱侧凸患者椎间盘纤维环胶原的分布及其意义

目的:研究青少年特发性脊柱侧凸(AIS)患者侧凸区椎间盘不同部位纤维环Ⅰ型、Ⅱ型胶原的分布,探讨胶原分布异常在AIS发生发展中的作用。方法:顶椎为腰椎的AIS患者共27例(AIS组),同时选15例同年龄段先天性脊柱侧凸(CS)患者为对照(CS组)。在脊柱侧凸前路手术时取L1/2或L2/3椎间盘。AIS组取材节段为侧凸顶椎区,CS组则为侧凸的下终椎区。采用胃蛋白酶-乙酸(0.5mol/L)体系提取胶原组织,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法及抗原抗体Western印记法进行胶原的分类和定量测定。在GelWork图像分析系统中进行泳道的对比定量分析。分别计算AIS组凹侧、凸侧和CS组纤维环中Ⅰ型、Ⅱ型胶原含量,并进行统计学分析。结果:AIS组患者纤维环中Ⅰ型、Ⅱ型胶原的含量在凹侧明显低于凸侧,有显著性差异(P<0.05),而且凹、凸侧胶原含量的差异与侧凸Cobb角有明显的相关。AIS组Ⅰ型、Ⅱ型胶原的含量比CS组也有显著下降(P<0.01)。结论:AIS椎间盘纤维环存在胶原代谢异常,AIS凹侧纤维环Ⅰ型、Ⅱ型胶原明显低于凸侧,且随Cobb角的增大差值越明显,提示椎间盘胶原代谢异常可能和AIS的发生发展有密切的联系。     

Ⅸ型胶原基因在特发性脊柱侧凸患者顶椎椎间盘内表达的初步研究

目的　研究Ⅸ型胶原基因在椎间盘内分布,探讨其在特发性脊柱侧凸发病中的作用。方法　收集特发性脊柱侧凸患者椎间盘标本14例,已知病因脊柱侧凸标本13例,采用3例突然死亡的正常青少年的6个椎间盘作为正常对照。采用免疫组化技术和RNA探针原位杂交技术研究Ⅸ型胶原基因mRNA在椎间盘内不同部位的分布,对其mRNA含量进行半定量分析,比较Ⅸ型胶原mRNA含量在不同部位的分布。结果　Ⅸ型胶原主要分布于内层纤维环、髓核及终板软骨内,以内层纤维环与软骨终板内较高。Ⅸ型胶原主要由小圆形类软骨细胞分泌,在肥大的软骨细胞内无表达。Ⅸ型胶原mRNA含量特发性脊柱侧凸顶椎凹侧与已知病因组及正常对照组间差异均有统计学意义(P<0. 05),已知病因组端椎两侧含量均低于正常对照组,其余各组间均无明显差异。结论　Ⅸ型胶原在特发性脊柱侧凸患者椎间盘内分布无异常。Ⅸ型胶原mRNA含量在特发性侧凸患者顶椎椎间盘凹侧内含量明显低于正常人,而已知病因的侧凸患者则无明显下降,提示Ⅸ型胶原可能与特发性侧凸发病有关。     

脊柱侧凸顶椎区椎间盘纤维环中多聚蛋白多糖的表达及意义

目的：探讨脊柱侧凸患者顶椎区椎间盘纤维环中多聚蛋白多糖的表达及其意义。方法：采集2003年7月至2004年9月间行前路松解或矫形手术的40例脊柱侧凸患者侧凸顶椎区椎间盘组织。青少年特发性脊柱侧凸患者（adolescent idiopathic scoliosis，AIS）25例，胸椎椎间盘11例，腰椎椎间盘14例；先天性脊柱侧凸患者（congenital scoliosis，CS）15例，胸椎椎间盘6例，腰椎椎间盘9例。利用RT—PCR扩增多聚蛋白多糖（Aguecan），琼脂糖凝胶电泳，在UVP（紫外光测定法）成像系统进行扫描．GelWork图像分析系统中进行灰度测定半定量分析。分别计算AIS组和CS组凹侧、凸侧纤维环中Aggrecan含量，并对CS组和AIS组胸椎和腰椎以及椎间盘的凹侧和凸侧进行比较。结果：AIS组和CS组椎间盘凹侧纤维环中Aggrecan含量低于凸侧．差异有显著性（P〈0．01），胸椎椎间盘纤维环中Aggrecan的含量低于腰椎，但无统计学差异。AIS组Aggrecan的含量和CS组相应部位Aggrecan的含量无明显差别。结论：AIS椎间盘纤维环凹凸侧存在Aggrecan代谢差异．并且可能是脊柱侧凸所致的继发改变．但也可能是脊柱侧凸发生、发展中的重要因素。     

青少年特发性脊柱侧凸椎体软骨终板核心蛋白和细胞因子的变化

目的了解青少年特发性脊柱侧凸患者顶端椎凸、凹侧椎体软骨终板内核心蛋白、TGFβ1及bFGF的变化,探讨其在特发性脊柱侧凸发病中的作用。方法12例患者,男4例,女8例;年龄12～20岁,平均14.9岁;侧凸Cobb角43°～102°,平均65.1°。所有患者均经X线、CTM和(或)MR检查排除先天性、神经肌肉性等原因所导致的侧凸。对前路手术取下的顶椎和端椎的软骨终板进行S-P法免疫组化染色,染色结果采用北京航空航天大学图像中心医学彩色病理图像分析系统进行分析。结果经非参数Wilcoxon秩和检验,侧凸顶椎和端椎凹侧终板软骨细胞内TGFβ1表达的面密度和数密度高于凸侧及顶椎凸侧表达的数密度高于端椎均有统计学意义(P<0.05);侧凸顶椎和端椎凹侧bFGF表达的面密度和数密度高于凸侧亦有统计学意义(P<0.05);顶椎及端椎凸侧蛋白多糖核心蛋白的面密度和数密度高于凹侧,但无统计学意义(P>0.05)。TGFβ1及bFGF及核心蛋白在侧凸顶椎的表达较端椎表达略高,但无统计学意义(P>0.05)。结论青少年特发性脊柱侧凸患者凹侧TGFβ1、bFGF高表达和核心蛋白低表达,表明细胞因子和核心蛋白的表达异常可能是脊柱侧凸的发病原因或继发于侧凸的变化。     

SOX9在胃癌组织中的表达及与预后的关系

目的探讨蛋白质分子生物标记物SOX9在胃癌组织中的表达及其与临床病理特征及预后的关系。方法回顾性分析2004．2006年浙江省人民医院收治的112例胃癌患者的临床资料．通过免疫组织化学（IHC）法检测112例原发胃癌组织及70例癌旁非肿瘤组织中SOX9蛋白表达情况。结果70例癌旁非肿瘤胃黏膜上皮中仅有5例（7．1％）为SOX9低表达;112例胃癌组织中94例（83．9％）出现不同程度的表达,其中SOX9高表达51例（45．5％）。胃癌组织中SOX9的表达与患者性别、年龄、肿瘤部位、肿瘤大小及其分化程度无关（P〉0．05）,而与肿瘤的Lauren分型（P〈0．05）、浸润深度（P〈0．01）、淋巴结转移（P〈0．05）、远处转移（P〈0．05）及肿瘤TNM分期（P〈0．05）有关。Kaplan-Meier生存分析显示．SOX9高表达患者的5年生存率显著低于SOX9低表达者（29．4％比49．2％．P=0．031）。多因素cox回归分析显示,分化程度（P=0．046）、浸润深度（P=0．001）和远处转移（P〈0．01）是影响胃癌患者预后的独立因素．而SOX9的高表达（P=0．948）不能作为影响胃癌预后的独立因素。结论胃癌组织中SOX9蛋白的表达与胃癌生长发展和侵袭转移有关并对胃癌患者预后有影响．但不是影响预后的独立因素。     

SOX9在青少年特发性脊柱侧凸患者骨髓间质干细胞的表达及意义

目的：探讨SOX9在青少年特发性脊柱侧凸（AIS）发病机制中的作用。方法：30例12～18岁志愿者分为两组，AIS组20例，同年龄对照组10例。分别从髂前上棘处穿刺抽取10ml骨髓，肝素抗凝。采用密度梯度离心法分离骨髓间质干细胞（MSCs），体外培养并传至P2代行表型鉴定，分别采用RT—PCR法、Western blotting法及免疫荧光法检测两组MSCs中SOX9的表达情况。结果：不论是核酸水平还是蛋白水平，AIS组患者的SOX9表达均高于对照组（P〈0．01）。结论：转录因子SOX9在MSCs水平表达强度的异常可能与AIS发病相关。     

胰腺癌组织SOX9的表达水平与肿瘤进展及预后的关系

目的 探究胰腺导管腺癌（pancreatic ductal adenocarcinoma,PDAC）中SOX9的表达水平及临床病理学意义.方法对 正常胰腺、胰腺导管内乳头状黏液瘤（IPMN）、胰腺上皮内瘤样病变（PanIN）及PDAC标本进行免疫组织化学染色,观察SOX9在不同胰腺组织中的表达情况,并将62例手术切除的PDAC组织标本的染色结果同临床病理及预后资料进行对比分析.最后对三种不同分化水平的胰腺癌细胞株做免疫荧光染色及qRT-PCR,检测其SOX9阳性细胞表达比率及SOX9mRNA表达水平.结果 免疫组织化学结果显示：SOX9蛋白在正常胰腺、IPMN、PanIN及PDAC组织中均呈阳性表达.SOX9蛋白表达水平与PDAC肿瘤浸润深度、淋巴结转移呈正相关.SOX9蛋白高表达PDAC病人较低表达者预后差.体外实验免疫荧光染色及qRT-PCR结果显示,在低分化胰腺癌细胞株PANC-1,SOX9阳性细胞比率及SOX9 mRNA表达水平明显高于高分化细胞株CA-PAN-2及中分化细胞株BxPC-3.结论 在PDAC中SOX9表达上调,与肿瘤进展及不良的预后相关,SOX9可能作为评估PDAC病人预后的指标.     

青少年特发性胸椎侧凸患者的脊髓偏移及临床意义

[目的]揭示青少年胸椎特发性侧凸患者椎管内脊髓的偏移，明确其变化趋势，并探讨其可能的发生机制和临床意义。[方法]本研究包括39名以右胸弯为主弯的青少年特发性脊柱侧凸（adolescent idiopathic scoliosis，AIS）患者。测量主胸弯节段内（T5-12）椎管内脊髓与凸凹侧椎弓根之间的距离，计算脊髓的偏移，揭示其变化趋势，并分析顶椎区脊髓偏移与主胸弯Cobb＇s角和顶椎相对偏移之间的相关性。[结果]在T5-12节段椎管内，脊髓与凸侧椎弓根之间的距离显著大于与凹侧椎弓根之间的距离（P〈0．05），即脊髓向凹侧椎弓根偏移，且以顶椎区最为显著，而逐渐向两侧端椎区递减。顶椎区脊髓偏移与主胸弯Cobb’s角和顶椎相对偏移存在显著的正相关（相关系数分别为0．631和0．546）。[结论]胸椎特发性脊柱侧凸患者存在侧凸节段椎管内脊髓偏移的现象，且以顶椎区最显著。研究结果提示脊髓偏移可能与脊椎偏移后凹侧脊神经的牵拉有关，而且凹侧置钉的风险高于凸侧。     

脊髓空洞源性脊柱侧凸椎旁肌肌纤维分型及群化的对比研究

目的分析脊髓空洞源性脊柱侧凸患者椎旁肌肌纤维分型及群化的特征,探讨其与脊柱侧凸发病的关系.方法病例分为三组：脊髓空洞源性脊柱侧凸（SS）组20例,青少年特发性脊柱侧凸（AIS）组16例,非脊柱侧凸（NS）组10例.术中切取两侧椎旁肌组织,统计三组的椎旁肌肌纤维分型及群化,并进行对比.结果SS组凸侧Ⅰ型肌纤维比例和横截面积均小于凹侧,差异无统计学意义;AIS组凸侧Ⅰ型肌纤维比例和横截面积均显著高于凹侧;NS组左、右侧之间差异无统计学意义.各组间比较显示：（1）凸侧Ⅰ型肌纤维所占比例,SS组和AIS组均高于NS组;凹侧Ⅰ型肌纤维所占比例,SS组高于AIS组和NS组.（2）凸侧Ⅰ型肌纤维横截面积,SS组低于AIS组;凹侧Ⅰ型肌纤维横截面积,AIS组低于NS组.（3）凸侧Ⅱ型肌纤维横截面积,SS组＜AIS组＜NS组;凹侧Ⅱ型肌纤维横截面积,SS组和AIS组均低于NS组.SS组中11例观察到椎旁肌Ⅰ型肌纤维群化,凹侧群化程度大于凸侧,但差异无统计学意义.AIS组中8例观察到凸侧Ⅰ型肌纤维群化,无凹侧肌纤维群化和Ⅱ型肌纤维群化.NS组左、右两侧均未见肌纤维群化.结论SS组患者椎旁肌肌纤维分型及群化的特征与AIS组明显不同,提示椎旁肌存在原发性失神经支配,可能与脊柱侧凸的发生、发展有一定相关性.     

青少年脊柱侧凸椎间盘终板内S100、HSP90和CaM基因表达的研究

目的观察特发性脊柱侧凸（idiopathic scoliosis,IS）和先天性脊柱侧凸（congenital scoliosis,CS）患者椎间盘终板内不同部位S100、HSP90和CaM基因表达的特点。方法提取的总RNA进行RT-PCR,同时提取终板软骨中总蛋白进行Western Blot研究,对实验结果进行单因素方差分析。结果 RT-PCR分析S100在CS顶椎终板中的表达明显低于端椎,差异有统计学意义;在IS顶椎终板、端椎终板中的表达均明显低于CS端椎终板,差异有统计学意义;HSP90仅在CS顶椎终板的双侧表达,差异有统计学意义;CaM在IS顶椎终板、端椎终板中的表达均明显高于CS端椎终板,差异有统计学意义。结论 S100在IS和CS中的表达有显著性差异,而CaM和HSP90在IS和CS中的表达无明显差异,提示S100可能在脊柱侧凸的发生发展过程中发挥作用。