特定条件下化疗诱导结肠癌细胞凋亡的研究

目的:研究结肠癌化疗药物氟尿嘧啶(5-FU)和奥沙利铂(OXA)分别诱导结肠癌细胞株HT-29细胞凋亡的作用.方法:用80μg/ml 5-FU和25μg/ml OXA分别作用HT-29细胞8h,并应用AnnexinV-FITC/PI双标记流式细胞术对细胞凋亡进行检测,观察凋亡细胞的比例.结果:80μg/ml 5-FU处理8h组与空白对照组比较,凋亡细胞比例上升约9.2%(P＜0.01);25μg/ml OXA处理8h组与空白对照组比较,凋亡细胞比例上升约21.1%(P＜0.01).25μg/ml OXA处理8h组与80μg/ml 5-FU处理8h组比较,凋亡细胞比例约高于11.9%(P＜0.01).结论:在特定条件下,5-FU和OXA均能明显诱导结肠癌细胞株HT-29细胞凋亡;OXA对结肠癌细胞的诱导凋亡作用要强于5-FU.     

VES对Her-2、p53共表达乳腺癌细胞的抑制作用及机制

目的:研究VES对Her-2、p53共表达乳腺癌细胞株MDA-MB-453细胞的增殖、凋亡的影响、通过检测Her-2、p53探讨VES抑制乳腺癌细胞生长的机制。方法:应用MTT法检测VES对MDA-MB-453细胞增殖的影响;流式细胞仪检测细胞周期变化及细胞凋亡;RT-PCR和免疫细胞化学法分别检测Her-2基因mRNA和Her-2、p53蛋白表达水平。结果:VES能抑制乳腺癌MDA-MB-453细胞增殖,随VES剂量的增加,抑制作用增强。其中20μg/ml VES处理组在48h后受到明显抑制,抑制率达52.25%;经VES处理后细胞出现凋亡,5μg/ml处理48h后,凋亡率为39.52%;药物干预组使肿瘤细胞大量阻滞于G1期(P<0.01);RT-PCR和免疫细胞化学法结果表明,VES能抑制Her-2基因mRNA的转录水平,从而抑制其蛋白的表达,也能降低p53蛋白的表达。结论:VES可诱导Her-2、p53共表达乳腺癌MDA-MB-53细胞凋亡,抑制增殖。其机制可能是通过抑制Her-2基因mRNA及蛋白的表达和通过抑制突变型p53蛋白的表达使细胞停滞于G1有关。     

循环肿瘤细胞p53基因表达和端粒酶活性在大肠癌临床病理学中的意义

背景与目的:探讨大肠癌患者循环肿瘤细胞p53基因的表达和端粒酶活性的变化及其临床病理学意义.材料与方法:113例大肠癌患者、13例良性大肠肿瘤患者术前的外周血和28例健康供血员的外周血,用分层液分离含有循环肿瘤细胞的单个核细胞.应用流式细胞仪和TRAP-ELISA法,分别检测p53基因表达和端粒酶活性.结果:在105例有信息的大肠癌患者中,p53基因表达和端粒酶活性的阳性率分别为74.3%(78/105)和61.0%(64/105).异常的p53基因表达和端粒酶活性水平均与大肠癌患者的淋巴结转移显著相关(P<0.05),两者的联合检测提高了对大肠癌淋巴结转移的预测水平.p53基因异常表达还与大肠癌细胞分化程度显著相关(P=0.003).结论:循环肿瘤细胞异常的p53基因表达和端粒酶活性是大肠癌的恶性生物学标志,两者密切相关.联合检测可提高对淋巴结转移状态的预测水平.     

VES对Her-2、p53共表达乳腺癌细胞的抑制作用及机制

目的：研究VES对Her-2、p53共表达乳腺癌细胞株MDA-MB-453细胞的增殖、凋亡的影响、通过检测Her-2、p53探讨VES抑制乳腺癌细胞生长的机制。方法：应用MTT法检测VES对MDA-MB-453细胞增殖的影响;流式细胞仪检测细胞周期变化及细胞凋亡;RT-PCR和免疫细胞化学法分别检测Her-2基因mRNA和Her-2、p53蛋白表达水平。结果：VES能抑制乳腺癌MDA-MB-453细胞增殖,随VES剂量的增加,抑制作用增强。其中20μg/ml VES处理组在48h后受到明显抑制,抑制率达52.25%;经VES处理后细胞出现凋亡,5μg/ml处理48h后,凋亡率为39.52%;药物干预组使肿瘤细胞大量阻滞于G1期（P〈0.01）;RT-PCR和免疫细胞化学法结果表明,VES能抑制Her-2基因mRNA的转录水平,从而抑制其蛋白的表达,也能降低p53蛋白的表达。结论：VES可诱导Her-2、p53共表达乳腺癌MDA-MB-53细胞凋亡,抑制增殖。其机制可能是通过抑制Her-2基因mRNA及蛋白的表达和通过抑制突变型p53蛋白的表达使细胞停滞于G1有关。     

Toremifene诱导MCF-7/ADR细胞凋亡的研究

目的研究Toremifene体外诱导乳腺癌耐药细胞MCF-7/ADR凋亡和凋亡相关基因Fas、FasL、p53和Caspase-3表达的关系.方法以不同浓度Toremifene(0.24μg/ml、2.4μg/ml、24μg/ml)诱导MCF-7/ADR细胞凋亡;以MTT法观察不同处理浓度的Toremifene对MCF-7/ADR细胞DNA合成活性的影响;以免疫组化检测Fas、FasL、p53和Caspase-3蛋白表达.结果不同浓度Toremifene处理的MCF-7/ADR细胞出现DNA合成活性下降,抑制强度与浓度有关(P＜0.05);Fas、FasL、p53和Caspase-3蛋白呈上调表达.结论Toremifene能诱导细胞凋亡;增加Fas、FasL、p53和Caspase-3基因表达;并且与启动Caspase-3凋亡信号和p53直接介导的凋亡有关.     

大肠癌p53基因突变和染色体异倍体表达与淋巴结转移的关系

目的 :研究大肠癌转移与p53基因突变及染色体倍性之间的关系。方法 :采用特异合成引物对p53基因 7～ 8外显子进行PCR扩增 ,结合单链构象多态性分析 (SSCP)和银染技术 ,检则 2 2例大肠癌手术标本p53基因的突变 ;用流式细胞仪 (FACS)分析其染色体的倍性。结果 :在有淋巴结转移 10例大肠腺癌中 ,p53基因突变者占 6例 ( 60 % ) ;在无淋巴结转移的 12例大肠腺癌中 ,p53基因突变者占 1例 ( 8 3% )。在有p53基因突变的 7例大肠腺癌中异倍体者 6例 ( 85 7% ) ;无p53基因突变的 15例大肠癌中异倍体者 6例 ( 4 0 % )。在有淋巴结转移的 10例大肠癌中 ,p53基因突变及DNA异倍体共同表达者 5例 ( 50 % ) ;无淋巴结转移的 12例大肠腺癌中p53基因突变及DNA异倍体共同表达者 1例。结论 :大肠癌p53基因突变及DNA异倍体共同表达与淋巴结转移密切相关。     

大肠癌p53基因突变和染色体异倍体表达与淋巴结转移的关系

目的：研究大肠癌转移与p53基因突变及染色体倍性之间的关系。方法：采用特异合成引物对p53基因7－8外显子进行PCR扩增,结合单链构象多态性分析（SSCP）和银染技术,检则22例大肠癌手术标本p53基因的突变;用流式细胞仪（FACS）分析其染色体的倍性。结果：在有淋巴结转移10例大肠腺癌中,p53基因突变者占6例（60％）;在无淋巴结转移的12例大肠腺癌中,p53基因突变者占1例（8．3％）。在有p53基因突变的7例大肠腺癌中异倍体者6例（85．7％）;无p53基因突变的15例大肠癌中异倍体者6例（40％）。在有淋巴结转移的10例大肠癌中,p53基因突变及DNA异倍体共同表达者5例（50％）;无淋巴结转移的12例大肠腺癌中p53基因突变及DNA异倍体共同表达者1例。结论：大肠癌p53基因突变及DNA异倍体共同表达与淋巴结转移密切相关。     

p53基因与大肠癌辅助化疗

大肠癌为我国常见的恶性肿瘤之一.80年代末至今,其发病率呈逐年上升趋势.在大肠癌患者的治疗方案中,辅助化疗占有很重要的地位.以5-FU为主的化疗药物是治疗大肠癌的首选用药.然而,药物对肿瘤细胞的敏感性在不同个体中差别甚大,同一种药物对不同大肠癌患者的疗效各不相同;尤其对于进展期或复发性大肠癌患者,制订化疗方案更需考虑个体差异以提高疗效,但选用什么指标作为化疗药物筛选的标准目前尚无定论.随着分子生物学理论和技术的不断完善,在大肠癌方面的研究已达到分子水平,许多文献报道p53抑癌基因与患者预后及肿瘤化疗药敏有关.若能运用基因手段作为制订肿瘤化疗方案的一个指标,将对临床用药有较大的参考价值.为此.本文就p53基因对大肠癌患者的预后及辅助化疗中的影响这两方面的国内外最新进展作一综述.一、p53基因与大肠癌p53基因为一抑癌基因,在维持细胞生长、抑制恶性增殖过程中起重要作用.在正常细胞中,p53控制着生长停滞状态的静止期细胞从G_0期到G_1期的转变,并且在G_1期的生长限制点(restriction point)控制着细胞进入细胞周期的增殖.当细胞发生DNA损伤时,p53能使细胞分裂终止在G_1～S期,使其有足够时间修复损伤,恢复正常状态;若损伤不能修复,则启动细胞程序死亡导致细胞凋亡,保证有癌变倾     

恶性肿瘤伴发高钙血症5例

目的及时诊断恶性肿瘤伴发高钙血症的临床意义。方法对经影像学和病理学确诊的５例恶性肿瘤（肺鳞癌３例，乳腺癌１例，肾癌１例）伴发高钙血症进行临床分析。结果４例伴有多发骨转移。５例高钙血症均有不同程度的口渴、多饮、厌食或纳差等胃肠道症状以及疲乏无力、烦燥、表情淡漠或木僵和多尿、便秘、脱水等临床表现，其中２例心电图Ｓ－Ｔ段消失，呈宽大Ｔ波。５例血钙的校正值分别为３．７５ｍｍｏｌ／Ｌ、３．５ｍｍｏｌ／Ｌ、３ｍｍｏｌ／Ｌ、４．４３ｍｍｏｌ／Ｌ、４．５ｍｍｏｌ／Ｌ。经补钠、利尿、骨膦静脉滴注和口服治疗，很快使血钙降至正常。结论对可疑的恶性肿瘤伴发高钙血症患者及时检查，可明确诊断，且经积极治疗后可获好转。     

5例杂合性急性白血病临床特点

利用单克隆抗体及免疫酶法(ABC法)检测92例次急性白血病免疫表型,发现5例HAL,其中AML伴CD_(19)~ 或CD_(10)~ 者4例,其细胞表达CD_(10),CD_(19),CD_(20),CD_(13),CD_(14),HIM_4,HIM_5,CD_(37),CD_(416)。4例均有肝或脾或淋巴结肿大,POX阳性率较低,治疗反应差,预后不好。ALL伴CD_(13)~ 者1例,细胞表达CD_(10),CD_(19),CD_(13),无肝、脾、淋巴结肿大,经治疗虽获CR但缓解期短,很快复发。HAL较一般急性白血病治疗反应不好,预后差。检测白血病细胞表面抗原有助于HAL的诊断。     

食管鳞癌层粘连蛋白表达的意义

应用兔抗鼠层粘连蛋白抗体、ＰＡＰ免疫组化方法研究８０例食管鳞癌层粘连蛋白的表达结果显示：癌旁正常上皮、单纯性增生及不典型增生上皮层粘连蛋白均呈连续线状，原位癌呈线状，但可见局部中断，浸润癌层粘连蛋白表达呈多种形式；分化好的团块型及网状型在癌巢周围呈线状，但呈明显不规则和不连续，分化差的细索型癌则常呈碎片状，在癌浸润前缘有时见不定形阳性物质堆积。分析层粘连蛋白表达癌的分级，血管、神经侵犯及淋巴结转移     

卟啉化合物PN—5 Fu的光动力学治疗作用机理初步研究

小鼠腹水癌细胞经PN-5Fu加光辐照处理后,癌细胞脂质过氧化产物丙二醛(MDA)、形成增多,随光照时间延长,其形成量显著增加(P>0.05-0.01),荷瘤小鼠局部肿瘤经PN-5Fu光动力治疗后,肿瘤组织中MDA含量也明显高于对照纽。(P<0.05),提示PN-5Fu光化学反应可以引起癌细胞膜磷脂中多不饱和脂肪酸的脂质过氧化。用苯甲酸捕获·OH的荧光法测定表明,PN-5Fu光动力反应过程中有羟自由基生成。荧光偏振方法测定细胞膜脂流动性的结果显示PN-5Fu的光动学作用可使腹水癌细胞膜的微粘度明显增高,反映膜脂的流动性明显下降。由透射电镜观察到PN-5Fu光动力治疗作用可使癌细胞超微结构发生显著变化,光照1小时后癌细胞胞浆疏松,线粒体肿胀、空泡变性;光照6小时后可见癌细胞膜破坏,核浓缩、碎解、甚至捎失。实验还表明,PN-5Fu光动学作用所致皮肤光敏反应可完全被维生素E所阻断,苯海拉明及消炎痛均能对抗PN-5Fu的皮肤光敏反应。     

肾上腺转移癌的诊断(附5例报告)

目的　提高肾上腺转移癌的诊断水平。方法　回顾 4例肾上腺转移癌的诊治情况。结果　 4例均经手术及病理确诊 ,其中原发性肺癌 2例、肾癌、鼻咽癌、恶性黑素瘤各1例。结论　有原发肿瘤伴肾上腺区肿物者应考虑转移癌之可能。这种转移癌多为双侧 ,且大小不对称 ,外形不规则 ,无内分泌功能紊乱症状     

平滑肌肉瘤的临床病理研究─—病理组织学、免疫组化及超微结构分析

本文报道对２６例全身多个部位的平滑肌肉瘤（ＬＭｓ）附病理组织学、ＨＨＦ３５及Ｄｅｓｍｉｎ免疫组化及部分病例还进行了超微结构特征研究。结果表明ＬＭＳ具有较典型的组织学特征：瘤细胞呈杆状，平行排列，胞浆内有肌原纤维。低分化的ＬＭＳ细胞异型性大，但仍具有上述特征。Ｄｅｓｍｉｎ标记ＬＭＳ的阳性率是６５％，ＨＨＦ３５的阳性率是９６％。两者有显著性差异。其它对照的多种梭形细胞肉瘤中，除恶性纤维组织细胞瘤中可有少数、单个的细胞呈ＨＨＦ３５阳性外，其它均不表达ＨＨＦ３５和Ｄｅｓｍｉｎ。因此ＨＨＦ３５是标记ＬＭＳ的敏感性高、特异性强的抗体。透射电镜观察ＬＭＳ具有特征性的密体和密斑存在。透射电镜观察也是确诊ＬＭＳ的途径之一。     

MC5单克隆抗体对大肠息肉的免疫组织化学研究

应用单克隆抗体ＭＣ５对１５６例大肠息肉进行免疫组化检测，腺瘤性息肉９６例，阳性４３例，占４４．８％，非腺瘤性息肉６０例，阳性６例，占１０％，两组相比有显著统计学意义（Ｐ＜０．０１）。在肿瘤性息肉中，绒毛状腺瘤阳性率为６８．２％（１５／２２），绒毛管状腺瘤阳性率为３８．９％（７／１８），管状腺瘤阳性率为３７．５％（２１／５６），它们三者之间无显著统计学意义（Ｐ＞０．０５）。这说明腺瘤性息肉与非腺瘤性息肉在肿瘤抗原表达上有差异。腺瘤性息肉伴不典型增生５９例，其中轻度不典型增生１１例，阳性６例（５４．５％），中度和重度不典型增生４８例，阳性３８例（７９．２％）。本组结果表明，腺瘤性息肉伴不典型增生与ＭＣ５的阳性率相平行，反映出它们的恶变趋势。提示早期切除腺瘤性息肉，对预防大肠癌的发生具有重要意义。     

醛氢叶酸联合氟尿嘧啶系列方案治疗93例晚期结直肠癌

目的　研究醛氢叶酸（ＬＶ）联合氟尿嘧啶（５ＦＵ） 系列方案治疗晚期结直肠癌近期疗效和毒性。　方法　９３ 例分别接受下列化疗①Ａ（ＬＦ） 组：５ＦＵ（５００ ｍｇ／ｍ２·ｄ－ １） 加ＬＶ（２０ ｍｇ／ｍ２·ｄ－ １） 静脉连续５ｄ,３ 周重复;②Ｂ（ＬＦＰ） 组：将顺铂（ＰＤＤ４０ ｍｇ／ｄ 静脉连续３ｄ） 加入Ａ 组中;③Ｃ（ＬＦＨ） 组：将羟基喜树碱（ＨＣＰＴ６ ～８ ｍｇ／ｍ２·ｄ－ １ 静脉连续５ ～１０ｄ） 加入Ａ 组中。每例２ 疗程后作疗效、不良反应评价。　结果　有效率分别为Ａ组１２５ ％（５／４０）、Ｂ组２２２％ （６／２７） 和Ｃ组３４６ ％（９／２６）,Ｃ组显著高于Ａ组（ Ｐ＜ ００５） ;胃肠道反应和骨髓抑制Ｂ 组较Ａ 组增加,Ｃ组较Ａ 组无明显增加。　结论　ＬＦＰ方案价值有待进一步研究,临床上可有选择地应用。ＬＦＨ 方案是治疗晚期结直肠癌有希望的方案。     

超氧化物歧化酶对平阳霉素抗癌作用的影响

本实验用体外培养的A_(549)肺癌细胞和裸鼠体内癌细胞接种方法分别观察了超氧化物歧化酶(SOD)活性与平阳霉素抗癌作用的关系。结果发现,外加的SOD抑制剂二乙基二硫氨基甲酸钠(DDC)明显增强了平阳霉素的抗癌作用;而外加SOD后,平阳霉素的抗癌作用受到明显抑制。实验结果提示,对应用平阳霉素类抗癌药化疗的患者,在一定时间内适当给予SOD活性抑制剂,将有利于提高化疗疗效。     

大剂量醛氢叶酸与氟尿嘧啶治疗晚期胃肠道癌

用醛氢叶酸（ＣＦ）与氟尿嘧啶（５ＦＵ）治疗经病理证实的晚期胃肠道癌１７例，其中胃癌８例，大肠癌９例。ＣＦ每次２００毫克，静滴２小时，５ＦＵ每次１克，于ＣＦ滴至一半时用，静滴１４小时以上，连用５天，２１天重复。结果：总有效率（ＣＲ＋ＰＲ）４７．１％，其中初治８例，有效率为６２．５％，复治９例（曾用过５ＦＵ或ＦＴ－２０７治疗），有效率３３．３％。胃癌与大肠癌有效率分别为５％和４４．４％，１７例中除１例