特定条件下化疗诱导结肠癌细胞凋亡的研究

目的:研究结肠癌化疗药物氟尿嘧啶(5-FU)和奥沙利铂(OXA)分别诱导结肠癌细胞株HT-29细胞凋亡的作用.方法:用80μg/ml 5-FU和25μg/ml OXA分别作用HT-29细胞8h,并应用AnnexinV-FITC/PI双标记流式细胞术对细胞凋亡进行检测,观察凋亡细胞的比例.结果:80μg/ml 5-FU处理8h组与空白对照组比较,凋亡细胞比例上升约9.2%(P＜0.01);25μg/ml OXA处理8h组与空白对照组比较,凋亡细胞比例上升约21.1%(P＜0.01).25μg/ml OXA处理8h组与80μg/ml 5-FU处理8h组比较,凋亡细胞比例约高于11.9%(P＜0.01).结论:在特定条件下,5-FU和OXA均能明显诱导结肠癌细胞株HT-29细胞凋亡;OXA对结肠癌细胞的诱导凋亡作用要强于5-FU.     

VES对Her-2、p53共表达乳腺癌细胞的抑制作用及机制

目的:研究VES对Her-2、p53共表达乳腺癌细胞株MDA-MB-453细胞的增殖、凋亡的影响、通过检测Her-2、p53探讨VES抑制乳腺癌细胞生长的机制。方法:应用MTT法检测VES对MDA-MB-453细胞增殖的影响;流式细胞仪检测细胞周期变化及细胞凋亡;RT-PCR和免疫细胞化学法分别检测Her-2基因mRNA和Her-2、p53蛋白表达水平。结果:VES能抑制乳腺癌MDA-MB-453细胞增殖,随VES剂量的增加,抑制作用增强。其中20μg/ml VES处理组在48h后受到明显抑制,抑制率达52.25%;经VES处理后细胞出现凋亡,5μg/ml处理48h后,凋亡率为39.52%;药物干预组使肿瘤细胞大量阻滞于G1期(P<0.01);RT-PCR和免疫细胞化学法结果表明,VES能抑制Her-2基因mRNA的转录水平,从而抑制其蛋白的表达,也能降低p53蛋白的表达。结论:VES可诱导Her-2、p53共表达乳腺癌MDA-MB-53细胞凋亡,抑制增殖。其机制可能是通过抑制Her-2基因mRNA及蛋白的表达和通过抑制突变型p53蛋白的表达使细胞停滞于G1有关。     

循环肿瘤细胞p53基因表达和端粒酶活性在大肠癌临床病理学中的意义

背景与目的:探讨大肠癌患者循环肿瘤细胞p53基因的表达和端粒酶活性的变化及其临床病理学意义.材料与方法:113例大肠癌患者、13例良性大肠肿瘤患者术前的外周血和28例健康供血员的外周血,用分层液分离含有循环肿瘤细胞的单个核细胞.应用流式细胞仪和TRAP-ELISA法,分别检测p53基因表达和端粒酶活性.结果:在105例有信息的大肠癌患者中,p53基因表达和端粒酶活性的阳性率分别为74.3%(78/105)和61.0%(64/105).异常的p53基因表达和端粒酶活性水平均与大肠癌患者的淋巴结转移显著相关(P<0.05),两者的联合检测提高了对大肠癌淋巴结转移的预测水平.p53基因异常表达还与大肠癌细胞分化程度显著相关(P=0.003).结论:循环肿瘤细胞异常的p53基因表达和端粒酶活性是大肠癌的恶性生物学标志,两者密切相关.联合检测可提高对淋巴结转移状态的预测水平.     

VES对Her-2、p53共表达乳腺癌细胞的抑制作用及机制

目的：研究VES对Her-2、p53共表达乳腺癌细胞株MDA-MB-453细胞的增殖、凋亡的影响、通过检测Her-2、p53探讨VES抑制乳腺癌细胞生长的机制。方法：应用MTT法检测VES对MDA-MB-453细胞增殖的影响;流式细胞仪检测细胞周期变化及细胞凋亡;RT-PCR和免疫细胞化学法分别检测Her-2基因mRNA和Her-2、p53蛋白表达水平。结果：VES能抑制乳腺癌MDA-MB-453细胞增殖,随VES剂量的增加,抑制作用增强。其中20μg/ml VES处理组在48h后受到明显抑制,抑制率达52.25%;经VES处理后细胞出现凋亡,5μg/ml处理48h后,凋亡率为39.52%;药物干预组使肿瘤细胞大量阻滞于G1期（P〈0.01）;RT-PCR和免疫细胞化学法结果表明,VES能抑制Her-2基因mRNA的转录水平,从而抑制其蛋白的表达,也能降低p53蛋白的表达。结论：VES可诱导Her-2、p53共表达乳腺癌MDA-MB-53细胞凋亡,抑制增殖。其机制可能是通过抑制Her-2基因mRNA及蛋白的表达和通过抑制突变型p53蛋白的表达使细胞停滞于G1有关。     

Toremifene诱导MCF-7/ADR细胞凋亡的研究

目的研究Toremifene体外诱导乳腺癌耐药细胞MCF-7/ADR凋亡和凋亡相关基因Fas、FasL、p53和Caspase-3表达的关系.方法以不同浓度Toremifene(0.24μg/ml、2.4μg/ml、24μg/ml)诱导MCF-7/ADR细胞凋亡;以MTT法观察不同处理浓度的Toremifene对MCF-7/ADR细胞DNA合成活性的影响;以免疫组化检测Fas、FasL、p53和Caspase-3蛋白表达.结果不同浓度Toremifene处理的MCF-7/ADR细胞出现DNA合成活性下降,抑制强度与浓度有关(P＜0.05);Fas、FasL、p53和Caspase-3蛋白呈上调表达.结论Toremifene能诱导细胞凋亡;增加Fas、FasL、p53和Caspase-3基因表达;并且与启动Caspase-3凋亡信号和p53直接介导的凋亡有关.     

大肠癌p53基因突变和染色体异倍体表达与淋巴结转移的关系

目的 :研究大肠癌转移与p53基因突变及染色体倍性之间的关系。方法 :采用特异合成引物对p53基因 7～ 8外显子进行PCR扩增 ,结合单链构象多态性分析 (SSCP)和银染技术 ,检则 2 2例大肠癌手术标本p53基因的突变 ;用流式细胞仪 (FACS)分析其染色体的倍性。结果 :在有淋巴结转移 10例大肠腺癌中 ,p53基因突变者占 6例 ( 60 % ) ;在无淋巴结转移的 12例大肠腺癌中 ,p53基因突变者占 1例 ( 8 3% )。在有p53基因突变的 7例大肠腺癌中异倍体者 6例 ( 85 7% ) ;无p53基因突变的 15例大肠癌中异倍体者 6例 ( 4 0 % )。在有淋巴结转移的 10例大肠癌中 ,p53基因突变及DNA异倍体共同表达者 5例 ( 50 % ) ;无淋巴结转移的 12例大肠腺癌中p53基因突变及DNA异倍体共同表达者 1例。结论 :大肠癌p53基因突变及DNA异倍体共同表达与淋巴结转移密切相关。     

大肠癌p53基因突变和染色体异倍体表达与淋巴结转移的关系

目的：研究大肠癌转移与p53基因突变及染色体倍性之间的关系。方法：采用特异合成引物对p53基因7－8外显子进行PCR扩增,结合单链构象多态性分析（SSCP）和银染技术,检则22例大肠癌手术标本p53基因的突变;用流式细胞仪（FACS）分析其染色体的倍性。结果：在有淋巴结转移10例大肠腺癌中,p53基因突变者占6例（60％）;在无淋巴结转移的12例大肠腺癌中,p53基因突变者占1例（8．3％）。在有p53基因突变的7例大肠腺癌中异倍体者6例（85．7％）;无p53基因突变的15例大肠癌中异倍体者6例（40％）。在有淋巴结转移的10例大肠癌中,p53基因突变及DNA异倍体共同表达者5例（50％）;无淋巴结转移的12例大肠腺癌中p53基因突变及DNA异倍体共同表达者1例。结论：大肠癌p53基因突变及DNA异倍体共同表达与淋巴结转移密切相关。     

吉西他滨对胰腺癌PC-2细胞体外生长及基因表达的影响

目的:探讨吉西他滨对胰腺癌PC-2细胞体外生长及基因表达的影响.方法:体外培养胰腺癌PC-2细胞,MTT法检测不同浓度吉西他滨(空白组,10μg/ml,20μg/ml,30μg/ml,40μg/ml,50μg/ml,60μg/ml,70μg/ml,80μg/ml,90μg/ml及100μg/ml吉西他滨组)对PC-2细胞体外生长的影响.流式细胞仪检测吉西他滨(40μg/ml组,60μg/ml组)对胰腺癌细胞周期及凋亡影响.Human 1A 基因表达谱芯片分析2组间基因谱差异表达.结果:胰腺癌PC-2细胞的凋亡分数与吉西他滨的浓度呈剂量依赖关系,加药组G1期细胞百分比与对照组相比差异具有统计学意义(P＜0.05),且随浓度增大,G1期细胞比例逐渐增多,而S期细胞则相反.40μg/ml吉西他滨组胰腺癌细胞24h凋亡率是10.86 %,且以早期凋亡细胞为主;60μg/ml吉西他滨组胰腺癌细胞24h凋亡率是32.14 %,也以早期凋亡细胞为主,但晚期凋亡细胞明显较40μg/ml组增多(P＜0.05).随时间增加细胞凋亡水平增高.细胞表达谱芯片结果显示,差异表达基因(差异表达两倍以上)共702条.其中主要包括表达上调的基因406个,下调基因296个.结论:吉西他滨通过诱导胰腺癌PC-2细胞凋亡和抑制其增殖来发挥抗肿瘤作用;吉西他滨对PC-2细胞株的作用涉及原癌基因、抑癌基因等多种相关基因的变化,吉西他滨可能主要通过上调Fas/FasL基因表达,同时通过下调bcl-2基因表达诱导PC-2细胞凋亡.     

恶性肿瘤伴发高钙血症5例

目的及时诊断恶性肿瘤伴发高钙血症的临床意义。方法对经影像学和病理学确诊的５例恶性肿瘤（肺鳞癌３例，乳腺癌１例，肾癌１例）伴发高钙血症进行临床分析。结果４例伴有多发骨转移。５例高钙血症均有不同程度的口渴、多饮、厌食或纳差等胃肠道症状以及疲乏无力、烦燥、表情淡漠或木僵和多尿、便秘、脱水等临床表现，其中２例心电图Ｓ－Ｔ段消失，呈宽大Ｔ波。５例血钙的校正值分别为３．７５ｍｍｏｌ／Ｌ、３．５ｍｍｏｌ／Ｌ、３ｍｍｏｌ／Ｌ、４．４３ｍｍｏｌ／Ｌ、４．５ｍｍｏｌ／Ｌ。经补钠、利尿、骨膦静脉滴注和口服治疗，很快使血钙降至正常。结论对可疑的恶性肿瘤伴发高钙血症患者及时检查，可明确诊断，且经积极治疗后可获好转。     

5例杂合性急性白血病临床特点

利用单克隆抗体及免疫酶法(ABC法)检测92例次急性白血病免疫表型,发现5例HAL,其中AML伴CD_(19)~ 或CD_(10)~ 者4例,其细胞表达CD_(10),CD_(19),CD_(20),CD_(13),CD_(14),HIM_4,HIM_5,CD_(37),CD_(416)。4例均有肝或脾或淋巴结肿大,POX阳性率较低,治疗反应差,预后不好。ALL伴CD_(13)~ 者1例,细胞表达CD_(10),CD_(19),CD_(13),无肝、脾、淋巴结肿大,经治疗虽获CR但缓解期短,很快复发。HAL较一般急性白血病治疗反应不好,预后差。检测白血病细胞表面抗原有助于HAL的诊断。     

食管鳞癌层粘连蛋白表达的意义

应用兔抗鼠层粘连蛋白抗体、ＰＡＰ免疫组化方法研究８０例食管鳞癌层粘连蛋白的表达结果显示：癌旁正常上皮、单纯性增生及不典型增生上皮层粘连蛋白均呈连续线状，原位癌呈线状，但可见局部中断，浸润癌层粘连蛋白表达呈多种形式；分化好的团块型及网状型在癌巢周围呈线状，但呈明显不规则和不连续，分化差的细索型癌则常呈碎片状，在癌浸润前缘有时见不定形阳性物质堆积。分析层粘连蛋白表达癌的分级，血管、神经侵犯及淋巴结转移     

卟啉化合物PN—5 Fu的光动力学治疗作用机理初步研究

小鼠腹水癌细胞经PN-5Fu加光辐照处理后,癌细胞脂质过氧化产物丙二醛(MDA)、形成增多,随光照时间延长,其形成量显著增加(P>0.05-0.01),荷瘤小鼠局部肿瘤经PN-5Fu光动力治疗后,肿瘤组织中MDA含量也明显高于对照纽。(P<0.05),提示PN-5Fu光化学反应可以引起癌细胞膜磷脂中多不饱和脂肪酸的脂质过氧化。用苯甲酸捕获·OH的荧光法测定表明,PN-5Fu光动力反应过程中有羟自由基生成。荧光偏振方法测定细胞膜脂流动性的结果显示PN-5Fu的光动学作用可使腹水癌细胞膜的微粘度明显增高,反映膜脂的流动性明显下降。由透射电镜观察到PN-5Fu光动力治疗作用可使癌细胞超微结构发生显著变化,光照1小时后癌细胞胞浆疏松,线粒体肿胀、空泡变性;光照6小时后可见癌细胞膜破坏,核浓缩、碎解、甚至捎失。实验还表明,PN-5Fu光动学作用所致皮肤光敏反应可完全被维生素E所阻断,苯海拉明及消炎痛均能对抗PN-5Fu的皮肤光敏反应。     

肾上腺转移癌的诊断(附5例报告)

目的　提高肾上腺转移癌的诊断水平。方法　回顾 4例肾上腺转移癌的诊治情况。结果　 4例均经手术及病理确诊 ,其中原发性肺癌 2例、肾癌、鼻咽癌、恶性黑素瘤各1例。结论　有原发肿瘤伴肾上腺区肿物者应考虑转移癌之可能。这种转移癌多为双侧 ,且大小不对称 ,外形不规则 ,无内分泌功能紊乱症状     

平滑肌肉瘤的临床病理研究─—病理组织学、免疫组化及超微结构分析

本文报道对２６例全身多个部位的平滑肌肉瘤（ＬＭｓ）附病理组织学、ＨＨＦ３５及Ｄｅｓｍｉｎ免疫组化及部分病例还进行了超微结构特征研究。结果表明ＬＭＳ具有较典型的组织学特征：瘤细胞呈杆状，平行排列，胞浆内有肌原纤维。低分化的ＬＭＳ细胞异型性大，但仍具有上述特征。Ｄｅｓｍｉｎ标记ＬＭＳ的阳性率是６５％，ＨＨＦ３５的阳性率是９６％。两者有显著性差异。其它对照的多种梭形细胞肉瘤中，除恶性纤维组织细胞瘤中可有少数、单个的细胞呈ＨＨＦ３５阳性外，其它均不表达ＨＨＦ３５和Ｄｅｓｍｉｎ。因此ＨＨＦ３５是标记ＬＭＳ的敏感性高、特异性强的抗体。透射电镜观察ＬＭＳ具有特征性的密体和密斑存在。透射电镜观察也是确诊ＬＭＳ的途径之一。     

MC5单克隆抗体对大肠息肉的免疫组织化学研究

应用单克隆抗体ＭＣ５对１５６例大肠息肉进行免疫组化检测，腺瘤性息肉９６例，阳性４３例，占４４．８％，非腺瘤性息肉６０例，阳性６例，占１０％，两组相比有显著统计学意义（Ｐ＜０．０１）。在肿瘤性息肉中，绒毛状腺瘤阳性率为６８．２％（１５／２２），绒毛管状腺瘤阳性率为３８．９％（７／１８），管状腺瘤阳性率为３７．５％（２１／５６），它们三者之间无显著统计学意义（Ｐ＞０．０５）。这说明腺瘤性息肉与非腺瘤性息肉在肿瘤抗原表达上有差异。腺瘤性息肉伴不典型增生５９例，其中轻度不典型增生１１例，阳性６例（５４．５％），中度和重度不典型增生４８例，阳性３８例（７９．２％）。本组结果表明，腺瘤性息肉伴不典型增生与ＭＣ５的阳性率相平行，反映出它们的恶变趋势。提示早期切除腺瘤性息肉，对预防大肠癌的发生具有重要意义。     

醛氢叶酸联合氟尿嘧啶系列方案治疗93例晚期结直肠癌

目的　研究醛氢叶酸（ＬＶ）联合氟尿嘧啶（５ＦＵ） 系列方案治疗晚期结直肠癌近期疗效和毒性。　方法　９３ 例分别接受下列化疗①Ａ（ＬＦ） 组：５ＦＵ（５００ ｍｇ／ｍ２·ｄ－ １） 加ＬＶ（２０ ｍｇ／ｍ２·ｄ－ １） 静脉连续５ｄ,３ 周重复;②Ｂ（ＬＦＰ） 组：将顺铂（ＰＤＤ４０ ｍｇ／ｄ 静脉连续３ｄ） 加入Ａ 组中;③Ｃ（ＬＦＨ） 组：将羟基喜树碱（ＨＣＰＴ６ ～８ ｍｇ／ｍ２·ｄ－ １ 静脉连续５ ～１０ｄ） 加入Ａ 组中。每例２ 疗程后作疗效、不良反应评价。　结果　有效率分别为Ａ组１２５ ％（５／４０）、Ｂ组２２２％ （６／２７） 和Ｃ组３４６ ％（９／２６）,Ｃ组显著高于Ａ组（ Ｐ＜ ００５） ;胃肠道反应和骨髓抑制Ｂ 组较Ａ 组增加,Ｃ组较Ａ 组无明显增加。　结论　ＬＦＰ方案价值有待进一步研究,临床上可有选择地应用。ＬＦＨ 方案是治疗晚期结直肠癌有希望的方案。     

超氧化物歧化酶对平阳霉素抗癌作用的影响

本实验用体外培养的A_(549)肺癌细胞和裸鼠体内癌细胞接种方法分别观察了超氧化物歧化酶(SOD)活性与平阳霉素抗癌作用的关系。结果发现,外加的SOD抑制剂二乙基二硫氨基甲酸钠(DDC)明显增强了平阳霉素的抗癌作用;而外加SOD后,平阳霉素的抗癌作用受到明显抑制。实验结果提示,对应用平阳霉素类抗癌药化疗的患者,在一定时间内适当给予SOD活性抑制剂,将有利于提高化疗疗效。     

大剂量醛氢叶酸与氟尿嘧啶治疗晚期胃肠道癌

用醛氢叶酸（ＣＦ）与氟尿嘧啶（５ＦＵ）治疗经病理证实的晚期胃肠道癌１７例，其中胃癌８例，大肠癌９例。ＣＦ每次２００毫克，静滴２小时，５ＦＵ每次１克，于ＣＦ滴至一半时用，静滴１４小时以上，连用５天，２１天重复。结果：总有效率（ＣＲ＋ＰＲ）４７．１％，其中初治８例，有效率为６２．５％，复治９例（曾用过５ＦＵ或ＦＴ－２０７治疗），有效率３３．３％。胃癌与大肠癌有效率分别为５％和４４．４％，１７例中除１例