多药耐药基因产物P—糖蛋白在正常人体组织中的分布和细胞定位

采用两种抗Ｐ－糖蛋白抗体免疫组化检测了３２例正常人体组织中多药耐药基因产物Ｐ－糖蛋白，结果发现肾上腺，肾、肝、大肠、小肠、胰腺及甲状腺中Ｐ－ｇｐ高度表达。在肾上腺和甲状腺中Ｐ－ｇｐ弥散分布于细胞浆质。在肾脏中Ｐ－ｇｐ在近曲小管上皮细胞的管腔侧分布较多。     

膀胱腔内灌注化疗对膀胱癌组织中P-糖蛋白表达的影响

目的：探讨膀胱癌P-糖蛋白（P—gP）的表达与临床膀胱灌注化疗之间的关系。方法：用免疫组化技术检测60例初发膀胱癌组织标本及应用膀胱腔内化疗后复发的32例活组织标本中P—gP的表达。结果：60例初发膀胱癌组织中P—gp阳性率30．5％，复发的32例中P—gp阳性率为62．5％，膀胱癌术后膀胱灌注化疗失败者的P—gP阳性率明显高于初发膀胱癌。结论：P-糖蛋白介导的多药耐药是膀胱腔内灌注化疗失败、肿瘤复发的重要原因，但P—gP表达不是引起多药耐药的唯一机制。     

32例肝癌组织中多药耐药基因及其产物P-糖蛋白的实验研究

探讨肝癌组织中mdr－1（多药耐药基因）mRNA及P－170（P－糖蛋白）的表达水平，采用RT－PCR及免疫组织化学SP法检测32例肝癌组织中mdr－1mRNA和P－糖蛋白的表达．发现不仅肝癌组织中mdr－1和P－糖蛋白的表达显著高于对照组，而且转移组中P－糖蛋白的表达高于非转移组．提示检测mdr－1／P－gp对肝癌制订治疗方案，判断疗效及MDR逆转剂的应用具有重要的临床意义；mdr－1mRNA／P－gp的过表达可能与肝肿瘤的转移预后有关．     

正常大鼠胆管细胞胆汁酸转运蛋白表达的异质性

目的检测正常大鼠肝脏不同部位胆管细胞胆汁酸转运蛋白表达的差异。方法用酶消化辅助机械分离方法获得SD大鼠胆管组织并分为大、小胆管组织,应用免疫组织化学、Real time PCR及Western blot等方法检测大鼠胆道系统顶侧钠依赖性胆汁酸转运体（ASBT）、回肠胆汁酸结合蛋白（IBABP）和基底侧有机溶质转运体α（OSTα）表达,分析其定位及分布的差异。结果 ASBT表达于胆管细胞顶侧胞膜,IBABP表达于细胞浆,Ostα表达于胆管细胞基底侧胞膜。ASBT和IBABP主要表达于大胆管上皮细胞,大胆管组织中ASBT和IBABP的表达量显著高于小胆管组织（P〈0.05）;而Ostα则同时表达于大胆管和小胆管上皮细胞,其表达量在大、小胆管组织中无显著差异（P〉0.05）。结论胆管细胞对胆汁酸的重吸收主要发生于大胆管。     

人免疫缺陷病毒Ⅰ型外膜糖蛋白gp~(120)和gp~(160)在重组痘苗病毒中的表达及其抗原性研究

人免疫缺陷病毒Ⅰ型（HIV-1）是严重威胁人类健康的病原体，其主要抗原是病毒外膜糖蛋白gp160（gp120＋gp41）。本文报道运用遗传工程技术，在噬菌体T7启动子或痘苗病毒启动子P7．5控制下，在重组痘苗病毒系统中构建和表达HIV－1gp120和gp160。进一步研究表明，在此系统中表达的重组HIV－1gp120和gp160以糖蛋白形式存在，保留着病毒在自然状况下的抗原表位构象，可同病毒特异性中和单克隆抗体反应，可作为重要的候选重组疫苗蛋白。     

大肠癌中多药耐药基因表达的临床意义及对预后的影响

目的：探讨多药耐药基因1(MDR1)表达产物P—糖蛋白(P—gp)在大肠癌中表达情况及其对预后的影响。方法：用免疫组织化学方法测定48例大肠癌及正常肠粘膜组织中P—gp表达情况，并与各临床指标及预后进行相关性分析。结果：上述组织中均存在P—gp的高表达率，两者之间无显著性差异；P—gp的表达与大肠癌临床分期、组织学类型等临床资料无关，但与预后有关，P—gp高表达者预后差，统计学上有显著性差异。结论：由于大肠癌中P—gp的高表达率，因此推测多数大肠癌患者对抗肿瘤化疗药物具有先天耐药性，这是大肠癌化疗疗效不佳的原因之一。肿瘤组织中P—gp高表达患者预后差。     

流式细胞术对人脑胶质瘤多药耐药膜糖蛋白测定的临床意义

目的：探讨流式细胞术对人脑胶质瘤多药耐药膜糖蛋白（P－gp）测定的临床意义。方法：采用流式细胞术直接免疫荧光染色法检测新鲜脑胶质瘤和正常脑组织标本中P－gp的表达。结果：不同性别、年龄、肿瘤大小之间P－gp表达阳性率无明显差异（P＞0．05），不同恶性程度之间P－gp表达阳性率差异有显著性（P＜0．05）。相同级别胶质瘤中复发与原发者P－gp表达差异有显著性（P＜0．05）。结论：P－gp表达与病人性别、年龄、肿瘤大小无关，与肿瘤恶性程度呈正相关，P-gp测定可判断胶质瘤对化疗药物敏感性，指导临床应用多药耐药逆转剂，制订化疗方案，亦对判断预后有指导作用。     

胃癌及癌前病变中的细胞凋亡与Bcl-2蛋白、P糖蛋白的表达及相关性研究

目的：探讨胃癌及癌前病变中细胞凋亡及Bcl-2蛋白与P糖蛋白（P－glycoprotein,P-gp)表达的变化规律及相互关系。方法：采用末端脱氧核苷酸转移酶（TdT)介导的dUTP缺口原位末端标记法（TUNEL）与免疫组织化学S－P法，分别检测细胞凋亡指数（Apoptotic Index,AI)及Bcl-2蛋白和P糖蛋白的表达。结果：AI和Bcl-2蛋白，P－gp的表达在30例慢性浅表性胃炎（CSG），11例慢性萎缩性胃炎（CAG），12例重度肠上皮化生（IM）三种吵的比较差异无显著性（P＞0．05），而在12例IM，13例中重度不典型增生（Dys),32例胃癌（GC）三组中的比较差异有显著性（P＜0．05），AI依次减少，Bcl-2蛋白与P－糖蛋白表达依次增加，AI与Bcl-2蛋白，P糖蛋白表达呈负相关（P＜0．05），Bcl-2蛋白与P糖蛋白呈正相关（P＜0．05），结论：癌前病变转化为胃癌与细胞凋亡与Bcl-2蛋白，P－gp的表达变化有关，同时P－gp,Bcl-2蛋白具有抗凋亡，耐药的双重作用，P－gp与Bcl-2蛋白可能存在协同作用。     

P—gp和p53蛋白在大肠癌细胞中的表达及其临床意义

目的：探讨大肠癌细胞中P－糖蛋白（P－gp)和p53蛋白的表达情况及其临床意义。方法：采用SP免疫组织化学法对64例大肠癌标本进行检测。结果：64例中有44例大肠癌标本的P－gp和p53蛋白表达一致，二者的表达有相关性，其中19例二者均为阳性表达，25例均为阴性表达，并且P－gp和p53蛋白在（Ⅲ加Ⅳ）组的阳性率显著高于（Ⅰ加Ⅱ＿组，结论：大肠癌中P-gp和p53蛋白的表达密切相关，二者共同表达提示患者预后不良。     

膀胱移行细胞癌P-gp170表达与细胞凋亡的关系

目的 探讨原发性膀胱移行细胞癌P－糖蛋白（P－gp170)表达与细胞凋亡的关系。方法 用免疫组化SP方法和凋亡细胞原位标记（TUNEL）检测了40例膀胱移行细胞癌P－gp170表达和细胞凋亡，并应用图像分析系统定量分析其凋亡指数（AI）。结果 40例膀胱移行细胞癌P－gp170表达率为48％，细胞学分级之间无显著性差异（P＞0．05）；AI随组织学分级增高而增高，各分级之间有显著性差异（P＜0．05）；AI在膀胱移行细胞癌P－gp170阳性表达组明显低于P－gp170阴性表达组，有显著性差异（P＜0．01）。结论 原发性膀胱移行细胞癌P－gp170高表达可能抑制细胞凋亡过程致AI降低。     

急性吗啡染毒大鼠体内吗啡的定位研究

The distribution of morphine in acute morphine-treated rats was studied by immunohistochemistry (PAP). Samples were examined for morphine distribution and localization in internal organs at 10-160 min after intraperitoneal injection of morphine. The results showed that morphine was distributed in the heart, hepatocytes, epithelial cells of the bile canalicular cells in liver, spleen, kidney, adrenal glands, stomach parietal cells, small intestinal villus, pancreas islet, sublingual glands and submandibular glands. Morphine was found in the cardiac tissue, liver, spleen, pancreas islet, small intestinal villus at 10 min after injection and in the cardiac tissue, stomach parietal cells at 160 min after injection. The cause of the postmortem the distribution of morphine in internal organs at different times after injection was discussed. The results of this study may be used as a basis for the choice of samples for the forensic toxicological analysis.     

五种多药耐药性基因在正常人体组织的表达

目的：观察五种多药耐药性（MDR）基因在正常人体组织中的表达。方法：采用二重RT-PCR法及免疫组织化学SP法，分别从mRNA和蛋白质表达水平检测（90例，共15种）正常人体组织中5种MDR基因的表达。结果：五种MDR基因在人体不同器官和组织中均有表达。同时表达5种MDR基因的器官和组织有肝脏、肺脏、肾脏、食管、结肠、小肠、胰腺、甲状腺、前列腺及胎盘。皮肤组织中未发现LRP基因表达（0/5）。乳腺和卵巢组织未发现MRP基因表达（0/5）。不同MDR基因在各种组织中的表达存在差别。结论：正常情况下，五种MDR基因的mRNA和蛋白质在人体组织中广泛表达，以在肝脏、肺脏、肾脏、结肠、小肠和胰腺组织中表达较强。     

SARS冠状病毒N蛋白单克隆抗体在SARS尸检组织中的表达

目的观察SARS死者的尸检组织中SARS冠状病毒(SARS-CoV)的存在与分布情况。方法应用免疫组化技术检测4例尸检标本肺、脾脏、淋巴结、脑、垂体、心、肝、肾、胰腺、气管、食道、胃肠道和骨髓等组织的SARS-CoV N蛋白。结果肺泡上皮、肺、脾、淋巴结内浸润的单核细胞/巨噬细胞、脑神经元、肝细胞、肾远曲小管上皮细胞、胰腺腺泡细胞、垂体嗜酸细胞、甲状旁腺嗜酸性细胞、肾上腺皮质细胞、气管及支气管浆液腺上皮细胞、食道粘膜鳞状上皮、胃肠道柱状上皮细胞及胃壁细胞、骨髓早幼粒细胞及小静脉内皮细胞等细胞质内SARS-CoV N蛋白单克隆抗体均为阳性。结论SARS-CoV可侵犯全身多种器官和组织。SARS-CoV N蛋白单克隆抗体在胃肠道、肾远曲小管及汗腺细胞内的阳性表达,对研究SARS-CoV传播途径具有重要意义。     

SARS冠状病毒N蛋白单克隆抗体在SARS尸检组织中的表达

目的 观察SARS死者的尸检组织中SARS冠状病毒(SARS-CoV)的存在与分布情况。方法 应用免疫组化技术检测4例尸检标本肺、脾脏、淋巴结、脑、垂体、心、肝、肾、胰腺、气管、食道、胃肠道和骨髓等组织的SARS-CoVN蛋白。结果 肺泡上皮、肺、脾、淋巴结内浸润的单核细胞／巨噬细胞、脑神经元、肝细胞、肾远曲小管上皮细胞、胰腺腺泡细胞、垂体嗜酸细胞、甲状旁腺嗜酸性细胞、肾上腺皮质细胞、气管及支气管浆液腺上皮细胞、食道粘膜鳞状上皮、胃肠道柱状上皮细胞及胃壁细胞、骨髓早幼粒细胞及小静脉内皮细胞等细胞质内SARS-CoVN蛋白单克隆抗体均为阳性。结论 SARS-CoV可侵犯全身多种器官和组织。SARS-CoVN蛋白单克隆抗体在胃肠道、肾远曲小管及汗腺细胞内的阳性表达，对研究SARS—CoV传播途径具有重要意义。     

原位杂交检测尸检组织中SARS-CoV RNA

目的从分子水平检测急性重症呼吸综合征(SARS)患者的病变组织中SARS病毒(SARS-associated coronavirus, SARS-CoV)的存在和分布情况。方法应用原位杂交技术检测因SARS死亡患者的肺、脾脏、淋巴结、垂体、胰腺、甲状旁腺、肾上腺、胃肠道、皮肤、脑、肝、肾、血管、四肢横纹肌组织、骨髓、心脏、卵巢、子宫和睾丸等组织的SARS-CoV RNA的表达和定位。结果尸检组织多部位(包括肺泡上皮细胞、气管及支气管浆液腺上皮细胞、肺内单核/巨噬细胞、脾脏和淋巴结的单核/巨噬细胞、胰腺腺泡细胞、垂体嗜酸性细胞、肾上腺皮质细胞、甲状旁腺嗜酸性细胞、食道鳞状上皮、胃肠道上皮细胞及胃粘膜壁细胞、皮肤汗腺细胞、大脑神经元细胞、肝细胞、肾远曲小管上皮细胞、骨髓早幼粒细胞及小静脉内皮细胞)SARS-CoV RNA阳性。结论SARS-CoV可侵犯全身多种器官;SARS-CoV在机体的分布情况与冠状病毒受体CD13分布相似;皮肤汗腺、消化道上皮及肾远曲小管上皮细胞SARS-CoV RNA阳性对确定SARS传播途径具有重要意义。     

原位杂交检测尸检组织中SARS-CoVRNA

目的 从分子水平检测急性重症呼吸综合征(SARS)患者的病变组织中SARS病毒(SARS-associatcd coronavirus，SARS—CoV)的存在和分布情况。方法 应用原位杂交技术检测因SARS死亡患者的肺、脾脏、淋巴结、垂体、胰腺、甲状旁腺、肾上腺、胃肠道、皮肤、脑、肝、肾、血管、四肢横纹肌组织、骨髓、心脏、卵巢、子宫和睾丸等组织的SARS-CoVRNA的表达和定位。结果 尸检组织多部位(包括肺泡上皮细胞、气管及支气管浆液腺上皮细胞、肺内单核／巨噬细胞、脾脏和淋巴结的单核／巨噬细胞、胰腺腺泡细胞、垂体嗜酸性细胞、肾上腺皮质细胞、甲状旁腺嗜酸性细胞、食道鳞状上皮、胃肠道上皮细胞及胃粘膜壁细胞、皮肤汗腺细胞、大脑神经元细胞、肝细胞、肾远曲小管上皮细胞、骨髓早幼粒细胞及小静脉内皮细胞)SARS-CoVRNA阳性。结论 SARS-CoV可侵犯全身多种器官；SARS-CoV在机体的分布情况与冠状病毒受体CD13分布相似：皮肤汗腺、消化道上皮及肾远曲小管上皮细胞SARS-CoVRNA阳性对确定SARS传播途径具有重要意义。     

胰腺丝氨酸弹力蛋白酶mRNA在正常大鼠组织器官中的表达

目的探查胰腺丝氨酸弹力蛋白酶mRNA在大鼠组织器官中的表达.方法克隆地高辛素标记的大鼠胰腺丝氨酸弹力蛋白酶Ⅱ的RNA探针,摘取Wistar雄性正常大鼠的组织器官,固定于4%多聚甲醛,进行原位杂交.结果正常大鼠腹主动脉的内皮细胞、中膜平滑肌细胞以及血管外膜成纤维细胞,血液细胞中的淋巴细胞、单核细胞,气管透明软骨细胞,胰腺的腺细胞、腮腺、颔下腺上皮细胞,肝细胞、肝窦壁的内皮细胞,小肠黏膜杯状细胞,心肌细胞,肾间质的纤维母细胞,肺泡上皮细胞,大脑胶质细胞,皮肤真皮纤维母细胞,睾丸曲精细管内的初级精母细胞、次级精母细胞以及精子,脾脏以及胸腺的淋巴细胞等,均有弹力蛋白酶mRNA的表达.结论胰腺丝氨酸弹力蛋白酶mRNA广泛表达于正常大鼠血管,气管,胰腺,肝,小肠,心,肾,脑,皮肤,睾丸,脾,胸腺等组织器官中.     

肾综合征出血热尸检组织中HFRSV抗原分布的研究

应用双桥 PAP 法和 ABC 法对12例肾综合征出血热尸检组织(1962～1986年)的 HFRSV抗原检测发现病毒抗原广泛分布于各组织中,所检测过的大脑、肾、心、肺、肝、脾、胰、肾上腺等主要脏器大部分病例为明显阳性,少数病例还保存有胃、支气管、小脑、脑垂体、甲状腺、淋巴结和扁桃体,经检测部分病例也为阳性。各组织中的阳性细胞主要为小血管和毛细血管内皮细胞,肾小管上皮细胞、胰腺、脑垂体、肾上腺和甲状腺上皮细胞部分病例明显阳性,另外,各组织中病毒抗原量与病程发展(病期)有一定的关系。     

肝癌内高表达新基因的部分cDNA克隆

目的寻找人肝癌相关的基因。方法应用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交技术，对表达序列标记（ＥｘｐｒｅｓｓｅｄＳｅ－ｑｕｅｎｃｅｔａｇｓ，ＥＳＴ）基因克隆进行筛选，以得到的基因片段为探针，筛选人胎肝ｃＤＮＡ文库。结果得到一个在肝癌内高表达的ＥＳＴ基因片段。进一步筛选人胎肝ｃＤＮＡ文库，得到一命名为ＦＬ６的ｃＤ－ＮＡ克隆，核苷酸序列测定表明，ＦＬ６长度为１４６４个碱基，检索最新版本ＧｅｎｅＤａｔａｂａｓｅｓ（ＥＭＢＬ９６．６），未发现同源基因。实验结果还显示该基因在胎儿各组织内有不同的表达特性。结论该基因可能与细胞的增殖、癌变过程相关。     

Ultrastructural study on extrahepatic infection of duck hepatitis B virus in ducks.

Kidney and pancreas tissues from congenitally infected Ma ducks with duck hepatitis B virus (DHBV) were examined by immunohistochemical staining technique and electron microscopy. The immunostaining showed that DHBV antigen was localized in the cytoplasm of tubular epithelial cells of kidney and acinar cells of pancreas of infected ducks. Under electron microscope, we found that complete and incomplete DHBV particles existed in the dilated cisternae of rough endoplasmic reticulum of both the cells. The size of complete and incomplete virus particles was nearly uniform in both the cells, 50-65 nm and 40-50 nm in diameter respectively. Therefore, extrahepatic infection and replication of DHBV were directly demonstrated ultrastructurally.