急性胎兔宫内窘迫模型脑组织病理及NMDAr1表达实验研究

目的：建立孕兔宫内窘迫模型，观察胎兔脑组织病理及NMDAr1表达情况。方法新西兰大白兔孕兔30只，随机分为缺血模型组（n=9）、假手术组（n=9）和空白组（n=12）。缺血模型组孕兔行开腹子宫动脉结扎术，建立急性胎兔宫内窘迫模型；假手术组行开腹术，不结扎子宫动脉；空白组不行任何手术处理。除空白组胎兔直接断头取脑外，其他组胎兔都在术后6h断头取脑，观察各组胎兔脑组织病理形态及NMDAr1表达情况。结果与空白组及假手术组比较，缺血模型组胎兔脑组织NMDAr1表达呈强阳性，病理形态学为明显的脑组织细胞损伤表现；空白组和假手术组胎兔脑组织NMDAr1表达基本相同，均为少量表达，病理形态学均无脑组织细胞损伤表现。结论急性宫内窘迫可致胎兔脑组织NMDAr1表达增加，可能是造成其脑组织病理损伤的重要机制。     

急性胎兔宫内窘迫模型脑NO、iNOS和T—SOD变化实验研究

目的建立孕兔宫内窘迫模型,探讨胎兔脑一氧化氮（NO）、诱生型一氧化氮合酶（iNOS）和总超氧化物歧化酶口一SOD）含量变化规律。方法新西兰大白孕兔30只,随机分为空白对照组（n=12）、假手术组（n=9）和宫内缺血缺氧组（n=9）,宫内缺血缺氧组建立孕兔开腹子宫动脉结扎胎兔宫内窘迫缺血缺氧模型,分别开腹取各组胎兔脑匀浆液测定NO、iNOS和T—SOD含量,进行统计学比较。结果与空白对照组比较,假手术组和宫内缺血缺氧组NO、iNOS的含量显著升高（P〈0．01）,T—SOD的含量明显降低Ⅱ）〈0．01）,差异具有统计学意义。与假手术组相比,宫内缺血缺氧组NO、iNOS显著升高U）〈O．01）,差异具有统计学意义;T—SOD降低不显著（P=0．399）。结论通过检测孕兔宫内窘迫模型NO、iNOS和T—SOD显示,胎兔缺氧应激反应强烈,手术操作及子宫动脉结扎对脑组织内自由基含量影响显著。     

孕酮干预对缺氧缺血性脑损伤新生鼠脑组织胶质纤维酸性蛋白表达的影响

目的:观察胶质纤维酸性蛋白(GFAP)在缺氧缺血性脑损伤新生鼠脑组织中的表达及孕酮对其影响,从分子水平探讨孕酮对新生鼠缺氧缺血性脑病星形胶质细胞的保护机制。方法:24只新生Wistar大鼠随机均分成3组,假手术组、缺氧缺血组和药物预防组动物,建立缺氧缺血脑病动物模型。假手术组仅分离左侧颈总动脉,不结扎,亦不做缺氧处理。药物预防组动物于建立模型前30min按8mg/kg腹腔注射0.5g/L的孕酮溶液,24h后动物被全部处死,采用免疫组化和RT-PCR方法检测各组大鼠脑组织中GFAP表达的变化。结果:各组大鼠星形胶质细胞中都有GFAP表达,缺氧缺血组的GFAP阳性细胞数和GFAPmRNA的表达水平明显高于假手术组(均P<0.05),药物预防组的GFAP阳性细胞数和GFAPmRNA的表达明显低于缺氧缺血组(均P<0.01)。结论:缺氧缺血性脑损伤可引起新生鼠脑组织GFAP大量表达,孕酮可抑制缺氧缺血后脑组织星形胶质细胞过度表达,发挥抗缺氧缺血性脑损伤的作用。     

丹参素对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤脑组织SOD、MDA的影响

目的 观察丹参素对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤脑组织SOD、MDA的影响及探讨丹参素的脑损伤保护作用机理.方法 7日龄SD新生大鼠78只,随机分成5组:假手术组(n =6);缺氧缺血模型组(n =18);丹参素低剂量组(n =18);丹参素中剂量组(n =18);丹参素高剂量组(n =18).通过结扎左颈总动脉和吸入8%低氧混合气制备缺氧缺血性脑损伤(HIBD)动物模型.假手术组不进行缺氧缺血处理.丹参素各治疗组按低、中、高剂量分别于造模后0、24 h两个时点按15 mg/kg、30 mg/kg、60 mg/kg腹腔注射用生理盐水稀释至0.5 ml的丹参素注射液.缺氧缺血模型组及假手术组于相应时点腹腔注射生理盐水0.5 ml.假手术组于缺氧缺血后6 h,HIBD组与各丹参素组于缺氧缺血后6 h、24 h、48 h断头取脑,测定脑组织匀浆SOD、MDA.结果 与假手术组比较,缺氧缺血模型组新生大鼠大脑中MDA水平升高,SOD活性降低;应用丹参素治疗后MDA水平回降,SOD活性回升,且呈剂量效应.差异有统计学意义(P<0.05).结论 丹参素有减轻新生大鼠缺血再灌注时氧自由基引起的氧化损伤作用,从而发挥脑保护作用.     

三磷酸腺苷二钠氯化镁对宫内窘迫胎鼠脑保护作用的研究

目的 研究三磷酸腺苷二钠氯化镁对宫内窘迫胎鼠脑组织自由基的影响和病理组织学变化,探讨三磷酸腺苷二钠氯化镁对宫内窘迫胎鼠脑组织的保护作用.方法 成年雌性Sprague-Dawley大鼠15只,孕鼠随机分为 Sham组、I/R组和T/M组三组,每组各5只.于妊娠第19天以3.5%水合氯醛腹腔注射麻醉,通过无损伤动脉钳钳夹双侧子宫、卵巢血管20 min建立缺血缺氧宫内窘迫模型.T/M组缺血前30 min,45 mg· kg-1三磷酸腺苷二钠氯化镁腹腔注射,Sham组和I/R组于相同时间给予同等体积的0.9%氯化钠注射液.Sham组只进行开关腹手术,不钳夹子宫卵巢动脉.各组孕鼠缺氧20 min后拆除动脉夹以恢复血供,并逐层关腹.各组均于手术后24 h取标本.计算胎鼠死亡率.每组随机抽取10只胎鼠取脑组织制备标本,检测组织丙二醛水平;行HE染色高倍镜下观察胎鼠脑组织病理改变.结果 胎鼠死亡率:I/R组胎鼠死亡率明显高于Sham组(P<0.05);T/M治疗组胎鼠死亡率较I/R组显著降低(P<0.05).MDA含量:与Sham组比较,I/R组胎鼠脑组织MDA含量显著增高(P<0.05),但T/M组胎鼠脑组织MDA活性显著降低(P<0.05).结论 三磷酸腺苷二钠氯化镁能够减轻对宫内窘迫胎鼠脑组织细胞损伤,对缺血缺氧脑细胞有保护作用.     

神经节苷脂GM1对新生鼠缺血缺氧后NOS表达的影响

目的：探讨神经节苷酯GM1对新生儿缺氧缺血性脑病的保护作用及可能机理。方法：通过建立新生鼠缺氧缺血性脑病动物模型，观察缺血缺氧后不同时期脑组织的病理变化和一氧化氮合酶（NOS）表达，以及GM1对其影响。结果：GM1给药组脑组织损伤明显减轻，缺血缺氧可诱导脑组织中NOS表达水平上调，GM1部分地抑制了缺血缺氧后NOS的表达水平。结论：GM1对新生儿缺氧缺血性脑损伤具有一定程度的保护作用，其作用可能是通过部分抑制NOS的表达。     

艾灸对缺氧缺血性脑病新生小鼠脑组织炎症细胞浸润和 CD11b表达的影响

目的 观察艾灸对缺氧缺血性脑病新生小鼠脑组织炎症细胞浸润和CD11b表达的影响。方法 出生7 d 新生ICR小鼠,随机分为3组：假手术组（n=20）、模型组（n=24）和艾灸组（n=20）。假手术组只做颈部手术,不闭合颈 总动脉,不缺氧;模型组行颈总动脉闭合术,并给予缺氧处理;艾灸组在模型组的基础上给予艾灸治疗,每日1次,35 min/次。采用TTC染色检测小鼠脑梗死的面积;HE染色观察小鼠脑组织形态结构和炎症细胞浸润;组织免疫荧光染 色检测脑组织CD11b表达。结果 与假手术组相比,模型组小鼠的脑梗死面积增大,患侧脑组织大量细胞坏死脱 落,并伴有大量炎症细胞浸润,CD11b阳性细胞数明显增多;与模型组相比,艾灸组小鼠的脑梗死面积缩小,患侧脑组 织细胞排列较致密、整齐,炎症细胞较少,CD11b阳性细胞数明显减少。结论 艾灸具有减轻新生小鼠缺氧缺血性脑 损伤的作用,这可能与其减少脑组织小胶质细胞浸润、减轻炎症反应有关。     

丹参素对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤组织iNOS、NOS、NO的影响

目的:观察丹参素对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤组织iNOS、NOS、NO的影响并探讨其脑保护作用机制.方法:将78只SD新生大鼠随机分成假手术组(n=6),缺氧缺血模型组(n=18),丹参素低剂量组(n=18),丹参素中剂量组(n=18),丹参素高剂量组(n=18).通过结扎左颈总动脉和吸入8%低氧混合气制备缺氧缺血性脑损伤(HIBD)动物模型.假手术组不进行缺氧缺血处理.丹参素各治疗组按低、中、高剂量分别于造模后0、24 h两个时点按15,30,60 mg·kg-1腹腔注射用生理盐水稀释至0.5 mL的丹参素注射液.缺氧缺血模型组及假手术组于相应时点腹腔注射生理盐水0.5 mL.假手术组于缺氧缺血后6 h,缺氧缺血模型组与各丹参素治疗组于缺氧缺血后6,24,48 h断头取脑,测定脑组织匀浆iNOS、NOS、NO浓度.结果:与假手术组比较,缺氧缺血模型组新生大鼠大脑中iNOS在缺氧缺血后6 h时变化不大;而在缺氧缺血24 h后升高,应用丹参素治疗后回降,呈一定的量效关系,差异有统计学意义(P＜0.05);NOS及NO在缺氧缺血后6,24,48 h均升高,应用丹参素治疗后回降,且呈一定的量效关系,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:丹参素能抑制nNOS、iNOS的产生,从而减少过高的NO的产生,而发挥对新生鼠HIBD时脑的保护作用.     

褪黑素对宫内缺氧胎鼠脑组织的自由基和细胞凋亡的影响

目的研究褪黑素(MT)对宫内缺氧胎鼠脑组织自由基和细胞凋亡的影响。方法妊娠19 d SD大鼠随机分为假手术(S)组、缺血-再灌注(I-R)组和MT处理组。建立大鼠30 min I-R宫内窘迫模型。MT组孕鼠在阻断血供前1 h腹腔注射MT(10 mg/kg)。分别于再灌注1、6和24 h剖宫取胎鼠,测定胎鼠脑组织的超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)和丙二醛(MDA)水平,HE染色观察脑组织病理变化,TUNEL法测定脑细胞凋亡指数。结果 I-R组较S组胎鼠脑组织中SOD、GSH-PX活力下降,MDA含量上升,大脑皮质神经细胞凋亡指数增加;同时随着再灌注时间的延长,上述改变亦趋于明显。与I-R组比较,MT组能提高胎鼠脑组织中SOD、GSH-PX活力,降低MDA含量,减少脑皮质神经细胞的凋亡指数。结论 MT有较强的抗氧化和自由基清除作用,减轻胎鼠脑组织宫内缺氧性损伤。     

APP17肽对缺氧缺血性脑病新生鼠皮质区GAP-43表达的影响

目的：观察APP（β—amyloid precursop protein,APP）17肽（APP695—319—335）肽段对缺氧缺血性脑病新生鼠皮质区GAP-43表达的影响。方法：将生后7d的新生大鼠随机分为假手术组、脑病组和APP17肽治疗组。采用一侧颈动脉结扎,然后放在缺氧仓内2h的方法制备缺氧缺血性脑病模型。应用免疫组化方法观察各组大鼠不同时期脑皮质GAP-43表达的变化。结果：免疫组化结果显示,脑病组较假手术组小鼠皮质区GAP-43免疫阳性细胞增加（P〈0．01）．治疗组较脑病组GAP-43免疫阳性细胞明显增多（P〈0．01）。结论：缺氧缺血性脑损伤后,皮质区GAP-43表达和合成增加,GAP-43的表达增加可能与神经元再生和轴突重塑有关,是脑缺氧缺血后神经细胞内源性代偿机制之一。APP17肽可能通过调节GAP-43的表达来增加神经细胞之间的突触联系,促进神经的生长起到营养神经的作用,从而改善缺氧缺血性脑病小鼠的预后。     

火炮打击兔应激防护模型肠组织病理及NMDAr1表达的形态学研究

目的探讨实弹演习火炮打击后,不同位置掩体保护下兔肠组织病理及NMDAr1表达的变化。方法闽南山地团进攻演习,按照模拟战地士兵隐蔽情况,将30只实验兔随机分为远离火炮打击的空白对照组及火炮打击区域的反角隐蔽组和迎面隐蔽组。火炮打击6h后,各组存活兔取肠组织,观察其病理损伤形态学及NMDAr1表达的变化。结果与空白对照组比较．反角隐蔽组和迎面隐蔽组NMDAr1表达强阳性,肠组织结构层紊乱,间质出血。炎症细胞浸润;迎面隐蔽组肠组织结构损伤程度及NMDAr1免疫反应强度均高于反角隐蔽组。结论火炮打击后兔肠组织应激损伤反应强烈,反角掩体保护能够减轻肠组织损伤,NMDAr1参与肠组织损伤病理过程。     

灯盏花素对大鼠脑缺血再灌注损伤后SOD和细胞凋亡的影响

目的:研究灯盏花素对大鼠脑缺血再灌注(I-R)损伤后超氧化物歧化酶(SOD)和细胞凋亡的影响。方法:实验分为5组,即假手术、I-R、MgSO4及灯盏花素高、低剂量组。采用线栓法制备大鼠脑I-R损伤模型,观察大鼠脑组织和血清SOD活性,以及脑细胞凋亡情况。结果:与假手术组比较,I-R组大鼠脑组织和血清中SOD活性显著降低(P<0.01),脑细胞凋亡率显著升高(P<0.01);与I-R组比较,灯盏花素高、低剂量组大鼠脑组织和血清中SOD活性显著增强(P<0.01),脑细胞凋亡率显著降低(P<0.01)。结论:灯盏花素对脑I-R损伤模型大鼠有保护作用,其机制可能与增强SOD活性和减少细胞凋亡等作用有关。     

奥拉西坦/丁基苯酞对新生大鼠缺氧缺血性脑病的相关研究

目的：研究联合应用奥拉西坦（ORS）和丁基苯酞（NBP）在新生大鼠缺氧缺血性脑病中的早期治疗作用。方法：出生7d大鼠共分为4组，每组25只。（1）空白组：分离左侧颈总动脉后在动脉下置线，不结扎亦不低氧。（2）模型组：制备大鼠缺血缺氧性脑病模型立即腹腔注射生理盐水0．1mL／只。（3）对照组：建模后立即腹腔注射ORS100mg／kg。（4）实验组：造模成功后立即腹腔注射0RS100mg／kg，30min后腹腔注射丁基苯酞10mg／kg。所有动物于注射药物后12h、24h、3d、7d后断头处死取大脑组织，并对脑组织中含水量、SOD含量进行检测，通过免疫组化及westernblot方法检测水通道蛋白-4（AQP-4）和环磷酸腺苷反应元件结合蛋白（CREB）的变化情况。结果：与模型组比较，实验组脑组织含水量明显低于时照组，但SOD结果显示高于对照组（P〈0．05）；通过免疫组化及westernblot分析与模型组比较，可见AQP-4表达在对照组和实验组均有降低，但实验组低于对照组接近空白组，CREB蛋白在实验组中呈高表达接近空白组（P〈0．05）。结论：大脑缺氧缺血后应用ORS／NBP可上调CREB蛋白并下调AQP-4，时新生大鼠缺氧缺血性脑病具有早期治疗作用。     

DADLE对大鼠急性全脑缺血再灌注损伤脑组织ERK信号转导通路影响的研究

目的探讨DADLE对急性全脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织中ERK信号转导通路的影响及其与脑保护作用的关系。方法将健康雌性SD大鼠50只（1800220g）随机分为5组：假手术组（Sham,n=10）：只暴露血管而不夹闭;缺血再灌注组（I／R,n=10）：采用改良的二血管阻断加低血压法建立全脑缺血再灌注模型,缺血15min后再灌注120min;DADLE处理组分为DADLE2mg／kg组（A,n=10）、DADLE3mg／kg组（B,n=10）和DADLE5mg／kg组（C,n=10）：在FR组的基础上于再灌注前经颈外静脉注射DADLE。HE染色观察各组海马CAl区神经元病理变化情况,westernblot测其脑组织内非磷酸化ERK与磷酸化ERK（P-ERK）的表达状况。结果Sham组ERK与P-ERK蛋白表达水平显著低于其他各组（P〈0．05）;DADLE处理组与I／R组相比,ERK、P-ERK蛋白的表达水平上调（P〈0．05）,其中B组、C组ERK与P-ERK蛋白表达水平显著高于A组（P〈0．05）,而B组、C组之间ERK、P-ERK表达则无显著性差异（P〉0．05）。结论在急性大鼠全脑缺血再灌注损伤中,ERK信号转导通路的活性明显上调,DADLE可以通过增加ERK的活化而达到降低神经元细胞的损伤,发挥脑保护的作用;同时,该作用呈剂量相关性和有“天花板效应”。     

黄体酮对颅脑损伤大鼠脑组织含水量及水通道蛋白-4表达的影响

目的:探讨黄体酮对脑外伤模型大鼠脑组织含水量、水通道蛋白-4(AQP-4)表达的影响机制.方法:SD雄性大鼠165只,随机分为假手术组(55只)、模型组(55只)和黄体酮组(55只),用Freeney法造成大鼠脑挫裂伤模型,干湿重法测定脑组织含水量,并采用免疫组化方法检测脑组织AQP-4蛋白的表达.结果:模型组大鼠伤后各时间点伤侧脑组织含水量、伤灶周围AQP-4蛋白表达水平均明显高于假手术组(均P<0.05);黄体酮治疗组各时间点脑组织含水量、AQP-4表达水平均较模型组降低(P<0.05).结论:黄体酮可以明显减轻创伤后脑水肿,其作用可能与抑制AQP-4在损伤脑组织中的表达有关.     

DADLE对大鼠急性全脑缺血再灌注Bax、Bel-2蛋白表达的影响

目的观察急性全脑缺血再灌注大鼠脑组织Bax、Bcl一2蛋白表达情况,研究8阿片受体激动剂DADLE对急性全脑缺血再灌注脑组织凋亡途径的影响以及其与脑保护作用的关系。方法将健康雌性sD大鼠50只（180—220g）随机分为5组：假手术组（Sham组,n=10）：只暴露血管而不夹闭;缺血再灌注组（I／R组,n=lO）：采用改良的二血管阻断加低血压法建立全脑缺血再灌注模型,缺血15min后给予再灌注;DADLE处理组分为DADLE2mg／kg组（A组,n=10）、DADLE3mg／kg组（B组,n=10）、DADLE5mg／kg组fc组,n=10）：在I／R组的基础上于再灌注前经颈外静脉注射DADLE。手术结束后,采用免疫组化法检测脑组织Bax、Bcl一2蛋白表达情况。结果Sham组Bax与Bcl-2阳性细胞数显著少于其他各组（P〈0．05）,分别为（20．38±2．84）与（9．624-2．10）;I／R组Bax与Bcl-2阳性细胞数为（52．73±6．08）与（19．49±2．35）;而DADLE处理组中Bax阳性细胞数分别为：A组（43．71±3．85）、B组（37．92±4．08）、C组（36．20±3．94）;Bcl-2阳性细胞数分别为：A组（28．744-2．41）、B组（33．584-2．16）、C组（34．96士1．98）。Bcl-2／Bax的比值,Sham组显著高于I／R组[（49134-3．4）％VS．（35．84-3．2%,P〈0．05];DADLE处理组中,A组为（66．4±6．8）％、B组为（85．7±7．3炀、C组为（92．6±6．9）％。结论在大鼠急性全脑缺血再灌注损伤中,Bax与Bel-2蛋白的表达均明显上调,而DADLE可以通过影响Bax与Bel一2的表达程度减少细胞凋亡,发挥脑保护的作用;由Bel-2／Bax的比值可发现,该作用与使用剂量呈现“S型剂量效应曲线”。     

地塞米松联合过氧化碳酰胺治疗第二产程胎儿宫内窘迫32例

目的探讨地塞米松联合过氧化碳酰胺治疗第二产程胎儿宫内窘迫的临床疗效。方法将2010年5月至2012年5月医院第二产程中胎儿宫内窘迫孕妇64例随机分为两组,各32例。研究组采用地塞米松联合过氧化碳酰胺治疗,对照组仅采用鼻吸氧联合常规治疗(左侧卧位、纠正酸中毒等)。结果治疗后胎心率恢复正常研究组30例(93.75%),对照组18例(56.25%),研究组明显优于对照组(χ2=12.00,P<0.05)。研究组患者中行剖宫产14例(43.75%),对照组患者中行剖宫产23例(71.88%),研究组的剖宫产率明显低于对照组(χ2=5.19,P<0.05)。新生儿1 min Apgar评分不低于8分者,研究组明显多于对照组(χ2=4.95,P<0.05)。1 min Apgar平均评分研究组为(9.05±1.25)分,明显高于对照组的(6.20±2.10)分(χ2=6.11,P<0.05)。研究组羊水性状与对照组比较有明显差异(χ2=3.95,4.11,P<0.05)。结论地塞米松联合过氧化碳酰胺松是治疗第二产程胎儿宫内窘迫是一种有效的方法,可有效改善宫内窘迫胎儿的缺氧状态,降剖宫产率,减少新生儿窒息率,值得临床推广。