p53和bcl-2表达与BT325细胞辐射性凋亡的关系

目的探讨癌基因表达的变化与辐射诱导肿瘤细胞凋亡的关系。方法采用免疫组化技术检测人多形性胶质母细胞瘤细胞系，经Ｘ射线处理前后ｐ５３、ｂｃｌ－２基因表达的变化；原位杂交方法检测ｐ５３基因在ｍＲＮＡ水平表达的变化。结果①凋亡组内ｐ５３蛋白表达率明显高于对照组，ｂｃｌ－２表达显著减弱，ｐ５３与ｂｃｌ－２蛋白表达呈显著性负相关。②凋亡组内ｐ５３在ｍＲＮＡ水平表达量明显高于对照组，ｐ５３基因在蛋白水平与ｍＲＮＡ水平表达呈显著性正相关。结论ｐ５３和ｂｃｌ－２基因在Ｘ射线诱导的细胞凋亡过程中具有重要作用     

bcl-2反义寡核苷酸对HL-60细胞作用的研究

探讨ｂｃｌ－２反义寡核苷酸对ＨＬ－６０细胞的作用,将人工合成的ｂｃｌ－２反义寡核苷酸片段与ＨＬ－６０细胞共培养,在作用的第０、１、３、５天通过细胞计数和锥虫蓝染色法检测细胞的生长、存活情况,并通过免疫组化法（ＡＰＡＡＰ法）检测细胞内ｂｃｌ－２蛋白表达水平的变化,通过流式细胞仪分析细胞凋亡的情况。结果表明,ｂｃｌ－２反义寡核苷酸可显著地抑制ＨＬ－６０细胞增殖,而且可以调ＨＬ－６０细胞内ｂｃｌ－２蛋白     

bcl—2高表达细胞株的构建及其抗凋亡特性的观察

目的：建立ｂｃｌ－２高表达的肿瘤细胞株，观察其抗凋亡特性。方法：利用基因转染技术，将人的ｂｃｌ－２基因ｃＤＮＡ克隆于逆转录病毒载体ｐＬＸＳＮ，通过ＰＡ３１７细胞包装成病毒后感染宫颈癌ＨｅＬａ细胞。结果和结论：经ＰＣＲ及Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹证明转染成功，得到ｂｃｌ－２稳定高表达株Ｈｂｃ１７。用顺铂诱导凋亡，Ｈｂｃ１７比对照细胞株Ｈ１具有更明显的抗凋亡能力。为进一步研究细胞凋亡的机理奠定了基础。     

不同持续高＋Gz作用下大鼠脑细胞凋亡及bcl,p53的表达

目的 了解不同＋Ｇｚ作用下大鼠脑细胞凋亡的发生和凋亡相关基因ｂｃｌ－２、ｐ５３基因表达的变化,探讨细胞凋亡在反复高＋Ｇｚ暴露所致脑损伤中的病理作用。方法４８只ＳＤ大鼠随机分成对照组、＋７Ｇｚ暴露组、＋１０Ｇｚ暴露组和＋１４Ｇｚ暴露组,各组分别于暴露后３０ｍｉｎ、６ｈ、２４ｈ和４８ｈ处死大鼠取脑。用原位末端标记法（ＴＵＮＥＬ）检测大鼠脑细胞凋亡及用半定量聚合酶链反应检测凋亡相关基因ｂｃｌ－２和ｐ５３ｍＲＮＡ表达的变化。结果 ＋１０Ｇｚ暴露组和＋１４Ｇｚ暴露组在６ｈ和２４ｈ时在大脑皮层、海马ＣＡ１区和纹状体可见部分神经细胞发生凋亡和ｂｃｌ－２和ｐ５３ｍＲＮＡ表达变化。结论 反复高＋Ｇｚ暴露可引起大鼠脑内部分神经细胞凋亡及ｂｃｌ－２和ｐ５３的表达变化,细胞凋亡可能是反复高＋Ｇｚ暴露致脑损伤的机理之一。     

低剂量辐射对细胞凋亡相关基因蛋白表达的影响

目的研究低剂量辐射对细胞凋亡相关基因蛋白ｐ５３、ｂｃｌ－２和ｂａｘ表达的影响，以揭示低剂量辐射免疫兴奋效应以及辐射诱导细胞凋亡“Ｊ”型曲线的分子机理。方法采用间接免疫荧光流式细胞术。结果７５ｍＧｙＸ射线全身照射后２４小时，ｐ５３基因蛋白产物的表达显著降低，ｂｃｌ－２基因蛋白表达呈增高趋势，ｂａｘ基因蛋白表达呈降低趋势，但均无统计学意义。然而，ｂｃｌ－２／ｂａｘ比值则明显增加。结论低剂量辐射全身后，ｐ５３和ｂｃｌ－２／ｂａｘ比值的变化表明：ｐ５３、ｂｃｌ－２／ｂａｘ在辐射诱导细胞凋亡的调控中起着重要作用。该结果为揭示低剂量辐射免疫兴奋效应和辐射诱导细胞凋亡“Ｊ”型曲线的分子机理提供了有意义的实验数据     

凋亡相关基因与食管鳞状细胞癌放射敏感性相关关系的研究

目的 探讨凋亡相关基因ｂｃｌ－２,ｃ－ｍｙｃ,ｐ５３与食管鳞癌放疗敏感性的关系。方法 采用免疫组化ＬＳＡＢ方法检测食管癌活检组织中ｂｃｌ－２,ｃ－ｍｙｃ,ｐ５３基因表达水平,病人接受放射治疗观察疗效,分析基因表达与放射敏感性的关系。结果 ｂｃｌ－２蛋白表达阳性者放射敏感性明显低于表达阴性者,ｐ５３蛋白表达阳性者略差于阴性者;ｃ－ｍｙｃ基因表达与放射敏感性无关。结论 ｂｃｌ－２,ｃ－ｍｙｃ,ｐ５３等凋亡相关基因表达产物的检测及综合分析有助于食管鳞癌放疗疗效的预测。     

裂变中子诱导小鼠胸腺细胞凋亡的时间效应及其分子机制 …

目的：以＾６０Ｃｏγ射线为参比射线,研究裂变中子诱导小鼠胸腺细胞凋亡的时间效应,并初步探讨其分子机制。方法：用形态学观察、ＤＮＡ电泳、流式细胞仪（ＦＣ,）分析及二苯胺（ＤＰＡ）法检测细胞凋亡;用斑点杂交方法检测ｐ５３与ｂｃｌ－２的基因表达,结果：小鼠经裂变中子２．５Ｇｈ照射后２－２４ｈ,在各时间点上均检测到胸腺细胞ＤＮＡ梯状条带,利用光镜与电镜观察到具有典型凋亡特征的胸腺细胞;以ＤＮＡ法、ＦＣＭ分     

癌基因与正常及骨关节炎中软骨细胞凋亡关系的研究

用免疫组化及ＤＮＡ缺口末端标记法观察了正常及骨关节炎软骨组织中ｃ－ｍｙｃ，ｂｃｌ－２的表达以及软骨细胞的凋亡情况。发现在正常软骨组织的表层有软骨细胞的凋亡及＆ｕ，ｃ－ｍｙｃ的表达，在移行层有ｂｃｌ－２的表达，在柱状层下层有ｃ、ｎａｙｃ的表达及ＤＮＡ缺口末端标记的阳性信号；在骨关节炎的软骨组织中发现软骨细胞凋亡及ｆａｓ表达的减少或消失，ｂｃｌ－２的表达增强。结果表明：在骨关节炎软骨组织中软骨细胞凋亡的减少可能是软骨细胞对软骨组织损伤的反应，这种反应可以延长软骨细胞的存活时间，增强软骨细胞的修复能力。     

As2O3诱导HL—60,K562及NB4细胞的凋亡

目的：研究三氧化二砷（Ａｓ２Ｏ３）对慢性粒细胞Ｋ５６２（ＣＭＬ）,急性粒细胞白血病细胞株ＨＬ－６０（ＡＭＬ Ｍ２）的作用并与细胞株ＮＢ４（ＡＰＬ Ｍ３）作比较。方法：采用形态学和流式细胞术观察不同浓度Ａｓ２Ｏ３对ＨＬ－６０,Ｋ５６２及ＮＢ４细胞的作用。结果：Ａｓ２Ｏ３不仅能诱导ＮＢ４的凋亡,;提高其浓度至２．７μＭ和８．１μＭ,也能诱导Ｋ５６２,ＨＬ－６０的凋亡。Ａｓ２Ｏ３不能诱导三种细胞分化。结论：Ａｓ２Ｏ３对细胞诱导的凋亡是非选择性的且不能诱导分化。     

反义核酸对辐射所致白血病的逆转作用

目的探讨ｃ－ｍｙｂ基因反义核酸对辐射所致白血病的逆转作用。方法以脂质体为载体,用人工合成的ｃ－ｍｙｂ基因反义寡核苷酸（ＡＳＯＤＮ）及无关寡核苷酸（Ｎ－ＡＳＯＤＮ）作用于人急性红白血病Ｋ５６２细胞系,以观察Ｋ５６２细胞的增殖、集落形成、ＤＮＡ合成及ｃ－ｍｙｂ癌基因的表达。结果ＡＳＯＤＮ可抑制Ｋ５６２细胞的增殖［作用２４小时,２０μｍｏｌ／Ｌ的ＡＳＯＤＮ的抑制率为（６６．８１±７．５４）％,Ｐ＜０．０１］、集落形成、ＤＮＡ合成［２０μｍｏｌ／Ｌ的ＡＳＯＤＮ作用１２小时、２４小时、４８小时时抑制率分别为（４８．９３±６．７４）％、（６９．５５±１．７８）％和（５７．６２±５．５０）％,Ｐ＜０．０１］及ｃ－ｍｙｂ癌基因的表达;而对照组对Ｋ５６２细胞则无明显影响。结论ｃ－ｍｙｂ基因ＡＳＯＤＮ可逆转Ｋ５６２细胞恶性表型,反义技术对白血病的防治指出了新方向。