冠心病血瘀证代谢组学研究进展＊

冠心病血瘀证的生物学基础研究是证候客观化研究的热点问题之一，代谢组学技术通过对机体代谢组的识别和量化研究，系统探索机体正常生理下或病理刺激下的动态变化规律，有助于揭示病证结合的生物学基础。本文综述了冠心病代谢组学研究概况，分析了冠心病血瘀证血液与尿液差异代谢产物谱，总结了冠心病血瘀证潜在的诊断代谢标志物，探讨了活血化瘀中药干预冠心病血瘀证的作用机制，以期为未来冠心病血瘀证的生物学基础研究与药物研发提供新的启发。     

炎症介质:探讨血瘀证生物学基础新思路

阐明血瘀证的生物学基础是中医药现代化研究亟需解决的关键问题之一.传统的临床生化指标和诊断量表难以有效辨识不同证型血瘀证,文章拟提出血瘀证生物学基础的新方法.在前期动物模型研究与代谢组学研究基础上,发现血瘀证模型动物的炎症介质呈现明显的特异性表达,提出建立血瘀证的炎症介质特征谱,从炎症介质的整体性表征这一全新角度研究血瘀...     

血瘀证血小板改变及中医药作用研究进展

中医血瘀证是指体内血液停滞或血运不畅,阻滞于经脉及脏腑内,以疼痛、肿块、出血、舌紫、脉涩等为主要表现的证候。心脑血管疾病是严重危害我国人民健康的重大慢性疾病,冠心病和脑卒中大部分为血瘀证。血小板被认为是参与血栓形成的必要因素之一,聚焦中医血瘀证的范畴,相关的心脑血管疾病的发生也与之息息相关,临床和实验室针对血小板活化聚集等功能的研究也被越来越广泛的重视,其目的在于治疗和预防中医血瘀证。该文在中医血瘀证的范围内,收集并分析了目前关于血瘀证血小板功能异常的研究、血瘀证生物学基础的研究以及活血化瘀方药对血瘀证血小板的作用等内容,旨为血瘀证血小板机制研究及其中医药防治通路靶点研究提供参考。     

基于iTRAQ技术的慢性心力衰竭气虚血瘀证及气阴两虚证组差异蛋白质组学研究

目的:寻找慢性心力衰竭(CHF)(Chronic Heart Failure,CHF)气虚血瘀证及气阴两虚证的相关蛋白质组学特征,探讨证候发生发展机制的可能生物学通路。方法:研究设计分为CHF气虚血瘀证、气阴两虚证、健康对照组,利用i TRAQ标记定量结合串联质谱技术分析CHF气虚血瘀证及气阴两虚证的相关表达差异蛋白质,为蛋白质组学层面的疾病与证候生物学基础提供实验依据,可以在一定层面上揭示证的内涵。结果:与健康对照组比较,在CHF气虚血瘀证组表达差异蛋白质有16个,其中载脂蛋白E、半乳糖凝集素-3结合蛋白等11个蛋白质表达上调,维生素D结合蛋白、胰蛋白酶抑制剂等5个蛋白质表达下调;与健康对照组比较,在CHF气阴两虚证组表达差异的蛋白质有15个,其中补体9、间-α-胰蛋白酶抑制剂家族重链相关蛋白等10个蛋白质表达上调,前血清淀粉样蛋白P、维生素D结合蛋白等5个蛋白质表达下调。结论:蛋白质组检测结果能够反映CHF气虚血瘀证及气阴两虚证的生物学基础,从而能客观的评价证候特征,为病证结合的研究开拓了新的视野。     

高血压病气虚血瘀证和肝阳上亢证比较蛋白质组学初步研究

目的:揭示高血压病气虚血瘀证和肝阳上亢证"同病异证"的现代生物学基础。方法:建立高血压病气虚血瘀证和肝阳上亢证细胞模型,利用双向凝胶电泳(2-DE)技术筛选差异表达的蛋白点。结果:高血压病气虚血瘀证与肝阳上亢证比较,差异蛋白有27个,其中,有11个蛋白上调,16个蛋白质下调。结论:基于双向电泳技术的蛋白质组学方法可以用于中医学证侯研究,27个差异蛋白点可能是高血压病气虚血瘀证和肝阳上亢证同病异证重要分子基础。     

136例急性脑梗死血瘀证与Hs-CRP血脂四项的相关性研究

目的:探讨急性脑梗死患者血清HS-CRP、TC、TG、HDL、LDL变化与血瘀证的相关性。方法:对来源于中国人民解放军第306医院的136例脑梗死患者进行中医证候要素评分及血清HS-CRP、血脂四项测定。结果:血清HS-CRP、TC、TG、HDL、LDL比较,血瘀证组与非血瘀证组均无显著差异(P>0.05)。脑梗死血瘀证与血清HS-CRP、TC、TG、HDL、LDL无明显相关(P>0.05)。结论:急性脑梗死血瘀证与Hs-CRP、血脂四项无明显相关,本研究对于从细胞层面研究血瘀证的生物学基础有着重要意义。     

血瘀证分子调控网络研究历程及前瞻

梳理血瘀证科学研究文献,对血瘀证分子调控网络研究历程及前瞻进行简要述评。血瘀证本质研究最早由陈可冀、王阶等首次提出,随后历经30余年,研究逐渐深入。血瘀证研究历程主要包括血瘀证诊断标准的制定,血瘀证动物模型的建立,家系、双生子与临床流行病学相结合的血瘀证研究,四大组学与血瘀证分子调控网络研究,以及信号转导网络与血瘀证研究等。随着新一代高通量测序技术在基础研究、临床诊断和药物研发等领域的运用,可看到人类疾病全基因网络研究的希望,如代谢性疾病、癌症等。这些重大研究成果,为血瘀证深层次本质研究提供了新思路。     

论血瘀证与络病的关系

血瘀证与活血化瘀研究是当今中医学界的研究重点,许多临床中的疑难杂症、久病、重病都与血瘀证密切相关,治疗中亦常从血瘀证的角度去制定治则方药.而无论从血瘀证的病因病机,还是从血瘀证的病理生理基础方面去研究,血瘀证都与络脉系统及络病密不可分,因此络病理论亦是血瘀证研究的基础.     

血瘀证的生物学基础研究

血瘀证通常是指因气虚、气滞、寒凝、血热、痰阻和外伤等原因，导致血行不畅、壅阻血脉或出血未能及时消散而引起的病证，临床上以舌暗、有瘀点或瘀斑、舌下静脉曲张、唇痿舌青、口燥但欲漱水不欲咽、疼痛夜甚或痛处不移、脉微大来迟或涩等为表现特征。中医学认识体内“血瘀”并作为致病原因和基本证候之一已有两干多年的历史。近20年来，血瘀证的研究不断深入，尤其对血瘀证的生物学基础研究取得了显著的进展。本文围绕血瘀证病变中血液和血管的病理改变做一综述，希望能为进一步的血瘀证研究提供思路。     

血瘀证基础研究的若干思考

通过对目前证候相关基因研究中主要研究思路的归纳和梳理,预测和展望血瘀证基础研究的未来发展.证相关基因研究的思路主要有:1.不同证候状态下基因表达的比较研究;2.中医证型与基因多态性的相关研究;3.基因突变型与中医证型的相关性研究;4.以方测证,结合药物干预反证证本质.近50年来,血瘀证基础研究的内容涉及到血流动力学、微循环、血小板功能、凝血功能、血管内皮细胞损伤、组织氧供、炎症与结缔组织代谢研究等方面,取得了较大进展,但也存在两大困惑和误区:1.无证不血瘀、无病不血瘀的错误倾向;2.实验室指标与临床辨证相关性差.为此,血瘀证基础研究的发展在于:开展同病异证、异病同证血瘀证的比较学研究,进一步优化完善血瘀证诊断标准及建立可靠的动物模型,开展血瘀证体质、证候、疾病与基因多态性的相关研究,开展血瘀证基因组学及蛋白质组学研究.     

冠心病血瘀证转录组学研究——病证结合生物标志物研究思路与方法

中医证候的生物学基础研究是影响中医学发展与创新的重大科学问题,证候相关生物标志物及中药干预调控网络的研究对于在证候标准规范的基础上进一步提高诊断效能和临床疗效具有重要意义。因此,在前期冠心病证候标准规范研究的基础上,本项目组以冠心病心绞痛血瘀证为切入点,从分子生物水平对证候进行了深入研究。第一,通过采集累计312例患者外周血基因信息,运用差异显示法、实时定量聚合酶链式反应(Real-time polymerase chain reaction,Real-time PCR),斑点杂交法,高通量芯片,测序等方法,确立了冠心病血瘀证长链非编码核糖核酸-微小核糖核酸-信使核糖核酸(long noncoding ribonucleic acid-micro ribonucleic acid-messenger ribonucleic acid,lncRNA-miRNA-mRNA)3个层面的潜在生物标志物。第二,在前期筛选出的差异基因的基础上,运用生物信息学分析结合细胞功能学验证的方法,构建了冠心病血瘀证基因miRNAmRNA以及lncRNA-miRNA-mRNA 2个水平的调控网络。第三,基于血瘀证差异基因及调控网络,通过累计202例活血化瘀中药干预冠心病心绞痛血瘀证患者的随机对照试验,治疗前后共计400余人次的基因检测,以及活血化瘀中药处理相关细胞模型的体外实验,从基因-蛋白-功能3个层面研究中药作用机制,从分子水平揭示了活血化瘀中药干预冠心病血瘀证的基因调控网络机制。本研究将相关的分子生物学技术及生物信息学方法引入证候的生物学基础研究,建立了一套证候相关生物标志物的研究方法,为证候实质的研究提供了新思路。     

128例急性脑梗塞患者血清b-FGF变化与血淤证的相关性研究

目的 探讨急性脑梗塞患者血清b-FGF变化与血淤证的相关性.方法 对来源于中国人民解放军第306医院的128例脑梗塞患者进行中医证候要素评分及血清b-FGF测定.结果 血清b-FGF比较,血淤证组与非血瘀证组均无显著差异(P>0.05).脑梗塞血淤证与血清b-FGF无明显相关(P>0.05).结论 急性脑梗塞血淤证与b-FGF无明显相关,该研究对于从细胞层面研究血瘀证的生物学基础有着重要意义.     

基于尿液代谢组学的冠心病血瘀证模型大鼠生物学基础研究

目的 研究冠心病血瘀证模型大鼠尿液代谢组学特征,探讨其潜在的生物学基础.方法 将20只SD大鼠随机分为假手术组和冠心病血瘀证模型组.采用结扎大鼠左冠状动脉前降支方法制备冠心病血瘀证模型.利用超高效液相色谱-质谱联用技术检测假手术组和冠心病血瘀证模型组尿液样本小分子内源代谢物,进行主成分分析和正交偏最小二乘法-判别分析,...     

冠心病血瘀证基因组学研究进展＊

目的 系统综述冠心病血瘀证基因组学研究的方法和内容。方法 计算机检索Medline、Cochrane Central Register of Controlled Trials、中国知网、万方数据库，查找冠心病血瘀证基因组学的临床研究，按照制定的纳入排除标准，由2名研究人员独立筛选文献，任何分歧通过协商一致或通过第3名研究人员来解决。结果 最终纳入34项研究，其中与冠心病血瘀证密切相关的基因组学研究类型包括基因多态性、差异基因的表达、基因的甲基化修饰，涉及的生物学功能有血管内皮损伤、血液流变学改变、炎症反应与免疫调节、血管平滑肌增殖、血脂水平等，采用的技术方法有聚合酶链式反应（Polymerase chain reaction，PCR）、飞行时间质谱技术（Time-of-flight mass spectrometry，TOF-MS）、基因芯片杂交测序（Gene Chip）等。结论 基因组学研究可阐明冠心病血瘀证的生物学基础，为冠心病血瘀证的病机演变提供更好的依据，更有助于从分子水平实现个体化治疗，从而进一步提高临床疗效。     

血瘀证与NF-κB 信号通路的相关性探讨

血瘀证见于多种疾病,是一种综合性的病理状态,形成机理非常复杂。研究证明,血瘀证形成与炎症反应、免疫失调关系密切。NF-κB通过调控众多靶基因的转录表达而在免疫应答、炎症反应等许多生理学过程中发挥重要作用。血瘀证与NF-κB信号通路从理论和实验中的研究结果表明：NF-κB信号通路在血瘀证形成中扮演重要角色。血瘀证与NF-κB信号通路的相关性探讨,将进一步揭示血瘀证炎症、免疫机制的分子生物学基础,深化血瘀证形成机理的研究。     

冠心病血瘀证标准规范、生物学基础及循证评价——基于病证结合的“证候”研究思路与方法

冠心病已成为严重危害人类健康的重大疾病,属于中医学中的"胸痹""真心痛"范畴,而血瘀证为其核心病机,贯穿疾病始终。在30余年临床实践基础上,以"冠心病血瘀证"为研究对象,在"标准规范-分子机制-循证评价"方面开展全面、深入、系统研究,建立了冠心病血瘀证定量诊断标准,创新了中医证候定量化和客观化的研究方向,还从宏观表征到器官细胞分子水平揭示了冠心病血瘀证的生物学基础,将上述研究成果应用冠心病的防治中,提升了中医诊断准确率及冠心病的中医临床疗效。     

肾虚糖尿病家系中的血瘀证研究

目的:通过一个肾虚糖尿病家系,研究血瘀证候的分子生物学基础,提示利用家系和基因芯片深入研究血瘀证分子机理的可行性。方法:对一个糖尿病家系18个成员做理化测试及肾虚血瘀诊断后,精选其中3例肾虚血瘀证糖尿病患者与该家系中的2例正常人作14000点的基因芯片杂交测试。结果:获得肾虚血瘀证糖尿病家系图谱和肾虚、血瘀症状分值比较表,同时得到肾虚血瘀证糖尿病患者与正常人的差异基因446条,尤其是血栓素A合成酶1等5条基因与血瘀证的发生密切相关。结论:利用家系研究寻找宏观的证候和微观的差异基因表达具有极强的的优势,有助于探讨肾虚血瘀糖尿病证候与差异表达基因之间的关系。     

血瘀证及活血化瘀疗法客观化研究综述

血瘀证见于多种疾病,是一种综合性病理状态,形成机理非常复杂。近年关于血瘀证的基础研究取得了很大的进展,已开始从神经、内分泌、免疫调节(NEI网络)以及基因水平方面探索血瘀证的形成机理。本文从血液流变学、血管内皮损伤、微循环、基因表达研究等十个方面综述了近20年来国内外对血瘀证的客观化研究进展,以求进一步探索血瘀证的微观实质。     

双向电泳-质谱技术筛选心绞痛血瘀证相关蛋白的研究

目的 对心绞痛血瘀证患者血瘀证程度变化前后的血浆进行双向电泳图谱检测,寻找心绞痛血瘀证相关蛋白,探索心绞痛血瘀证的蛋白质组学特点.方法 采用双向凝胶电泳和基质辅助激光解析/电离-飞行时间质谱对8例心绞痛血瘀证患者血瘀证程度变化前后的血浆进行比较蛋白质组学研究,寻找心绞痛血瘀证相关蛋白.结果 初步发现了Clustenin、ApoA-I在血瘀证程度变轻后表达增加,而Fibrinogen β chain、Vitamin D-Binding Protein、Haptoglobin β chain、Albumin isofom在血瘀证程度变轻后表达降低.结论 初步发现Clusterin、ApoA-I、Fibrinogen β chain、Vitamin D-Binding Protein、Haptoglobin β chain、Albumin isoform可能与心绞痛血瘀证相关,但结果有待运用其他生物学的方法进行具体的验证并探索其机制.     

双向电泳-质谱技术筛选心绞痛血瘀证相关蛋白的研究

目的对心绞痛血瘀证患者血瘀证程度变化前后的血浆进行双向电泳图谱检测，寻找心绞痛血瘀证相关蛋白，探索心绞痛血瘀证的蛋白质组学特点。方法采用双向凝胶电泳和基质辅助激光解析／电离-飞行时间质谱对8例心绞痛血瘀证患者血瘀证程度变化前后的血浆进行比较蛋白质组学研究，寻找心绞痛血瘀证相关蛋白。结果初步发现了Clusterin、ApoA-I在血瘀证程度变轻后表达增加，而Fibrinogen β chain、Vitamin D-Binding Protein、Haptoglobin β chain、Albumin isoform在血瘀证程度变轻后表达降低。结论初步发现Clusterin、ApoA-I、Fibrinogen β chain、Vitamin D-Binding Protein、Haptoglobin β chain、Albumin isoform可能与心绞痛血瘀证相关，但结果有待运用其他生物学的方法进行具体的验证并探索其机制。