圣愈汤及其拆方对血虚模型小鼠造血生长因子IL-6和GM-CSF的影响

目的:观察圣愈汤及其拆方对γ射线照射致血虚小鼠造血系统的影响,探讨圣愈汤补血作用的机制及配伍机制。方法:采用3.5 Gy60Coγ射线全身一次照射制作小鼠血虚模型,放免法测定血液中IL-6水平,免疫细胞化学法测定骨髓细胞中GM-CSF表达,以观察比较圣愈汤及其拆方对血虚小鼠造血生长因子的影响。结果:圣愈汤及各拆方组能明显提高血液中IL-6水平(P<0.05或P<0.01),促进骨髓细胞GM-CSF蛋白表达(P<0.05或P<0.01)。结论:圣愈汤调控造血的机制,可能与促进IL-6分泌,增强GM-CS活性,促进粒系、单核巨噬细胞系和红系等血细胞的生成、成熟与释放有关。圣愈汤及各拆方药组作用环节及强度不同,各药组相互协同,符合方剂组方的基本规律。     

圣愈汤对骨髓抑制小鼠骨髓细胞周期和凋亡的影响

目的:观察圣愈汤对骨髓抑制小鼠外周血、骨髓细胞周期和凋亡的影响,并探讨其造血调控的可能机制。方法:将60只BALB/c小鼠随机分为空白组、模型组、阳性药组、圣愈汤32,16,8 g.kg-1.d-1 3个剂量组,每组各10只,除空白组外,其他5组用60Coγ照射和ip注射环磷酰胺、氯霉素制备骨髓抑制小鼠模型。造模完成24 h后,空白组和模型组小鼠ig生理盐水,圣愈汤三剂量组分别按含生药32,16,8 g.kg-1.d-1ig给药,给药体积20 mL.kg-1.d-1;阳性组ip rhG-CSF 125μg.kg-1.d-1,各组均连续给药7 d。用全自动血细胞分析仪、白细胞计数法、流式细胞术(FCM)分别检测圣愈汤对骨髓抑制小鼠外周血、骨髓有核细胞数、骨髓细胞周期和凋亡率的影响。结果:圣愈汤32,16 g.kg-1.d-1均能明显升高外周血白细胞(WBC)、红细胞(RBC)、血红蛋白(Hb)、血小板(PLT)和骨髓有核细胞(BMC)数(P<0.05或P<0.01)。模型组、圣愈汤32,16 g.kg-1.d-1组G0/G1期细胞比例分别为(70.38±1.38)%,(62.43±2.03)%,(63.85±2.90)%;S期比例分别为(22.52±1.27)%,(26.35±2.52)%,(24.80±1.48)%;G2/M期细胞比例(7.43±1.04)%,(11.37±2.18)%,(10.95±2.35)%;PI分别为(29.85±1.06)%,(37.66±2.01)%,(35.88±3.13)%;凋亡率分别为(26.88±3.58)%,(19.15±4.30)%,(21.65±4.34)%。圣愈汤32,16g.kg-1.d-1组与模型组比,上述指标有显著差异(P<0.05或P<0.01)。结论:圣愈汤能改善骨髓抑制小鼠的造血机能,其机制之一可能是通过促进骨髓造血细胞进入细胞增殖周期和抑制其凋亡。     

圣愈汤不同剂型对骨髓抑制小鼠骨髓细胞周期和凋亡影响的研究

目的:观察圣愈汤配方颗粒与煎剂对骨髓抑制小鼠造血功能的影响,比较两者的功效。方法:采用60Coγ照射和注射环磷酰胺制备骨髓抑制小鼠模型,应用血液学、流式细胞术等方法探讨圣愈汤不同剂型对骨髓抑制小鼠外周血、骨髓有核细胞数、骨髓细胞周期和凋亡率的影响。结果:圣愈汤煎剂和配方颗粒剂均能促进骨髓造血细胞从G0/G1期进入G2/M期和S期,抑制造血细胞凋亡,提高骨髓抑制小鼠外周血中的白细胞、红细胞、血红蛋白、血小板数和骨髓有核细胞数。结论:圣愈汤煎剂、配方颗粒剂均能改善骨髓抑制小鼠的造血机能,两种剂型在促进骨髓造血细胞进入细胞增殖周期和抑制骨髓造血细胞凋亡等方面无明显差异。     

补肾健脾方及其拆方对移植性原发性肝癌小鼠肿瘤生长的影响及差异研究

目的 探讨补肾健脾方及其拆方对移植性原发性肝癌小鼠肿瘤生长的影响及差异。     

逍遥散及其拆方对行为绝望模型小鼠的影响

目的观察逍遥散及其拆方的抗抑郁作用，为探讨逍遥散的组方原理提供实验依据。方法采用小鼠悬尾实验、小鼠强迫游泳实验及小鼠自主活动测定等观察逍遥散及其拆方的抗抑郁作用。结果逍遥散、单味柴胡、当归＋白芍药对以及逍遥散去归芍组均能明显缩短行为绝望模型小鼠的不动时间，并对小鼠自主活动无影响；逍遥散去柴胡组与白术＋茯苓药对未表现出减少不动时间的作用。结论逍遥散具有抗抑郁作用，其君药-柴胡在方中发挥重要作用；“抑木扶土”可能为其组方原理之一。     

半夏泻心汤及其拆方对胃腺癌SGC-7901细胞周期和凋亡的影响

目的:从细胞增殖、凋亡、细胞周期角度,研究半夏泻心汤治疗胃癌机制。方法:把半夏泻心汤拆分为苦降、辛开和补益3个组方,1×104细胞/孔接种于96孔板,药物浓度为4,2,0.5,0.125 g·L-1,MTT法检测细胞增殖;1×105/孔接种于6孔板,全方和苦降高、低浓度为0.5,0.125 g·L-1,辛开和补益高、低浓度为4,2 g·L-1,流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡。观察半夏泻心汤及其拆方对胃癌细胞SGC-7901增殖、细胞周期和凋亡的影响,并与5-氟尿嘧啶(5-Fluorouracil,5-Fu)比较。结果:半夏泻心汤全方及苦降、辛开组方能够抑制SGC-7901细胞增殖,全方IC50为1.645 g·L-1,苦降组为1.446 g·L-1,辛开组为3.867 g·L-1;它们增加SGC-7901细胞S期和G0-G1期百分比,促进细胞凋亡,高浓度强于低浓度,但补益组方对此没有作用。结论:半夏泻心汤及其拆方能够一定程度的抑制细胞增殖,以苦降组为最,补益组作用甚微,其机制可能与药物阻滞细胞至G1/S期和诱导细胞凋亡有关。     

生血增白汤对骨髓移植后小鼠骨髓细胞周期和细胞凋亡的影响

目的探讨生血增白汤对骨髓移植后小鼠骨髓中细胞周期和细胞凋亡的影响及其促进骨髓造血重建的机制。方法将实验动物随机分为5组:正常组、模型组、粒细胞-集落刺激因子组(G-CSF组)、生血组、生血+G-CSF组(联合组);建立小鼠骨髓移植模型,生血组及联合组胃饲生血增白汤浓缩煎剂。骨髓移植后第9、14、24天,采用流式细胞仪检测骨髓单核细胞凋亡率(APO)并分析细胞周期变化,进行外周血细胞和骨髓单核细胞计数,并做骨髓组织学观察。结果骨髓移植后第14天,生血组外周血细胞中血红蛋白高于模型组及G-CSF组(P<0.05),联合组高于模型组(P<0.05);骨髓移植后第24天,生血组外周血细胞中白细胞高于模型组(P<0.05)。骨髓移植后第24天时,G-CSF组、生血组和联合组骨髓单核细胞计数均高于模型组(P<0.01)。骨髓移植后第24天,生血组第24天APO明显低于同期模型组及G-CSF组(P<0.01)。结论生血增白汤能促进骨髓造血细胞的增殖分化,抑制骨髓细胞凋亡,可能是生血增白汤重建造血的机制之一。     

益气养阴方及其拆方对急性髓细胞白血病小鼠细胞凋亡及相关蛋白的影响

目的观察益气养阴方及其拆方对小鼠细胞凋亡率及相关蛋白c-myc、survivin的影响,探讨其作用机制。方法 NOD-SCID小鼠经60Co照射后,尾静脉注射KG1a细胞1×106个造模;随机分为对照组、全方组、扶正组、祛邪组。治疗组给予相应药物灌胃,对照组给予等体积生理盐水灌胃。采用流式细胞术检测细胞凋亡率,免疫组化法检测c-myc、survivin蛋白表达。结果与对照组比较,治疗组细胞凋亡率升高,差异有统计学意义(P0.01);治疗组淋巴结c-myc、survivin蛋白表达降低,差异有统计学意义(P0.05)。全方组对各指标的影响均优于扶正组和祛邪组(P0.05)。结论益气养阴方通过降低c-myc、survivin蛋白表达,诱导白血病细胞凋亡,起到治疗作用。     

左归丸及其组方对卵巢早衰小鼠卵巢细胞凋亡的影响

目的：比较左归丸及其组方对卵巢早衰的作用差异。方法：建立免疫性卵巢早衰小鼠模型,按中医药理论用撤药分析法分为Ⅰ-Ⅴ组,与模型对照组及空白对照组对比,观察各组方对模型小鼠卵巢细胞的凋亡率作用。结果：Ⅰ-Ⅴ组、己烯雌酚组卵巢细胞凋亡率均低于模型对照组（P〈0.01）,降低效果从大到小依次为Ⅴ组、己烯雌酚组、Ⅳ组、Ⅲ组、Ⅱ组、Ⅰ组,Ⅲ组与Ⅱ组比较无显著性差异（P〉0.05）,Ⅳ组与Ⅴ组比较无显著性差异（P〉0.05）。结论：左归丸治疗卵巢早衰配伍合理,熟地起到君药作用。     

滋补肝肾方全方及拆方对黑素细胞氧化损伤致凋亡的影响

目的观察滋补肝肾方中滋补肝肾药、活血药、祛风药及全方对氧化损伤后的黑素细胞活性、凋亡率、线粒体膜电位及释放凋亡蛋白的调节作用,探讨滋补肝肾方的作用机制。方法以B16黑素细胞为研究对象,用过氧化氢刺激造成黑素细胞氧化损伤模型。根据组方规律将滋补肝肾方中的药物拆分为滋补肝肾组、活血组、祛风组,采用冻干粉溶液作用细胞。MTT比色法观察各组黑素细胞的生长抑制;流式细胞仪技术分析DNA含量,确定凋亡细胞所占比例;线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1法)检测线粒体膜电位变化;Western blot法检测凋亡蛋白。结果滋补肝肾方全方组(200μg/mL、100μg/mL)、活血组(100μg/mL)可升高氧化损伤后细胞活性,以全方组作用最为明显。全方组细胞凋亡率低,在保护黑素细胞免受氧化损伤方面比其他组效果更明显。与对照组相比,50μg/mL全方组、200μg/mL滋补肝肾组、50μg/mL滋补肝肾组Bcl-2蛋白表达升高(P0.05),说明全方组、滋补肝肾组抗凋亡作用明显。Capase 9、Capase 3、CytC模型组与各药物组蛋白表达差异无统计学意义(P0.05)。25μg/mL祛风组、12.5μg/mL祛风组AIF蛋白与模型组相比差异有统计学意义(P0.05)。50μg/mL全方组、50μg/mL滋补肝肾组、50μg/mL活血组、25μg/mL祛风组、12.5μg/mL祛风组Bax蛋白与模型组比较差异有统计学意义(P0.05)。除全方组、滋补肝肾组外,其余各药物组Smac蛋白表达与模型组比较差异有统计学意义(P0.05)。结论滋补肝肾方及其拆方可抑制黑素细胞氧化损伤,可能通过线粒体通路发生作用,提示白癜风临床治疗当补血活血、滋补肝肾、祛风共用。     

酸甘生津方及其拆方对干燥综合征小鼠血清IgG含量及颌下腺BAFF表达的影响

目的观察酸甘生津方及其拆方对干燥综合征(SS)模型小鼠血清IgG含量及颌下腺BAFF表达的影响。方法将60只BALB/C小鼠随机分为全方组、养阴组、活血组、解毒组、模型组及空白组,除空白组外其余各组小鼠均采用同种小鼠颌下腺接种方法造模。造模第3周起,分别予以酸甘生津方全方及其拆方制剂灌胃,模型组及空白组给予等量蒸馏水灌胃。干预2周后观察各组小鼠血清IgG含量及颌下腺组织BAFF表达水平。结果与空白组比较,模型组小鼠血清IgG含量、BAFF表达水平均升高,差异有统计学意义(P<0.01)。与模型组比较,各药物组小鼠血清IgG含量、BAFF表达水平均降低,差异有统计学意义(P<0.01)。各药物组之间比较,小鼠血清IgG含量差异无统计学意义(P>0.05)。与全方组比较,3个拆方组BAFF表达水平差异有统计学意义(P<0.01);与解毒组比较,养阴组与活血组BAFF表达差异有统计学意义(P<0.01);养阴组与活血组之间比较,BAFF表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论酸甘生津方及其拆方均能有效降低SS疾病模型小鼠血清IgG含量,显著抑制SS模型小鼠颌下腺组织BAFF过度表达,全方组效果最佳,这可能是其有效治疗SS的作用机制之一。     

补肾活血方对卵巢早衰小鼠颗粒细胞凋亡的影响

目的探讨补肾活血方抑制卵巢早衰(POF)小鼠卵泡颗粒细胞凋亡的作用机制。方法以小鼠透明带3为抗原,皮下多点注射免疫BALB/c雌性小鼠建立免疫性POF模型。取40只清洁级雌性小鼠,随机分为空白组、模型组、阳性药组、补肾活血方组。补肾活血方组给予补肾活血方药液灌胃,阳性药组给予戊酸雌二醇药液灌胃,模型组和空白组给予等量生理盐水灌胃,2次/d,连续15 d。取卵巢、子宫、胸腺进行称重,计算其脏器指数;HE染色观察颗粒细胞凋亡情况;采用放射免疫法检测雌二醇(E2)、促黄体生成激素(LH)和促卵泡生成激素(FSH)的水平;采用RT-PCR分析卵巢颗粒细胞中Fas、Fas-L m RNA表达情况。结果与空白组比较,模型组卵巢、胸腺、子宫质量和E2水平显著降低(P0.05,P0.01),FSH、LH水平和Fas、Fas-L m RNA表达显著升高(P0.01);与模型组比较,给药组颗粒细胞凋亡明显减少,卵巢指数、子宫指数、胸腺指数增加(P0.05),E2水平升高(P0.01),FSH、LH水平及Fas、Fas-L m RNA表达明显降低(P0.05,P0.01)。结论补肾活血方可调节下丘脑-垂体-卵巢轴的激素水平,通过降低Fas、Fas-L的m RNA表达抑制细胞凋亡。     

羚角降压方及其拆方对血管调节因子的影响

目的:探索羚角降压方及其拆方对高血压肝阳上亢证模型大鼠血管调节因子的影响,筛选最佳组方。方法:采用三因素制备高血压肝阳上亢证动物模型,连续给药28d,采血观察羚角降压方全方及拆方对血浆PRL、AngII、ALD、ANP、ET、cGRP的影响。结果:羚角降压方全方可降低模型大鼠血浆AngII、ET,升高cGRP,羚羊角-夏枯草-槲寄生可降低AngII、ALD、ET水平,羚羊角-夏枯草-黄芩可降低ALD水平。夏枯草-黄芩、单味羚羊角可降低模型大鼠血浆ET水平,各组方药对模型大鼠血浆ANP无明显影响。结论:羚羊角-夏枯草改善高血压肝阳上亢证,可能与降低AngII、ET水平有关。     

当归拈痛汤及其拆方对实验性尿酸血症小鼠血尿酸的影响

目的观察当归拈痛汤中各药味对实验性尿酸血症小鼠血尿酸的影响。方法采用正交t值法对当归拈痛汤(对小鼠高尿酸血症模型)进行拆方研究。取小鼠注射氧嗪酸钾盐造成高尿酸血症,给药7天后,摘眼球取血,取血清测定血尿酸值。结果当归拈痛汤中当归、羌活、防风、苍术对氧嗪酸钾盐小鼠高尿酸血症模型血尿酸降低程度不显著,而方中茵陈、苦参、知母、黄芩、泽泻、猪苓、白术、党参对氧嗪酸钾盐小鼠高尿酸血症模型血尿酸降低程度较显著。结论当归拈痛汤中茵陈、苦参、知母、黄芩、泽泻、猪苓、白术、党参为降低尿酸酶抑制-氧嗪酸钾盐小鼠高尿酸血症模型血尿酸的有效药味。     

清肝活血方及其拆方抗酒精性肝损伤大鼠肝细胞内质网应激性凋亡的作用及机制

目的 研究中药复方清肝活血方及其拆方抗酒精性肝损伤大鼠肝细胞内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)性凋亡的作用及机制。     

降脂清肝方及其拆方对脂肪肝家鸭的影响

目的:探讨降脂清肝方及其拆方对脂肪肝家鸭的影响。方法:对由高糖饲料填饲的家鸭进行预防给药[1],观察各组家鸭血清和肝脏甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)及肝脏病理形态学变化。结果:各拆方组中,丹姜组和首乌组在降肝脏及血清TG方面效果显著,其余两组无显著性差异;各拆方组降肝脏及血清总胆固醇效果不明显。全方组降血清TG效果不显著,但降肝脏TG效果显著,且全方组可降低血清总胆固醇(P<0.05)。结论:降脂清肝方可以显著降低肝脏TG,其拆方中,丹姜组与首乌组能显著降低肝脏与血清TG,治疗脂肪肝效果显著。     

痛痹颗粒及拆方的含药血清对家兔软骨细胞增殖与凋亡的影响

骨关节炎（OA）是临床常见的关节退行性疾病，是导致老年人肢体功能障碍的主要原因，主要病理特征是软骨骨质的降解和软骨中细胞数目明显减少，软骨基质的合成和分解代谢失调，这与软骨释放高浓度的NO有关，因此，抑制软骨细胞的凋亡，保护软骨，防治骨关节炎具有重要临床意义，痛痹颗粒是我院风湿科自90年代用于OA的确有疗效的组方，且毒副作用小，有研究报道该方具有较好的抗炎、镇痛、活血化瘀和抗衰老作用，为进一步探讨能否保护软骨细胞这对临床治疗具有实用性，本文选用痛痹颗粒及诉方（补肝肾方，活血化瘀方和祛风湿方）含药血清观察该方对软骨细胞增殖和凋亡的影响，现将结果报道如下：     

柴枳朴槟汤及拆方对小鼠小肠推进及排便次数的影响

目的:观察柴枳朴槟汤原方及拆方对小鼠小肠推进和及4 h内排便次数的影响。方法:小鼠随机分成对照组、理气A组、理气B组、活血A组、活血B组、理气活血A组、理气活血B组(原方)、甘草组8组,ig给药10 d后进行小肠推进和排便次数的观察。结果:理气A组、理气B组、理气活血A组和理气活血B组(柴枳朴槟汤原方组)小肠推进率增加,与对照组比较有显著性差异(P<0.05);理气活血A组和理气活血B组(柴枳朴槟汤原方组)湿粪数明显增高,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:原方促胃肠推进优于拆方,理气药、理气药配活血药及理气药、活血药、甘草三者配伍后都可促进小鼠肠蠕动,理气药可能为促进肠推进的主要药物。     

益气养阴方及其拆方对急性髓细胞白血病小鼠骨髓细胞hTERT及其启动子甲基化表达的影响

目的探讨益气养阴方治疗急性髓细胞白血病的可能作用机制。方法 40只NOD-SCID小鼠经60Co照射后,尾静脉注射KG1a细胞1×106个,建立急性髓细胞白血病动物模型后随机分成4组,每组10只。模型组予生理盐水灌胃;扶正组予扶正方浓缩药液(1.08g/ml)灌胃;祛邪组予祛邪方浓缩药液(0.92g/ml)灌胃;全方组予益气养阴方浓缩药液(2g/ml)灌胃。各组均0.2ml/次,每日2次,共28天。采用PCR-ELISA法检测骨髓细胞端粒酶活性;荧光定量PCR法检测人端粒酶逆转录酶(hTERT)-mRNA及其启动子甲基化的表达。结果扶正组、祛邪组和全方组小鼠骨髓细胞端粒酶活性、hTERT-mRNA和hTERT启动子甲基化的表达较模型组明显降低(P0.05或P0.01),全方组端粒酶活性、hTERT-mRNA和hTERT启动子甲基化的表达低于扶正组与祛邪组(P0.05或P0.01)。结论益气养阴方治疗急性髓细胞白血病的机制可能与降低端粒酶活性、hTERT及其启动子甲基化的表达水平有关。     

柏叶汤及其拆方对小鼠虚寒性出血影响的实验研究

目的:观察柏叶汤及其拆方对脾胃虚寒性出血小鼠模型的影响。方法:将小鼠随机分为正常对照组,模型对照组及模型用药1、2、3组,模型组造脾胃虚寒出血模型。3个用药组分别以柏叶汤、干姜艾叶汤、单味柏叶汤灌胃。结果:三用药组均有缩短凝血时间(干姜艾叶组除外)、增加血小板计数、抑制胃溃疡出血的作用。