兔骨髓间充质干细胞自体移植及血管新生修复梗死心肌的实验研究

目的　了解骨髓间充质干细胞 (MSCs)在心肌梗死的缺血心肌微环境中转化为心肌细胞并改善心功能的可行性。方法　结扎兔左前降支 (LAD)制作急性心肌梗死(AMI)模型 ,骨穿抽取骨髓 ,分离培养扩增骨髓间充质干细胞。术后 2周进行心肌梗死瘢痕内移植 5溴脱氧尿嘧啶(BrdU)标记的骨髓间充质干细胞 ,对照组注射培养基。AMI术前、AMI术后 3d及移植后 4周做超声心动图检测心功能 ,移植后 4周从右颈总动脉插管至左心室测左室压力变化 ,随后处死动物模型 ,取左室标本做冰冻切片 ,采用免疫荧光方法检测BrdU鉴定植入细胞并检测Ⅷ因子相关抗原以测量毛细血管密度。结果　细胞移植组左室切片中可见BrdU染色阳性细胞即植入细胞 ,对照组未见BrdU染色阳性细胞。Ⅷ因子阳性内皮细胞计数表明细胞移植组毛细血管密度大于对照组 (P <0 0 5 )。超声心动图检查证实MSCs移植后 4周左室收缩末期直径 (LVESD)、舒张末期直径 (LVEDD)均小于对照组 (分别为P <0 0 1及P <0 0 5 ) ,小轴缩短率 (ΔD % )、射血分数 (EF)均大于对照组 (均P <0 0 1)。结论　兔缺血心肌内注射骨髓间充质干细胞可依赖组织微环境转化为心肌细胞修复梗死心肌 ,可能伴有移植区域新生血管形成 ,能显著改善心功能 ,可用于心肌梗死的治疗。     

兔骨髓间充质干细胞自体移植治疗扩张型心肌病的实验研究

目的 研究骨髓间充质干细胞(MSCs)自体移植于扩张型心肌病后的增殖分化情况和对心功能的保护作用。方法 日本大耳白兔随机分为4组:(1)扩张型心肌病(DCM)细胞移植组(n=12);(2)DCM对照组(n=12);(3)DCM假手术组(n=12);(4)正常对照组(n=10)。分离培养DCM细胞移植组MSCs后,前3组动物用盐酸阿霉素建立兔DCM模型,第4组注射等量生理盐水。模型建立成功后第3周,将5溴脱氧尿嘧啶(BrdU)标记的MSCs自体移植到细胞移植组心肌内,对照组注射培养基,假手术组只开胸,不做注射。4周后采用超声心动图和血流动力学参数评价各组动物的心脏结构和功能,并取移植区心肌组织行免疫荧光染色以观察移植细胞的增殖分化情况。另选部分心肌组织做HE染色查看心肌组织形态学改变。结果 与正常对照组相比,DCM各组心功能明显受损。细胞移植4周后,可以在移植组心肌内找到BrdU标记的阳性细胞,且一部分表现为心肌特异性肌钙蛋白T染色阳性,一部分Ⅷ因子相关抗原染色阳性并参与形成新生血管,其他组中没有发现。且细胞移植组心功能较对照组和假手术组有明显改善。组织学检查示前3组均有心肌细胞变性坏死。结论 MSCs自体移植到DCM后有可能增殖分化为心肌样细胞和血管内皮样细胞并改善心功能。     

同种异体移植骨髓间充质干细胞治疗大鼠心肌梗死

目的　探讨同种异体骨髓间充质干细胞 (MSCs)在梗死大鼠心脏局部存活、迁移、分化及对心功能的影响 ;明确同种异体细胞移植治疗心肌梗死 (MI)的可行性及效果。方法　雌性Wistar大鼠 3 5只 ,随机分为正常对照组、急性心肌梗死 (AMI)组及MI MSCs治疗组。分离纯化雄性Wistar大鼠骨髓MSCs ,于左冠状动脉前降支结扎后 1～ 3h植入到雌性大鼠心脏组织 ,移植后 10周检测心功能并取心脏检测各种相关指标。结果　异体大鼠MSCs经纯化后可在梗死心脏组织定居、生存 ,并与宿主心肌纤维排列方向一致 ,免疫组化检测胞质心肌特异蛋白染色阳性 ,与MI组比较 ,异体细胞移植组左室收缩压升高 (P <0 0 5) ,舒张末压明显降低 (P <0 0 1)、左心室内压最大上升和下降速率显著增快 (P <0 0 5) ,梗死边缘区心肌面毛细血管数目明显增加 (P <0 0 5) ,多功能真彩色病理图像分析系统显示MI面积缩小 (P <0 0 5)。结论　同种异体MSCs移植治疗MI可行、有效     

自体骨髓间充质干细胞移植对犬缺血心肌的修复作用观察

目的 观察自体骨骼间充质干细胞移植对犬缺血心肌的修复作用.方法 通过结扎犬冠状动脉左前降支近端建立心肌梗死(MI)模型.自每只犬的髂后上棘抽取骨髓进行分离、培养、扩增骨髓间充质干细胞(MSCs).2周后用二脒苯基吲哚(DAPI)标记自体MSCs后二次开胸注射到MI瘢痕区及其周围.对照组注射等量无血清培养基.细胞移植前3 d及移植后4周分别行超声心动图和心肌灌注显影检查.结果 细胞移植后4周,两组犬全部存活,超声心动图显示实验组左室射血分数(EF)、每搏量(SV)、左室短轴缩短率(FS)、左室舒张末期内径(LVD)、左室收缩末内径(LVS)分别为56.72%±4.90%、(33.24±8.50)ml、26.16%±3.33%、(3.85±0.36)cm、(2.83±0.30)cm,与移植前的50.40%±6.31%、(25.49±7.67)ml、21.86%±3.04%、(4.24±0.41)cm、(3.14±0.30)cm相比,P均＜0.05;而对照组4周后左室上述指标较移植前差异不显著(P均＞0.05).99mTc-MIBI检查显示细胞移植组原心尖部、前壁缺损区再填充明显,而对照组原心尖部、前壁缺损区再填充不明显.结论 自体MSCs移植能有效地修复损伤的心肌并提高心功能.     

骨髓间充质干细胞移植治疗心力衰竭

目的 探讨骨髓间充质干细胞移植对阿霉素诱导的心力衰竭大鼠心功能的影响.方法 无菌条件下取8周龄F344大鼠的股骨和胫骨,获得骨髓间充质干细胞(MSCs),在体外纯化、扩增后 ,用5-溴-2'脱氧尿苷(BrdU)进行标记,然后注射到心力衰竭模型细胞移植组和对照组大鼠的心肌组织内,细胞移植后4周,采用生理记录仪测量3组大鼠的心功能 ,处死动物,心脏切片行免疫组化了解移植细胞在受体心脏的存活情况.结果 细胞移植后4周,细胞移植组大鼠死亡率为6.2%,明显低于假细胞移植组12.5%(P<0.01);在受体大鼠的心脏切片上有BrdU标记的移植细胞存活.心功能测定显示:与对照组相比,细胞移植组最大左室收缩末压(LVSP)、心率(HR)、左室内压最大(最小)变化速率(LV±dp/dtmax)均明显下降(P<0.01),而左室舒张末压(LVDP)明显升高(P<0.01);与对照组相比,细胞移植组大鼠的LVSP、HR、LV±dp/dtmax均有明显升高(P<0.01),而LVDP明显降低(P<0.01);与假移植组相比,细胞移植组大鼠的HR、 LV±dp/dtmax仍有明显下降(P<0.01),而LVDP明显升高(P<0.01).结论 MSCs移植可有效改善阿霉素诱导的扩张型心力衰竭大鼠的心功能,减少心力衰竭大鼠的死亡率.     

经静脉和经梗死心肌周边移植自体骨髓间质干细胞对心肌梗死后心功能影响的比较研究

目的比较经静脉移植和心肌移植骨髓间质干细胞(MSCs)对心肌梗死后心功能的影响。方法结扎30只日本大耳兔的冠状动脉左前降支,建立急性心肌梗死模型后分成3组:损伤对照组、静脉移植组和心肌移植组。5周后检测各移植组抗DAPI染色及心脏的结构和功能。结果静脉移植组、心肌移植组在移植区均可检测到大量DAPI阳性标记的细胞,与损伤对照组相比,二者的左室结构与功能均明显改善(P<0.05);而心肌移植组对心功能的改善优于静脉移植组,二者的差异有统计学意义(P<0.05)。结论经静脉移植的MSCs能够在心肌局部分化成为类心肌细胞,并有效改善心脏功能;经心肌移植MSCs对心功能的改善更为有效。     

脂肪干细胞自体移植促进心肌再生和血管新生

目的探讨体外培养的脂肪干细胞（ADSCs）自体移植后能否在心肌梗死区（MI）分化为心肌细胞,并促进血管新生。方法取新西兰白兔30只,结扎前降支近段制作MI模型。治疗组同时取脂肪组织,体外培养扩增AD-SCs,并给予5-氮胞苷诱导。MI后3周进行细胞自体移植,对照组注射磷酸盐缓冲液,饲养5周后行组织学和心功能检查。结果细胞移植组MI面积显著小于对照组,免疫组织化学检测显示大量ADSCs在MI区分化为心肌细胞,ASDCs在MI边缘较梗死中心分化更为彻底,细胞间互相连接,而MI中心分化的细胞之间连接较少;另有部分ADSCs分化为内皮细胞,整合至毛细血管壁内或者形成血管样结构,治疗组血管密度显著高于对照组。细胞移植前两组动物心功能无明显差别,细胞移植5周后,心功能检查显示:治疗组左心室射血分数和+dp/dtmax明显高于对照组,而心肌功能指数,左室舒张末压和-dp/dtmax明显低于对照组。结论脂肪干细胞移植至MI心肌组织后可以分化为心肌细胞并促进血管新生,进而改善心脏功能。     

自体骨髓间充质干细胞移植对急性心肌梗死后心功能的影响

目的观察骨髓间充质干细胞（MSCs）经冠脉移植对急性心肌梗死后心功能的影响。方法24只日本大耳白兔,随机分为MSCs移植组（n=12）和培养液对照组（n=12）。从兔股骨抽取骨髓,体外培养MSCs。通过结扎左冠前降支建立急性心肌梗死模型。冠脉结扎后7d,细胞移植组和对照组直接经冠脉注入MSCs和培养液。于心肌梗死前、细胞移植前、细胞移植后1、2和4周对兔进行超声心动图检查。移植后4周处死动物,进行BrdU和第Ⅷ因子相关抗原免疫组化检测。结果移植后2周,MSCs移植组在射血分数（LVEF）和左室收缩末直径（LVESD）方面与移植前和对照组相比有显著改善（P<0.05）;移植4周后,LVEF、LVESD和左室舒张末直径（LVEDD）在MSCs移植组与移植前及对照组相比均有显著改善（P<0.05）。免疫组化检测发现,MSCs移植组BrdU染色阳性,血管计数较对照组明显增多（P<0.01）。结论经冠脉移植的MSCs可在梗死区心肌内存活并逐渐分化成心肌样细胞,促进毛细血管生成,显著改善心功能。     

骨髓间充质干细胞移植治疗心力衰竭

目的探讨骨髓间充质干细胞移植对阿霉素诱导的心力衰竭大鼠心功能的影响。方法无菌条件下取8周龄F344大鼠的股骨和胫骨,获得骨髓间充质干细胞(MSCs),在体外纯化、扩增后,用5-溴-2’脱氧尿苷(BrdU)进行标记,然后注射到心力衰竭模型细胞移植组和对照组大鼠的心肌组织内,细胞移植后4周,采用生理记录仪测量3组大鼠的心功能,处死动物,心脏切片行免疫组化了解移植细胞在受体心脏的存活情况。结果细胞移植后4周,细胞移植组大鼠死亡率为6.2%,明显低于假细胞移植组12.5%(P<0.01);在受体大鼠的心脏切片上有BrdU标记的移植细胞存活。心功能测定显示:与对照组相比,细胞移植组最大左室收缩末压(LVSP)、心率(HR)、左室内压最大(最小)变化速率(LV±dp/dtmax)均明显下降(P<0.01),而左室舒张末压(LVDP)明显升高(P<0.01);与对照组相比,细胞移植组大鼠的LVSP、HR、LV±dp/dtmax均有明显升高(P<0.01),而LVDP明显降低(P<0.01);与假移植组相比,细胞移植组大鼠的HR、LV±dp/dtmax仍有明显下降(P<0.01),而LVDP明显升高(P<0.01)。结论MSCs移植可有效改善阿霉素诱导的扩张型心力衰竭大鼠的心功能,减少心力衰竭大鼠的死亡率。     

同种异体骨髓间充质干细胞移植治疗急性心肌梗死的实验研究

目的探讨同种异体骨髓间充质干细胞(BMMSCs)移植对急性心肌梗死(AMI)大鼠心脏结构和功能的影响及其作用机制。方法采用Wistar大鼠30只,随机分成BMMSCs移植组、培养液注射组(开胸后在梗死区周围注射等量细胞培养液);体外分离纯化、扩增BMMSCs,4,6二脒基-2-苯吲哚(DAPI)标记。BMMSCs移植组于造模后1周经心肌直接注射MSCs,培养液注射组注射同等剂量的细胞培养液。造模后4周测定心功能并行免疫组织化学检测。结果造模后4周,与培养液注射组比较,BMMSCs移植组左室射血分数明显增加,左室收缩末期内径和舒张末期内径显著降低(P均<0.05);心肌梗死区毛细血管密度明显增高(P<0.05);BMMSCs移植组大鼠梗死心肌中可见DAPI标记阳性细胞;与培养液注射组比较,BMMSCs移植组可以显著减少非梗死区心肌细胞的凋亡(P<0.05)。结论 BMMSCs移植能够提高AMI梗死区毛细血管密度,改善大鼠的心功能。     

巴曲酶对体外培养下内皮祖细胞数量及功能的影响

目的探讨巴曲酶(DF-521)对内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)数量和功能的影响。方法采用密度梯度离心法从外周血获取单个核细胞,将其接种在细胞培养板中,分为对照组、低剂量干预组(DF-5210.05BU/ml)、中剂量干预组(DF-5210.1BU/ml)和高剂量干预组(DF-5210.2BU/ml)。激光共聚焦显微镜鉴定"FITC标记的荆豆凝集素"和"DiI标记的乙酰化低密度脂蛋白"双染色阳性细胞为正在分化的EPCs,流式细胞仪检测其表面标记并进一步鉴定EPCs。MTT比色法、改良的Boyden小室及黏附能力测定EPCs的增殖、迁移和黏附能力。结果与对照组比较,不同浓度DF-521干预组均随浓度增加明显提高EPCs的数量;中剂量干预组作用24h时对EPCs的数量影响最为显著,较对照组增加近1倍(P<0.05)。DF-521对于EPCs的增殖、迁移、黏附能力也有显著的改善(P<0.05)。结论DF-521可增加体外培养条件下EPCs的数量并改善其功能。     

U94 of human herpesvirus 6 inhibits in vitro angiogenesis and lymphangiogenesis

Human herpesvirus 6 (HHV-6) is a lymphotropic virus, but recent observations showed that also vascular endothelial cells (ECs) are susceptible to infection, both in vivo and in vitro. The observation that lymph nodes are a site of viral persistence suggests that lymphatic ECs (LECs) might be even more relevant for HHV-6 biology than vascular ECs. Here, we provide evidence that HHV-6 can infect LECs in vitro and establish a latent infection. Thus HHV-6 infection induces the loss of angiogenic properties both in LECs and in vascular ECs, as shown by the inability to form capillary-like structures and to seal wound scratches. The antiangiogenic effects observed in infected cells are associated to the expression of HHV-6 U94/rep, a latency-associated gene. In fact, transfection of U94/rep or addition of recombinant U94/REP protein to ECs inhibits the formation of in vitro capillary-like structures, reduces migration of ECs, and blocks angiogenesis, rendering rat aortic rings insensitive to VEGF-induced vasculogenetic activity. The ability of U94/rep to block different angiogenetic steps may lead to approaches in the potential control of the proliferation of blood and lymphatic vessels.     

Phenotypic analysis of nylon-wool-adherent suppressor cells that inhibit the effector process of tumor cell lysis by lymphokine-activated killer cells in patients with advanced gastric carcinoma

The causes of down-regulation of cytotoxic immune responses in cancer patients have not been fully evaluated. We previously demonstrated that T-cell-growth-factor-activated peripheral blood lymphocytes (PBL) with the surface phenotype CD8⁺ CD11b^–, from patients with widespread metastasis of gastric carcinoma, inhibited the effector process of lymphokine-activated-killer(LAK)-cell-mediated cytolysis. In this study, we examined suppressor cell activity in freshly prepared PBL from 18 patients with advanced gastric carcinoma, and 10 normal healthy individuals. The suppressor cell activity was assayed by recording whether or not PBL inhibited directly the effector process of LAK cell cytotoxicity. Most of the PBL suspensions from cancer patients showed that they contained a population of cells that can directly inhibit the effector phase of tumor cell lysis of the cytotoxic cells. To analyze further the PBL responsible for the suppression, the cells were passed over a nylon-wool column. Nylon-wool-adherent cells significantly augmented the suppression, while the cells passing through abrogated the suppressive effect. Most nylon-wool-adherent cells from 10 normal healthy controls did not inhibit the cytotoxic reaction. To determine further the suppressor-effector population in nylon-wool-adherent cells, negative-selection studies using CD8-, CD4- or CD11b-coated magnetic beads, and positive-selection studies using CD8- or CD4-coated magnetic beads were performed. Finally the results suggest that the suppressor-effector cells comprise at least two different surface phenotypes: CD8⁺ T and CD8^–CD11b⁺ cells. The possible role of CD4⁺ T cells and HLA-DR⁺ LeuM3⁺ macrophages as suppressor cells was ruled out in nylon-wood-adherent cells. CD8⁺ T and possibly CD8^–CD11b⁺ cells apparently suppressed the efferent limb of the antitumor immunity. The selective immune suppression mediated by these cells may partly be concerned with escape mechanisms of gastric carcinoma from the host immune surveillance system.Abbreviations TCGF T cell growth factor - PBL peripheral blood leucocytes - LAK lymphokine-activated killer - NK natural killer - CTL cytotoxic T lymphocytes     

Electron-microscopic aspects of Hodgkin's disease

Summary Lymph nodes from patients with Hodgkin's disease of the nodular sclerosis or mixed cellularity type were examined by electron microscopy to classify all the cells that occur in these types of lymphoma. Most of the cells showed morphological features that were the same, or nearly the same as those of cells of normal lymphoid tissue. These included typical interdigitating reticulum cells (IDC), histiocytic reticulum cells, so-called dark reticulum cells, and sinus macrophages. There were also small and medium-sized lymphocytes, immunoblasts, plasma cells, and plasma cell precursors resembling those seen in non-specific lymphadenitis. Germinal center cells, on the other hand, were present in negligible numbers.Special attention was paid to Hodgkin's (H) and Sternberg-Reed (SR) cells. This group of cells proved to be heterogeneous. The only common features were a large cell size, large nuclei, and a prominent nucleolus. Some of the H and SR cells resembled immunoblasts of normal lymphoid tissue. The cytoplasm of these cells contained numerous polyribosomes, and their heterochromatin was coarsely condensed at the nuclear membrane. Other H and SR cells were more similar to histiocytic cells or reticulum cells because of the large number of cell organelles (e.g., lysosome-like granules) and diffuse heterochromatin. Finally, cases of the nodular sclerosis type of Hodgkin's disease showed another cell type with some resemblance to IDC. The cells of this type are called lacunar cells because of their special light-microscopic appearance.Abbreviations H Hodgkin - IDC interdigitating reticulum cell - SR Sternberg-Reed     

Mesenchymal stem cells efficiently inhibit the proinflammatory properties of 6-sulfo LacNAc dendritic cells

Mesenchymal stem cells emerged as a promising treatment modality for steroid-refractory graft-versus-host disease, which represents a major complication of allogeneic hematopoietic stem cell transplantation. Dendritic cells (DCs) display an extraordinary capacity to induce T-cell responses and play a crucial role in the pathogenesis of graft-versus-host disease. Here, we investigated the impact of mesenchymal stem cells on the proinflammatory capacity of 6-sulfo LacNAc (slan) dendritic cells, representing a major subpopulation of human blood dendritic cells. Mesenchymal stem cells markedly impair maturation of slanDCs and their ability to secrete proinflammatory cytokines, which was dependent on prostaglandin E₂. In contrast, the release of anti-inflammatory IL-10 was improved by mesenchymal stem cells. Furthermore, mesenchymal stem cells efficiently inhibit slanDC-induced proliferation of CD4⁺ and CD8⁺ T cells and polarization of naïve CD4⁺ T lymphocytes into Th1 cells. These results indicate that mesenchymal stem cells significantly impair the high proinflammatory capacity of slanDCs and further substantiate their potential for the treatment of graft-versus-host disease.     

人尿源干细胞的分离培养及体外成神经细胞分化研究

目的从正常成人尿液中分离提取间充质干细胞(MSC)来源的人尿源干细胞(hUSC),并研究比较其在不同诱导液中的体外成神经分化能力。方法提取正常成人来源hUSC,经体外培养、扩增,流式细胞术鉴定,用4种不同配方的成神经诱导液分别诱导hUSC向神经细胞分化,在诱导至第14天时,光镜下观察细胞形态改变,并用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法鉴定Nestin、S100、β3-tublin和NF-200基因表达。采用SPSS 13.0统计软件对数据进行分析。组间比较采用t检验和方差分析。结果从正常成人提取的hUSC成功表达MSC表面标志物(CD27~+、CD44~+、CD73~+、CD90~+、CD31~-、CD34~-、CD45~-、HLA-DR~-)。hUSC在B、C、D成神经诱导液中诱导培养14 d后,细胞胞体回缩饱满、折光度变强,呈现神经元样突起。相比A成神经诱导液,B、C和D成神经诱导液中细胞Nestin、S100表达水平增高,B和D成神经诱导液中细胞β3-tublin、NF-200表达水平降低。其中C成神经诱导液中细胞Nestin表达水平高于B和D成神经诱导液中的细胞,B成神经诱导液中细胞S100表达水平高于C和D成神经诱导液中细胞,差异均具有统计学意义(P0.05)。结论 hUSC具备MSC特性;B、C、D成神经诱导液均有助于hUSC向神经类细胞方向分化,提示在优化诱导条件下,hUSC能向神经干细胞(NSC)及胶质细胞亚群分化。     

树突状细胞与细胞融合后诱导T细胞介导的抗肿瘤效应

目的　研究树突状细胞与小鼠肥大细胞瘤细胞P815融合作为肿瘤疫苗免疫小鼠后抑制肿瘤生长的作用及其机理。方法　Balb/C小鼠DC与P815细胞体外融合 ,形成的杂交瘤分 2次免疫接种同基因小鼠皮下 ,然后用P815细胞攻击免疫的小鼠 ,观察肿瘤的生长情况及免疫小鼠脾细胞特异性CTL功能。结果　DC P815融合率为 3 0 %,杂交瘤接种小鼠能产生明显的抗肿瘤效应 ,其拮抗P815细胞攻击的能力明显强于用灭活的死P815细胞与DC混合 ,和单用死亡P815细胞免疫的小鼠及用生理盐水的对照组小鼠。DC P815杂交瘤免疫接种小鼠的脾细胞特异性CTL ,杀伤活性强于其它各组小鼠。结论　DC与肿瘤细胞融合后作为肿瘤疫苗接种可在体内产生明显的抗肿瘤免疫 ,其机理主要是特异性CTL的作用。     

动脉内注入内皮祖细胞促进血管内皮快速修复的实验研究

目的探讨体外培养的自体内皮祖细胞（EPC）对兔颈动脉球囊损伤后内皮修复以及内膜增生的影响。方法分离兔骨髓单个核细胞,EBM-2＋SingleQuots培养基培养,鉴定EPC表面标志,并标记。建立兔颈动脉球囊损伤模型,在动脉球囊损伤的即刻,将体外培养的自体EPC经损伤动脉缓慢注入动物体内。分别在手术后7、14天处死动物。检测损伤部位的内皮修复以及内膜增生情况,计算内膜中膜比值（I／M比值）并检测注入的细胞在血管损伤局部的分布。结果EPC治疗组在7、14天的内皮覆盖率分别为（50．923±2．476）％和（82．609±2．611）％,均明显高于对照组,差异有统计学意义。EPC治疗组14天的I／M比值为0．378±0．029,低于对照组,差异有统计学意义。免疫组织化学染色示EPC治疗组损伤血管局部有标记的EPC分布。结论内皮球囊损伤后动脉内注入EPC能有效促进内皮修复,减少内膜增生,预防再狭窄的发生。     

肺结核患者外周血记忆性T细胞及B细胞亚群的检测分析

目的探讨肺结核患者外周血记忆性T及B细胞亚群的表达水平。方法采用流式细胞仪检测肺结核患者（TB）、潜伏感染者（LTBI）、健康人（HD）外周血记忆性T、B细胞亚群水平及B细胞表达水平;利用Elispot技术检测外周血单个核细胞（PBMC）结核菌抗原特异性IFN-r分泌水平。结果流式结果显示,TB及LTB1的CD4＊及CD8＊中心记忆性T细胞（Tcm）显著增多,以CD4＊尤为显著;相反,效应记忆性T细胞（Tem）减少。TB记忆性B细胞均低于HD和LTBI（P〈0．01）;而在HD与LTBI及TB这三组CD19＆细胞占淋巴细胞比例中都有明显差异（P〈0．01;P〈0．001）。CD4’／CD8’Tcm与IFN-γ ELISPOT结果成正相关。结论肺结核患者外周血中存在着记忆性T及B细胞亚群的紊乱,中心记忆性T细胞增多,效应记忆性T细胞减少,记忆性T、B细胞的数量及免疫状态与结核菌感染的不同转归有关,记忆性T、B细胞在结核病发病机制中发挥着重要作用。