自体骨髓间充质干细胞移植对急性心肌梗死后心功能的影响

目的观察骨髓间充质干细胞（MSCs）经冠脉移植对急性心肌梗死后心功能的影响。方法24只日本大耳白兔,随机分为MSCs移植组（n=12）和培养液对照组（n=12）。从兔股骨抽取骨髓,体外培养MSCs。通过结扎左冠前降支建立急性心肌梗死模型。冠脉结扎后7d,细胞移植组和对照组直接经冠脉注入MSCs和培养液。于心肌梗死前、细胞移植前、细胞移植后1、2和4周对兔进行超声心动图检查。移植后4周处死动物,进行BrdU和第Ⅷ因子相关抗原免疫组化检测。结果移植后2周,MSCs移植组在射血分数（LVEF）和左室收缩末直径（LVESD）方面与移植前和对照组相比有显著改善（P<0.05）;移植4周后,LVEF、LVESD和左室舒张末直径（LVEDD）在MSCs移植组与移植前及对照组相比均有显著改善（P<0.05）。免疫组化检测发现,MSCs移植组BrdU染色阳性,血管计数较对照组明显增多（P<0.01）。结论经冠脉移植的MSCs可在梗死区心肌内存活并逐渐分化成心肌样细胞,促进毛细血管生成,显著改善心功能。     

自体骨髓间充质干细胞移植治疗心肌梗死的进展

心肌梗死可引起心肌细胞的丢失,进而引起心脏功能的下降,是心力衰竭最主要的病因。骨髓间充质干细胞（BM—MSCs）是一类具有横向分化为各系统器官和组织能力的干细胞,能补充丢失的心肌细胞并通过旁分泌等机制增强心功能,为心肌梗死提供一种全新的治疗方法,极具发展潜力。本文对BM—MSCs的分离培养、诱导因素、移植以及临床研究等方面进行了综述。     

自体骨髓间充质干细胞移植对犬缺血心肌的修复作用观察

目的 观察自体骨骼间充质干细胞移植对犬缺血心肌的修复作用.方法 通过结扎犬冠状动脉左前降支近端建立心肌梗死(MI)模型.自每只犬的髂后上棘抽取骨髓进行分离、培养、扩增骨髓间充质干细胞(MSCs).2周后用二脒苯基吲哚(DAPI)标记自体MSCs后二次开胸注射到MI瘢痕区及其周围.对照组注射等量无血清培养基.细胞移植前3 d及移植后4周分别行超声心动图和心肌灌注显影检查.结果 细胞移植后4周,两组犬全部存活,超声心动图显示实验组左室射血分数(EF)、每搏量(SV)、左室短轴缩短率(FS)、左室舒张末期内径(LVD)、左室收缩末内径(LVS)分别为56.72%±4.90%、(33.24±8.50)ml、26.16%±3.33%、(3.85±0.36)cm、(2.83±0.30)cm,与移植前的50.40%±6.31%、(25.49±7.67)ml、21.86%±3.04%、(4.24±0.41)cm、(3.14±0.30)cm相比,P均＜0.05;而对照组4周后左室上述指标较移植前差异不显著(P均＞0.05).99mTc-MIBI检查显示细胞移植组原心尖部、前壁缺损区再填充明显,而对照组原心尖部、前壁缺损区再填充不明显.结论 自体MSCs移植能有效地修复损伤的心肌并提高心功能.     

兔骨髓间充质干细胞自体移植及血管新生修复梗死心肌的实验研究

目的　了解骨髓间充质干细胞 (MSCs)在心肌梗死的缺血心肌微环境中转化为心肌细胞并改善心功能的可行性。方法　结扎兔左前降支 (LAD)制作急性心肌梗死(AMI)模型 ,骨穿抽取骨髓 ,分离培养扩增骨髓间充质干细胞。术后 2周进行心肌梗死瘢痕内移植 5溴脱氧尿嘧啶(BrdU)标记的骨髓间充质干细胞 ,对照组注射培养基。AMI术前、AMI术后 3d及移植后 4周做超声心动图检测心功能 ,移植后 4周从右颈总动脉插管至左心室测左室压力变化 ,随后处死动物模型 ,取左室标本做冰冻切片 ,采用免疫荧光方法检测BrdU鉴定植入细胞并检测Ⅷ因子相关抗原以测量毛细血管密度。结果　细胞移植组左室切片中可见BrdU染色阳性细胞即植入细胞 ,对照组未见BrdU染色阳性细胞。Ⅷ因子阳性内皮细胞计数表明细胞移植组毛细血管密度大于对照组 (P <0 0 5 )。超声心动图检查证实MSCs移植后 4周左室收缩末期直径 (LVESD)、舒张末期直径 (LVEDD)均小于对照组 (分别为P <0 0 1及P <0 0 5 ) ,小轴缩短率 (ΔD % )、射血分数 (EF)均大于对照组 (均P <0 0 1)。结论　兔缺血心肌内注射骨髓间充质干细胞可依赖组织微环境转化为心肌细胞修复梗死心肌 ,可能伴有移植区域新生血管形成 ,能显著改善心功能 ,可用于心肌梗死的治疗。     

自体骨髓间充质干细胞移植治疗心肌梗死的时机选择

目的:评价不同时机骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植治疗急性心肌梗死(AMI)的疗效.方法:44例首次急性ST段抬高型AMI患者,在急诊成功开通梗死相关冠状动脉后随机分为AMI后第1周移植组(A组,10例)、AMI后第2、第3周移植组(B组,10例)、AMI后第4至6周移植组(C组,11例)和对照组(仅行PCI术,不进行骨髓穿刺或冠状动脉内输注,13例).各组于AMI后3 d、6个月行经胸超声心动图,采用99MTc-MIBI核素的单光子放射计算机断层显像术进行心肌灌注显像.结果:与对照组相比,A组和B组左室射血分数显著提高,心肌灌注缺损指数明显下降.A组与B组间未见明显差异,而C组与对照组相比亦未见明显差异.A组、B组、C组均未出现恶性心律失常和其他严重并发症.结论:AMI急诊介入术后行BMSCs移植是安全的.AMI后前3周行BMSCs移植比较理想.     

骨髓间充质干细胞移植对心力衰竭大鼠心功能的影响

目的探讨骨髓间充质干细胞（MSCs）对心衰大鼠心功能的影响及其机制。方法腹腔注射阿霉素（2mg／kg,每周1次,连续6周）至近交系F344大鼠体内,建立心衰大鼠模型。存活大鼠（32只）随机分为2组：心衰组（16只）和细胞移植组（16只）。分离纯化大鼠MSCs进行体外培养,予4,6-联脒-2-苯基吲哚（DAPI）进行标记;经股静脉注射MSCs或DMEM至心衰大鼠体内。细胞移植后4周,应用多导生理记录仪测量大鼠心功能;通过免疫组织荧光及化学染色,观察移植细胞存活情况,并计算血管数量;通过天狼猩红染色计算心肌胶原容积分数（CVF）和血管周围胶原面积（PVCA）。结果移植后4周,细胞移植组大鼠心肌组织见到DAPI标记的移植细胞存活,并表达心肌特异性抗原心肌肌球蛋白重链（β—MHC）。与心衰组相比,细胞移植组最大左室收缩末压（LVSP）、左室内压最大（最小）变化速率（LV＋dp／dtmax）均明显升高（P〈0．05）,而左室舒张末压（LVDP）明显下降（P〈0．05）;细胞移植组左室血管数量明显高于心衰组[（11．83±1．40）个比（7．78±1．39）个,P〈O．05],细胞移植组左心室内膜CVF及PVCA明显低于心衰组（4．53±1．98比7．79±1．99,10．91±2．31比14．17±2．49,P〈0．05）。结论MSCs移植可改善心衰大鼠心功能,其机制可能与MSCs归巢至心脏,分化为心肌样细胞,并且促进血管新生、抑制心肌纤维化有关。     

兔骨髓间充质干细胞移植后移植细胞凋亡的实验研究

目的利用TUNEL法检测5-氮胞苷体外诱导骨髓间充质干细胞（MSCs）移植后的凋亡情况。方法5-氮胞苷体外诱导骨髓间充质干细胞MSCs向肌源性心肌细胞分化,通过免疫组化,鉴定诱导后的MSCs是否向类心肌细胞转化。建立兔心肌梗死模型,将细胞移植于心梗区域。移值2周后,利用TUNEL法检测植入细胞的凋亡率。结果移植2周后,可见DAPI标记带蓝色荧光的供体细胞核,分布比较广泛,形态呈椭圆形类似心肌细胞核,并与心肌纤维排列方向一致,证明移植细胞已存活。移值细胞表达troponinT,证明移植的MSCs分化为类心肌细胞。移植细胞均出现不同程度细胞凋亡。结论移植的MSCs细胞可在缺血的心肌组织存活,并分化为类心肌细胞,但移植细胞均出现不同程度凋亡。     

骨髓间充质干细胞移植治疗心肌梗死的新技术

骨髓间充质干细胞移植是治疗心肌梗死的新途径之一,其技术和方法不断发展。诸如建立更好的大型活体实验动物模型；改进对植入细胞的标记追踪技术；进一步研究细胞植入的适宜方式和时间等。骨髓间充质干细胞移植和基因疗法相结合可能得到叠加的治疗效果。     

骨髓间充质干细胞移植治疗心肌梗死的新技术

骨髓间充质干细胞移植是治疗心肌梗死的新途径之一,其技术和方法不断发展.诸如建立更好的大型活体实验动物模型;改进对植入细胞的标记追踪技术;进一步研究细胞植入的适宜方式和时间等.骨髓间充质干细胞移植和基因疗法相结合可能得到叠加的治疗效果.     

骨髓间充质干细胞移植治疗心肌梗死的研究进展

骨髓间充质干细胞是一种多能干细胞,在体外培养时,可以通过诱导使其分化为心肌细胞等。目前进行的动物实验和临床Ⅰ期实验表明骨髓间充质干细胞具有促进血管增生以及改善心肌梗死后心脏功能的作用,为心肌梗死的治疗提供了广阔前景。     

自体骨骼肌成肌细胞和骨髓间充质干细胞移植对心肌梗死兔心室重构和心功能的影响

目的：观察经冠状动脉途径移植自体骨骼肌成肌细胞（SMs）和骨髓间充质干细胞（BM—MSCs）到兔急性心肌梗死（AMI）区后对心室重构和心脏功能的影响。方法：取日本大耳白兔60只,随机分为经冠状动脉注射SMs移植组、BM—MSCs移植组、对照组和假手术组,各15只。结扎兔左冠状动脉前降支,建立AMI模型：再灌注后,SMs移植组经冠状动脉注射自体SMs悬液1ml（5×10^6个细胞）;BM—MSCs移植组经冠脉注射自体BM—MSCs悬液1ml（5×10^6个细胞）;对照组注入等量的无血清培养液;假手术组除不结扎左前降支外,其余操作均同对照组。术后4周,以超声心动图仪测量各组左心室舒张末期内径（LVEDd）和左心室射血分数（LVEF）。测定各组兔左心室质量及左心室质量指数并以免疫组织化学法检测各组兔新生血管数目。结果：术后4周,与对照组比较,SMs和BM—MSCs移植组的I。VEF明显提高[（53．21±2．32）％比（61．93±4．11）％比（62．41±2．58）％,P〈0．01],LVEDd明显减小[（12．48±0．84）mm比（11．23±0．44）mm比（11．34±0．36）mm,P〈0．01],左心室质量、左心室质量指数明显减低（P〈0．01）,新生血管数目明显增多[（4．08±1．8）个／HP比（13．6±1．6）个／HP比（12．5±1．7）个／HP,P〈0．05]。两移植组间各指标比较均无显著性（P〉0．05）。结论：经冠状动脉途径自体骨骼肌成肌细胞和骨髓间充质干细胞移植可促进血管新生,改善心肌梗死后心室重构,从而增强心脏收缩功能。     

经静脉和经梗死心肌周边移植自体骨髓间质干细胞对心肌梗死后心功能影响的比较研究

目的比较经静脉移植和心肌移植骨髓间质干细胞(MSCs)对心肌梗死后心功能的影响。方法结扎30只日本大耳兔的冠状动脉左前降支,建立急性心肌梗死模型后分成3组:损伤对照组、静脉移植组和心肌移植组。5周后检测各移植组抗DAPI染色及心脏的结构和功能。结果静脉移植组、心肌移植组在移植区均可检测到大量DAPI阳性标记的细胞,与损伤对照组相比,二者的左室结构与功能均明显改善(P<0.05);而心肌移植组对心功能的改善优于静脉移植组,二者的差异有统计学意义(P<0.05)。结论经静脉移植的MSCs能够在心肌局部分化成为类心肌细胞,并有效改善心脏功能;经心肌移植MSCs对心功能的改善更为有效。     

Effects of bone marrow derived mesenchymal stem cells transplantation in acutely infarcting myocardium

BACKGROUND: Cellular cardiomyoplasty (CCM) is considered to be a novel therapeutic approach for post-myocardial infarction (MI) heart failure. In this study, the functional effects of cultured mesenchymal stem cells (MSCs) transplantation and the associated histopathologic changes were evaluated in a rat model of MI. METHODS: Rats were subjected to 5 h of coronary ligation followed by reperfusion and, 10 days after MI, animals were randomized into either the MSCs transplantation (MI-MSC, n=8) group or the control (n=8) group. Allogeneic MSCs (3x10(6) cells) or media were epicardially injected into the center and the border area of the infarct scar. RESULTS: Four weeks after the MSCs transplantation, the echocardiogram showed preserved anterior regional wall motion and increases in fractional shortening in the MI-MSC heart relative to the control heart. Left ventricular (LV) end-diastolic pressure was smaller in the MI-MSC than in the control group. Implanted MSCs formed islands of cell clusters on the border of the infarct scar, and the cells were positively immunostained by sarcomeric alpha-actinin and cardiac troponin T. In addition, the number of microvessels on the border area of the infarct scar was greater in the MI-MSC than in the control group. CONCLUSION: Allogeneic MSCs transplanted into the MI scar formed clusters of cell grafts on the border of the infarct, expressed cardiac muscle proteins, increased microvessel formation, and improved regional and global LV function. Our data indicate that CCM using MSCs may have a significant role in the treatment of post-MI heart failure.     

干细胞因子在骨髓干细胞心肌内移植治疗中的作用研究

目的探讨干细胞因子（SCF）在骨髓干细胞心肌内移植中的作用机制及对移植治疗的影响。方法对急性心肌梗死（AMI）大鼠进行骨髓干细胞心肌内移植治疗,RT—PCR方法检测骨髓中SCF表达水平的变化,并用SCF表达水平不同的骨髓干细胞进行心肌内移植治疗,超声心动图检测心脏结构、功能的变化;ELISA方法检测心肌组织、血和骨髓中SCF蛋白水平的变化。结果AMI1周时骨髓中SCF mRNA表达明显降低（P〈0．01）,接受移植治疗大鼠骨髓中SCF mRNA表达未出现降低。不同SCF表达水平的骨髓干细胞进行心肌内移植治疗均能使心脏射血分数达到70％,各组之间差异无统计学意义。移植治疗后1周血清中SCF蛋白的表达水平明显低于正常对照（P〈0．05）。结论骨髓干细胞心肌内移植可能通过SCF产生骨髓动员作用;心肌梗死或曾接受移植治疗个体的骨髓干细胞同样可用于心肌内移植治疗,不影响心功能的改善。     

大鼠骨髓间充质干细胞移植在心肌梗死区长期存活的观察

目的 探讨大鼠骨髓间充质干细胞(BMSC)异体移植在心肌梗死区后长期存活数量的动态变化及其分布情况.方法 分离、纯化、培养雄性SD大鼠BMSC.开胸结扎雌性SD大鼠左冠状动脉前降支,于心肌梗死1 b后,将雄性大鼠BMSC 1.2×106个注入移植在雌性大鼠梗死心肌中心区心外膜下.将细胞移植受体大鼠随机分为3组,分别于移植后1、3和6周采集心肌梗死组织标本(n=18).实验动物移植细胞用Hoechst33342(n=5)和Brdu预先标记(n=5).实时定量PCR(realtime quantitative PCR)检测大鼠Y染色体雄性鉴别基因sry片段的表达(n=8).结果 分离纯化的雄性大鼠BMSC经流式细胞术鉴定为CID44+/CD34-.Hoechst33342荧光及Brdu免疫组织化学定性定位了移植细胞的存活,并在3周和6周组观察到部分标记细胞有序聚集排列,形成血管样结构.RT-PCR检测移植后细胞存活率在1、3和6周组分别为7.88%、7.82%和8.73%.结论 BMSC可以在心肌梗死区长期存活并参与受损心肌的修复.存活数量于移植1周后不再进行性减少,至6周均为8%左右.

Abstract：

Objective To investigate the quantification and distribution of survival transplanted bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs) in infarcted myocardium of rats. Methods BMSCs of male SD rats were isolated, purified and proliferated. Female SD rats were subjected to occlusion of left anterior descending artery, 1.2 × 106 BMSCs were injected into the centre zone of the infarct region 1 h after left anterior descending artery occlusion. Myocardial tissue was harvested randomly at 1,3 and 6 ( n = 18) weeks after transplantation. Transplanted cells were labeled with Hoechst33342 ( n = 5 ) and Brdu ( n = 5 ). Sry suquence of Y chromatosome in male rat was analyzed by real-time PCR in the tissue ( n = 8). Results FACS analysis showed that BMSCs expressed homogenous with CD44 +/ CD34 -. Hoechst33342 or Brdu labeled positive cells were found in localized accumulation and some of them migrated to the margin of the infarct region, and vessel-like structure could be observed in the host hearts. The real-time PCR demonstrated that the survival rates of engrafted BMSCs were 7. 88%, 7. 82% and 8. 73% respectively at 1,3 and 6 weeks after transplantation. Conclusion BMSCs could survive in the host infarcted myocardium for more than one month and the survival rate was around 8% from the first week to the sixth week after transplantation.     

兔骨髓基质细胞自体移植治疗急性心肌梗死的实验研究

目的 探讨自体骨髓基质细胞(BMSCs)移植治疗急性心肌梗死的相关问题。方法穿刺法抽取新西兰兔双侧股骨骨髓,分离培养BMSCs,5-溴脱氧尿苷(BrdU)标记后,分别进行5-氮胞苷诱导或与乳鼠心肌细胞共培养,取诱导后21天或共培养21天的细胞进行免疫细胞化学染色。34只新西兰兔均先后经过骨穿抽取骨髓,BMSCs体外培养,开胸建立心肌梗死模型及心肌内注射等操作,按照对其BMSCs的处理方式和心肌内注射的成分不同随机分为3组,A组BMSCs经5-氮胞苷诱导,B组BMSCs未经诱导(A、B两组注射自体细胞悬液),C组(注射生理盐水)。于开胸手术前、手术后1周、1个月采用超声检测左心室功能。手术后1个月取心脏组织行光镜及电镜检查。结果 体外培养的BMSCs无论是在5-氮胞苷诱导还是与心肌细胞共培养的条件下,均有部分细胞表达横纹肌肌动蛋白。与C组相比,术后1个月时A、B两组梗死的范围显著缩小(P<0.01),梗死的心室壁运动幅度以及收缩期室壁增厚率显著提高(P均<0.05)。A、B两组之间上述心功能指标差异无显著性。病理检查示新生的肌细胞呈岛状或散在分布于梗死区变性坏死的心肌细胞及间质细胞之间。电镜检查显示梗死区有毛细血管新生。结论 自体BMSCs移植治疗急性心肌梗死效果显著,其疗效可能与BMSCs引起的心肌再生和血管新生有关,诱导的B     

小型猪自体骨髓单个核细胞移植对心肌梗死后心室重构的影响

目的观察小型猪自体骨髓单个核细胞移植对改善心肌梗死后心室重构的影响并探讨可能的机制。方法采用经冠状动脉球囊堵闭法制作小型猪前壁心肌梗死动物模型,喂养3周后随机分为经皮冠状动脉内骨髓单个核细胞(BM-MNC)移植组(n=7)和磷酸盐缓冲液(PBS)对照组(n=5)。BM-MNC移植组注入BM-MNC悬液10mL至梗死相关血管,对照组注入PBS10mL至梗死相关血管。继续喂养4周后采用超声心动图、左心室造影评价心脏结构和功能,用羟脯氨酸消化法测定心肌胶原含量,以天狼猩红染色后观察胶原纤维形态。结果移植后4周BM-MNC移植组左心室舒张末内径(LVEDD)较移植前缩小(40.40±4.51mm比45.88±4.15mm,P=0.026),左心室射血分数(LVEF)较移植前增加(47.50%±9.07%比41.16%±9.83%,P=0.020);对照组LVEDD较移植前有所增加(48.50±9.31mm比42.40±7.29mm,P=0.328),射血分数无明显变化。两组移植前后LVEDD及LVEF的差值比较,差异均有统计学意义(-5.48±0.71mm比6.10±1.39mm,P=0.046;5.33%±2.88%比0.20%±1.38%,P=0.030)。BM-MNC移植组在交界区及远离区胶原含量均较对照组减少(1.32±0.49μg/mg比0.71±0.35μg/mg,P=0.047;0.32±0.05μg/mg比0.21±0.08μg/mg,P=0.034),胶原排列整齐;梗死区胶原含量和形态两组无明显差异。结论BM-MNC移植治疗可改善心肌梗死后心室重构过程,心肌胶原含量的减少可能是其重要的机制之一。     

冠状动脉内自体骨髓单个核细胞移植治疗心肌梗死的临床研究

目的探讨冠状动脉内自体骨髓单个核细胞移植治疗急性心肌梗死的安全性和疗效.方法 19例拟行介入治疗的急性心肌梗死患者,11例通过放置于梗死相关动脉内的球囊导管,进行自体骨髓单个核细胞移植.另外8例对照组患者以生理盐水代替细胞进行移植.结果 3个月随访时,在细胞治疗组梗死的范围显著缩小(32.4%±4.8%到16.9%±2.9%,P<0.001),与对照组相比也明显较小(16.9%±2.9% 比28.1%±2.8%,P<0.001).只有在细胞治疗组,梗死的心室壁运动速度明显增加(2.05cm/s±1.08cm/s到4.47cm/s±0.59cm/s,P<0.001).细胞治疗组左心室(左室)射血分数,收缩期室壁增厚率以及梗死区心肌灌注显著提高.结论自体骨髓单个核细胞冠状动脉内移植安全有效.其疗效可能与骨髓细胞引起的心肌再生和血管新生有关.