急性白血病细胞凋亡抑制基因Livin表达及临床意义

目的 观察 Livin 基因在急性白血病(AL)病人白血病细胞中的表达及其临床意义.方法 采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测41例不同时期AL病人白血病细胞Livin mRNA的表达水平,以10例健康人作为正常对照.结果 AL病人白血病细胞Livin mRNA 阳性表达率为53.7%.其中急性淋巴细胞白血病(ALL)和急性非淋巴细胞白血病(ANLL)病人Livin mRNA 阳性表达率分别为53.8%、53.6%,二者比较差异无显著性,但均高于正常对照组(10.0%)(P=0.035、0.017).初治和复发AL病人白血病细胞Livin mRNA 阳性表达率分别为52.4%、85.7%,明显高于对照组(P=0.025、0.004).缓解组病人Livin mRNA阳性表达率为15.4%,明显低于初治组和复发组(P=0.004、0.030),而与对照组相比差异无统计学意义.白细胞计数≥50×109/L的初治白血病病人Livin mRNA的阳性表达率(77.8%,7/9)明显高于白细胞计数＜50×109/L的初治病人(25.0%,3/12)(P=0.022),其表达水平也明显高于后者(T=6.50,P<0.05).结论 Livin mRNA过度表达参与了AL的发病,可作为AL的诊断、复发及预后判断的指标之一.Livin mRNA表达在AL细胞的增殖分化和(或) 抗凋亡过程中发挥了重要作用,可能是导致AL细胞对化疗药物不敏感的原因之一,可作为治疗的一个潜在靶点.     

急性白血病病人骨髓细胞BAALC基因表达及意义

目的通过检测脑和急性白血病胞质(BAALC)mRNA在急性白血病(AL)病人表达,探讨其与AL病情进展及预后关系。方法应用逆转录聚合酶链反应技术,检测20例急性髓系白血病(AML)、8例急性淋巴细胞白血病(ALL)及11例特发性血小板减少性紫癜(ITP)、缺铁性贫血(IDA)等非恶性血液病病人(对照组)骨髓单个核细胞BAALC mRNA表达水平。结果初治组AL病人BAALC mRNA表达水平较对照组显著升高(F=8.59,q=5.62,P<0.05);经治疗获完全缓解后,与初治组比较,其表达水平显著下降,两组比较差异有显著性(q=3.99,P<0.05)。BAALC mRNA表达水平与AL病人外周血白细胞计数及骨髓原始细胞比例无明显相关性(P>0.05)。结论 BAALC mRNA表达与AL疾病进展及预后密切相关,可作为AL预后判断的有意义指标。     

急性白血病病人XIAP和Caspase-3的表达及其临床意义

目的：通过对急性白血病患者及健康成人骨髓细胞中X连锁凋亡抑制蛋白（x chromosome linked inhibitor of apoptosisprotein,XIAP）、半胱天冬蛋白酶-3（Caspase-3）表达的检测,探讨XIAP及Caspase-3在急性白血病（AL）发生、发展过程中的作用以及二者相关性,为临床诊疗及预后提供有价值的参照指标。方法：采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）技术检测50例AL患者及30例健康成人骨髓细胞中XIAP及caspase-3的表达情况。数据结果采用SPSS17.0统计软件进行数据分析,计量资料以均数±标准差（x±s）表示,组间比较采用独立样本t检验。Caspase-3与XIAP的相关性采用Spearman等级相关进行相关分析,P值〈0.05视为有统计学意义。结果：①急性白血病患者骨髓细胞中XIAP的表达水平明显高于正常健康成人骨髓细胞中XIAP表达水平（P〈0.05）;急性白血病患者骨髓细胞中Caspase-3的表达水平明显低于正常健康成人骨髓细胞中Caspase-3表达水平（P〈0.05）,二者的表达呈负相关（r=-0.837,P〈0.05）;②急性白血病初治患者骨髓细胞中XIAP的表达水平较复发组患者骨髓细胞中XIAP的表达明显减低（P〈0.05）。③急性白血病初治患者骨的表达水平明显高于复发组患者骨髓细胞中Caspase-3表达水平（P〈0.05）。④在急性淋巴细胞白血病和急性髓细胞白血病患者中XIAP及Caspase-3的表达水平无明显差异（P〉0.05）。⑤初治急性白血病患者XIAP高表达组的完全缓解率低于低表达组,Caspase-3高表达组的完全缓解率高于低表达组（P〈0.05）。结论：AL患者XIAP的表达高于对照组,Caspase-3的表达低于对照组,两者呈负相关,提示XIAP高水平表达与Caspase-3低水平表达可能与AL的发生发展密切相关。XIAP高表达及Caspase-3低表达的病人完全缓解率低,预后不良,提示这可能是导致白血病细胞对化疗药物不敏感的原因之一,但XIAP及Caspase-3在AL发生发展中的具体机制还有待于进一步研究。     

XIAP在成人急性淋巴细胞白血病中的表达及其意义

目的探讨X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)在成人急性淋巴细胞白血病(ALL)中的表达及其临床意义。方法选取63例ALL患者,初治者37例[B-ALL29例,T-ALL8例;ph(+)-ALL12例,ph(-)-ALL25例]为初治组,血液学完全缓解(CR)者15例(CR组),复发者11例(复发组)。应用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测ALL骨髓标本XIAP基因表达水平,以20例非恶性血液病患者骨髓标本为对照组。结果初治组XIAP基因表达水平高于CR组和对照组(P<0.05),与复发组相比差异无统计学意义(P>0.05);B-ALL患者XIAP表达水平与T-ALL比较差异无统计学意义(P>0.05);ph(+)-ALL患者XIAP表达水平高于ph(-)-ALL(P<0.05);初治组XIAP高表达者较低表达者CR率明显下降(P<0.05)。结论ALL患者XIAP基因高表达,提示XIAP可能通过抑制白血病细胞凋亡参与了ALL的发生发展,为ALL的治疗提供了新思路。XIAP高表达可能是急性淋巴细胞白血病预后不良的指标之一。     

Livinα和Livinβ在儿童急性白血病骨髓单个核细胞中的表达及临床意义

目的 研究Livinα和Livinβ在儿童急性白血病(childhood acute leukemia,CAL)骨髓单个核细胞(marrow mononuclear cell,MMNC)中的表达与临床意义.方法 采用实时PCR(real-time PCR)和Western blot检测Livinα和Livinβ在CAL骨髓单个核细胞中mRNA水平和蛋白质水平的表达.结果 Livinα和Livinβ在初诊的39例儿童急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblastic leukemia,ALL)和12例急性髓细胞白血病(acute myeloid leukemia,AML)MMNC中的表达率和表达水平均高于对照组(P<0.05),Livinα的表达水平高于Livinβ(P<0.01).ALL化疗后第19天,幼稚细胞≤5%组Livinα和Livinβ的表达水平较化疗前明显降低(P<0.01).幼稚细胞5%组化疗后较化疗前也降低(P<0.05),但化疗后Livinα和Livinβ的表达水平仍明显高于对照组(P<0.01).结论 Livinα和Livinβ在CAL中高表达可能对评估CAL临床危险度及预后有重要意义;提示Livinα和Livinβ可作为观察CAL预后的分子指标之一.     

急性白血病病人XIAP表达及其临床意义

目的 探讨急性白血病(AL)病人X染色体连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)的表达及临床意义.方法 采用逆转录聚合酶链反应技术检测了46例不同类型、不同阶段AL病人白血病细胞中XIAP的表达情况,以11例健康人作为对照.结果 AL病人白血病细胞XIAP表达水平比对照组明显增高(t=13.96,P<0.01).初治组、缓解组和复...     

SYBR Green实时定量PCR检测急性髓系白血病患者BAALC基因表达

目的:观察SYBR Green相对定量逆转录聚合酶链反应(RQ-PCR)方法检测急性髓系白血病(AML)患者外周血单个核细胞(PBMC)中脑和急性白血病细胞胞质(BAALC)基因mRNA的表达水平。方法:分离12例初发AML患者和5名健康成年人PBMC,以白血病细胞株K562为阳性对照,提取细胞总RNA并逆转录为cDNA,SYBR Green相对定量RQ-PCR检测BAALC基因表达水平。结果:健康成年人PBMC中检测不到BAALC mRNA的表达,12例AML患者中,有8例BAALC mRNA高表达,与K562比较,其相对值为K562的0.8~5.6倍。结论:用SYBR Green相对定量RQ-PCR可以检测到AML患者PBMC中BAALC基因的表达,该方法稳定、敏感、可靠。     

凋亡抑制蛋白Livin在胃癌组织中的表达

目的: 探讨一种新的凋亡抑制蛋白Livin的2种异构体在胃癌组织中的表达.方法: 采用逆转录多聚酶链式反应(RT-PCR)检测胃癌组织中的Livin α和Livin β的表达.结果: 46例胃癌组织中Livin表达的阳性率为58.7%,相应的癌旁组织中Livin不表达或表达很低.结论: Livin的两种异构体在胃癌组织中的表达使其可能成为胃癌的分子标记物或胃癌治疗的新靶点.     

不孕症患者子宫内膜白血病抑制因子mRNA表达的研究

目的　研究白血病抑制因子 (LIF)mRNA在黄体功能不全、不明原因不孕及输卵管原因不孕患者子宫内膜的表达 ,了解其与各种不孕症的关系。方法　采用逆转录聚合酶链反应 (RT -PCR)测定不孕患者和正常妇女黄体中期子宫内膜LIFmRNA的表达水平。结果　LIFmRNA在正常妇女 (对照组 )黄体中期子宫内膜的表达水平为 1.12± 0 .45 ,黄体功能不全患者子宫内膜的表达量为 0 .6 4± 0 .41,两者差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ;不明原因不孕组表达量为 0 .5 2± 0 .41,与对照组之间差异有显著性 (P <0 .0 1)。输卵管原因不孕组LIF水平为 0 .99± 0 .35 ,与对照组相比差异无显著性 (P >0 .0 5 )。结论　LIFmRNA在黄体功能不全和不明原因不孕患者子宫内膜中表达量降低 ,因此 ,LIF基因表达缺失可能与不孕症的发病有关。输卵管原因不孕与LIF无关     

凋亡抑制因子Livin在喉鳞癌中的表达及临床意义

目的探讨凋亡抑制因子Livin在喉鳞癌中的表达及临床意义.方法采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测40例喉癌患者喉鳞癌组织及外周血细胞中Livin的表达,并以声带息肉患者和正常人外周血作对照.结果在40例喉鳞癌标本中,Livin α在26例(65%)癌组织中表达阳性,在17例(42.5%)外周血细胞中表达阳性;Livin β在喉癌组织及外周血细胞和声带患者中均不表达.Livin α的阳性表达率与喉癌患者的年龄、性别、肿瘤部位、分化程度无相关性(P>0.05),与临床分期、淋巴结转移呈正相关(P<0.05).结论凋亡抑制因子Livin α在喉鳞癌组织和血液中高表达且与喉癌淋巴结转移、临床分期密切相关.     

儿童急性白血病细胞遗传学特征分析

目的分析儿童急性白血病的遗传学特征。方法收集2013年10月至2014年10月于郑州大学第一附属医院就诊的100例患儿的骨髓或外周血细胞的遗传学检查资料进行回顾性分析。结果 80例ALL中仅76例有染色体核型检查结果,4例未见分裂相,45例异常,核型异常率为59.21%(45/76),其中染色体数目异常22例(48.89%),结构异常17例(37.78%),同时有数目和结构异常6例,20例AML中15例有克隆性核型异常,核型异常率为75.00%,融合基因检出率为42%(42/100),其中TEL/AML1 15例,PML/RARa 7例,E2A/PBX1 6例,AML1/ETO 4例,MLL基因重排3例,BCR/ABL 2例,二者结合使白血病患儿的遗传学异常检出率提升至69.00%。结论儿童急性白血病具有其独特的细胞遗传学特征,染色体核型分析联合应用多重PCR方法可显著提高白血病患儿遗传学异常检出率,从而指导临床诊断、分型及预后判断。     

脑膜瘤1基因在216例成人急性髓细胞性白血病中的表达及意义

目的通过检测急性髓细胞性白血病(AML)中脑膜瘤1基因(MN1)表达,探讨其与AML预后的相关性。方法使用荧光定量聚合酶链式反应(RTQ-PCR)定量检测216例AML的MN1、同源异型盒基因5(HOXA5)、ETS相关基因(ERG)、核磷蛋白(NPM1)4种基因的表达,分析MN1表达量与AML治疗效果、预后相关因素、分型等的相关性。结果初治AML的MN1表达量比缓解AML高(P<0.05);初治急性早幼粒细胞白血病(M3)型比非急性早幼粒细胞白血病(非M3)型低(P<0.05);初治AML一次标准诱导治疗完全缓解(CR)组比未缓解(NR)组低(P<0.05)。MN1表达量在初治AML年龄≥60岁、<60岁组及男、女组中差异无统计学意义;MN1表达量与血象(WBC、Hb、PLT)、骨髓原始细胞比、免疫表型无相关性;Logistic回归分析显示,MN1表达量、年龄、血象、骨髓原始细胞比、免疫表型均与初治AML一次标准方案化疗缓解与否无相关性。MN1表达量与HOXA5、ERG及NPM1表达量无相关性。结论 MN1可能是AML的一个重要不良预后因素,并可能指导AML的个体化诊治。     

bcr／ab1融合基因在慢性粒细胞白血病中的表达及临床意义

目的探讨bcr／ab1融合基因的表达在慢性粒细胞白血病（CML）中的诊断、疗效及预后观察中的意义。方法采用荧光定量逆转录多聚酶链反应（FQ-PCR）技术，对8例复治CML患者和作为对照组的2例急性非淋巴细胞性白血病患者的骨髓或外周血进行bcr／ab1融合基因检测；同时比较患者的血象、骨髓象等相关实验室指标。结果CML中7例慢性期（CP）和1例急变期（BC）患者，均不同程度地表达了bcr／ab1融合基因，而对照组该融合基因的表达为阴性。结论bcr／ab1基因是CML发病的分子基础，定量检测bcr／ab1融合基因对于CML的诊断、临床分型、疗效观察及预后判断有重要意义。     

急性髓细胞白血病患者CD96和CD123的表达及对预后的意义*

目的 检测CD96、CD123在急性髓细胞白血病（AML）患者中的表达,探讨其与AML疗效和预后的关系。方法 选取156例AML患者为观察对象,选取同期该院健康体检者150例作为对照组。采用流式细胞术检测CD96、CD123表达情况,并分析CD96、CD123表达与化疗疗效的关系。结果 AML患者CD96、CD123的阳性表达率与对照组比较,差异有统计学意义（P?<0.05）;AML患者中CD96、CD123阳性表达的缓解率均低于阴性表达者（P?<0.05）;AML患者中CD96、CD123阳性表达的生存率均低于阴性表达者（P?<0.05）;AML患者中CD96、CD123阳性表达的化疗后感染、化疗后复发发生率均高于阴性表达者（P?<0.05）;AML患者中CD96、CD123阳性表达的中位生存期均低于阴性表达者（P?<0.05）。结论 CD96、CD123在AML中均有不同程度的表达,其阳性表达可能与原发耐药或复发进展有关,可作为判断AML患者预后的相关指标。     

慢性髓细胞白血病Cyclin D1基因多态性的研究

目的:探讨细胞周期蛋白cyclin D1外显子4(870 A/G)多态性与慢性髓细胞白血病的相关性。方法:采用聚合酶链反应(PCR)和PCR-RFLP的方法,分析了40例慢性髓细胞白血病患者和46例健康对照者的cyclin D1基因型。结果:与健康对照组相比,携带GG基因型患者慢性髓细胞白血病的相对风险度增加3.06倍(OR=3.06,95%CI=1.033～9.043,P=0.041);按年龄分层,>45岁携带cyclin D1 GG基因型的患者相对风险度增加5.00倍(OR=5.00,95%CI=1.166～21.413,P=0.022)。结论:Cyclin D1基因多态性与慢性髓细胞白血病的发生发展有着密切相关。     

MEIS1基因在急性白血病中的表达及其意义

目的 研究MEISI基因在急性白血病(AL)中的表达及其意义。方法 采用半定量RT-PCR方法分别检测HEL细胞系(HOX阳性细胞株)、20名健康对照者及92例AL患者MEISI基因的表达。结果 20名正常人骨髓单个核细胞(MNC)中无MEISI基因表达(阴性),HEL细胞系阳性。在92例AL中,急性淋巴细胞白血病(ALL)患者MEISI基因表达阳性率为5．26％(2／38);急性髓细胞白血病(AML)患者阳性率为42．59％(23／54);表达阳性者完全缓解(CR)率(39．13％)明显低于阴性者(74．19％)。结论 MEISI基因表达与AML有一定的相关性;MEISI基因表达阳性者CR率低,提示MEISI基因有一定的预后意义。     

CDX2基因在成人急性髓细胞白血病中的表达及临床意义

目的：研究尾型同源盒基因2（CDX2）在急性髓细胞白血病（AML）患者中的表达及临床意义。方法通过 RT‐PCR方法检测114例初发AML患者及56例诱导化疗后患者骨髓和（或）外周静脉血单个核细胞CDX2基因表达,19例随访患者每3个月定期检测CDX2基因表达。8名健康者外周静脉血和5名缺铁性贫血患者骨髓作为对照。结果114例A M L患者和13名对照的骨髓和（或）外周血单个核细胞均检测到CDX2基因表达。以第一个四分位数为界划分低表达组和高表达组,对照组CDX2基因表达水平均在低表达组,114例A M L患者高表达组90例（78．9％）,对照组与A M L患者CDX2基因表达差异有统计学意义（ P＜0．01）。初发患者骨髓和外周静脉血CDX2基因表达呈正相关（ r＝0．656,P＜0．01）。CDX2高低表达组诱导化疗完全缓解（CR）率差异无统计学意义（P＞0．05）。本组 AML 病例 CDX2高表达78．9％。CR患者 CDX2表达量为化疗前的10．3％～86．2％,且随着疗程增加逐步降低,复发时显著升高。随访6个月以上病例19例,两组早期复发率差异无统计学意义（P＞0．05）。结论 CDX2表达量变化反映患者体内白血病细胞负荷,持续高表达可能是预后不良指标之一,可作为染色体核型正常AML微小残留病监测指标。     

MRP1和XIAP基因在急性髓系白血病及细胞株中的表达及临床意义

目的 本研究旨在探讨多药耐药相关蛋白1 (MRP1)和X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)基因在急性髓系白血病(AML)患者及K562、K562/ADM细胞株中的表达,探讨其在AML发生及多药耐药中的意义.方法 应用实时荧光定量PCR方法和蛋白免疫印迹法检测81例AML患者与20例正常人骨髓细胞(对照组),以及K562、K562/ADM细胞株中MRP1、XIAP基因mRNA及蛋白表达.结果 K562/ADM细胞MRP1、XIAP基因mRNA及蛋白水平明显高于K562细胞(P＜0.05).AML患者初治组和复发难治组MRP1、XIAP基因mRNA及蛋白表达水平均高于对照组(P＜0.05),复发难治组MRP1、XIAP基因mRNA及蛋白表达水平明显高于初治组(P＜0.05).结论 MRP1、XIAP基因的异常表达与白血病发病及复发密切相关,可能通过诱导白血病细胞耐药及抑制细胞凋亡的途径发挥作用,其表达水平的高低对评估AML患者预后及治疗效果有重要意义.     

新抗原基因MLAA-34在急性单核细胞白血病患者的表达及意义

目的探讨白血病新肿瘤抗原基因MLAA-34在急性单核细胞白血病(AML-M5)初诊患者中的表达水平,分析其与临床特征及预后的关系。方法采用基于TaqMan探针的实时荧光定量RT-PCR方法检测MLAA-34在35例AML-M5患者、40例非AML-M5急性髓细胞白血病患者、12例非白血病的血液疾病患者骨髓标本以及10例健康志愿者(正常对照)外周血单个核细胞中的表达水平并进行比较。结果初治AML-M5患者MLAA-34 mRNA表达水平较正常对照、非AML-M5白血病及非白血病疾病患者明显增高(P<0.05);完全缓解的M5患者MLAA-34 mRNA表达水平较治疗前明显下降(P<0.05),复发的M5患者MLAA-34 mRNA表达水平再次增高;对8例复发的AML-M5患者进行MLAA-34基因表达水平动态监测,发现复发前MLAA-34基因表达水平有上升趋势。结论 MLAA-34基因的过表达参与了急性单核细胞白血病的发病,在AML-M5中的表达具有较高的特异性,动态监测其表达水平在AML-M5的疗效评估、预后判断及复发预测方面具有一定的临床意义。     

VEGF在急性髓系白血病中的表达及预后关系研究

目的:检测初诊未治急性髓系白血病(acute myeloid leukemia AML)患者化疗前后血清VEGF的表达水平,探讨VEGF的表达对AML预后的评价作用。方法:采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay ELISA)检测40例AML初发患者化疗前后血清及12例对照组血清VEGF的含量。结果:初发和未缓解AML患者血清VEGF水平明显高于正常对照组和完全缓解(CR)AML组(P<0.01);初治组AML患者血清VEGF含量明显高于缓解组和对照组(P<0.01),未缓解患者血清VEGF含量又明显上升,与CR组比较差异有统计学意义(P<0.01)。初诊未治AML患者化疗前血清VEGF的表达与骨髓中白血病细胞比例呈正相关。结论:AML患者血清VEGF水平一定程度上可能反映体内白血病细胞的总负荷量同时与临床病情变化密切相关,可作为了解病情、观察疗效、判断预后的指标之一。