白细胞介素4基因转移的肿瘤细胞体内增强巨噬细胞功能的实…

观察了小鼠接种高分泌ＩＬ－４的黑色素瘤细胞后腹腔内巨噬细胞功能的变化，荷瘤小鼠腹腔内巨噬细胞杀伤性在荷瘤后第４天及第１２天出现两个高峰，荷瘤后第１５天小鼠腹腔内巨噬细胞的吞噬能力及ＭＨＣⅡ类抗原的表达增强，抗原提呈能力增高，荷瘤后第４天及第１２天腹腔内巨噬细胞经诱导的ＩＬ－１水平出现两个高峰，经诱导的ＴＮＦ水平变化不明显，此实验结果表明，高分泌ＩＬ－４的黑色素瘤细胞体内生长受抑制的原因之一是ＩＬ－     

IL—3基因转染的肿瘤细胞增强机体免疫功能的实验研究

建立了ＩＬ－３基因转染的Ｂ１６小鼠黑素瘤细胞株（Ｂ１６－ＩＬ－３），发现其体内的致瘤性和肺转移能力明显下降，对其免疫机理作一探讨，结果发现接种Ｂ１６－ＩＬ－３细胞的小鼠脾细胞体所诱生的ＬＡＫ活性和ＣＴＬ活性显著升高，外周血和脾细胞的ＣＤ４／ＣＤ８比值都有所升高，此外，在裸鼠体内，Ｂ１６－ＩＬ－３细胞的致瘤性也有一定程度的降低，结果表明ＩＬ－３基因转染的肿瘤细胞能诱导机体的特异性和非特异性免疫功能，     

白细胞介素4基因转移的肿瘤细胞体内增强巨噬细胞功能的实验研究

观察了小鼠接种高分泌ＩＬ－４的黑色素瘤细胞后腹腔内巨噬细胞功能的变化。荷瘤小鼠腹腔内巨噬细胞杀伤性在荷瘤后第４天及第１２天出现两个高峰；荷瘤后第１５天小鼠腹腔内巨噬细胞的吞噬能力及ＭＨＣⅡ类抗原的表达增强，抗原提呈能力增高；荷瘤后第４天及第１２天腹腔内巨噬细胞经诱导的ＩＬ－１水平出现两个高峰，经诱导的ＴＮＦ水平变化不明显。此实验结果表明，高分泌ＩＬ－４的黑色素瘤细胞体内生长受抑制的原因之一是ＩＬ－４基因的导入及ＩＬ－４的分泌使体内巨噬细胞的抗原提呈能力增强及杀伤活性的显著提高，因而使机体抗肿瘤免疫功能得以增强。     

IL－3基因转染的肿瘤细胞增强机体免疫功能的实验研究

建立了ＩＬ－３基因转染的Ｂ１６小鼠黑素瘤细胞株（Ｂ１６－ＩＬ－３），发现其体内的致瘤性和肺转移能力明显下降。对其免疫机理作一探讨。结果发现接种Ｂ１６－ＩＬ－３细胞的小鼠脾细胞体外所诱生的ＬＡＫ活性和ＣＴＬ活性显著升高，外周血和脾细胞的ＣＤ４￣＋／ＣＤ８￣＋比值都有所升高；此外，在裸鼠体内，Ｂ１６－ＩＬ－３细胞的致瘤性也有一定程度的降低。结果表明ＩＬ－３基因转染的肿瘤细胞能诱导机体的特异性和非特异性免疫功能，参与机体的抗肿瘤作用。     

白细胞介素4基因转移的肿瘤细胞体内诱导杀伤细胞活性及细胞因子产生的实验研究

观察了小鼠接种高分泌ＩＬ－４的黑色素瘤细胞后体内免疫效应细胞（包括ＣＴＬ、ＮＫ细胞及ＬＡＫ细胞）抗肿瘤活性及其分泌的细胞因子（包括ＩＬ－２、ＩＦＮ－ｒ、ＴＮＦ及ＧＭ－ＣＳＦ）水平的变化，荷瘤后第１５天小鼠脾细胞ＮＫ活性及经诱导后的ＬＡＫ活性有所降低，而经诱导后的ＣＴＬ杀伤活性显著升高，荷瘤小鼠腹腔内巨噬细胞杀伤活性及其分泌的ＩＬ－１水平也明显升高；在荷瘤后第４天及第１２天出现两个高峰，实验结果表明，高分泌ＩＬ－４的黑色素瘤细胞体内生长受抑制是因为ＩＬ－４基因的导入及ＩＬ－４的分泌使体内ＣＴＬ及巨噬细胞杀伤活性提高，因而使机体抗肿瘤免疫功能得以增强。     

抗鼠IL－1α、IL－6单抗对狼疮倾向NZB／W F1小鼠的免疫调节研究

对狼疮倾向ＮＺＢ／ＷＦ１小鼠在４月龄时腹腔注射抗鼠ＩＬ－１α、抗ＩＬ－６单抗，每日１次１０μｇ×３ｄ，后每月１次×３次，１１月龄活杀，发现这样的剂量不能完全防治狼疮性肾炎，但可减轻蛋白尿，明显降低血清ＩＬ－１α水平，抑制腹腔巨噬细胞分泌ＩＬ－１α。对ＩＬ－６和ＴＮＦ－α水平无明显影响。     

N—CWS激活小鼠巨噬细胞抗肿瘤作用的研究

Ｎ－ＣＷＳ在线只鼠体内１００－２００μｇ可明显抑制Ｂ１６黑色素瘤细胞在Ｃ５７ＢＬ／６小鼠体内的生长。Ｎ－ＣＷＳ腹腔给药后３天可明显增强小鼠脾脏自然钉伤细胞（ＮＫ）和腹腔巨噬细胞的杀伤活性，认为Ｎ－ＣＷＳ的抑制Ｂ１６黑色素瘤作用与其激活小鼠细胞免疫功能有关。体外实验结果表明，当有ＩＦＮ－γ存在的条件下，Ｎ－ＣＷＳ对小鼠腹腔Ｍψ释放ＮＯ及ＴＮＦ都具有显著促进作用，认为这一作用与Ｎ－ＣＷＳ激活小鼠腹腔Ｍ     

IL-3基因转染的肿瘤细胞体内对巨噬细胞数目和功能的影响

曾发现转染IL—3基因的黑色素瘤细胞(B16—IL—3)体内致瘤性下降,肿瘤组织有包括巨噬细胞在内的大量炎症细胞浸润。进而研究了C57BL/6小鼠在皮下接种B16—IL—3细胞后,腹腔巨噬细胞数目和功能的变化。在接种B16-IL-3细胞后第4天,腹腔巨噬细胞的数目就升高1倍,接种后第10～15天升高5～6倍。而且体外无需LPS的刺激,腹腔巨噬细胞就能分泌一定水平的细胞因子IL—1、IL—6和TNF,具有较强的杀伤活性,体外经LPS刺激后,其分泌水平和杀伤活性继续升高,明显高于对照组。此外。腹腔巨噬细胞MHC二类抗原Ia的表达也明显增强。提示B16—IL—3细胞分泌的IL—3有效地激活了体内的巨噬细胞,这可能是B16—IL—3细胞体内致瘤性下降的原因之一。     

柯萨奇B3病毒诱导小鼠单核-巨噬细胞产生肿瘤坏死因子和白细胞介素6

观察柯萨奇Ｂ３（ＣｏｘＢ３）病毒对小鼠单核－巨噬细胞（Ｍｏ／Ｍφ）的感染，及诱导白细胞介素６（ＩＬ－６）和肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）的产生。发现ＣｏｘＢ３能够感染小鼠腹腔巨噬细胞，并释放感染性病毒颗粒；一定感染量病毒的感染，对Ｍｏ／Ｍφ的存活率无明显影响。在体内和体外实验中，ＣｏｘＢ３的感染均可明显诱导Ｍｏ／Ｍφ释放单核因子，在受染的Ｍｏ／Ｍφ培养上清液中及ＣｏｘＢ３感染急性期小鼠血浆和心肌匀浆液中均可测到ＩＬ－６和ＴＮＦ浓度明显升高。     

IFN—γ对IL—2基因转染B16细胞治疗肿瘤的增强作用

本实验在完成ＩＬ－２基因转染瘤苗的基础上，探索了重组ＩＦＮ－γ对其效果的增强作用。结果表明，ＩＬ－２基因转染使Ｂ１６细胞成瘤性显著降低；小鼠经ＩＬ－２基因修饰的Ｂ１６细胞免疫后，对接种的亲代Ｂ１６细胞有保护作用；ＩＬ－２基因转染的Ｂ１６细胞对接种亲代Ｂ１６细胞的小鼠有一定的治疗作用，与重组ＩＦＮ－γ联合应用后，治疗作用加强。上述结果表明，佐以合适的重组细胞因子，有可能提高单基因转染瘤苗的作用，是一条值得探索的途径     

脾内途径GM—CSF基因疗法增强巨噬细胞功能的研究

探讨了该脾内途径的ＧＭ－ＣＳＦ基因疗法对化疗小鼠腹腔巨噬细胞功能活性的影响及其机制。化疗小鼠脾内移植ＧＭ－ＣＳＦ－ＦＬＣ后ｄ７，巨噬细胞数目升高１．５倍，移植后ｄ１４升高６￣８倍；巨噬细胞的吞噬功能、抗原提呈功能及肿瘤杀伤活性在治疗后ｄ１４明显增强，同时发现巨噬细胞ＭＨＣⅡ类抗原（Ｉａ）表达水平以及ＩＬ－１、ＴＮＦ和ＮＯ分泌水平亦有不同程度的升高，这些分子变化可能是上述巨噬细胞功能活性增强的基础。     

TNF-α基因和IL-2基因共转染的肿瘤细胞体内致瘤性和瘤苗效果的观察

为了探讨两种具有协同作用的细胞因子共转染的瘤苗是否具有更好的抗肿瘤作用，我们将ＴＮＦ－α基因和ＩＬ－２基因转染Ｂ１６黑色素瘤细胞，获得同时分泌ＩＬ－２和ＴＮＦ的Ｂ１６细胞克隆株（命名为Ｂ１６－ＩＬ－２＋－ＴＮＦ－α＋细胞），并观察了其体内致瘤性和瘤苗效果。结果发现，Ｂ１６－ＩＬ－２＋－ＴＮＦ－α＋细胞的体内致瘤性显著低于ＴＮＦ－α基因或ＩＬ－２基因单独转染的Ｂ１６细胞；而且，事先接种Ｂ１６－ＩＬ－２＋－ＴＮＦ－α＋细胞的小鼠能抵抗再接种的野生型肿瘤细胞的生长，表明其具有更佳的瘤苗效果。     

小鼠白细胞介素6的cDNA克隆及其在昆虫细胞中的表达

本文采用ＲＴ－ＰＣＲ技术从ＬＰＳ刺激后的小鼠腹腔巨噬细胞，扩增小鼠ＩＬ－６ｃＤＮＡ，并克隆构建ｐＧＥＭ－３Ｚｆ（＋）ＩＬ－６质粒，继将小鼠所得ｃＤＮＡ克隆到ｐＶＬ１３９２载体上，利用杆状病毒ＡｃＮＰＶ表达系统在Ｓｆ９中进行瞬间表达，用ＩＬ－６依赖细胞株ＭＨ６０·ＢＳＦ２检测其表达活性，结果表明，感染后４８ｈ后就具有明显ＩＬ－６表达，由此可见，利用该系统可成功地表达小鼠ＩＬ－６基因。     

同种肾移植患者血清IL－6水平变化及其临床意义

采用ＩＬ－６依赖性细胞株Ｂ９．９增殖反应ＭＴＴ法测定了１７例同种肾移植患者术前和术后血清中ＩＬ－６水平。结果表明，患者术前血清中ＩＬ－６水平均较低，术后两天，血清ＩＬ－６水平显著升高，术后无排斥征象、移植肾功能稳定者，血清中ＩＬ－６水平逐渐下降，３周时基本下降至正常水平。而术后发生急性排斥反应者，血清中ＩＬ－６水平急剧升高。可见检测血清中ＩＬ－６水平变化可作为一项早期诊断急性排斥反应的参考指标。     

IL-3体外造血支持效应的初步研究

探讨ＩＬ－３体外促进脐血细胞增殖分化的效应。方法：连续２次Ｆｉｃｏｌｌ－Ｈｙｐａｑｕｅ分离,初步纯化脐血造血细胞,将其单个核细胞接种于经γ射线预处理的成人骨髓基质细胞层上,加入适量ＩＬ－３,并设不加ＩＬ－３的对照组,持续培养６ｗ,定期检测非粘附细胞和集落形成细胞（ＣＦＣ）。结果：ＩＬ－３组３－６ｗ非粘附细胞数和ＣＦＣ产率显著高于对照组,分别为对照组的２．７－４．５倍和１．６－２．３倍。结论：ＩＬ－     

IL—6在诱导M1白血病细胞分化后凋亡中的应用

目的 探讨ＩＬ－６能否诱导Ｍ１小鼠急性髓样白血病细胞凋亡及其分子机制。方法 透射电镜观察细胞形态判断有无凋亡发生：ＲＴ－ＰＣＲ及狭缝杂交分析ｂｃｌ－２家族成员表达水平的改变。结果：ＩＬ－６诱导Ｍ１细胞向巨噬细胞方向分化后，Ｍ１细胞发生凋亡；ｂｃｌ－２，ｂｃｌ－ＸＬ在ＩＬ－６诱导下表达下调，ｂａｘ表达上调，结论ＩＬ－６诱导Ｂｃｌ－２／Ｂａｘ比例改变，使Ｍ１细胞分化后凋亡。     

通过维持微环境IL－2水平抑制肿瘤形成

为研究肿瘤微环境中ＩＬ－２对肿瘤生长的抑制效应，用转基因方法，将携带ｍＩＬ－２ｃＤＮＡ基因的牛乳头瘤病毒载体（ＢＣＭＧ）转染小鼠Ｂ１６瘤细胞，获稳定持久分泌ｍＩＬ－２的Ｂ１６细胞株（ｍＩＬ－２＋Ｂ１６）。动物实验结果显示：ｍＩＬ－２＋Ｂ１６细胞的致瘤性明显下降，但体外生长率与其亲代Ｂ１６细胞相比较无区别。用ｍＩＬ－２＋Ｂ１６细胞诱导的小鼠腹腔渗出细胞（ＰＥＣ）对ＹＡＣ－１靶细胞和Ｂ１６靶细胞的体外杀伤能力比对照组ＰＥＣ（Ｂ１６诱导的ＰＥＣ）高一倍以上（Ｐ＜０．０１）。表明提高微环境中的ＩＬ－２水平能提高抗肿瘤免疫细胞对肿瘤细胞的杀伤能力，从而抑制肿瘤的形成。     

三种淋巴因子在重组痘苗病毒中的表达及其对重组病毒毒力和免疫效果影响的初步研究

研究了巨噬细胞游走抑制因子（ＭＩＦ）、白细胞介素６（ＩＬ－６）及白细胞介素２（ＩＬ－２）等三种淋巴因子分别在含有甲型肝炎病毒基因的重组痘苗病毒中表达后，对病毒毒力及免疫效果的影响。使用Ｂａｌｂ／Ｃ小鼠和家兔进行免疫的初步结果显示，表达ＩＬ－６的重组痘苗病毒免疫后特异性抗体反应明显增强，痘苗病毒抗体及甲型肝炎病毒抗体阳转小鼠数量分别由对照的３／１０和１／１０提高到８／１０和７／１０，痘苗病毒和甲型肝炎病毒抗体滴度也明显升高。家兔初次免疫痘苗病毒后，抗体平均滴度比对照病毒组提高约６倍，并能促使甲型肝炎病毒抗体阳转。而ＩＬ－２和ＭＩＦ重组痘苗病毒免疫后，特异性抗体反应升高不明显。重组痘苗病毒毒力变化结果显示，兔皮内接种ＩＬ－２和ＭＩＦ均显示了一定的减毒能力，二者的重组痘苗病毒毒力均比单纯ＴＫ病毒下降接近１个对数，而表达ＩＬ－６的重组痘苗病毒的毒力与单纯ＴＫ病毒对照无差别。     

联合应用IL-2基因疗法和IL-3基因疗法对骨髓移植后荷瘤小鼠免疫功能的增强作用

以大剂量化疗后给予同基因骨髓移植（ＢＭＴ）的荷瘤小鼠为实验模型，动态观察了联合应用ＩＬ－２基因疗法和ＩＬ－３基因疗法配合ＢＭＴ对荷瘤小鼠抗肿瘤免疫功能的影响。结果表明，联合应用基因疗法能显著提高ＢＭＴ治疗后荷瘤小鼠脾细胞诱导的ＣＴＬ杀伤活性、腹腔巨噬细胞杀伤活性及其所分泌的ＩＬ－１、ＴＮＦ水平，但是对荷瘤小鼠脾脏分泌ＩＦＮ－γ无协同诱导效应。提示联合应用ＩＬ－２基因疗法和ＩＬ－３基因疗法通过显著地协同促进机体某些免疫功能恢复而增强ＢＭＴ后的抗肿瘤作用。     

联合应用IL—2基因疗法和IL—3基因疗法对骨髓移植后荷瘤小鼠免 …

以大剂量化疗后基因骨髓移植（ＢＭＴ）的荷瘤小鼠为实验模型。动态观察了联合应用ＩＬ－２基因疗法和ＩＬ－３基因疗法配合ＢＭＴ对荷瘤小鼠抗肿瘤免疫功能的影响。结果表明，联合应用基因疗法能显著提高ＢＭＴ治疗后葆瘤小鼠脾细胞诱导的ＣＴＬ杀伤活性、腹腔巨噬细胞杀伤活性及其所分泌的ＩＬ－１、ＴＮＦ水平，但是对荷瘤小鼠脾脏分泌ＩＮＦ＿γ无协同诱导效应。提示联合应用ＩＬ－２基因疗法和ＩＬ－３基因疗法通过显著地协同促