RAPD基因指纹图谱在解脲脲原体分型研究中的应用初探

采用随机扩增多态性DNA(RAPD)技术,以美国Operon公司生产的OPL1～20十聚体脱氧寡核苷酸为引物,对解脲脲原体8和10血清型标准株基因指纹图谱进行了构建。通过比较发现,两型解脲脲原体DNA间存在同源性和多态性。初步研究结果表明,RAPD可用于解脲脲原体分型。     

反相斑点杂交技术在解脲脲原体分型中的应用

解脲脲原体（UU）被认为是盆腔及生殖器炎症的主要病原体之一。然而，女性下生殖道内查到UU者，是否皆须按非淋菌性阴道炎进行治疗，近年来一直困扰广大妇产科医生。有学者研究认为UU的感染与其群别和亚型的型别相关，但目前临床中尚缺乏一种简单易行的进行UU分型的方法，为此我们对UU基因型的分型方法进行了一些研究，报道如下。     

免疫组化法检测解脲脲原体的研究

目的　建立检测解脲脲原体 (UU)的实验方法。方法　应用亲和素 生物素 酶复合物技术 (ABC法 )观察UU感染者 ,并与培养法和PCR法相比较。结果　ABC法对 75例临床标本的检出率为 5 2 % ,与培养法和PCR法比较 ,在统计学上差异无显著性 (P >0 .0 5 )。结论　ABC法可作为诊断UU感染的快速检测方法 ,在临床应用中有一定实用价值。     

解脲脲原体的实验室检测方法的研究现状

解脲脲原体是一种条件致病菌，多与宿主共存，仅在某些条件下引起机会性感染，感染部位常为男女泌尿道，其中更易致病的为U．urealyticum型。近年来检测解脲脲原体的方法主要有液体培养法、固体培养法、免疫学方法和分子生物学方法等等，这些检测方法各有优劣。本文就临床使用较多的液体培养法、固体培养法和分子生物学方法进行重点分析，希望能给临床提供更多的帮助。     

女性NGU与单纯解脲脲原体感染的分群分型初步研究

目的探讨女性非淋菌性尿道炎或宫颈炎（NGU）与解脲脲原体（Uu）分群和分型的关系。方法采用液体培养,A7固体分离,液体纯化的方法获得Uu纯菌株,分别对114例女性单纯Uu感染的NGU和113例单纯Uu感染的女性携带者的Uu做PCR分群和生长抑制试验分型。结果NGU组1群56例（49.12%）,2群58例（50.88%）。正常组1群51例（45.13%）,2群62例（54.87%）;NGU组Uu分型阳性率最高依次为2型、7型、6型,正常人组最高依次为7型、2型、14型。结论Uu感染所致NGU与Uu分群关系不大。     

妇科疾病中的解脲脲原体、沙眼衣原体Nesed-PCR检测

目的探讨UU、CT在本地区妇科疾病中的发病率及其致病作用,方法收集535例妇科阴道炎、不孕症、宫颈炎、附件炎等疾病患者的阴道分泌物,应用nested PCR(nPCR)技术检测解脲脲原体(UU)及沙眼衣原体(CT)核酸.结果393人检测解脲脲原体(UU),UU-DNA阳性192例(48.8%);142人检测沙眼衣原体(CT),CT-DNA阳性32例(22.5%).结论解脲脲原体(UU-DNA)、沙眼衣原体(CT-DNA)与妇科疾病的发生关系密切,特别是阴道炎的妇科患者.     

PCR法解脲脲原体分群和四环素耐药检测

目的 建立解脲脲原体(Ureaplasma urealyxicum，Uu)的分群和四环素耐药PCR检测方法。方法 1．根据Uu的多带抗原(multi—banded antigen，MBA)基因序列自行设计引物(P15′-ATT，TGC，AAT，CTT，TAT，ATG，TT；P25′-TTC，AGC，TGA，TGT，AAG，TGC，AGC，ATT，AAA，T)，并建立分群PCR反应体系。2．根据TetM基因序列自行设计引物(P15′-TTA，TCA，ACG，GTT，TAT，CAG，G；P25′-GCT，ATA，TAT，GCA，AGA，CG)，并建立四环素耐药反应体系。结果 1．MBA基因PCR能将Uul4个血清型正确分为二个生物群，其中生物一群(1、3、6、14等4个血清型)出现404bp的产物带，生物二群(2、4、5、7、8、9、10、11、12、13等10个血清型)出现448bp的产物带。60株Uu临床分离株经MBA基因PCR检测，生物一群53例、生物二群6例、生物一／二群同时存在1例。2.Uu典型株14个血清型，TetM基因PcR扩增的不能出现任何条带；60株Uu临床分离株经TetM基因PCR检测41例出现目的条带。结论 PCR法进行Uu生物分群和四环素耐药检测简单、快速，为相关研究提供了手段。     

解脲脲原体套式（Nested）PCR检测研究

本文报告解脲脲原体（ＵＵ）的套式（ＮＥＳＴＥＤ）ＰＣＲ检测方法。经方法学考核表明，本法的特异性、灵敏度以及试剂的稳定性和对临检标本的顺应性均较好。９３份各种生殖道炎症患者之宫颈拭子标本套式ＰＣＲ检出２１份阳性（阳性率２２．６％），而市售ＰＣＲ试剂盒仅检出１份阳性（阳性率１．１％）。前者阳性检出率明显高于后者（Ｐ＜０．０１）。     

抗解脲脲原体单克隆抗体的制备及鉴定

目的:制备抗解脲脲原体(Uu)的单克隆抗体(mAb)并进行鉴定。方法:用灭活的Uu免疫BALB/c小鼠,采用常规的细胞融合技术制备抗Uu的mAb。以ELISA和免疫组织化学染色法对mAb的亚类、效价及特异性进行鉴定。结果:获得3株抗Uu的mAb,均为IgG2b亚类。3株mAb的腹水ELISA效价为10-4~10-5。有2株只与Uu产生反应而不与肺炎支原体、淋球菌(gonococcus/GC)及豚鼠气单胞菌(A.cariae)等病原体发生交叉反应。免疫组化结果表明,mAb能和解脲脲原体特异性结合。结论:制备了3株具有较高的特异性和效价的抗UumAb,为Uu的免疫学检测及相关研究提供重要的制剂。     

128例原发性不育患者精液解脲脲原体的检测

采用解脲脲原体检测试剂对１２８例原发性不育患者的精液进行解脲脲原体病原学诊断，阳性率为３１．２５％（４０／１２８）。本文结果提示在山西省大同地区，解脲脲原体感染可能是引起男性原发性不育的重要原因之一。     

抗解脲脲原体单克隆抗体的制备

作者用提纯的解脲脲原体抗原免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞,与小鼠骨髓瘤细胞FO融合,获得3株稳定分泌抗解脲脲原体单克隆抗体的杂交瘤细胞株。制备了小鼠腹水抗体,并对杂交瘤细胞株进行了鉴定。用ELISA法测定该抗体腹水效价为1:64000～1:2048000,1F9、2B2抗体的Ig类型为IgG1,5H1为IgG2b。建立的3株能稳定分泌抗解脲脲原体的McAb杂交瘤细胞林,经液氮冻存后复苏,其分泌抗体能力不受影响。     

生殖支原体及解脲脲原体对妊娠的影响研究

目的：进一步探讨生殖支原体（Mg)及解脲脲原体（Uu)对妊娠的影响。方法：应用灵敏、特异的套式PCR（nPCR）技术对219例胎盘组织进行Mg、Uu检测,并对Mg、Uu nPCR阳性产物各1例进行了DNA序列测定以验证。结果：早产、胎膜早破者的Mg、Uu,胎儿窘迫者的Mg之阳性检出率均明显高于正常妊娠者（P均小于0．01）;另外,上胎流产、死胎者和本次妊娠3．00以上,呈强关联。结论：Mg与Uu一样,围产期感染可致不良妊娠结局。     

解脲脲原体免疫血清的制备和应用

目的　探讨快速检测解脲脲原体 (UU)的免疫学方法。方法　用处理的临床分离株作为免疫原 ,免疫家兔制备UU免疫血清 ,以自制UU免疫血清作为第一抗体 ,用亲和素 生物素 酶复合物法 (ABC法 )检测了 63例临床标本。结果　UU免疫血清的代谢抑制效价为 1∶640 ,ABC法检测临床标本的阳性率为 54 % ,其结果与培养法比较 ,差异无显著意义 (P >0 .0 5)。结论　ABC法可作为快速检测UU的方法。     

广州地区新生儿解脲脲原体感染及高危因素调查

对１４１例新生儿做鼻咽部及尿道口分泌物的解脲脲原体（ＵＵ）培养，结果显示：无症状正常组的新生儿（ＵＵ的阳性率为２０％，患病组的新生儿ＵＵ的阳性率为４５％，两者差异有显著性（Ｐ＜０．０５）。新生儿出生前其母有胎膜早破的，其ＵＵ阳性率为２５％，出生前其母无胎膜早破的新生儿ＵＵ阳性率为１９％，两者差异显著（Ｐ＜０．０５）。本文认为ＵＵ是引起新生儿感染的重要病原体之一。     

解脲脲原体感染研究进展

解脲脲原体属于支原体科中的脲原体属,与男女性生殖道炎症、HIV感染、不孕不育、不良妊娠结局以及新生儿疾病等有关。该文从以上几个方面就解脲脲原体与人类健康的关系进行阐述。     

解脲脲原体与男性不育及生殖道炎症关系的探讨

本文对218例男性精液解脲脲原体(ureaplasma Urealyticum,UU)分离培养,发现不育症组UU检出率56.8%,生殖道炎症组检出率45.0%,正常对照组检出率22.0%,不育组和炎症组与正常组之间存在非常显著性差异(P<0.01),分析结果,亦证明UU是导致男性不育及生殖道炎症的病因之一.     

解脲脲原体生物膜胞外多糖的检测

目的 研究解脲脲原体(Ureaplasma urealyticum,Uu)4个型别标准株在体外形成的生物膜之胞外多糖的分布及结构成分.方法 将Uu标准株Parvo群中4、8血清型和T960群中3、14血清型进行体外生物膜培养后,扫描电镜下观察生物膜组成及结构,并在FITC-ConA/PI及ECA/PI双荧光染色后进行激光共聚焦显微镜观察及测定平均荧光强度.秩和检验及t检验分别比较两种荧光标记物、两生物群的总体平均荧光强度的差异.结果 4个型别Uu标准株均可在体外形成生物膜,生物膜结构主要呈网格状,胞外物质占大部分比例.在激光共聚焦显微镜下,Uu生物膜胞外多糖均可被FITC-ConA和ECA染色,FTTC-ConA呈网格状分布,ECA小片状聚集分布.FITC-ConA的总体平均荧光强度较ECA高,差异有统计学意义(P＜0.001).结论 Uu体外培养生物膜主要呈网格状结构,胞外多糖中含有葡萄糖、甘露糖、半乳糖、N-乙酰葡聚糖残基,并以葡萄糖、甘露糖残基为主.     

87例培养阳性解脲脲原体的药敏分析

目的了解泌尿生殖道标本中解脲脲原体对不同抗生素的敏感性差异.方法用法国生物梅里埃生产的支原体IST试剂盒对泌尿生殖道分泌物等标本进行培养鉴定和药敏试验.结果其中有87例解脲支原体培养阳性,药敏结果分析发现解脲脲原体分别对6种抗生素敏感如下:四环素60例(69.00%)、强力霉素68例(78.16%)、交沙霉素82例(94.25)、原始霉素全部敏感率(100%)、红霉素只有7例(8.05%)、氧氟沙星28例(32.18%).结论应将原始霉素、交沙霉素、强力霉素、四环素列为临床治疗解脲支原体感染首先药物.